紅細(xì)胞檢驗(yàn)-網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（臨床檢驗(yàn)技術(shù)）

網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)2網(wǎng)織紅細(xì)胞(reticulocyte，Ret)是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟紅細(xì)胞間的過渡細(xì)胞胞質(zhì)中殘存嗜堿性物質(zhì)核糖核酸(RNA)，經(jīng)煌焦油藍(lán)等活體染色后，嗜堿性物質(zhì)凝聚成藍(lán)黑色顆粒，連綴成線，線連接成網(wǎng)。屬于尚未完全成熟的紅細(xì)胞(當(dāng)嗜堿性物質(zhì)消耗殆盡后才被視為成熟紅細(xì)胞)，一般為8～9.5μm。34任務(wù)網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)十PARTTEN目錄檢測原理1

參考范圍3

質(zhì)量保證2

4臨床意義

檢測原理

1.普通光學(xué)顯微鏡法

活體染色（新亞甲藍(lán)或煌焦油藍(lán))的堿性著色基團(tuán)網(wǎng)織紅細(xì)胞RNA的磷酸基(帶負(fù)電荷)RNA膠體間的負(fù)電荷減少而發(fā)生凝縮，藍(lán)色的點(diǎn)狀、線狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)

，顯微鏡下計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中所占的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，以百分比或分?jǐn)?shù)數(shù)表示。

流式細(xì)胞儀法2．儀器法網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀血液分析儀法。熒光染料與網(wǎng)織紅細(xì)胞中RNA結(jié)合，發(fā)出特定顏色的熒光進(jìn)行RNA定量精確計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞占成熟紅細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(Ret％)。將網(wǎng)織紅細(xì)胞分成高、中、低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞比率(HFR、MFR、LFR)并計(jì)算網(wǎng)織紅細(xì)胞其他參數(shù)。

血液分析儀法

提供與網(wǎng)織紅細(xì)胞相關(guān)的多個(gè)參數(shù)，網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值、網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比、網(wǎng)織紅細(xì)胞平均體積、網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白分布寬度、網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度、

LFR、MFR、HFR、網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟指數(shù)。11質(zhì)量保證以手工計(jì)數(shù)法為重點(diǎn)

1．染料選擇2．正確辨認(rèn)網(wǎng)織紅細(xì)胞外周血中網(wǎng)織紅細(xì)胞主要為Ⅳ型，凡含有2個(gè)以上網(wǎng)織顆粒的紅細(xì)胞均應(yīng)計(jì)為網(wǎng)織紅細(xì)胞。

3．網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法

(1)Miller窺盤：(2)顯微成像系統(tǒng)：計(jì)算機(jī)和細(xì)胞形態(tài)分析軟件，①HFR：粗顆粒堆積成網(wǎng)狀。②MFR：粗顆粒在10個(gè)以上，或細(xì)小顆粒超過15個(gè)。③LFR：細(xì)胞內(nèi)含15個(gè)以下細(xì)小顆粒

參考范圍網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)成人和兒童:0.005～0.025新生兒:0.02～0.06網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)數(shù)成人和兒童:(24～84)X109／L參考值臨床意義41．評(píng)價(jià)骨髓增生能力，判斷貧血類型。

(1)網(wǎng)織紅細(xì)胞增多：表示骨髓造血功能旺盛，各種增生性貧血

(2)網(wǎng)織紅細(xì)胞減少：常見于再生障礙性貧血

(3)鑒別貧血：2．評(píng)價(jià)療效(1)觀察貧血療效：貧血隨訪缺鐵貧或巨幼貧有效治療后，2～3d后Ret開始上升，7～10d達(dá)到最高峰(約10％)，2周后漸降至正常。

(2)骨髓移植后監(jiān)測骨髓造血恢復(fù)：骨髓移植后第21天，如Ret大于15X109／L，常表示無移植并發(fā)癥；若骨髓開始恢復(fù)造血功能，首先HFR和MFR上升，其次為網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)值上升。3．放療和化療的監(jiān)測

指導(dǎo)臨床適時(shí)調(diào)整治療方案，避免造成嚴(yán)重的骨髓抑制。機(jī)體接受放、化療后，如出現(xiàn)骨髓抑制，早期HFR和MFR降低，而后網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)值降低；停止放、化療，骨髓功能恢復(fù)后，這些指標(biāo)依次上升。

網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)試劑操作步驟目

錄CONTENTS計(jì)算參考值注意事項(xiàng)思考題實(shí)驗(yàn)原理

用等滲稀釋液將血液按一定倍數(shù)稀釋，充人計(jì)數(shù)池后顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)，換算求出每升血液中紅細(xì)胞的數(shù)量試驗(yàn)器材、試劑顯微鏡、改良Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)板等試驗(yàn)器材試劑紅細(xì)胞稀釋液改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板操作步驟01取中號(hào)試管1支，加紅細(xì)胞稀釋液2.0ml。02用清潔干燥微量吸管取末梢血10μl，擦去管外余血后加至紅細(xì)胞稀釋液底部，再輕吸上層清洗吸管2-3次立即混勻。03混勻后，用干凈微量吸管將紅細(xì)胞懸液充人計(jì)數(shù)池，不得有空泡或外溢，充池后靜置2-3min后計(jì)數(shù)。04高倍鏡下依次計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)四角和正中共5個(gè)中方格內(nèi)的紅細(xì)胞。對(duì)壓線細(xì)胞按"數(shù)上不數(shù)下、數(shù)左不數(shù)右"的原則進(jìn)行計(jì)數(shù)計(jì)數(shù)原則計(jì)算紅細(xì)胞數(shù)/L=5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)×5×10×200×106=5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)×1010=5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)÷100×1012式中：×55個(gè)中方格換算成1個(gè)大方格；×101個(gè)大方格容積為0.1μl，換算成1.0μl；×200血液的實(shí)際稀釋倍數(shù)應(yīng)為201倍，按200是便于計(jì)算；×106由1μl換算成1L。男：（4.09～5.74）×1012/L女：（3.68～5.13）×1012/L新生兒：（5.2～6.4）×1012/L參考區(qū)間注意事項(xiàng)1