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35DB35/T1958—2021鴨巴泰病毒RT-PCR檢測方法DetectionmethodofRT-PCRforduckBataivirus2021-02-09發(fā)布2021-05-09實施福建省市場監(jiān)督管理局發(fā)布 2 2 3 4 6本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草1下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文4.1.3冰箱（2℃~8℃、-20℃)。2在超凈工作臺中取出采集的待檢樣品置于滅菌平皿內，充分剪碎后與磷酸鹽緩沖液按體積比1:3的比例制成組織勻漿液，反復凍融3次后于4℃~10℃條件下8000r/min離心30min，取上清用于核酸3病毒RNA提取應采用以下步驟或等效的商品化RNA提取試劑盒進行，且在實驗操作過程中應遵守GB取200μL待檢樣品，加入1mLTrizol試劑，用移液器充分混勻），4A.10.01mol/L磷酸鹽緩沖液（P將上述試劑溶于800mL滅菌雙蒸水中，定容至1000mL，1.034×105Pa高壓滅菌30min，4℃保于三蒸水按0.1%加入DEPC，磁力攪拌過夜，1.034×105PaA.5.1配制0.5mol/L乙二銨四乙酸二鈉（EDTA）溶液（5BATV-F5’-CTGCAGTTTTMAGATTGTTTC-3’BATV-R5’-TGTTTTATTTCCTGTAGGTAC-3’

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