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學(xué)而優(yōu)·教有方PAGEPAGE1第1章發(fā)酵工程第1節(jié)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用P5發(fā)酵的概念:第1自然段黑體字。傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)定義:第2自然段倒數(shù)第3句話。腐乳風(fēng)味佳的原因:第2自然段。P5泡菜制作所需的主要菌種:最后1自然段。乳酸菌無氧呼吸的反應(yīng)式:反應(yīng)簡式①。P6酵母菌酒精發(fā)酵的反應(yīng)式:反應(yīng)簡式②。P7醋酸菌發(fā)酵的兩種反應(yīng)式:反應(yīng)簡式③④。P6-7探究與實踐:梳理制作3種傳統(tǒng)發(fā)酵食品的過程,注意事項,溫度、氣體要求。P8練習(xí)與應(yīng)用:三、拓展應(yīng)用2.⑴【答案】應(yīng)該在發(fā)酵10天后食用比較合適,因為這時亞硝酸鹽含量已經(jīng)降到較低的水平。⑵【答案】可能是食鹽濃度過高、發(fā)酵溫度過低等原因?qū)е屡莶宋茨苷0l(fā)酵。⑶【答案】“陳泡菜水”中含有純度較高的乳酸菌,加入“陳泡菜水”相當(dāng)于接種乳酸菌。3.【提示】C同學(xué)的裝置更適合制作果醋。出料口可以用來取樣;充氣口可以在發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣,從而有利于醋酸菌更好地進行有氧呼吸,提高發(fā)酵效率;排氣口可以用來排出在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的氣體,它通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是防止空氣中微生物的污染。進一步改進:可以在充氣口填充棉花或者安裝其他過濾裝置,以防止充入的氣體攜帶外來雜菌污染發(fā)酵液等。微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用P9實驗室培養(yǎng)微生物的2個要求:第1自然段。培養(yǎng)基的定義,作用,類型:第2自然段。P10培養(yǎng)基的基本成分:第1自然段。培養(yǎng)微生物的基本培養(yǎng)及配置:表1-1。培養(yǎng)基的特殊需求:第2自然段。牛肉膏蛋白胨的作用:相關(guān)信息。P10消毒,滅菌的概念:倒數(shù)第2自然段黑體字。消毒和滅菌的范圍:倒數(shù)第2自然段。P11常用的消毒和滅菌方法:資料卡。P11培養(yǎng)物,純培養(yǎng)物,純培養(yǎng)的定義:第1自然段。微生物純培養(yǎng)的基本步驟:第2自然段。P12分離微生物的方法:探究與實踐第1自然段。P12-13酵母菌的純培養(yǎng):梳理培養(yǎng)流程,注意實驗過程如何保持無菌狀態(tài),消毒滅菌的對象。P12倒平板的流程,注意事項與目的。P13平板劃線法的操作流程,注意事項與目的。P14練習(xí)與應(yīng)用:一、概念檢測2.【提示】日常生活中保存食品的方法有干制、腌制、低溫儲存等。干制可以降低食品的水分含量;腌制可以通過食鹽、糖等制造高滲環(huán)境,從而抑制微生物的生長和繁殖;低溫則是通過降低微生物的代謝速率來抑制微生物的生長和繁殖。二、拓展應(yīng)用1.⑴【答案】培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基。⑵【答案】接種。⑶【提示】通過實驗結(jié)果可以看到,洗手后手上還有一些微生物,不能直接進行無菌操作??梢酝ㄟ^用酒精棉球擦拭雙手,或戴消過毒的手套等方法來避免手上微生物的污染。2.⑴【答案】意味著培養(yǎng)液中O2含量不同。⑵【答案】培養(yǎng)液中O2含量越高,酵母菌種群密度越大。⑶【提示】這時候已經(jīng)達到了環(huán)境容納量。P16選擇培養(yǎng)基的概念:黑體字。功能:第2自然段黑體字之前。能分解尿素的微生物具有的特點:思考與討論第1自然段。P17稀釋涂布平板法的操作流程:圖1-7.P18涂布好的平板培養(yǎng)要求:第1自然段。稀釋涂布平板劃線法的計數(shù)原理:第2自然段。用于計數(shù)的要求、原則:第3自然段。計數(shù)結(jié)果的誤差分析:最后1自然段。P19土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù):取樣環(huán)境的選擇,實驗流程,注意事項。區(qū)分不同菌落的原理:左邊最后1自然段。P20練習(xí)與應(yīng)用:2.(D)二、拓展應(yīng)用1.【提示】反芻動物的瘤胃中有大量的微生物,其中就有分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多為厭氧菌,接觸空氣后會死亡,因此分離其中能分解尿素的微生物除了需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基,還應(yīng)該參照厭氧菌的培養(yǎng)方法進行實驗設(shè)計。2.⑴【提示】可以參考本節(jié)“探究?實踐”中的設(shè)計思路進行設(shè)計。⑵【提示】纖維素分解菌大多分布在富含纖維素的環(huán)境中,采集土樣時,可以選擇纖維素豐富的環(huán)境,如樹林中多年落葉形成的腐殖土等。⑶【提示】這是人工設(shè)置適合纖維素分解菌生存的環(huán)境,腐爛的濾紙上很可能有纖維素分解菌。發(fā)酵罐示意圖發(fā)酵工程及其應(yīng)用發(fā)酵罐示意圖P22發(fā)酵工作的基本環(huán)節(jié)及其流程:圖1-9,注意各過程的注意事項,作用。P24發(fā)酵過程在食品上的應(yīng)用:酒精的工業(yè)化生產(chǎn)。P26發(fā)酵工程在醫(yī)藥與及其他領(lǐng)域的應(yīng)用。P28練習(xí)與應(yīng)用:二、拓展應(yīng)用1.⑴【答案】可以用基因工程的方法,將血紅蛋白基因轉(zhuǎn)入青霉素生產(chǎn)菌來提高菌體對氧的吸收和利用率。⑵【答案】可以對兩種酶的基因進行改造或敲除其中一種酶的基因,從而使青霉素生產(chǎn)菌只生產(chǎn)一種產(chǎn)物。2.【提示】學(xué)生通過査找資料可以知道,這一風(fēng)險是存在的。在生產(chǎn)燃料乙醇時,為了規(guī)避這一風(fēng)險,應(yīng)該使用陳化糧食(如陳化的稻谷等)或者非糧食生物材料(如秸稈等)。使用陳化糧食來生產(chǎn)燃料乙醇,還有利于防止問題糧食流入市場。P30復(fù)習(xí)與提高:1.⑴【答案】篩選出可以降解化合物A的微生物
選擇⑵【答案】顯著降低
擴增⑶【答案】細菌計數(shù)板計數(shù)
S型增長⑷【提示】目的菌能否在自然環(huán)境中大量生長繁殖、是否會產(chǎn)生對環(huán)境有害的代謝物、降解化合物A后是否會產(chǎn)生二次污染等問題都需要研究清楚后,才能進行實踐。⑸【提示】可行。這是后面將要學(xué)習(xí)的基因工程的基本思路。2.⑴【答案】①不同意。提示:只檢測一個冰激凌數(shù)據(jù)太少,不能排除偶然因素的影響。②沒有必要。提示根據(jù)國家的標(biāo)準(zhǔn),自來水中的大腸桿菌數(shù)目應(yīng)該是非常少的。即使冰激凌中大腸桿菌數(shù)目超標(biāo)了,也不可能很離譜,如果進行梯度稀釋,最后培養(yǎng)出來的菌落數(shù)可能不在計數(shù)要求的范圍內(nèi),從而導(dǎo)致結(jié)果誤差大。解答這個問題的時候,應(yīng)該讓學(xué)生明白并不是所有的細菌檢測培養(yǎng)都需要進行梯度稀釋,而是要根據(jù)實際情況來確定培養(yǎng)方案。③需要設(shè)置對照組。嚴格來說,應(yīng)該設(shè)置兩組對照組。一組為陰性對照組,不進行涂布或者用無菌水涂布平板;另一組為陽性對照組,涂布大腸桿菌。前者可以說明培養(yǎng)基是否被污染,后者可以說明該培養(yǎng)基能否培養(yǎng)出大腸桿菌。⑵B⑶【答案】說明冰激凌中不僅有大腸桿菌,還有其他細菌或真菌等。統(tǒng)計結(jié)果比實際值偏少。因為有些菌落可能會重疊,統(tǒng)計時容易將其誤認為是一個菌落,并且這種計數(shù)方法統(tǒng)計的是活菌的數(shù)目。⑷【提示】應(yīng)該馬上去小店告知店主這批冰激凌不能再賣了;還要告知食品衛(wèi)生管理部門,以對這批冰激凌的來源進行追蹤調(diào)查。其他合理答案也可。第2章細胞工程第1節(jié)植物細胞工程P34細胞的全能性概念:第1自然段黑體字。P35植物組織培養(yǎng)概念:黑體字。P35脫分化,再分化定義:探究與實踐第1自然段。組織培養(yǎng)中的關(guān)鍵激素:探究與實踐第1自然段。P36菊虎組織培養(yǎng)的操作流程及其注意事項:實驗探究。P37植物細胞去除細胞壁的方法,誘導(dǎo)細胞融合的方法:第1自然段。P38植物體細胞雜交概念:黑體字。意義:第1自然段最后1句。P42練習(xí)與應(yīng)用:拓展1【答案】F2中的紫色甜玉米的基因型可能為Aasusu或AAsusu。如果運用常規(guī)育種方法,將F2中的紫色甜玉米與白色甜玉米(aasusu)進行測交,可以選擇出基因型為AAsusu的純種紫色甜玉米。但這種方法比較煩瑣,耗時也較長,需要至少三年的選種和育種時間。其實在F1產(chǎn)生的花粉中就可能有Asu的組合,如果利用花藥培養(yǎng)的技術(shù)獲得單倍體植株,再經(jīng)過誘導(dǎo)染色體加倍,就可以直接得到紫色甜玉米的純合體。這種方法可以大大縮短育種周期。動物細胞工程P43動物細胞培養(yǎng)的概念:黑體字。動物細胞培養(yǎng)的條件:圖2-9.P44動物細胞培養(yǎng)各個條件的作用:第1-4自然段。體外動物細胞培養(yǎng)的類型,處理方法:最后1自然段。P45動物細胞培養(yǎng)的過程:圖2-12,第1自然段。P46干細胞培養(yǎng)及其應(yīng)用:第1,2自然段。P47練習(xí)與應(yīng)用:一、概念檢測1.⑴(×)
⑵(×)⑶
(√)⑷(×)2.(A)二、拓展應(yīng)用⑴【答案】像建立骨髓庫一樣,有研究團隊正在嘗試建立HA(HumanLeukocyteAntigen,人類白細胞抗原)多態(tài)性豐富的iPS細胞庫,可以為需要的人找到HLA匹配度較高的iPS細胞,這樣不僅可以節(jié)省時間、成本,還能減輕異體干細胞移植后發(fā)生的免疫排斥反應(yīng)。⑵【提示】該技術(shù)可能被用于治療不孕癥;獲得足夠量的生殖細胞來進行瀕危物種的克隆研究;獲得生殖細胞進行轉(zhuǎn)基因操作,再經(jīng)過受精、胚胎發(fā)育等過程來獲得轉(zhuǎn)基因動物。該技術(shù)可能帶來一系列的倫理問題。例如,如果用同一個人的iPS細胞分別誘導(dǎo)形成精子和卵子,兩者受精可能培育出“單親”嬰兒;有的人還可能有目的地選擇iPS細胞,從而“設(shè)計”嬰兒。P48動物細胞融合技術(shù)概念:黑體字。融合方法:第3自然段。融合流程:圖2-16.P49單克隆抗體及其應(yīng)用:第1,2自然段。P50單克隆抗體的優(yōu)點:第1自然段。P52動物細胞核移植技術(shù)概念:黑體字。P53體細胞核移植的流程:圖2-18.胚胎工程P56胚胎工程的概念:黑體字。P57胚胎工程的理論基礎(chǔ):圖2-20.P58胚胎早期發(fā)育:第3-5自然段。P59練習(xí)與應(yīng)用:一、概念檢測1.⑴(×)⑵(×)⑶(√)2.(A)拓展應(yīng)用1.【答案】細胞核和線粒體都是精子的重要結(jié)構(gòu)。其中,細胞核是遺傳物質(zhì)儲存的場所,決定后代的遺傳特性,它參與受精過程。線粒體是精子進行有氧呼吸的主要場所,為精子的生存和運動提供能量。P60體外受精與精子獲能:第2自然段。P61胚胎移植的概念:黑體字。移植過程:圖2-23.P62胚胎分割的概念:黑體字。流程:圖2-25.P64練習(xí)與應(yīng)用:一、概念檢測1.⑴(×)⑵(×)⑶(×)2.⑴【答案】體外胚胎培養(yǎng)胚胎移植。⑵【答案】可以對雌性杜泊羊進行超數(shù)排卵處理。⑶【答案】要對采集到的卵母細胞進行成熟培養(yǎng),對采集到的精子進行獲能處理。二、拓展應(yīng)用⑴【提示】可以使用人工授精、體外受精、胚胎移植、體細胞核移植等技術(shù)來人工繁育北方白犀牛。運用這些技術(shù)不一定能成功繁育北方白犀牛,因為任何一項技術(shù)都不能保證百分之百的成功率,何況現(xiàn)存的北方白犀牛數(shù)量極少。⑵【答案】這樣人工繁育的種群與野生種群相比,遺傳多樣性會降低,野外生存能力也會下降。⑶【提示】多種多樣的生物是生態(tài)系統(tǒng)的重要成員,是一個個獨特的基因庫。任何一個物種的滅絕都可能產(chǎn)生多米諾效應(yīng),使其他相關(guān)物種受到影響,進而威脅到生態(tài)系統(tǒng)的平衡與穩(wěn)定。保護瀕危的野生動物,保護生物多樣性刻不容緩。P66復(fù)習(xí)與提高:1.⑴【答案】植物組織培養(yǎng)技術(shù)白菜和甘藍雜交產(chǎn)生的子代沒有同源染色體,進行減數(shù)分裂時聯(lián)會發(fā)生紊亂,不能形成正常的配子,所以該子代一般不可育。⑵【答案】B淋巴細胞能大量增殖并能產(chǎn)生抗丙肝病毒的抗體。⑶【答案】減數(shù)分裂Ⅱ中期(MⅡ期)獲能處理。3.⑴【答案】誘導(dǎo)細胞融合。⑵【答案】這兩種物質(zhì)都是通過改變組蛋白的表觀遺傳修飾來調(diào)控基因表達。組蛋白去甲基化酶Kdm4l的mRNA可以表達組蛋白去甲基化酶,該酶能降低組蛋白的甲基化水平;組蛋白脫乙酰酶抑制劑TSA可以抑制組蛋白脫乙酰酶的作用,提高組蛋白的乙?;?。⑶【答案】“聰明的化學(xué)方法”是指對重構(gòu)胚的處理用了TSA以及將組蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注人了重構(gòu)胚,這可以促進囊胚的發(fā)育和提高代孕母猴的妊娠率?!安僮骷记伞笔侵缚茖W(xué)家經(jīng)過大量的訓(xùn)練,能在10s內(nèi)完成對卵母細胞的去核操作,能在15s內(nèi)將體細胞注入去核的卵母細胞,這樣迅速的操作大大減少了對卵母細胞的損傷。⑷【提示】在醫(yī)學(xué)研究中通常需要用到遺傳背景相似或相同的實驗動物,這樣實驗組和對照組的比較才更具有說服力。小鼠因其能快速地進行近親繁殖,產(chǎn)生大量遺傳背景相似的后代,而被廣泛用作實驗動物。但是小鼠與人的親緣關(guān)系太遠,很多在小鼠體內(nèi)有效的候選藥物,用在人身上不一定有效,或有很大的副作用;在小鼠體內(nèi)存在的致病機制也不一定存在于人體內(nèi)。由于猴與人的親緣關(guān)系極近,培育大批具有相同遺傳背景的克隆猴,對人類疾病致病機制的研究和新藥的研發(fā)等具有重要意義。特別是在腦研究方面,克隆猴的培育將大大促進人類腦疾病的研究和治療。例如,我們可以培育一批“模型猴”,標(biāo)記它們的某一類神經(jīng)元,追蹤其神經(jīng)連接,由于這些猴的遺傳背景一致,所以在研究中可以最大限度排除由基因差異造成的大腦結(jié)構(gòu)形狀不ー的問題??寺『锏某晒ε嘤龢?biāo)志著我國在非人靈長類疾病動物模型研究方面處于國際領(lǐng)先水平。(其他合理答案均可)精液由精子和精漿兩部分組成。精漿中含有一種能抑制精子獲能的物質(zhì),因此在一般情況下,精液中的精子無法獲能。只有當(dāng)交配后精液進入雌性動物的生殖道時,由生殖道分泌產(chǎn)生些物質(zhì)解除對精子獲能的抑制,才能引起精子獲能。不同動物的精子在雌性動物生殖道內(nèi)獲能的部位可能會所有差異,但主要是在子宮和輸卵管中。精子的獲能涉及以下變化:雌性動物生殖道分泌的一些物質(zhì)使精子表面的物質(zhì)發(fā)生變化(如某些酶將頂體表面的糖蛋白降解);精子表面膜結(jié)構(gòu)一些物質(zhì)的比例發(fā)生變化;膜的通透性發(fā)生變化等。這些變化可以暴露出精子表面與卵細胞相識別的受體,改變精子的活力,為后續(xù)受精做準(zhǔn)備。關(guān)于防止多精人卵的機制,教材只進行了簡單介紹,內(nèi)容主要涉及防止多精入卵的兩道重要屏障:透明帶反應(yīng)和卵細胞膜反應(yīng)。它們分別發(fā)生在精子穿越透明帶觸及卵細胞膜的瞬間及精子入卵之后。如果學(xué)生査閱專業(yè)書籍,還會發(fā)現(xiàn),生殖道對精子具有初步的篩選作用,在經(jīng)過雌性動物生殖道的一些屏障后,只有少數(shù)活動力強的精子能到達受精部位;在精子和卵細胞識別后會發(fā)生一些反應(yīng),如卵細胞表面的精子識別受體很快發(fā)生分子修飾,使后來的精子表面的卵細胞結(jié)合蛋白不能識別受體等。具體的生理、生化機制,請參閱有關(guān)專著。第3章基因工程第1節(jié)重組DNA技術(shù)的基本工具P70基因工程的三種工具:黑體字。P71限制酶的類型,作用:第1,2自然段。P72DNA連接酶的作用,類型:第1自然段。運載體的選擇標(biāo)準(zhǔn):最后1自然段,圖3-4.P74DNA的粗提取與鑒定:探究與實踐,注意梳理實驗原理,過程,注意事項。P74練習(xí)與應(yīng)用:一、概念檢測1.C2.A二、拓展應(yīng)用1.【提示】迄今為止,在基因工程操作中使用的限制酶絕大部分都是從細菌或霉菌中提取出來的,它們可以識別DNA上特定的堿基序列并使特定部位的磷酸二酯鍵斷開。微生物在長期的進化過程中形成了一套完善的防御機制,可以將外源入侵的DNA降解。細菌中限制酶之所以不切割自身的DNA,是因為含有某種限制酶的細胞的DNA分子或者不具備這種限制酶的識別序列,或者通過甲基化酶將甲基轉(zhuǎn)移到了限制酶所識別序列的堿基上,使限制酶不能將其切開。這樣,盡管細菌中含有某種限制酶,也不會使自身的DNA被切斷,并且可以防止外源DNA入侵。2.⑴【答案】XbaⅠ。因為XbaⅠ與SpeⅠ切割產(chǎn)生了相同的黏性末端。⑵【提示】識別DNA分子中不同核苷酸序列,但能切割產(chǎn)生相同黏性末端的限制酶被稱為同尾酶。同尾酶使構(gòu)建載體時,切割位點的選擇范圍擴大。例如,我們選擇了用某種限制酶切割載體,如果目的基因的核苷酸序列中恰好含有該限制酶的識別序列,那么用該限制酶切割含有目的基因的DNA片段時,目的基因就很可能被切斷;這時可以考慮用合適的同尾酶(目的基因的核苷酸序列中不能有它的識別序列)來獲取目的基因。基因工程的基本操作程序P76目的基因的定義,類型:第2自然段。P77常用的獲取目的基因的方法:PCR第2自然段。PCR的條件:最后1自然段。引物:相關(guān)信息。P78PCR的流程:圖3-5.P79PCR產(chǎn)物的鑒定方法:第1自然段。P80基因表達載體需具備的條件:第2自然段。載體的構(gòu)建過程:第3自然段。,圖3-6.將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ǎ鹤詈?自然段。P82目的基因的檢測與鑒定方法:第2自然段。將目的基因?qū)雱游锛毎?,微生物的方法:倒?shù)第2自然段?;蜻^程的整體流程:圖3-7.基因工程的基本操作流程圖P83練習(xí)與應(yīng)用:一、概念檢測1.⑴√⑵×⑶×2.D二、拓展應(yīng)用1.【提示】外源基因插入基因組中可能為單位點插入,或者同一染色體多位點插入,或者不同染色體多位點插入。大多數(shù)情況下,插入的位點難以做到定點插入;插入的拷貝數(shù)也是隨機的。因此,外源基因在轉(zhuǎn)基因植物中的遺傳是很復(fù)雜的。例如,科研人員在對轉(zhuǎn)GUS基因(β-葡糖醛酸糖苷酶基因)的煙草進行基因表達分析時,發(fā)現(xiàn)部分轉(zhuǎn)基因植株的染色體DNA中整合了多個拷貝的基因,從而導(dǎo)致GUS基因失活。除此之外,外源基因丟失、基因重排等也都可能影響外源基因的穩(wěn)定性。2.⑴【答案】ctrl
基因和psy基因
Pmi基因?qū)⒛康幕蛩腿胨炯毎?。⑵【答案】不能。如果目的基因序列中含有用到的限制酶的識別序列,限制酶可能將它切斷。⑶【提示】維生素A在人體內(nèi)具有非常重要的生理功能,對視力、骨骼生長、免疫功能等都有調(diào)節(jié)作用。但是,人體不能合成維生素A,需要從食物中攝取。維生素A缺乏癥是南亞地區(qū)常見的由營養(yǎng)不良導(dǎo)致的疾病,該地區(qū)的居民一般以秈稻作為主食。β-胡蘿ト素是維生素A的前體,在人體內(nèi)它可以轉(zhuǎn)化為維生素A。因此,科學(xué)家將兩個參與β-胡蘿ト素合成的酶的基因轉(zhuǎn)入了秈稻中,使其胚乳中富含β-胡蘿ト素,期望讓人們通過日常食用主食就能補充足夠量的維生素A,從而降低維生素A缺乏癥的患病率。關(guān)于“是否要推廣“黃金大米””的爭論主要圍繞其安全性、有效性等方面展開。P84了解電泳?;蚬こ痰膽?yīng)用P92練習(xí)與應(yīng)用:一、概念檢測1.C
2.A二、拓展應(yīng)用1.⑴【提示】限制酶和DNA連接酶矮牽牛轉(zhuǎn)基因矮牽牛對草甘膦產(chǎn)生了一定的抗性⑵【答案】對照組為非轉(zhuǎn)基因矮牽牛理論上增加轉(zhuǎn)入的外源EPSP合酶基因的數(shù)量,矮牽牛體內(nèi)EPSP合酶的表達水平會升高,它對草甘膦的抗性會增強?!咎崾尽繉⒉煌截悢?shù)的EPSP合酶基因分別轉(zhuǎn)入矮牽牛細胞中,培育轉(zhuǎn)基因植株,比較它們對草甘膦抗性的差異。蛋白質(zhì)工程的原理和應(yīng)用P93蛋白質(zhì)工程的概念:黑體字。P94蛋白質(zhì)工程的基本思路:圖3-17.蛋白質(zhì)工程的基本思路P98復(fù)習(xí)與提高:1.⑴【答案】應(yīng)選擇用相同的限制酶或切割能產(chǎn)生相同末端的限制酶切割質(zhì)粒和含有目的基因的DNA片段,并且注意限制酶的切割位點不能位于目的基因的內(nèi)部,以防破壞目的基因,限制酶也不能破壞質(zhì)粒的啟動子、終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點等結(jié)構(gòu)。⑵【答案】加入DNA連接酶。⑶【提示】該質(zhì)粒便于進行雙重篩選。標(biāo)記基因AmpR基因可用于檢測質(zhì)粒是否導(dǎo)入了大腸桿菌,一般只有導(dǎo)入了質(zhì)粒的大腸桿菌才能在添加了青霉素的培養(yǎng)基上生長。而由于LacZ基因的效應(yīng),這些生長的菌落可能出現(xiàn)兩種顏色:含有空質(zhì)粒(沒有連接目的基因的質(zhì)粒)的大腸桿菌菌落呈藍色;含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌落呈白色。⑷【答案】含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌落呈白色。因為目的基因的插入破壞了LacZ基因的結(jié)構(gòu),使其不能正常表達,形成β-半乳糖苷酶,底物X-gal也就不會被分解。2.⑴【答案】逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體,能將外源基因Oct3/4、Sox2、c-Myc和KIf4送入小鼠成纖維細胞。⑵【提示】可以設(shè)置對照組。將轉(zhuǎn)入外源基因和沒有轉(zhuǎn)人外源基因的細胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中,并確保其他培養(yǎng)條件相同。如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細胞轉(zhuǎn)化成了iPS細胞,就可以證明iPS細胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用。⑶【提示】可以依次去掉1個基因,將其他3個基因轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細胞中,然后通過與轉(zhuǎn)入4個基因的小鼠成纖維細胞的誘導(dǎo)情況進行比較,來推測缺失的那個基因?qū)φT導(dǎo)iPS細胞的影響,進而判斷每個基因作用的相對大小。(其他合理答案均可)⑷【提示】不會引起免疫排斥反應(yīng),因為在誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化的過程中細胞的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生變化,理論上產(chǎn)生的還是“自體”細胞。iPS細胞擁有分化為各種細胞的潛能,因此存在分化成腫瘤細胞的風(fēng)險3.⑴【提示】從親緣關(guān)系的遠近來看,固氮相關(guān)基因可能更容易在水稻根系微生物中穩(wěn)定存在和表達,進而使其具有固氮的能力。(其他合理答案均可)⑵【提示】此題不要求有唯一的答案,學(xué)生可從便捷性、安全性、經(jīng)濟性等角度進行分析,言之成理即可。例如,從便捷性角度認為能固氮的水稻新品種更值得推廣;或從轉(zhuǎn)基因安全性角度認為能固氮的水稻根系微生物更值得推廣等。第4章生物技術(shù)的安全性與倫理問題第1節(jié)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性1、基因生物與食物安全的爭論:反方觀點:反對“實質(zhì)性等同”、出現(xiàn)滯后效應(yīng)、出現(xiàn)新的過敏原、營養(yǎng)成分改變正方觀點:有安全性評價、科學(xué)家負責(zé)的態(tài)度、無實例無證據(jù)2、轉(zhuǎn)基因生物與生物安全(對生物多樣性的影響)的爭論:反方觀點:擴散到種植區(qū)之外變成野生種類、成為入侵外來物種、重組出有害的病原體、成為超級雜草、有可能造成“基因污染”正方觀點:生命力有限、存在生殖隔離、花粉傳播距離有限、花粉存活時間有限3、轉(zhuǎn)基因生物與環(huán)境安全(對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響)的爭論:反方觀點:打破物種界限、二次污染、重組出有害的病原微生物、毒蛋白等可能通過食物鏈進入人體正方觀點:不改變生物原有的分類地位、減少農(nóng)藥使用、保護農(nóng)田土壤環(huán)境4、理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)5、我國的農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物實行了標(biāo)識制度:農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物分為四個等級:安全等級I:尚不存在危險;安全等級II:具有低度危險;安全等級III:具有中度危險;安全等級IV:具有高度危險。關(guān)注生殖性克隆人三個關(guān)于生物技術(shù)的倫理的熱點問題1、克隆人:兩種不同觀點,多數(shù)人持否定態(tài)度。否定的理由:克隆人嚴重違反了人類倫理道德,是克隆技術(shù)的濫用;克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念;克隆人是在人為的制造在心理上和社會地位上都
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