二輪專項分層特訓卷•生物【統(tǒng)考版】專 題 七

eq\a\vs4\al(專)eq\a\vs4\al(題)eq\a\vs4\al(七)現(xiàn)代生物科技專題真題分類再回訪課堂定時練規(guī)范———————————全國卷真題·再回訪·尋趨勢———————————考點Ⅰ基因工程1．[2022·全國乙卷]新冠疫情出現(xiàn)后，病毒核酸檢測和疫苗接種在疫情防控中發(fā)揮了重要作用?；卮鹣铝袉栴}。(1)新冠病毒是一種RNA病毒，檢測新冠病毒RNA(核酸檢測)可以采取RT-PCR法。這種方法的基本原理是先以病毒RNA為模板合成cDNA，這一過程需要的酶是________________，再通過PCR技術(shù)擴增相應(yīng)的DNA片段。根據(jù)檢測結(jié)果判斷被檢測者是否感染新冠病毒。(2)為了確保新冠病毒核酸檢測的準確性，在設(shè)計PCR引物時必須依據(jù)新冠病毒RNA中的______________________來進行。PCR過程每次循環(huán)分為3步，其中溫度最低的一步是________________。(3)某人同時進行了新冠病毒核酸檢測和抗體檢測(檢測體內(nèi)是否有新冠病毒抗體)，若核酸檢測結(jié)果為陰性而抗體檢測結(jié)果為陽性，說明____________________(答出1種情況即可)；若核酸檢測和抗體檢測結(jié)果均為陽性，說明________________________。(4)常見的病毒疫苗有滅活疫苗、蛋白疫苗和重組疫苗等。已知某種病毒的特異性蛋白S(具有抗原性)的編碼序列(目的基因)。為了制備蛋白疫苗，可以通過基因工程技術(shù)獲得大量蛋白S?；蚬こ痰幕静僮髁鞒淌莀_______________________________________________________________________________________________________________________________________________。2．[2021·全國甲卷]PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測。為檢測病人是否感染了某種病原菌，醫(yī)生進行了相關(guān)操作：①分析PCR擴增結(jié)果；②從病人組織樣本中提取DNA；③利用PCR擴增DNA片段；④采集病人組織樣本?；卮鹣铝袉栴}：(1)若要得到正確的檢測結(jié)果，正確的操作順序應(yīng)該是__________(用數(shù)字序號表示)。(2)操作③中使用的酶是________。PCR反應(yīng)中的每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、______三步，其中復(fù)性的結(jié)果是________________________________________________________________________。(3)為了做出正確的診斷，PCR反應(yīng)所用的引物應(yīng)該能與____________特異性結(jié)合。(4)PCR(多聚酶鏈式反應(yīng))技術(shù)是指________________________________________________________________________________。該技術(shù)目前被廣泛地應(yīng)用于疾病診斷等方面。3．[2021·全國乙卷]用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過程中需要使用多種工具酶，其中4種限制性核酸內(nèi)切酶的切割位點如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)常用的DNA連接酶有E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶。圖中________________________________________________________________________酶切割后的DNA片段可以用E·coliDNA連接酶連接。圖中________________________________酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。(2)DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學鍵是__________________________________________________________________________________________。(3)DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征。如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點，可以保證質(zhì)粒在受體細胞中能______；質(zhì)粒DNA分子上有________，便于外源DNA插入；質(zhì)粒DNA分子上有標記基因(如某種抗生素抗性基因)，利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細胞，方法是________________________________________________________________________。(4)表達載體含有啟動子，啟動子是指________________________________________________________________________________________________________________________________________________。4．[2019·全國卷Ⅰ]基因工程中可以通過PCR技術(shù)擴增目的基因?；卮鹣铝袉栴}。(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀╛___________和____________。(2)生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是______________。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是__________。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的________。(3)目前在PCR反應(yīng)中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。5．[2019·全國卷Ⅱ]植物組織培養(yǎng)技術(shù)在科學研究和生產(chǎn)實踐中得到了廣泛的應(yīng)用?；卮鹣铝袉栴}。(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術(shù)的特點有____________________________________(答出2點即可)。(2)通過組織培養(yǎng)技術(shù)，可把植物組織細胞培養(yǎng)成胚狀體，再通過人工種皮(人工薄膜)包裝得到人工種子(如圖所示)，這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長。人工種皮具備透氣性的作用是____________________________。人工胚乳能夠為胚狀體生長提供所需的物質(zhì)，因此應(yīng)含有植物激素、____________和__________等幾類物質(zhì)。(3)用脫毒苗進行繁殖，可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗，可以選取植物的________________進行組織培養(yǎng)。(4)植物組織培養(yǎng)技術(shù)可與基因工程技術(shù)相結(jié)合獲得轉(zhuǎn)基因植株。將含有目的基因的細胞培養(yǎng)成一個完整植株的基本程序是________________________________________________________________________________________________________________________________________________(用流程圖表示)?？键cⅡ細胞工程和胚胎工程1．[2022·全國甲卷]某牧場引進一只產(chǎn)肉性能優(yōu)異的良種公羊，為了在短時間內(nèi)獲得具有該公羊優(yōu)良性狀的大量后代，該牧場利用胚胎工程技術(shù)進行了相關(guān)操作?；卮鹣铝袉栴}。(1)為了實現(xiàn)體外受精需要采集良種公羊的精液，精液保存的方法是________。在體外受精前要對精子進行獲能處理，其原因是________________________________________________________________________；精子體外獲能可采用化學誘導法，誘導精子獲能的藥物是______________________(答出1點即可)。利用該公羊的精子進行體外受精需要發(fā)育到一定時期的卵母細胞，因為卵母細胞達到________時才具備與精子受精的能力。(2)體外受精獲得的受精卵發(fā)育成囊胚需要在特定的培養(yǎng)液中進行，該培養(yǎng)液的成分除無機鹽、激素、血清外，還含的營養(yǎng)成分有________________________(答出3點即可)等。將培養(yǎng)好的良種囊胚保存?zhèn)溆谩?3)請以保存的囊胚和相應(yīng)數(shù)量的非繁殖期受體母羊為材料進行操作，以獲得具有該公羊優(yōu)良性狀的后代。主要的操作步驟____________________________________________________________________________________________________________________________________________________。2．[2020·全國卷Ⅰ]為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學以小鼠甲為實驗材料設(shè)計了以下實驗流程?；卮鹣铝袉栴}：(1)上述實驗前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是________________________________________________________________________。(2)寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞，需要進行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于__________，使用該培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng)的結(jié)果是____________________________。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖，可采用的方法有________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出2點即可)。3．[2020·全國卷Ⅲ]W是一種具有特定功能的人體蛋白質(zhì)。某研究小組擬仿照制備乳腺生物反應(yīng)器的研究思路，制備一種膀胱生物反應(yīng)器來獲得W，基本過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)步驟①中需要使用的工具酶有__________________________。步驟②和③所代表的操作分別是__________和__________。步驟④稱為________________________________________________________________________。(2)與乳腺生物反應(yīng)器相比，用膀胱生物反應(yīng)器生產(chǎn)W的優(yōu)勢在于不受轉(zhuǎn)基因動物的________________________________________________________________________(答出2點即可)的限制。(3)一般來說，在同一動物個體中，乳腺上皮細胞與膀胱上皮細胞的細胞核中染色體DNA所含的遺傳信息________(填“相同”或“不同”)，原因是____________________________________________。(4)從上述流程可知，制備生物反應(yīng)器涉及胚胎工程，胚胎工程中所用到的主要技術(shù)有________________________________(答出2點即可)?？键cⅢ生態(tài)工程[2020·全國卷Ⅱ]植樹造林、“無廢棄物農(nóng)業(yè)”、污水凈化是建設(shè)美麗中國的重要措施。回答下列有關(guān)生態(tài)工程的問題：(1)在植樹造林時，一般認為，全部種植一種植物的做法是不可取的。因為與混合種植方式所構(gòu)建的生態(tài)系統(tǒng)相比，按照種植一種植物方式所構(gòu)建的生態(tài)系統(tǒng)，其抵抗力穩(wěn)定性__________。抵抗力穩(wěn)定性的含義是________________________________________________________________________。(2)“無廢棄物農(nóng)業(yè)”是我國利用生態(tài)工程的原理進行農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的一種模式，其做法是收集有機物質(zhì)，包括人畜糞便、枯枝落葉等，采用堆肥和漚肥等多種方式，把它們轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C肥料，再施用到農(nóng)田中。施用有機肥料的優(yōu)點是________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出3點即可)。在有機肥料的形成過程中，微生物起到了重要作用，這些微生物屬于生態(tài)系統(tǒng)組分中的________。(3)在污水凈化過程中，除發(fā)揮污水處理廠的作用外，若要利用生物來回收污水中的銅、鎘等金屬元素，請?zhí)峁┮粋€方案：________________________________________________________________________________________________________________________________________________?！燃壙颊骖}·真體驗·尋共性———————————Ⅰ.基因工程1．[2022·湖南卷]水蛭是我國的傳統(tǒng)中藥材，主要藥理成分水蛭素為水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。擬通過蛋白質(zhì)工程改造水蛭素結(jié)構(gòu)，提高其抗凝血活性?；卮鹣铝袉栴}：(1)蛋白質(zhì)工程流程如圖所示，物質(zhì)a是________________，物質(zhì)b是________。在生產(chǎn)過程中，物質(zhì)b可能不同，合成的蛋白質(zhì)空間構(gòu)象卻相同，原因是____________。(2)蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸，基因工程中獲取目的基因的常用方法有________________、________________和利用PCR技術(shù)擴增。PCR技術(shù)遵循的基本原理是________________。(3)將提取的水蛭蛋白經(jīng)甲、乙兩種蛋白酶水解后，分析水解產(chǎn)物中的肽含量及其抗凝血活性，結(jié)果如圖所示。推測兩種處理后酶解產(chǎn)物的抗凝血活性差異主要與肽的________(填“種類”或“含量”)有關(guān)，導致其活性不同的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)若要比較蛋白質(zhì)工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解產(chǎn)物和天然水蛭素的抗凝血活性差異，簡要寫出實驗設(shè)計思路________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。2．[2022·山東卷]某種類型的白血病由蛋白P引發(fā)，蛋白UBC可使P被蛋白酶識別并降解，藥物A可通過影響這一過程對該病起到治療作用。為探索藥物A治療該病的機理，需構(gòu)建重組載體以獲得融合蛋白FLAG-P和FLAG-P△。P△是缺失特定氨基酸序列的P，F(xiàn)LAG是一種短肽，連接在P或P△的氨基端，使融合蛋白能與含有FLAG抗體的介質(zhì)結(jié)合，但不影響P或P△的功能。(1)為構(gòu)建重組載體，需先設(shè)計引物，通過PCR特異性擴增P基因。用于擴增P基因的引物需滿足的條件是______________________________________________、為使PCR產(chǎn)物能被限制酶切割，需在引物上添加相應(yīng)的限制酶識別序列，該限制酶識別序列應(yīng)添加在引物的________(填“3′端”或“5′端”)。(2)PCR擴增得到的P基因經(jīng)酶切連接插入載體后，與編碼FLAG的序列形成一個融合基因，如圖甲所示，其中“ATGTGCA”為P基因編碼鏈起始序列。將該重組載體導入細胞后，融合基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA序列正確，翻譯出的融合蛋白中FLAG的氨基酸序列正確，但P基因?qū)?yīng)的氨基酸序列與P不同。據(jù)圖甲分析，出現(xiàn)該問題的原因是____________________________________________________________________________________________。修改擴增P基因時使用的帶有EcoRⅠ識別序列的引物來解決該問題，具體修改方案是______________________________________________________________。(3)融合蛋白表達成功后，將FLAG-P、FLAG-P△、藥物A和UBC按照圖乙中的組合方式分成5組。各組樣品混勻后分別流經(jīng)含F(xiàn)LAG抗體的介質(zhì)，分離出與介質(zhì)結(jié)合的物質(zhì)并用UBC抗體檢測，檢測結(jié)果如圖丙所示。已知FLAG-P和FLAG-P△不能降解UBC，由①②③組結(jié)果的差異推測，藥物A的作用是____________________________________________；由②④組或③⑤組的差異推測，P△中缺失的特定序列的作用是______________________________________。(4)根據(jù)以上結(jié)果推測，藥物A治療該病的機理是________________________________________________________________________。3．[2021·廣東卷]非細胞合成技術(shù)是一種運用合成生物學方法，在細胞外構(gòu)建多酶催化體系，獲得目標產(chǎn)物的新技術(shù)，其核心是各種酶基因的挖掘、表達等。中國科學家設(shè)計了4步酶促反應(yīng)的非細胞合成路線(如圖)，可直接用淀粉生產(chǎn)肌醇(重要的醫(yī)藥食品原料)，以期解決高溫強酸水解方法造成的嚴重污染問題，并可以提高產(chǎn)率?；卮鹣铝袉栴}：(1)研究人員采用PCR技術(shù)從土壤微生物基因組中擴增得到目標酶基因。此外，獲得酶基因的方法還有__________________。(答出兩種即可)(2)高質(zhì)量的DNA模板是成功擴增出目的基因的前提條件之一。在制備高質(zhì)量DNA模板時必須除去蛋白，方法有______________________。(答出兩種即可)(3)研究人員使用大腸桿菌BL21作為受體細胞、pET20b為表達載體分別進行4種酶的表達。表達載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時，首先應(yīng)制備______________細胞。為了檢測目的基因是否成功表達出酶蛋白，需要采用的方法有__________________。(4)依圖所示流程，在一定的溫度、pH等條件下，將4種酶與可溶性淀粉溶液混合組成一個反應(yīng)體系。若這些酶最適反應(yīng)條件不同，可能導致的結(jié)果是______________________。在分子水平上，可以通過改變__________________，從而改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，實現(xiàn)對酶特性的改造和優(yōu)化。4．[2021·河北卷]采礦污染和不當使用化肥導致重金屬鎘(Cd)在土壤中過量積累。利用植物修復(fù)技術(shù)將土壤中的Cd富集到植物體內(nèi)，進行后續(xù)處理(例如，收集植物組織器官異地妥善儲存)，可降低土壤中Cd的含量。為提高植物對Cd污染土壤的修復(fù)能力，研究者將酵母液泡Cd轉(zhuǎn)運蛋白(YCF1)基因?qū)胧茉囍参?，并檢測了相關(guān)指標?；卮鹣铝袉栴}：(1)為獲取YCF1基因，將酵母細胞的全部DNA提取、切割后與載體連接，導入受體菌的群體中儲存，這個群體稱為__________________。(2)將DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時，所需要的兩種酶是______________。構(gòu)建的重組基因表達載體中必須含有標記基因，其作用是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)進行前期研究時，將含有YCF1基因的重組載體導入受試雙子葉植物印度芥菜，采用最多的方法是__________。研究者進一步獲得了轉(zhuǎn)YCF1基因的不育楊樹株系，采用不育株系作為實驗材料的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)將長勢一致的野生型和轉(zhuǎn)基因楊樹苗移栽到Cd污染的土壤中，半年后測定植株干重(圖1)及不同器官中Cd含量(圖2)。據(jù)圖1可知，與野生型比，轉(zhuǎn)基因植株對Cd具有更強的__________(填“耐性”或“富集能力”)；據(jù)圖2可知，對轉(zhuǎn)基因植株的__________進行后續(xù)處理對于緩解土壤Cd污染最為方便有效。(5)已知YCF1特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細胞的液泡膜上。據(jù)此分析，轉(zhuǎn)基因楊樹比野生型能更好地適應(yīng)高Cd環(huán)境的原因是________________________________。相較于草本植物，采用楊樹這種喬木作為Cd污染土壤修復(fù)植物的優(yōu)勢在于______________________________(寫出兩點即可)。5．[2021·山東卷]人類γ基因啟動子上游的調(diào)控序列中含有BCL11A蛋白結(jié)合位點，該位點結(jié)合BCL11A蛋白后，γ基因的表達被抑制。通過改變該結(jié)合位點的序列，解除對γ基因表達的抑制，可對某種地中海貧血癥進行基因治療。科研人員擴增了γ基因上游不同長度的片段，將這些片段分別插入表達載體中進行轉(zhuǎn)化和熒光檢測，以確定BCL11A蛋白結(jié)合位點的具體位置。相關(guān)信息如圖所示。(1)為將擴增后的產(chǎn)物定向插入載體指導熒光蛋白基因表達，需在引物末端添加限制酶識別序列。據(jù)圖可知，在F1～F7末端添加的序列所對應(yīng)的限制酶是________，在R末端添加的序列所對應(yīng)的限制酶是________。本實驗中，從產(chǎn)物擴增到載體構(gòu)建完成的整個過程共需要________種酶。(2)將構(gòu)建的載體導入除去BCL11A基因的受體細胞，成功轉(zhuǎn)化后，含F(xiàn)1～F6與R擴增產(chǎn)物的載體表達熒光蛋白，受體細胞有熒光，含F(xiàn)7與R擴增產(chǎn)物的受體細胞無熒光。含F(xiàn)7與R擴增產(chǎn)物的受體細胞無熒光的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)向培養(yǎng)液中添加適量的雌激素，含F(xiàn)1～F4與R擴增產(chǎn)物的受體細胞不再有熒光，而含F(xiàn)5～F6與R擴增產(chǎn)物的受體細胞仍有熒光。若γ基因上游調(diào)控序列上與引物序列所對應(yīng)的位置不含有BCL11A蛋白的結(jié)合位點序列，據(jù)此結(jié)果可推測，BCL11A蛋白結(jié)合位點位于________________________________________，理由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。6．[2020·江蘇卷]如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，簡捷地分析出已知序列兩側(cè)的序列，具體流程如圖(以EcoRⅠ酶切為例)：請據(jù)圖回答問題：(1)步驟Ⅰ用的EcoRⅠ是一種________酶，它通過識別特定的________切割特定位點。(2)步驟Ⅱ用的DNA連接酶催化相鄰核苷酸之間的3′-羥基與5′-磷酸間形成______；PCR循環(huán)中，升溫到95℃是為了獲得________；TaqDNA聚合酶的作用是催化________________________________________________________________________。(3)若如表所列為已知的DNA序列和設(shè)計的一些PCR引物，步驟Ⅲ選用的PCR引物必須是________(從引物①②③④中選擇，填編號)。DNA序列(虛線處省略了部分核苷酸序列)已知序列PCR引物①5′－AACTATGCGCTCATGA－3′②5′－GCAATGCGTAGCCTCT－3′③5′－AGAGGCTACGCATTGC－3′④5′－TCATGAGCGCATAGTT－3′(4)對PCR產(chǎn)物測序，經(jīng)分析得到了片段F的完整序列。下列DNA單鏈序列中(虛線處省略了部分核苷酸序列)，結(jié)果正確的是________。A．5′－AACTATGCG……AGCCCTT－3′B．5′－AATTCCATG……CTGAATT－3′C．5′－GCAATGCGT……TCGGGAA－3′D．5′－TTGATACGC……CGAGTAC－3′7．[2020·山東卷]水稻胚乳中含直鏈淀粉和支鏈淀粉，直鏈淀粉所占比例越小糯性越強。科研人員將能表達出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉(zhuǎn)入水稻，實現(xiàn)了對直鏈淀粉合成酶基因(Wx基因)啟動子序列的定點編輯，從而獲得了3個突變品系。(1)將能表達出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列插入Ti質(zhì)粒構(gòu)建重組載體時，所需的酶是__________________________________，重組載體進入水稻細胞并在細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為________。(2)根據(jù)啟動子的作用推測，Wx基因啟動子序列的改變影響了____________________________，從而改變了Wx基因的轉(zhuǎn)錄水平。與野生型水稻相比，3個突變品系中Wx基因控制合成的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列________(填“發(fā)生”或“不發(fā)生”)改變，原因是_________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)為檢測啟動子變化對Wx基因表達的影響，科研人員需要檢測Wx基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA(WxmRNA)的量。檢測時分別提取各品系胚乳中的總RNA，經(jīng)________過程獲得總cDNA。通過PCR技術(shù)可在總cDNA中專一性地擴增出Wx基因的cDNA，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)各品系WxmRNA量的檢測結(jié)果如圖所示，據(jù)圖推測糯性最強的品系為______，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。Ⅱ.細胞工程和胚胎工程1．[2021·湖南卷]M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達?，F(xiàn)設(shè)計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A，流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是____________________，這類酶能將特定部位的兩個核苷酸之間的____________斷開。(2)在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進行動物A成纖維細胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是_____________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)與胚胎細胞核移植技術(shù)相比，體細胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為______________________(答出兩點即可)，功能上具有__________________________。(4)鑒定轉(zhuǎn)基因動物：以免疫小鼠的________淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合，篩選融合雜種細胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路___________________________________________________________________________________________________________________________________。2．[2021·浙江1月，節(jié)選]回答下列(二)小題：(二)三葉青為蔓生的藤本植物，以根入藥。由于野生三葉青對生長環(huán)境要求非?？量?，以及生態(tài)環(huán)境的破壞和過度的采挖，目前我國野生三葉青已十分珍稀。(1)為保護三葉青的________多樣性和保證藥材的品質(zhì)，科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理，利用________技術(shù)，實現(xiàn)了三葉青的林下種植。(2)依據(jù)基因工程原理，利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片，葉片產(chǎn)生酚類化合物，誘導發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上vir系列基因表達形成________和限制性核酸內(nèi)切酶等，進而從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段(T－DNA)。T－DNA進入葉片細胞并整合到染色體上，T－DNA上rol系列基因表達，產(chǎn)生相應(yīng)的植物激素，促使葉片細胞持續(xù)不斷地分裂形成________，再分化形成毛狀根。(3)剪取毛狀根，轉(zhuǎn)入含頭孢類抗生素的固體培養(yǎng)基上進行多次________培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加抗生素的主要目的是____________________。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進行懸浮培養(yǎng)，通過控制搖床的________和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的________________________________________，獲得大量毛狀根，用于提取藥用成分。3．[2020·江蘇卷]新型冠狀病毒可通過表面的刺突蛋白(S蛋白)與人呼吸道黏膜上皮細胞的ACE2受體結(jié)合，侵入人體，引起肺炎。圖1為病毒侵入后，人體內(nèi)發(fā)生的部分免疫反應(yīng)示意圖。單克隆抗體可阻斷病毒的粘附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點之一。圖2為篩選、制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。請據(jù)圖回答下列問題：(1)圖1中人體內(nèi)抗原遞呈細胞吞噬病毒，并將病毒的抗原暴露在細胞表面，被________細胞表面的受體識別后激活該細胞。(2)B細胞識別入侵的病毒后，在淋巴因子作用下，經(jīng)過細胞的____________，形成____________細胞。(3)為判斷疑似患者是否為新型冠狀病毒感染者，采集鼻咽拭子主要用于病原學檢查，檢測病毒的__________；采集血液樣本主要用于血清學檢查，檢測________________________________。(4)據(jù)圖2所示，研制抗S蛋白單克隆抗體，需先注射________免疫小鼠以激活小鼠的免疫細胞，再提取激活的B細胞與骨髓瘤細胞融合，用HAT培養(yǎng)基篩選獲得________細胞。因為同一種抗原可能激活________細胞，還需繼續(xù)篩選才能獲得分泌單克隆抗體的細胞株。專項分類強化練課內(nèi)課外提能力———————————非選擇題分類·規(guī)范提升練———————————類型概述析因推理探究綜合類1．[2022·廣西壯族自治區(qū)南寧市高三測試]回答胚胎工程和基因工程的實際應(yīng)用相關(guān)的問題：(1)試管嬰兒技術(shù)為某些不育夫婦帶來了福音，試管嬰兒技術(shù)的最后一道操作是____________，該操作的實質(zhì)是______________________________________________。(2)PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測。利用PCR擴增DNA片段的酶與細胞內(nèi)的酶相比，主要特點是____________。(3)生產(chǎn)基因工程藥物時通常用細菌中的質(zhì)粒作為______________________________，而選擇細菌作為受體細胞的原因可能是____________________________________(寫兩點)。(4)重組人生長激素是通過基因重組大腸桿菌分泌型表達技術(shù)生產(chǎn)的。獲取生長激素基因后，構(gòu)建基因表達載體時要在生長激素基因前連接上相應(yīng)的啟動子，其目的是__________________________，生長激素基因在導入大腸桿菌之前，一般先用Ca2＋處理細胞，其目的是____________________________________________________。2．[2022·貴陽市五校高三聯(lián)考]馬鈴薯是重要的經(jīng)濟作物，植物細胞工程在馬鈴薯的脫毒及育種等方面有重要應(yīng)用。請回答下列問題：(1)植物細胞工程的基本技術(shù)主要包括________________和________________。(2)培育脫毒馬鈴薯時，外植體宜選用______(填“莖尖”或“葉片”)，不選另一個的理由是________________________________________________________________________。(3)植物組織培養(yǎng)常用到愈傷組織培養(yǎng)基、生芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。在愈傷組織培養(yǎng)基上，外植體經(jīng)脫分化形成愈傷組織，愈傷組織是一團__________________________________，在再分化階段，生長素和細胞分裂素參與了細胞分化方向的調(diào)節(jié)，與生根培養(yǎng)基相比，一般情況下生芽培養(yǎng)基中兩者的含量關(guān)系是______________________________________________________。(4)避免微生物污染、優(yōu)化培養(yǎng)條件可提高植物組織培養(yǎng)的成功率。在植物組織培養(yǎng)時，應(yīng)從________________________________________________________________(至少答出兩點)等方面制定措施，減少污染。在培養(yǎng)室中培養(yǎng)時，注意優(yōu)化培養(yǎng)環(huán)境，控制________________________(至少答出兩點)等培養(yǎng)條件。3．[2022·廣東省珠海市高三摸底測試]我國正在科學、有序推進新冠疫苗接種工作，其中科興及北京生物兩款滅活疫苗均使用Vero細胞進行病毒擴增培養(yǎng)(下圖)。Vero細胞為非洲綠猴腎細胞的傳代細胞系，回答以下問題：(1)Vero細胞的培養(yǎng)應(yīng)在培養(yǎng)箱中進行，箱內(nèi)的氣體環(huán)境條件為________________________________________________________________________。(2)Vero細胞的傳代培養(yǎng)過程中需要使用________________________使細胞分散，并在合成培養(yǎng)基中加入________________等天然成分。此外，在培養(yǎng)過程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，目的是____________________________________________________。(3)滅活疫苗制備成功之后先進行動物試驗，一段時間后檢測試驗動物是否產(chǎn)生抗體，檢測的方法是__________________________________________________________________。(4)某科研團隊想利用Vero細胞系制備新冠病毒的單克隆抗體用于診斷試劑，請寫出相關(guān)的實驗思路________________________________________________________。4．[2022·甘肅一模]胚胎干細胞(ES)是從哺乳動物的早期胚胎或原始性腺中獲得的，人工培養(yǎng)時能夠形成各種類型的細胞，并具有自我更新能力，表現(xiàn)出顯著的長期增殖潛力，在科學和醫(yī)學領(lǐng)域具有極高的研究價值，目前被用于損傷組織的修復(fù)、器官移植等研究領(lǐng)域，稱為“胚胎干細胞療法”。請結(jié)合以下材料回答問題：材料一：日前，英國研究人員利用最新的3D打印技術(shù)，“打印”出了活體胚胎干細胞。實驗證明，這些干細胞仍保持著胚胎干細胞的正常分化能力。材料二：美國科學家利用鼠的活性卵子及皮膚成纖維細胞，在實驗室成功克隆出了多個鼠胚胎，進而可以開發(fā)出有研究價值的胚胎干細胞。材料三：科學家將胰腺病患者的胚胎干細胞注入經(jīng)基因改造的豬胚胎中，培育出了人體的健康胰腺。(1)自然狀況下的胚胎干細胞是從哺乳動物囊胚的________________(填“滋養(yǎng)層細胞”或“內(nèi)細胞團”)中分離出來的。胚胎干細胞在體外可培養(yǎng)形成各種類型的細胞，這體現(xiàn)了細胞的________能力。(2)從理論上講，用3D打印技術(shù)獲得的活體胚胎干細胞________(填“能”或“不能”)誘導形成完整個體，原因是________________________________________________。(3)使用活性卵子及皮膚成纖維細胞克隆出多個胚胎的過程中，用到的生物工程技術(shù)有細胞核移植__________________________________(至少寫出一種)。(4)與常規(guī)的器官移植相比，在豬體內(nèi)培育出的器官移植到人體后成活率大大提高，原因是________________________________________________________________________。(5)目前，胚胎干細胞療法的安全性也受到了有關(guān)人士的質(zhì)疑，主要原因是胚胎干細胞具有的________________特點和腫瘤細胞相似。5．[2022·山西晉中一模]某科研團隊利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育耐鹽水稻，作為沿海灘涂和鹽堿地的改良作物，從而擴大耕地面積。下圖A表示含有耐鹽基因的外源DNA分子，圖B表示質(zhì)粒，其上含有BamHⅠ、SmaⅠ和HindⅢ三種限制酶的酶切位點。請回答下列問題：(1)四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因是質(zhì)粒上的________基因，可以利用其進行____________________________。(2)據(jù)圖推斷，獲取耐鹽基因時不能使用限制酶________進行酶切，原因是________________________________________________________________________。(3)為保證耐鹽基因在受體細胞中能夠正確表達，圖B所示基因表達載體還應(yīng)具有啟動子和________，其中啟動子的功能是________________。(4)在添加氨芐青霉素的固體培養(yǎng)基上，________(填“能”或“不能”)篩選出含有插入了耐鹽基因重組質(zhì)粒的受體細胞，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。6．生長激素是由垂體分泌的肽類激素，在人體生長發(fā)育中起著關(guān)鍵性作用。其促進機體軟骨細胞增殖的調(diào)節(jié)過程如圖所示(圖中“＋”是促進，“－”是抑制)。請回答下列問題：(1)垂體合成生長激素時，細胞中“搬運工”________________將氨基酸運到蛋白質(zhì)的“生產(chǎn)線”，蛋白質(zhì)的“生產(chǎn)線”是________________的結(jié)合體。(2)研究人員研究時發(fā)現(xiàn)，有的兒童身材矮小的原因是IGF-Ⅰ基因缺失。據(jù)圖推測這類兒童體內(nèi)GH水平應(yīng)________(填“低于”“等于”或“高于”)正常兒童，理由是______________________________________________________________________。(3)據(jù)圖所知，GH和IGF-Ⅰ都能促進軟骨細胞的增殖。研究人員想利用以下實驗材料：離體的軟骨細胞、細胞培養(yǎng)液、GH、IGF-Ⅰ等，通過細胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)后檢測細胞增殖率，以探究GH促進軟骨細胞增殖的兩條途徑中，哪條為主要途徑？請你設(shè)計該實驗的主要思路：________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(要求：只寫實驗思路，不寫預(yù)期結(jié)果和結(jié)論)非常“組合4”主觀題模擬真演練(一)1．[2022·河南模擬預(yù)測]鐮孢菌引起的小麥赤霉病被稱作小麥“癌癥”，會造成小麥嚴重減產(chǎn)，山東農(nóng)業(yè)大學研究團隊從小麥近緣植物長穗燕麥草中得到抗赤霉病基因Fhb7，并將Fhb7基因成功轉(zhuǎn)移至小麥品種，明確了其在小麥抗病育種中的穩(wěn)定抗性和應(yīng)用價值。這一成果是我國科學家在小麥赤霉病研究領(lǐng)域的又一重大突破，這一發(fā)現(xiàn)為解決小麥赤霉病世界性難題找到了“金鑰匙”。(1)將Fhb7基因與運載體結(jié)合時，所用到的工具酶有________________________，用質(zhì)粒構(gòu)建基因表達載體，除目的基因外，必須添加的結(jié)構(gòu)有________________________________________。(2)用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將Fhb7基因轉(zhuǎn)入小麥成功率很低，原因是________________________________________________________________?？蛇x用____________________法，將目的基因Fhb7導入受體細胞。(3)在受體細胞的選擇上，目前多采用小麥幼胚細胞作為受體，通過體細胞胚胎發(fā)育獲得轉(zhuǎn)基因植株。具體做法是在無菌環(huán)境中，顯微鏡下分離幼胚，并且切除胚軸以防止萌發(fā)。選用小麥幼胚細胞的原因是__________________________________________________，如果沒有切除胚軸導致幼胚直接萌發(fā)并發(fā)育成植株，則該過程______(填“能”或“不能”)體現(xiàn)植物細胞的全能性。(4)研究人員進一步獲得了轉(zhuǎn)基因小麥的雄性不育系，請從轉(zhuǎn)基因與生物安全的角度分析，采用雄性不育系的原因是____________________________________________，解決這一問題的另一種做法是：________________________________________。2．[2022·陜西省渭南市富平縣高三一模]重組新冠病毒疫苗是基于新冠病毒刺突蛋白(S蛋白)受體結(jié)合區(qū)(RBD)的天然結(jié)構(gòu)特征疫苗，具有靶點明確、針對性強的特點。如圖為通過基因工程的方法，在體外制備病毒的S蛋白的過程。請回答下列問題：(1)目前，基因工程中使用的限制酶主要是從__________(生物)中分離純化獲得的。含有限制酶的細胞通常還具有相應(yīng)的甲基化酶，它可以對DNA的堿基序列進行修飾。含有某種限制酶的細菌可利用限制酶切割外源DNA，但不破壞自身DNA，其原因可能是①________________________________________________________________________________________________________________________________________________；②________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)新冠病毒的遺傳物質(zhì)是RNA，要獲得S基因，需要經(jīng)過______________________過程得到cDNA。需要用________________________(酶)完成基因表達載體的構(gòu)建。(3)要檢測制備的S蛋白是否成功，可以采用__________________法檢測。要具體檢測S蛋白的功效還需要進行的操作是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)研究人員想利用蛋白質(zhì)工程的方法獲得新S基因進而獲得免疫效應(yīng)更強的疫苗，請按照蛋白質(zhì)工程的原理寫出獲得新S基因的基本途徑：________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。3．[2022·陜西省商洛市高三二模]中科院動物研究所研究小組已培育出中國首例轉(zhuǎn)基因獼猴。這項研究成果標志著中國科學家在靈長類轉(zhuǎn)基因動物研究方面達到世界領(lǐng)先水平。下圖是轉(zhuǎn)基因獼猴培育過程示意圖，據(jù)圖回答。(1)過程①需要使用的酶是______________________。過程②中常用________________技術(shù)將目的基因?qū)胧芫选?2)如果⑤過程在體外進行，那么卵母細胞需要培養(yǎng)到____________，精子需要獲能。該過程中防止多精入卵的第二道屏障是________________________________。(3)在體外培養(yǎng)受精卵時，要維持無菌、無毒的環(huán)境，提供營養(yǎng)和適宜溫度、pH值，同時細胞培養(yǎng)所需氣體主要有__________________________。(4)圖中⑦過程稱為______________，為使代孕雌猴與供體雌猴生殖器官的生理變化相同，此前需對代孕雌猴做____________處理。(5)若要同時獲得多只與此轉(zhuǎn)基因獼猴相同的小猴，可采用胚胎分割技術(shù)，在對囊胚階段的胚胎分割時，要注意__________________________________________________。4．[2022·福建省福州市華僑中學高三一模]如圖是我國常見的一種生態(tài)農(nóng)業(yè)示意圖，請據(jù)圖回答下列問題：(1)該生態(tài)農(nóng)業(yè)中農(nóng)作物秸稈得到了充分利用，貫穿全過程的核心原理是______________原理。其中“過腹還田”是最快捷的還田途徑，具體途徑是__________________________。將秸稈和動物糞便等通過圖中____________________________的設(shè)計開發(fā)了潔凈可再生的新能源。(2)依據(jù)生態(tài)工程的____________原理，設(shè)計了如圖所示的系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，使人工農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中的物質(zhì)循環(huán)和____________更為合理。(3)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上，畜牧業(yè)依賴和受制于種植業(yè)，可以依據(jù)生態(tài)工程的________原理使社會—經(jīng)濟—自然相統(tǒng)一來提高經(jīng)濟和社會效益。使用農(nóng)藥能有效控制農(nóng)業(yè)害蟲，但也可能使生態(tài)系統(tǒng)的________________減少，因此利用生物的______________進行生物防治是今后的發(fā)展方向。非常“組合4”主觀題模擬真演練(二)1．[2022·安徽馬鞍山一模]為了戰(zhàn)勝新型冠狀病毒肺炎疫情，科研人員加緊研制各類疫苗，其中mRNA疫苗具有研發(fā)速度快、針對性強的特點而被采用，mRNA不穩(wěn)定易被分解是一大難題。如圖所示為針對新冠病毒的mRNA疫苗的制備過程?；卮鹣铝袉栴}：(1)①過程所需要的酶和原料分別是______________________，圖中②的名稱是________________________。(2)若用大腸桿菌作為工程菌生產(chǎn)S蛋白，則可用CaCl2處理大腸桿菌，使其成為____________細胞，檢測工程菌中是否含有目的基因，可以采用____________________技術(shù)，要檢測大腸桿菌生產(chǎn)的S蛋白是否有效，方法是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)提純獲得的S蛋白基因經(jīng)體外轉(zhuǎn)錄形成的mRNA在使用前需要包裹一層脂類物質(zhì)，推測其原因是______________________________________________________。(4)新冠病毒是RNA病毒，這給疫苗研制帶來的困難是________________________________________。2．[2022·云南省昆明市高三雙基檢測]研究發(fā)現(xiàn)，蘆薈是一種具有抗衰老、促進愈合、強心活血、免疫和再生作用的常綠多肉質(zhì)草本植物，其栽培產(chǎn)業(yè)早已在全世界興起。目前，可采用對蘆薈進行植物組織培養(yǎng)來快速獲得種苗，獲得蘆薈試管苗的過程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)步驟①切取的蘆薈莖尖要包括植物的分生組織，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)步驟②中常用的試劑有________________________________(答出兩種)。(3)愈傷組織由一些______________________細胞形成。步驟④中愈傷組織的形成標志著接種的外植體的生長狀態(tài)為____________________________________________________________________________________________。(4)植物生長調(diào)節(jié)劑在植物組織培養(yǎng)中具有極其重要的作用，加入培養(yǎng)基中的植物生長調(diào)節(jié)劑的種類、________________不同將會影響培養(yǎng)的結(jié)果。其中，在分化培養(yǎng)基中____________(填“適合”或“不適合”)使用2，4-D，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)植物組織培養(yǎng)除了用于種苗的快速繁殖，還可用于作物新品種的培育。例如，通過__________________________________培育得到京花1號小麥、抗鹽堿的野生煙草等植物新品種。3．[2022·陜西省西安中學高三月考]糖尿病是影響人類健康的重大疾病，利用基因工程結(jié)合細胞工程、胚胎工程生產(chǎn)人胰島素為糖尿病患者帶來了福音，請回答下列問題：(1)將人胰島素基因與載體結(jié)合成重組人胰島素基因表達載體，此過程需要的酶是__________________。(2)大腸桿菌是生產(chǎn)胰島素常用工程菌，其優(yōu)點是________________________________________(至少答出兩點)；但利用大腸桿菌得到的胰島素需要進一步加工和修飾才能獲得生物活性，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)轉(zhuǎn)入胰島素基因?？赏ㄟ^分泌乳汁來生產(chǎn)人胰島素。在轉(zhuǎn)入牛受精卵的基因表達載體中，人胰島素基因的前端必須含有__________________________。將培養(yǎng)到________________時期的胚胎進行移植，移植前需要對受體進行____________處理，使胚胎能正常著床。若要對胚胎的性別進行鑒定，可在囊胚期取________細胞進行性別鑒定。(4)若在分子水平上判斷獲得的轉(zhuǎn)基因牛中人胰島素基因是否表達，可通過檢測____________(填物質(zhì))進行確定。4．[2022·寧夏銀川市高三月考]利用轉(zhuǎn)基因母牛乳腺生物反應(yīng)器可生產(chǎn)蛛絲蛋白，獲得轉(zhuǎn)基因母牛的過程如圖所示。請回答下列問題。(1)從雌牛的卵巢中采集的卵母細胞需要培育到________________________期才能進行體外受精；體外受精前，需用含有一定濃度的________或鈣離子載體A23187溶液對精子進行獲能處理。當一個精子進入卵細胞后會激發(fā)卵子發(fā)生反應(yīng)，如________________和________________等。(2)在過程①中，蛛絲蛋白基因應(yīng)與________________基因的啟動子等調(diào)控組件組合在一起。在過程④前，需對囊胚的________進行切割并做DNA分析進行性別鑒定，再選用雌性胚胎進行移植。(3)為了進一步擴大繁殖規(guī)模，可通過____________技術(shù)獲得同卵多胎，該技術(shù)的關(guān)鍵是________________________。(4)從生理學基礎(chǔ)角度看，胚胎移植能成功的原因有：________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(任意兩點即可)。非?！敖M合4”主觀題模擬真演練(三)1．[2022·廣西柳州二模]目前，全球共有5條新冠病毒疫苗技術(shù)路線，我國是全球唯一同時進行5條技術(shù)路線研發(fā)的國家，先后有26款新冠疫苗進入臨床試驗。陳薇院士團隊與康希諾生物共同開發(fā)的重組腺病毒疫苗(以腺病毒Ad5為載體)是首家獲批的國產(chǎn)腺病毒載體新冠病毒疫苗。該疫苗的原理流程如下圖所示。請回答下列問題：(1)腺病毒Ad5是雙鏈DNA病毒，在①過程中去除了Ad5復(fù)制有關(guān)的基因，對人體無害；而新冠病毒為單鏈RNA病毒，還需要經(jīng)過體外誘導____________過程，才能合成相關(guān)DNA，②過程所用的工具酶為________。(2)③過程是基因工程中的核心步驟，即________________________。以病毒作為基因工程的載體，其優(yōu)點之一是可以利用病毒__________________________________的特點，將目的基因?qū)胧荏w細胞。(3)滅活病毒疫苗技術(shù)是傳統(tǒng)疫苗制備技術(shù)，有120年以上的使用歷史，但其對生產(chǎn)的安全性要求更高。從新冠疫苗的制備流程分析，傳統(tǒng)滅活病毒疫苗的風險在于生產(chǎn)疫苗必須先大規(guī)模培養(yǎng)______________。而重組腺病毒疫苗則明顯降低了該風險，其引起機體產(chǎn)生免疫反應(yīng)的有效物質(zhì)是____________，控制該有效物質(zhì)合成的是進入到________(填“細胞核”或“細胞質(zhì)”)中的目的基因。(4)無論哪種技術(shù)路線生產(chǎn)的疫苗，要確認其是否引起機體產(chǎn)生對新冠病毒的免疫反應(yīng)，常用________________________________________方法進行檢測。2．[2022·濰坊5月模擬]假結(jié)核耶爾森氏菌(細菌Y)在與其他細菌的競爭中常常占據(jù)優(yōu)勢，推測與其tce1基因和tci1基因的表達有關(guān)。(1)研究者用獲取的基因分別構(gòu)建重組質(zhì)粒，將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌進行培養(yǎng)和計數(shù)，繪制出大腸桿菌生長曲線，如圖1。轉(zhuǎn)化前需先將大腸桿菌處理為感受態(tài)細胞，對照組大腸桿菌導入________。據(jù)圖1結(jié)果推測，tce1蛋白對大腸桿菌具有毒性，tci1蛋白的作用是________tce1蛋白的毒性。(2)研究者利用野生型細菌Y及其不同突變體進行了如下實驗：在固體培養(yǎng)基表面放置一張能隔離并吸附細菌的濾膜，將一種菌(下層菌)滴加在濾膜上后再放置第二張濾膜，滴加等量的另一種菌(上層菌)，共同培養(yǎng)48h后，將兩張濾膜上的菌體刮下計數(shù)，計算上層菌與下層菌數(shù)量的比值，得到圖2結(jié)果。①實驗中的________等均需滅菌處理；對菌體進行計數(shù)的方法：先將菌體進行梯度稀釋，再________到固體培養(yǎng)基表面，每隔一段時間統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的紀錄作為結(jié)果。②圖2結(jié)果________(填“支持”或“不支持”)(1)推測。請解釋乙組結(jié)果出現(xiàn)的原因：________________________________________________________________________。(3)tce1蛋白能被細菌表面的B蛋白識別并與之結(jié)合。研究者構(gòu)建基因表達載體經(jīng)轉(zhuǎn)化獲得工程菌，生產(chǎn)出能發(fā)出綠色熒光的tce1蛋白(GFP基因控制合成的蛋白可發(fā)出綠色熒光)，將該蛋白與野生型細菌Y及其B蛋白突變體接觸后，結(jié)果證實tce1蛋白可通過B蛋白進入靶細胞內(nèi)發(fā)揮作用。請?zhí)顚懟虮磉_載體的基本結(jié)構(gòu)，并預(yù)期實驗結(jié)果。據(jù)圖3分析，①～④依次為________________________，預(yù)期結(jié)果：________________________。(4)進一步研究表明tce1蛋白具有DNA水解酶活性。綜合上述研究，闡明細菌Y在與其他細菌的競爭中占據(jù)優(yōu)勢的原因：________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。3．[2022·福建省莆田市二中高三月考]類胡蘿卜素具有抗癌、降血脂等多種生物學功能。P蛋白是催化類胡蘿卜素形成的關(guān)鍵酶，研究者從裙帶菜中克隆了P基因，按下圖所示流程進行基因工程操作。(1)研究者從裙帶菜中提取了總RNA，利用逆轉(zhuǎn)錄方法獲得________(作為模板)，設(shè)計特異性________，利用PCR技術(shù)擴增得到P基因。將P基因與質(zhì)粒載體重組時，需要使用的酶包括__________________________________。流程圖中①是________菌，②是______________________技術(shù)。(2)隨機選取9株轉(zhuǎn)基因苗，利用PCR、電泳檢測的結(jié)果如圖2，分析結(jié)果說明沒有成功轉(zhuǎn)入P基因的植株是________。檢測P基因的mRNA相對含量，結(jié)果如圖3，研究者選擇轉(zhuǎn)基因煙草植株2進行后續(xù)研究，請說明理由________________________________________________________________________________________________________________________________________________。4．[2022·重慶市南開中學高三質(zhì)量檢測]試管嬰兒技術(shù)不僅為部分不育的夫婦提供生育的機會，也給一些遺傳病患者生育健康的下一代帶來希望。回答下列問題：(1)在采集卵母細胞之前，需要給供卵者注射適量的________________，目的是________________________。(2)體外受精過程中，精子必須獲能，其獲能的方法包括________________________。(3)體外受精后，受精卵發(fā)育至____________________________________是最佳胚胎移植階段。胚胎移植前后母體都必須注射________(激素名稱)以保證正常的同期備孕狀態(tài)。(4)利用設(shè)計試管嬰兒技術(shù)，在胚胎植入母體孕育前，需要對胚胎進行遺傳學診斷，篩除________________的胚胎，有利于生育健康的下一代。如果濫用設(shè)計試管嬰兒技術(shù)，將會對社會產(chǎn)生負面影響。濫用設(shè)計試管嬰兒技術(shù)的表現(xiàn)之一是將該技術(shù)用于設(shè)計____________________________。非?！敖M合4”主觀題模擬真演練(四)1．[2022·新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團高三月考]自然界中的兩種微生物，可以通過各自不同的作用將培養(yǎng)液中的葡萄糖轉(zhuǎn)化為維生素C，其過程如圖所示。在歐文氏菌中無2，5-DKG還原酶基因，不能將2，5-DKG轉(zhuǎn)化為2-KLG.科學家通過基因工程技術(shù)，改造歐文氏菌，使其可產(chǎn)生2－KLG。請回答下列問題：(1)改造歐文氏菌的過程中，目的基因為________________。將棒狀桿菌的DNA全部提取出來，用適當?shù)南拗菩院怂醿?nèi)切酶將其切成DNA片段，并導入受體菌的群體中，構(gòu)成________文庫(2)按其來源不同，改造過程中所使用的DNA連接酶有兩類，即________DNA連接酶和________DNA連接酶。(3)利用基因工程技術(shù)改造此細菌的基本方法是：先用________切割目的基因和______，然后用DNA連接酶將上述切割產(chǎn)物連接，構(gòu)成________________并將其導入受體菌中。(4)一般情況下，不能直接用未處理的此菌作為受體菌，原因是_______________________________