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DB52DB52/T954—2014辣椒品種抗疫病溫室接種鑒定技術(shù)規(guī)程Ruleforidentificationofpepperforresistancetopepperphytophthorablight2014-10-30發(fā)布2014-11-30實施貴州省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局貴州省農(nóng)業(yè)委員會I 1 1 1 2 2 5 61由辣椒疫霉（PhytophthoracapsiciLeonian）侵染引起的植株根系、莖基部、2用于人工接種鑒定的病原物或病原物的一部分，本文件特指辣椒疫霉孢子囊懸浮液，其濃度為凈工作臺、恒溫生物培養(yǎng)箱、孔徑規(guī)格為25mm×25mm×50mm的塑料泡沫漂浮育苗盤、直徑7cm營養(yǎng)10%Na3PO4、NaClO、(NH4)2SO4、參鑒品種（材料）育苗采用漂浮育苗盤育苗。辣椒種子用10%磷酸三鈉溶液浸種20min，用清珠巖混合，各成分所占比例分別為6070滅菌（121℃,30min播種后在辣椒種子上蓋3mm左右的育苗基質(zhì)，壓實，然后將播種的漂浮盤放入營養(yǎng)液中。營養(yǎng)液配方為：每100kg清水加入50g硫酸銨、15g尿素、100g普通過磷酸鈣、50g硫酸鉀；配制營養(yǎng)液使用的清水應(yīng)符合GB5084的蔬菜類灌溉水質(zhì)要求。在18℃~25℃的自然條件下育3選取已分離鑒定屬于不同生理小種的菌株回接到甜椒上復(fù)壯，待發(fā)病后從病果上直接挑取菌絲或切取一小塊病組織置于選擇性胡蘿卜培養(yǎng)基（胡蘿卜200g榨汁，瓊脂18g，青霉素50mg/L，利福平接種前1d灌透水，接種時用玻璃棒在距幼苗莖基部約2cm處扎一深3cm左右的孔，用移液器吸取3mL含量為1.2×104/mL的孢子囊混合懸浮液注入孔中，置于溫室中光暗交替培育。溫室內(nèi)白天為26℃~28℃,夜間為20℃~24℃,每天光照12h～14h，強度為15000Lux左右，空氣相對濕度75%5.5.1調(diào)查時間4）：）：56

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