產(chǎn)氣莢膜梭菌實驗活動風(fēng)險評估報告

產(chǎn)氣莢膜梭菌實驗活動風(fēng)險評估報告生物學(xué)特性（一）種類和細菌分型產(chǎn)氣莢膜梭菌（Clostridiumperfringens）是一種革蘭陽性、產(chǎn)生芽孢、嚴格厭氧及形成特殊莢膜的梭狀桿菌，是梭狀芽孢菌屬中的主要成員之一。它是臨床上氣性壞疽病原菌中最多見的一種梭菌，因其能分解肌肉和結(jié)締組織中的糖，產(chǎn)生大量氣體，導(dǎo)致組織嚴重氣腫，繼而影響血液供應(yīng)，造成組織大面積壞死，加之本菌在體內(nèi)能形成莢膜，故名產(chǎn)氣莢膜梭菌。根據(jù)本菌產(chǎn)生外毒素種類的不同，可將產(chǎn)氣莢膜梭菌分成A、B、C、D和E5個毒素型。對人致病的主要是A型和C型，A型最常見，能引起氣性壞疽和胃腸炎型食物中毒；C型能引起壞死性腸炎。（二）來源產(chǎn)氣莢膜梭菌最早是由英國人Welch和Nuttall（1892年）從一個腐敗人尸產(chǎn)生氣泡的血管中分離得到的，并被命名為Bacillusaerogenescapsulatus。1924年，Kahn在腹瀉和腸毒血癥病人病料中分離到產(chǎn)氣莢膜梭菌。Knox和Maconald（1943年）對該菌引起的食物中毒進行了明確詳細的描述，從此對該菌的認識越來越清楚。Hobbs（1953年）等對該菌的大量研究使人們重新重視該菌引起食物中毒的作用。（三）傳染性產(chǎn)氣莢膜梭菌不會由感染者直接傳染給其他人，常發(fā)生于自然外傷、分娩損傷及器官移植的情況下，進食污染食物而引起疾病。（四）傳播途徑產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的疾病通過感染皮膚黏膜傷口或攝取污染了該菌的食物引起。該菌廣泛存在于自然界的水源、土壤及人和動物腸道，以及動物和人類的糞便中，常因深部創(chuàng)傷而感染。A型產(chǎn)氣莢膜梭菌還產(chǎn)生產(chǎn)氣莢膜梭菌腸毒素（Clostridiumperfringensenterotox-in，CPE），該毒素致病性很強，食品在加工或烹調(diào)時，由于加熱不充分，以及在冷凍儲藏過程中操作不當(dāng)，該菌常?？梢源婊钣谑称分小Ｒ坏┤藗兪橙胧芪廴镜氖称?，產(chǎn)氣莢膜梭菌就浸入體內(nèi)，并在腸道內(nèi)繁殖形成芽孢，產(chǎn)生CPE。該毒素導(dǎo)致腸粘膜上皮細胞的損傷，從而引起人的食物中毒。（五）易感性產(chǎn)氣莢膜梭菌能引起人和動物多種疾病，人群普遍易感。（六）潛伏期進食產(chǎn)氣莢膜梭菌污染的食物后8~24h出現(xiàn)腹痛和腹瀉，癥狀輕微。平均潛伏期約10h，臨床表現(xiàn)為腹痛、腹脹、水樣腹瀉；無熱、無惡心嘔吐。1~2d后自愈。如不進行細菌學(xué)檢查常難確診，除老幼體弱者外，一般預(yù)后良好。氣性壞疽病通過傷口接觸傳播氣性壞疽潛伏期短，一般僅為8~48h。病菌除產(chǎn)生多種毒素外，體內(nèi)形成的莢膜和繁殖周期短，使該病發(fā)展迅速、病情險惡。感染后如得不到及時治療，12h內(nèi)可造成嚴重后果，甚至死亡。（七）劑量—效應(yīng)關(guān)系是否發(fā)生產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的食物中毒，與污染食品、動物飼料及食品加工環(huán)節(jié)產(chǎn)氣莢膜梭菌的活菌量的多事、機體的健康狀態(tài)密切相關(guān)。目前認為，在108~109個細菌繁殖體污染的食物（主要為肉類食品）中，引起食物中毒的情況相當(dāng)多見。自然外傷、分娩損傷及器官移植等傷口是否發(fā)生氣性壞疽，取決于是否及時對組織清創(chuàng)、消除局部厭氧環(huán)境，對感染局部是否擴創(chuàng)手術(shù)、切除感染和壞死組織等措施密切相關(guān)。（八）致病性產(chǎn)氣莢膜梭菌所致的疾病有食物中毒、氣性壞疽、產(chǎn)氣莢膜梭菌經(jīng)腸穿孔或子宮破裂進入腹腔引起的內(nèi)源性感染。產(chǎn)氣莢膜梭菌既能產(chǎn)生強烈的外毒素，又有多種侵襲性酶，并有莢膜，構(gòu)成其強大的侵襲力，從而引起機體感染致病。該菌至少可以產(chǎn)生15種以上的毒素，但目前僅有5~6種毒素，即α、β、ε、ι毒素及腸毒素（CPE）、β2毒素等，被認為是該菌的主要致病性毒素，其中CPE和β2毒素是人發(fā)生食物中毒及胃腸疾病的重要致病因子。4種主要毒素中，α毒素（卵磷脂酶）的毒性最強，各菌型均能產(chǎn)生，在氣性壞疽的形成中起主要作用。產(chǎn)氣莢膜梭菌食物中毒因食入被本菌大量細菌繁殖體污染的肉類食物而引起。60%~80%的氣性壞疽由A型引起，多見于戰(zhàn)傷，但也見于平時的工傷、車禍等。病菌除產(chǎn)生多種毒素外，體內(nèi)形成的莢膜和繁殖周期短等，使該病發(fā)展迅速、病情險惡。如不及時治療，常導(dǎo)致死亡。卵磷脂酶、膠原酶、透明質(zhì)酸酶、DNA酶等的分解破壞作用，使病菌易穿過肌肉結(jié)締組織間隙，侵入四周正常組織，發(fā)酵肌肉和組織中的糖類，產(chǎn)生大量氣體，造成氣腫；同時，血管通透性增加，水分滲出，導(dǎo)致局部水腫，進而擠壓軟組織和血管，影響血液供應(yīng)，造成組織壞死。嚴重病例表現(xiàn)為組織脹痛劇烈，水氣夾雜、觸摸有捻發(fā)感，最后產(chǎn)生大塊組織壞死，并有惡臭。病菌產(chǎn)生的毒素和組織壞死的毒性產(chǎn)物被吸收入血，引起毒血癥、休克，死亡率高達40%~100%。（九）變異性從醫(yī)學(xué)相關(guān)文獻的檢索中尚未找到可靠的存在變異性的證據(jù)。（十）環(huán)境中的穩(wěn)定性產(chǎn)氣莢膜梭菌廣泛存在于土壤、人和動物的腸道，以及動物和人類的糞便中，在低于pH5.0或高于pH8.3時，數(shù)天后死亡。（十一）藥物敏感性產(chǎn)氣莢膜梭菌的高度敏感藥物有氯霉素、頭孢哌酮；中度敏感藥物有紅霉素；不敏感藥物有諾氟沙星、慶大霉素、卡那霉素、復(fù)方新諾明、四環(huán)素、氨芐西林、桿菌肽、呋喃唑酮和丙氟哌酸。（十二）消毒劑敏感性產(chǎn)氣莢膜梭菌對臭氧敏感，高濃度的酒精可以破壞其活性和殺死芽孢，6%~8%的NaCl可抑制其生長。（十三）物理滅活產(chǎn)氣莢膜梭菌繁殖體對熱敏感，芽孢加熱至90℃30min或100℃5min可被殺死，繁殖體對低溫敏感。（十四）在宿主體外存活本菌雖屬厭氧性細菌，但對厭氧程度的要求并不太嚴，甚至在微氧條EH=200~250mv的環(huán)境內(nèi)也能生長。在普通培養(yǎng)基上能生長，若加葡萄糖、血液，則生長更好。生長適宜溫度為37~47℃，多認為43~47℃為最宜本菌生長和繁殖速度極快的溫度，在適宜條件下增代時間僅8min，可利用高溫快速培養(yǎng)法，對本菌進行選擇分離，如在45℃下，每培養(yǎng)3~4h傳種1次，即可較易獲得純培養(yǎng)，在深層葡萄糖瓊脂中大量產(chǎn)氣，致使瓊脂破碎。（十五）與其他生物和環(huán)境的交互作用本菌廣泛存在于土壤、人和動物的腸道，以及動物和人類的糞便中，常因深部創(chuàng)傷而感染。導(dǎo)致氣性壞疽的病原菌還有諾維氏梭菌、腐敗梭菌、溶組織梭菌和產(chǎn)芽孢梭菌等。此外，產(chǎn)氣莢膜梭菌能引起羔羊痢疾和羔羊、牛犢、仔豬、家兔、雛雞等的壞死性腸炎；諾維氏梭菌可引起羊、牛的傳染性壞疽性肝炎；腐敗梭菌可引起牛、羊、豬等家畜的腸型壞疽“快疫”（braxy）；肖維氏梭菌可引起牛、羊氣腫疽等。（十六）預(yù)防和治療方案傷口的及時處理、破壞和消除厭氧微環(huán)境、預(yù)防性的使用抗生素可預(yù)防大多數(shù)（90%）感染。對局部感染應(yīng)盡早施行擴創(chuàng)手術(shù)，切除感染和壞死組織，必要時通過截肢以防止病變擴散。大劑量使用青霉素等抗生素以殺滅病原菌和其他細菌。有條件時可使用α抗毒素和高壓氧艙法治療氣性壞疽，后者可使血液和組織中的氧含量提高15倍，能部分抑制厭氧菌的生長。實驗室相關(guān)活動風(fēng)險評估與控制實驗室感染性因子的種類、來源和危害1.感染性因子的種類產(chǎn)氣莢膜梭菌既能產(chǎn)生強烈的外毒素，又有多種侵襲性酶，并有莢膜，構(gòu)成其強大的侵襲力。根據(jù)其生物學(xué)特性和本中心實驗室檢測能力范圍，本實驗室可能的感染性因子為產(chǎn)氣莢膜梭菌病原體本身。2.感染性因子的來源（1）用于產(chǎn)氣莢膜梭菌檢測的食品、水樣、不明原因腹瀉采集的糞便、嘔吐物、食品加工環(huán)節(jié)涂抹物、深部感染壞死組織、血液等樣本。（2）樣本采集和檢測過程中涉及的所有實驗場所。（3）實驗人員被銳器刺傷造成的皮膚黏膜等暴露后感染。（4）實驗室檢測活動工作中，各種原因?qū)е碌囊后w飛濺或微滴濺出及氣溶膠對實驗室環(huán)境造成污染。產(chǎn)氣莢膜梭菌經(jīng)皮膚黏膜外傷引起氣性壞疽，食入被細菌繁殖體污染的食物引起食物中毒。在實驗室工作中，通過銳器刺傷造成的皮膚黏膜感染和各種原因?qū)е碌母腥拘砸后w飛濺或微滴濺出，污染器物表面或地面等，造成意外食入感染。食物中毒和意外食入感染是良種較可能的實驗室獲得性感染方式，雖然概率很小，但不容忽視。（二）實驗活動風(fēng)險識別與風(fēng)險控制1.實驗方法（1）主要風(fēng)險點識別未采用國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進行檢測；使用新的或變更過的國家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)前，未經(jīng)技術(shù)確認，可能存在安全風(fēng)險。（2）風(fēng)險控制措施盡量采用國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進行檢測，或使用經(jīng)過充分驗證的實驗方法；在使用新的或變更的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)前，必須經(jīng)過嚴格的技術(shù)確認。2.樣品采集（1）食品和水樣等樣品采集①主要實驗設(shè)備和器材采樣剪刀或鑷子、密閉盛樣容器等。②主要風(fēng)險點識別食品和水樣等樣品中可能存在感染性病原體，采樣人員采樣不規(guī)范、盛裝容器密合不嚴、玻璃容器意外破損等，可導(dǎo)致樣品濺灑、溢出、滲漏而污染環(huán)境；同時，玻璃容器意外破損和剪刀、鑷子的使用不當(dāng)，存在意外刺傷或劃傷采樣人員的風(fēng)險。③風(fēng)險控制措施食品水樣采集容器必須防水、防漏，容器外面要包裹足量的吸收性材料，以便容器打破或泄漏時，能吸收溢出的所有液體。在使用剪刀、鑷子、玻璃容器等銳器時，必須規(guī)范操作，做好防護，防止刺傷或劃傷。（2）糞便、嘔吐物、食品加工環(huán)節(jié)涂抹物等樣本采集①主要實驗設(shè)備和器材PV螺旋蓋采便盒（管）、玻璃試管或培養(yǎng)皿、采樣消毒棉簽等。②主要風(fēng)險點識別糞便、嘔吐物、食品加工環(huán)節(jié)涂抹物等標(biāo)本中可能存在感染性病原體，采集過程存在樣本微滴濺出從而形成小顆粒氣溶膠；工作人員采樣不規(guī)范、個人防護不到位，導(dǎo)致環(huán)境污染和人員感染；破碎玻璃試管或培養(yǎng)皿存在刺傷或劃傷采樣人員的隱患。③風(fēng)險控制措施采集糞便和嘔吐物時，采樣人員應(yīng)戴手套、口罩、防護眼鏡；采樣動作輕柔，采樣容器盡量使用外螺旋蓋塑料管；發(fā)生污染時，應(yīng)立即進行消毒處理。（3）深部感染壞死組織的采集①主要實驗設(shè)備和器材PV螺旋蓋采便盒（管）、一次性培養(yǎng)皿、采樣消毒棉簽。②主要風(fēng)險點識別深部感染壞死組織病理樣本中可能存在感染性病原體，采集過程中發(fā)生樣本濺出，工作人員采樣不規(guī)范、個人防護不到位，導(dǎo)致環(huán)境污染和人員感染。③風(fēng)險控制措施采集深部感染壞死組織部位時，采樣人員應(yīng)戴手套、口罩、防護眼鏡；采樣時動作輕柔，采樣容器盡量使用外螺旋蓋塑料管；發(fā)生污染時，應(yīng)立即進行消毒處理。（4）血液的采集①主要實驗設(shè)備和器材一次性采血針和塑料采血管、消毒棉簽及一次性利器盒。②主要風(fēng)險點識別血液樣品可能存在感染性病原體，采血管密封蓋意外脫落或注射器內(nèi)殘留血滴落，造成血樣濺灑從而污染人員或環(huán)境；采血針頭存在意外刺傷或劃傷采樣人員的風(fēng)險。③風(fēng)險控制措施使用一次性采血針和真空采血管，采樣人員經(jīng)過正規(guī)采血培訓(xùn)，并熟練掌握采血技巧。采血前做好個人防護（防護服、乳膠手套、口罩）；認真、仔細、謹慎操作，抽血后的針頭直接放入利器盒內(nèi)，禁止用手直接接觸使用后的針頭或?qū)⑹褂煤蟮尼橆^重新套上針頭套；采好血后直立于試管架中，防止倒翻；消毒棉簽等污染物放入醫(yī)療廢棄物專用袋中，統(tǒng)一進行消毒處理。3.樣品的包裝和運送（1）主要實驗設(shè)備和器材真空密封采血管、外螺旋蓋玻璃瓶、PV螺旋蓋采樣罐（管）主容器、95千帕樣品運輸罐、B類標(biāo)本運輸箱（UN3373冷藏箱）和運送車輛。（2）主要風(fēng)險點識別盛裝樣品容器必須堅固，不易破碎，盡可能選用塑料制品，采樣后必須檢查容器的密合性，樣品的運輸需使用三層合格包裝材料。4.樣品接收和前處理（1）主要實驗設(shè)備和器材剪刀、鑷子、振蕩器、均質(zhì)器、均質(zhì)袋、離心機、生物安全柜和潔凈工作臺。（2）主要風(fēng)險點識別樣品管理員未按實驗室《樣品管理程序》（XJK/CX32）要求接收樣品；樣品前處理時，打開糞便或嘔吐物、深部感染壞死組織等感染性樣品包裝的動作過猛，會造成樣品側(cè)翻；對食品等固形物樣品進行剪切時，操作不慎發(fā)生手剪傷；均質(zhì)器均質(zhì)樣本時發(fā)生均質(zhì)袋破裂；離心操作時發(fā)生離心管破裂等意外情況。（3）風(fēng)險控制措施①樣品接受必須在專用的區(qū)域進行，合同評審人員和收樣人員嚴格按照《樣品管理程序》（XJK/CX32）要求交接樣品，不得擅自打開樣品包裝，收樣后及時洗手。②開始檢測前，對盛裝感染性材料樣品的容器，必須在生物安全柜中緩慢打開，食品和水樣必須在潔凈工作室內(nèi)打開，開啟容器的管口不能對著操作者。③對食品等固體物樣品取樣，要小心使用剪刀和鑷子，盡可能剪取食物可食部分，以防止樣品均質(zhì)時堅硬物質(zhì)刺破均質(zhì)袋，造成樣液濺灑。對含有感染性樣品進行離心振蕩時，必須將離心蓋封嚴實，并關(guān)上離心機蓋。④實驗室應(yīng)配備應(yīng)急藥箱，發(fā)生手剪傷等意外事件時，應(yīng)立即進行消毒包扎處理。⑤當(dāng)發(fā)生離心管或均質(zhì)袋意外破裂、濺出時，及時對所有涉及污染的部位進行消毒處理，同時按《二級生物安全實驗室建設(shè)與管理》“實驗室意外事故的處置”章節(jié)處置。5.樣本檢測過程（1）主要實驗設(shè)備和器材培養(yǎng)箱、水浴箱、細菌鑒定和藥敏測試儀（ATB儀）、生物安全柜、振蕩器、離心機及離心管、吸管和試管、移液器及吸頭、接種環(huán)和培養(yǎng)皿等。（2）主要風(fēng)險點識別①對食品、水樣、糞便和嘔吐物、深部感染壞死組織等樣品進行產(chǎn)氣莢膜梭菌菌株分離鑒定、生化試驗、藥敏試驗等實驗活動均涉及活菌操作。在檢測過程中移液、水樣過濾、混勻震蕩等操作可能釋放較大顆粒和小液滴。離心振蕩過程中，容器的破碎或滲漏等意外事故，都可能造成感染性物質(zhì)污染操作者的手、操作臺面、器物表面及地面，從而污染實驗室環(huán)境和人。實驗室人員通過皮膚接觸或粘膜接觸而意外食入。②實驗過程中未正確操作銳器、玻璃實驗器材意外破碎等，造成人員割傷和刺傷而導(dǎo)致的接種感染隱患。③樣品檢測時試管開啟、樣品轉(zhuǎn)移、稀釋混勻吹打、劃線分離、涂片染色、離心等操作都可產(chǎn)生氣溶膠，但產(chǎn)氣莢膜梭菌不通過吸入感染，氣溶膠感染產(chǎn)氣莢膜梭菌的風(fēng)險非常小。（3）風(fēng)險控制措施①檢測人員在實驗前應(yīng)按照二級生物安全防護要求做好自身防護措施（穿防護服，戴手套、口罩，穿不露腳趾和覆蓋腳背、防滑、防滲漏的工作鞋），必要時戴防護眼鏡、防護面罩以增加保護。進行食品、水樣等樣品制備、均質(zhì)等操作時應(yīng)在潔凈實驗室內(nèi)進行；糞便、嘔吐物、食品加工環(huán)節(jié)涂抹物、深部感染壞死組織等所有具有感染性材料的操作必須在生物安全柜內(nèi)進行，必須保證潔凈實驗室和生物安全柜處于正常運行狀態(tài)。②進行活菌操作時，應(yīng)在安全柜工作臺面上放置一塊浸有消毒液的紗布或吸有消毒液的紙，避免感染性物質(zhì)的擴散；涉及高濃度或大體積的感染性的材料離心操作時，應(yīng)選用密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩的離心機離心。若有意外污染，應(yīng)及時消毒、沖洗并擦干飛濺出來的液體。實驗結(jié)束后必須對桌面、臺面及時進行消毒處理。③必須使用移液器或吸球移取樣液，旋蓋和移液操作的動作要輕緩，所有吸管應(yīng)用棉塞，移液頭盡可能使用帶濾芯的，以減少對移液器或吸球的污染。④使用直徑2~3mm且完全封閉、手柄的長度小于6cm的接種環(huán)分離細菌，盡可能使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán)，避免在酒精燈的明火上加熱從而引起感染性物質(zhì)的爆濺。⑤盡可能以塑料器皿代替玻璃器皿，若必須使用玻璃器皿，則只能用實驗室級玻璃（硼硅酸鹽），且任何破碎或有裂紋的器皿都應(yīng)丟棄。禁止用手直接接觸使用后的針頭、刀片、玻璃碎片等銳器。嚴禁用帶有注射針頭的注射器吸液，更不可當(dāng)吸管用，用過的銳器應(yīng)直接放入利器盒，經(jīng)消毒后廢棄。⑥在任何可能導(dǎo)致潛在的傳染性物質(zhì)濺出的操作過程中，應(yīng)保護好面部、眼睛和嘴；發(fā)生液體濺出、溢出等事故，或明顯暴露于傳染源時，應(yīng)立即向科室負責(zé)人報告，及時處理并對事故的發(fā)生與處理作記錄，必要時進行適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)評估、觀察、治療，并保留書面記錄。6.菌株使用、保存和運輸（1）主要實驗設(shè)備和器材接種針、菌株保存管、振蕩器、生物安全柜、移液器、95千帕樣品運輸罐、B類標(biāo)本運輸箱（UN3373冷藏箱）和運送車輛。（2）主要風(fēng)險點識別①工作人員保菌操作不規(guī)范、個人防護不到位、半固體或磁珠管等保存容器意外破損、磁珠掉落等會導(dǎo)致病原菌污染實驗室環(huán)境和實驗人員。②產(chǎn)氣莢膜梭菌使用和保存未按照《菌（毒）種管理規(guī)程》（XJK/CX37）要求實施管理，存在菌株被惡意使用及污染環(huán)境等生物安全隱患。③產(chǎn)氣莢膜梭菌陽性菌株上送等運輸過程中如使用不合格包裝進行運輸，容器密封不嚴，可能導(dǎo)致運輸過程中包裝容器意外破損，從而產(chǎn)生病原體的擴散。（3）風(fēng)險控制措施①產(chǎn)氣莢膜梭菌分離純化及保菌操作應(yīng)在生物安全柜內(nèi)進行，若發(fā)生磁珠管意外破損、磁珠掉落時，應(yīng)及時對所涉及的污染部位進行消毒處理，按《二級生物安全實驗室建設(shè)與管理》“實驗室意外事故的處置”章節(jié)要求規(guī)范處理。②產(chǎn)氣莢膜梭菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的使用、保存嚴格按照《菌（毒）種管理規(guī)程》（XJK/CX37）要求進行操作，嚴格實行雙人雙鎖保管，嚴防菌株別惡意使用而造成生物危害。③產(chǎn)氣莢膜梭菌陽性菌株的上送應(yīng)嚴格執(zhí)行B類運輸包裝，攜帶“可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸許可證”，并由專車運送，由專業(yè)人員全程護送。7.實驗室的清潔和消毒（1）主要實驗設(shè)備和器材70%~75%的酒精、施康清洗消毒液Ⅰ。（2）主要風(fēng)險點識別工作完畢后，若不及時對工作臺面、生物安全柜進行消毒，則有可能會對下次的操作人員造成污染或感染。（3）風(fēng)險控制措施工作完畢后，及時對檢測所涉及的工作臺面、地面和生物安全柜進行消毒，使用稀釋100倍的施康清洗消毒液Ⅰ擦拭，用消毒液清潔后要干燥20min以上。生物安全柜用70%~75%的酒精擦拭消毒。待實驗和消毒完畢，先脫去手套，再脫去防護服，并正確用肥皂和流水洗手。8.廢棄物處置（1）主要實驗設(shè)備和器材醫(yī)療廢棄物專用袋、硬質(zhì)耐高壓且防滲漏的垃圾桶、高壓滅菌器。（2）主要風(fēng)險點識別①樣品采集和實驗檢測過程中產(chǎn)生的感染性廢棄物如食品、水樣等樣品、深部感染壞死組織、血液血清及排泄物標(biāo)本、病原菌的培養(yǎng)基、標(biāo)本和菌種、毒種保存液及所有實驗過程涉及的用品在釋放前未按照規(guī)范要求處理，導(dǎo)致感染或致病因子外泄而污染環(huán)境。②樣品采集和實驗檢測過程中產(chǎn)生的被污染的損傷性廢棄物（一次性使用采血用具、載玻片、玻璃試管、玻璃安瓿、培養(yǎng)皿等）未按照規(guī)范處理，存在意外刺傷或劃傷工作人員的隱患。（3）風(fēng)險控制措施實驗室廢棄物處理應(yīng)遵循《醫(yī)療廢棄物管理條例》《醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)醫(yī)療廢棄物管理辦法》《醫(yī)療廢物專用包裝袋、容器和警示標(biāo)志標(biāo)準(zhǔn)》等相關(guān)法規(guī)要求，分類收集，規(guī)范處置。所有損傷性廢棄物必須放置于有警示標(biāo)識的硬質(zhì)、防漏、防銳器刺破的專用利器盒中；所有感染性廢棄物必須放置于有警示標(biāo)志的醫(yī)療廢物專用包裝袋中，使用高效消毒液浸泡或高溫高壓滅菌后集中處理，集中存放至中心指定的醫(yī)療廢棄室，由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理單位上門收集集中處置。同時，做好廢棄物處置交接記錄，所有相關(guān)記錄應(yīng)定期整理歸檔。（三）實驗過程中其他風(fēng)險識別和控制1.電力（1）主要風(fēng)險點識別產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離和鑒定對溫度有明確要求，當(dāng)實驗過程中突然間隙斷電或電力供應(yīng)不穩(wěn)定時，會對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性帶來一定的影響。實驗室沒有布置雙路供電或者相關(guān)儀器未配備不間斷電源。當(dāng)電力供應(yīng)發(fā)生故障時，可導(dǎo)致設(shè)備突然停止工作，存在實驗活動被迫終止等所帶來的相關(guān)安全風(fēng)險。（2）預(yù)防控制措施盡可能在實驗室布置雙路供電，若客觀條件受限制，對產(chǎn)氣莢膜梭菌檢測所有的關(guān)鍵儀器需配備應(yīng)急電源（UPS）。2.電器操作（1）主要風(fēng)險點識別實驗室活動涉及的電氣操作，包括實驗室工作區(qū)內(nèi)電氣設(shè)備的啟動、關(guān)閉、安裝和維修；設(shè)備層內(nèi)UPS、空調(diào)機組等電氣設(shè)備的啟動、關(guān)閉和維修等。這些電氣操作的過程可能存在觸電、電擊、造成電氣故障等風(fēng)險。（2）預(yù)防控制措施①電氣設(shè)備的設(shè)計及制造符合相關(guān)安全標(biāo)準(zhǔn)的要求。實驗室工作區(qū)內(nèi)若有380V電源插座，需明確標(biāo)識，并由有資質(zhì)的專業(yè)人員進行操作。②新的、改裝過的或修理過的電氣設(shè)備在未經(jīng)專業(yè)人員（如有資質(zhì)的電工）完成電氣安全測試和設(shè)備符合安全使用要求之前，不允許使用。③電氣設(shè)備使用人員接受正確操作的培訓(xùn)，操作方式不降低電氣安全性。電氣設(shè)備中使用人員要定期檢查設(shè)備可能引起電氣故障的破碎。只有專業(yè)人員才可以從事電氣設(shè)備和電路工作。禁止未經(jīng)授權(quán)的工作。④采取措施對設(shè)備去污染，以降低維護人員感染的風(fēng)險。3.實驗室給排水設(shè)施設(shè)備（1）主要風(fēng)險點識別實驗室含有給排水的設(shè)施設(shè)備，包括位于工作區(qū)和洗消區(qū)的高壓滅菌器和洗滌池。當(dāng)水管道意外破裂、排水管道阻塞時，感染性材料可能溢出，有污染實驗人員和環(huán)境的風(fēng)險。（2）預(yù)防控制措施實驗室產(chǎn)生的所有染菌物及器具，必須先經(jīng)高壓滅菌或含氯消毒劑浸泡消毒后洗滌，洗消產(chǎn)生的污水集中排入中心污水池進行消毒處理，嚴禁直接排放。至少每月檢測糞大腸菌群，定期檢查實驗室給排水管道各接口的密封性，及時發(fā)現(xiàn)安全隱患。4.實驗室設(shè)施設(shè)備管道（1）主要風(fēng)險點識別實驗室設(shè)施設(shè)備管道穿越維護結(jié)構(gòu)的部位可能存在密封不嚴，當(dāng)感染性材料溢出時，有污染環(huán)境的風(fēng)險。（2）預(yù)防控制措施所有管道穿越維護結(jié)構(gòu)的部位應(yīng)嚴格密封，定期進行檢查檢測，避免感染性材料外溢從而污染環(huán)境。5.主要檢測儀器設(shè)備（1）細菌鑒定和藥敏測試儀（ATB儀）、顯微鏡、培養(yǎng)箱等設(shè)備①主要風(fēng)險點識別對疑似產(chǎn)氣莢膜梭菌鑒定時，需要使用ATB儀、顯微鏡等設(shè)備，如果不按操作規(guī)程操作，則會導(dǎo)致病原體濺出、滲漏而污染實驗環(huán)境。②預(yù)防控制措施嚴格按ATB儀等設(shè)備操作規(guī)程操作和維護，每次使用完畢后對設(shè)備箱體及可能污染的實驗環(huán)境進行消毒。（2）離心機①主要風(fēng)險點識別在分離血清、濃縮菌液等檢測活動中會使用到離心機，離心過程中可能存在離心管破裂、離心管蓋脫落、離心轉(zhuǎn)子和離心艙被污染的風(fēng)險。②預(yù)防控制措施離心時配備耐離心壓力的且?guī)菪苌w的離心管，離心前做好平衡，選擇正確的離心速度和離心力。規(guī)范正確操作，定期維護，確保離心機性能正常，每次做好清潔消毒和使用記錄，并定期進行功能檢查。（3）微生物膜過濾系統(tǒng)①主要風(fēng)險點識別未按照儀器使用要求規(guī)范操作，可能發(fā)生濾杯松動，導(dǎo)致待檢樣品濾液外流，污染實驗臺面和設(shè)備。②預(yù)防控制措施實驗室嚴格按照儀器使用說明規(guī)范操作，儀器啟動前，必須檢查濾杯與濾器接口的密封性，保證密閉狀態(tài)，并做好個人生物安全防護；每次使用后做好清潔消毒和使用維護記錄，定期進行功能檢查，確保儀器性能正常。6.生物安全設(shè)施設(shè)備（1）生物安全柜①主要風(fēng)險點識別在進行產(chǎn)氣莢膜梭菌大量活菌操作時，應(yīng)在生物安全柜中進行，操作過程中沒有按照設(shè)備操作規(guī)程進行正確操作、維護，則使生物安全柜的氣溶膠防護效果明顯降低，甚至消失，失去安全防護作用；若長時間使用或未及時更換HEPA過濾膜，會使其功能喪失，造成工作窗口氣流速度降低或流向紊亂；生物安全柜使用后未按要求進行徹底消毒處理，會造成使用和維護人員間接接觸污染。②預(yù)防控制措施正確選配生物安全柜，操作人員應(yīng)接受相關(guān)的操作、維護培訓(xùn)，日常操作和維護嚴格按照設(shè)備操作規(guī)程或使用說明書進行。每年請有檢測資質(zhì)的服務(wù)機構(gòu)對生物安全柜進行風(fēng)速、氣流、塵埃粒子、紫外線強度等關(guān)鍵要素的檢測，實驗室定期進行空氣沉降菌檢測，確保其正常性能。一旦生物安全柜的使用造成污染，應(yīng)及時進行消毒。（2）高壓滅菌器①主要風(fēng)險點識別產(chǎn)氣莢膜梭菌檢測過程中被病原菌污染的玻璃、耐高壓的實驗器材及實驗廢棄物要進行高壓滅菌消毒才可移出實驗室。在高壓消毒時如果沒有按照高壓鍋的操作規(guī)程或使用說明書進行操作、維護，可能使高壓滅菌器效果明顯降低，甚至失效，失去去污染與無害化的作用；若長時間使用又不定期檢測滅菌效果，對其滅菌效果無從考證，可能產(chǎn)生功能缺損，存在滅菌不徹底從而引起污染的隱患；在長期關(guān)停期間，若內(nèi)部水分不及時排干，將會使內(nèi)部器件老化從而失去正常功能。②預(yù)防控制措施選擇下排式高壓滅菌器，防止氣溶膠污染，操作人員持證上崗，正確規(guī)范操作，定期維護，確保高壓滅菌器性能正常，做好使用記錄。使用時每次檢測化學(xué)指示物，監(jiān)控記錄溫度、壓力、時間等滅菌參數(shù)，每周進行生物檢測，以保證滅菌質(zhì)量。（3）個人防護用品①主要風(fēng)險點識別實驗室不提供足夠數(shù)量的、符合質(zhì)量要求的防護服、防護眼罩、一次性乳膠手套、口罩和覆蓋足背的防滑鞋等，使用大小不合適的個人防護用品，個人防護用品穿戴、脫卸的程序、方法不符合要求，均可能造成人員感染或環(huán)境污染。②預(yù)防控制措施選擇正規(guī)、符合質(zhì)量要求的防護用品，使用前進行必要的培訓(xùn)，按照規(guī)定的程序正確使用、脫卸，穿戴時相互檢查確認，及時更換污染和破損的防護裝備，避免使用破損、缺陷、過期的產(chǎn)品。（4）應(yīng)急救治設(shè)施和用品①主要風(fēng)險點識別實驗室若沒有配備洗眼器、應(yīng)急藥箱等必要的應(yīng)急設(shè)施和物品，或設(shè)備的急救用品種類不全、不合適或過期，則導(dǎo)致急用時無法發(fā)揮作用。②預(yù)防控制措施在實驗室內(nèi)正確配備洗眼器，確保功能正常。配備的75%乙醇、碘伏或其他消毒劑、創(chuàng)可貼等急救物品與實驗活動相適應(yīng)并在有效期內(nèi)使用，由專人負責(zé)管理，定期維護、清理和更新。（5）消毒滅菌劑①主要風(fēng)險點識別消毒劑產(chǎn)品無生產(chǎn)許可證、過期、配制方法或濃度不正確、種類選擇不合理，將會導(dǎo)致消毒效果降低、生物滅活能力降低或?qū)ξ锲犯g性增加、對皮膚造成刺激等問題。②預(yù)防控制措施選擇符合國家標(biāo)準(zhǔn)的正規(guī)廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品，選擇合適的消毒劑，按照規(guī)定的消毒方法、消毒時間、消毒濃度（劑量）進行消毒，避免使用過期產(chǎn)品；消毒過程中，消毒人員應(yīng)做好必要的個體防護，防止發(fā)生意外。根據(jù)產(chǎn)氣莢膜梭菌特點，選用70%~75%酒精和稀釋10~25倍、50~100倍、200倍的施康消毒劑Ⅰ（主要成分為次氯酸鈉）作為實驗室常用消毒劑。7．管理體系的風(fēng)險（1）主要風(fēng)險識別管理體系（包括應(yīng)急預(yù)案）是否健全和完善，是否符合實際管理要求，程序文件、作業(yè)指導(dǎo)書和操作規(guī)程是否科學(xué)和具有可操作性，是否能確保生物安全的主要因素。如果組織結(jié)構(gòu)不健全、設(shè)置不合理，體系文件與實際工作不匹配，以及部門職責(zé)不清或銜接不當(dāng)?shù)?，就都可能帶來安全風(fēng)險。（2）預(yù)防控制措施定期開展對管理體系的評審，要特別關(guān)注風(fēng)險評估程序、應(yīng)急預(yù)案、檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范（SOP）等，發(fā)現(xiàn)問題及時修訂、完善，以確保生物安全管理體系持續(xù)有效運行。（四）工作人員的風(fēng)險評估與預(yù)防控制措施1.人員數(shù)量和素質(zhì)（1）人員數(shù)量①主要風(fēng)險點識別人員過少會因缺少相互提示監(jiān)督或因工作量增大而導(dǎo)致操作過程中工作失誤增加，風(fēng)險增加。②預(yù)防控制措施采樣和檢測人員的數(shù)量應(yīng)與工作量相匹配，盡量有2名工作人員同時進行采樣和檢測工作，加強質(zhì)量監(jiān)督員對實驗活動關(guān)鍵步驟的監(jiān)督。（2）人員結(jié)構(gòu)①主要風(fēng)險點識別實驗室檢測人員的職稱分布不合理，新進人員沒有高資歷人員帶教操作，不能很好應(yīng)對意外事件，風(fēng)險增加。②預(yù)防控制措施實驗室檢測人員的年齡和資歷結(jié)構(gòu)應(yīng)配備合理，新進人員應(yīng)由高資歷人員帶教或監(jiān)督操作。（3）職業(yè)操守①主要風(fēng)險點識別產(chǎn)氣莢膜梭菌檢測存在一定的生物安全風(fēng)險，若政治思想素質(zhì)不高、責(zé)任心不強的人員參與該項工作，則產(chǎn)生生物危害而危及人員安全、環(huán)境安全與社會安定的可能性較大。②預(yù)防控制措施加強職業(yè)道德教育，培養(yǎng)工作責(zé)任心。2.健康管理（1）主要風(fēng)險點識別健康狀況主要包括生理、心理素質(zhì)與免疫狀態(tài)。若實驗室檢測相關(guān)人員出現(xiàn)呼吸道或者消化道感染癥狀、機體免疫力低下等其他不適合工作的狀況，職業(yè)暴露風(fēng)險增加。（2）預(yù)防控制措施建立健康申報制度，遇有呼吸道或者消化道感染及其他不適于工作的情況，及時向科室負責(zé)人報告并暫停工作；若接觸物的傳染性大，應(yīng)加強感染保護。3.人員資質(zhì)（1）主要風(fēng)險點識別檢測人員不具備衛(wèi)生檢測相關(guān)學(xué)歷教育背景，不熟悉產(chǎn)氣莢膜梭菌檢測方法及操作規(guī)范，未執(zhí)行相關(guān)的專業(yè)知識培訓(xùn)和考核并未獲得上崗證，無法保證工作質(zhì)量和安全。（2）預(yù)防控制措施檢測人員必須是檢驗或相關(guān)專業(yè)畢業(yè)，經(jīng)過上崗培訓(xùn)、考核合格和持證上崗。4.生物安全培訓(xùn)要求（1）主要風(fēng)險點識別檢測人員、輔助人員、后勤保障人員、進修實習(xí)人員上崗前沒有接受嚴格的生物安全，以及相關(guān)生物安全設(shè)備操作的技術(shù)培訓(xùn)，易造成生物安全事故的發(fā)生。（2）預(yù)防控制措施檢測人員、輔助人員、后勤保障人員每年參加本中心組織的生物安全知識或生物安全操作技術(shù)培訓(xùn)、考核。上崗前熟練掌握生物安全儀器設(shè)備、設(shè)施操作技術(shù)，具備相關(guān)的安全防護能力。進修實習(xí)人員參與實驗活動前必須接受生物安全知識的培訓(xùn)，在帶教老師的監(jiān)督下工作。5.應(yīng)急事件處理能力（1）主要風(fēng)險點識別實驗室人員上崗前沒有接受實驗室意外事故處理、職業(yè)暴露后預(yù)防等突發(fā)事件處置的培訓(xùn)，一旦發(fā)生意外事件，就不能有效地進行早期處理和控制生物安全事件。（2）預(yù)防控制措施實驗室工作人員必須嚴格按照《實驗室意外事故和職業(yè)性疾病報告制度》和《病原微生物生物安全應(yīng)急處置技術(shù)方案》中規(guī)定的要求進行應(yīng)急事件的處置，強化職業(yè)暴露的應(yīng)急處理能力。規(guī)范工作中職業(yè)暴露后現(xiàn)場急救處理和預(yù)防辦法。（五）實驗室非常規(guī)活動中的風(fēng)險評估與預(yù)防控制措施1.主要的實驗室非常規(guī)活動（1）實驗室外專業(yè)人員對實驗室設(shè)施設(shè)備的維護、維修、檢定/校準(zhǔn)、檢測驗證（如主要設(shè)施設(shè)備的檢測驗證）和更換（如高效過濾器等的更換）等。（2）實驗室后勤保障人員對實驗室及公共環(huán)境的保潔、實驗器材的清洗消毒。（3）實驗室外人員參觀實驗室和上級部門對實驗室的檢查。（4）任何其他人員需要進入實驗室從事實驗活動外的行為（如發(fā)生水災(zāi)時，消防人員、急救人員的進入）。2.主要風(fēng)險點的識別（1）上述人員進入實驗室從事相關(guān)活動，特別是不慎打翻、打破標(biāo)本管或損壞儀器零部件等情況，可能會引起實驗室感染的風(fēng)險。（2）實驗室運行過程中某些人員需要進入實驗室參觀，存在影響實驗活動正常運行或者導(dǎo)致相關(guān)或不相關(guān)的設(shè)施設(shè)備損壞的風(fēng)險。3.預(yù)防控制措施（1）實行人員準(zhǔn)入、登記制度。進修實習(xí)人員進入實驗室從事檢測活動前，必須先進行生物安全和實驗室規(guī)章制度的培訓(xùn)。參觀和檢測活動應(yīng)盡可能不進入實驗區(qū)域。若中心實驗室外專業(yè)人員和實驗室后勤保障人員確實需要進入實驗室進行相關(guān)活動，或上級部門需要進入實驗室進行檢查，應(yīng)在對實驗室（包括環(huán)境和設(shè)施設(shè)備等）作徹底消毒后和實驗室未運行時才準(zhǔn)入。任何外來人員進入實驗室時，應(yīng)有中心實驗室人員協(xié)助和全過程陪同。（2）實驗室外專業(yè)人員和實驗室后勤保障人員必須要有相應(yīng)的專業(yè)知識，應(yīng)對其進行生物安全培訓(xùn)，提供安全指南，實驗室人員應(yīng)協(xié)助、指導(dǎo)和規(guī)范進入人員在實驗室內(nèi)的活動并對其安全行為進行監(jiān)督，進入人員必須遵守實驗室的各項管理規(guī)定，以確保人員和環(huán)境安全。（3）進入人員未經(jīng)許可絕對不能私自動用實驗室內(nèi)有標(biāo)志的危險品（除非經(jīng)過授權(quán)），絕不能將未經(jīng)消毒處理的物品拿出實驗區(qū)。（4）在生物安全BSL-2實驗室進行設(shè)施、設(shè)備維護維修過程中，若發(fā)生意外事件，應(yīng)立即報告實驗室負責(zé)人。實驗室負責(zé)人根據(jù)造成的事故進行風(fēng)險評估，采取應(yīng)對措施。按專業(yè)技術(shù)要求進行設(shè)施、設(shè)備的維護維修時，不能私自動用其他設(shè)施設(shè)備。若導(dǎo)致相關(guān)或不相關(guān)的設(shè)施設(shè)備損壞時，應(yīng)及時報告。（5）當(dāng)需要更換HEPA過濾膜或高效過濾器時，應(yīng)先對高效過濾器、HEPA過濾膜等作原位消毒后，專業(yè)人員才能進行更換。（6）為確保自己和他人的安全，禁止未穿防護服的人員隨意進出實驗室的防護區(qū)域。同時也禁止穿防護服的人員走出實驗室的防護區(qū)域。（7）對實驗室的設(shè)施、設(shè)備進行維護工作時動作輕柔，避免產(chǎn)生氣溶膠。（8）在實驗室內(nèi)進行設(shè)施、設(shè)備檢驗維修工作時，至少有兩人共同參加。檢驗維修后，離開實驗室前，必須洗手。（六）被誤用和惡意使用的風(fēng)險與預(yù)防控制措施1.主要風(fēng)險點識別陽性標(biāo)本未明確標(biāo)識，未嚴格實行雙人雙鎖管理，實驗活動結(jié)束后不及時對操作場所進行消毒，工作人員在不知情的情況下可能誤用標(biāo)本、實驗材料和設(shè)施設(shè)備等，導(dǎo)致人員感染和實驗室環(huán)境污染、人員受傷或設(shè)施設(shè)備損壞等事故。2.預(yù)防控制措施（1）實行嚴格的人員準(zhǔn)入和持證上崗制度。（2）所有獲得批準(zhǔn)進入實驗室工作的人員，必須嚴格按規(guī)程操作實驗材料和設(shè)施設(shè)備，以及其他一切實驗活動，不得私自動用實驗室內(nèi)任何不熟悉物品。（3）發(fā)生事故時必須及時報告并作必要的處理和記錄。（4）實驗所用材料和試劑等必須有明確的標(biāo)識。（5）陽性標(biāo)本嚴格實施雙人雙鎖管理，上送的陽性樣本必須經(jīng)中心蓋章批準(zhǔn)，攜帶“可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸許可證”，由專車運送，并由專業(yè)人員全程護送。（七）相關(guān)實驗室已發(fā)生的事故分析和從中得到的啟示目前，尚未有產(chǎn)氣莢膜梭菌檢測導(dǎo)致實驗室人員感染的相關(guān)報道，但仍然存在實驗室人員在進行采樣、檢驗、廢棄物處置等工作過程中，個人防護不到位而導(dǎo)致感染的風(fēng)險。因此，嚴格遵守實驗室相關(guān)規(guī)定，按照風(fēng)險評估報告制訂的要求規(guī)范執(zhí)行，可降低和規(guī)避職業(yè)暴露風(fēng)險。實驗室理化因素風(fēng)險評估及安全防護措施紫外線1.主要風(fēng)險點識別潔凈實驗室內(nèi)傳遞窗、生物安全柜、BSL-2實驗室均使用紫外線燈進行物體表面消毒。紫外線波長為250~280nm，主要影響眼睛和皮膚，引起急性角膜炎和結(jié)膜炎、慢性白內(nèi)障等眼疾病，還可誘發(fā)皮膚癌。紫外線燈開啟時，人員在不知情的情況下進入可受到傷害。2.預(yù)防控制措施在實驗室工作應(yīng)避免紫外線直接照射人體，特別是眼部。生物安全柜表面應(yīng)張貼紫外線危害的標(biāo)識，提醒實驗人員小心紫外線危害。在進行紫外線消毒時，實驗人員盡量遠離消毒區(qū)域，基本可以規(guī)避紫外線對人體的危害。（二）輻射1.主要風(fēng)險點識別實驗室籌建選址時對周圍輻射源進行排查，使用含輻射的儀器未嚴格管理，存在輻射源或輻射事故間接導(dǎo)致病原微生物屏障系統(tǒng)破壞的隱患。2.預(yù)防控制措施實驗室籌建選址時對周邊建筑群嚴格排查輻射源，實驗室不使用有輻射源的儀器設(shè)備，輻射造成的風(fēng)險基本不予考慮。（三）施康清洗消毒劑Ⅰ1.主要風(fēng)險點識別施康清洗消毒劑Ⅰ屬于含氯消毒劑，有效氯的含量為4.55%~5.55%，次氯酸鈉為主要殺菌因子。含氯的消毒液會殘留在空氣中不揮發(fā)，長期使用會使人感到頭疼、惡心，刺激黏膜，對于有體質(zhì)過敏的人，還容易引發(fā)過敏、哮喘疾病等。高濃度的含氯消毒劑對人的呼吸道黏膜和皮膚有明顯的刺激作用，可使人流淚、咳嗽，并刺激皮膚和黏膜，嚴重者可發(fā)射氯氣中毒。急性中毒者出現(xiàn)躁動、惡心、嘔吐、呼吸困難等癥狀，甚至因窒息而死。2.預(yù)防控制措施按照使用說明，根據(jù)消毒對象不同而配制不同的稀釋倍數(shù)，避免使用不必要的高濃度的消毒液，稀釋和使用時戴好手套，消毒后可及時開窗通風(fēng)，基本可規(guī)避消毒液對人體的危害。（四）其他1.主要風(fēng)險點識別實驗室內(nèi)的照明和聲音（生物安全柜等）有可能因強光和噪聲對人員造成的損害。2.預(yù)防控制措施對實驗室的照明和聲音等參數(shù)進行檢測，確保合格，避免強光和噪聲對人員的損害。四、實驗室火災(zāi)風(fēng)險評估與預(yù)防控制措施1.主要風(fēng)險點識別（1）超負荷用電，電線過長。（2）電器和電源老化、電器保養(yǎng)不良，例如電纜的絕緣層破舊或損壞。（3）用火不當(dāng)?shù)纫l(fā)火災(zāi)。（4）儀器設(shè)備在不使用時未關(guān)閉電源。（5）使用的儀器設(shè)備不是專為實驗室環(huán)境設(shè)計。（6）易燃、易爆品處理、保存不當(dāng)。（7）不相容化學(xué)品沒有正確隔離。（8）在易燃物品和蒸汽附近有能產(chǎn)生火花的設(shè)備。（9）通風(fēng)系統(tǒng)不當(dāng)或不充分。2.預(yù)防控制措施實驗室采取以下預(yù)防控制措施避免火災(zāi)發(fā)生，保證發(fā)生火災(zāi)后能夠安全撤離實驗室。（1）定期檢查電器插座、電線絕緣層是否完好，保證用電負荷，對易燃、易爆等危險品進行有效區(qū)域隔離。（2）實驗室配備滅火器。放置在易取的地點，擺放部位張貼滅火器標(biāo)識。該滅火器用于撲滅可控制的火災(zāi)，幫助人員撤離火場；對滅火器進行定期檢測和維護，確保其有效使用。（3）實驗室需裝設(shè)應(yīng)急燈，所有出口都有黑暗中可見的“緊急出口”標(biāo)識；當(dāng)出現(xiàn)緊急狀況時，實驗室所有出口的鎖必須處于開啟狀態(tài)，出口設(shè)計應(yīng)保證不經(jīng)過高危險區(qū)域就能逃脫，所有出口都能通向一個開放空間。（4）走廊、流通區(qū)域不得放置障礙物，不受人員流動和滅火設(shè)備移動的影響。（5）在實驗室工作區(qū)顯著位置張貼火警電話標(biāo)識。實驗室每年對工作人員進行消防知識培訓(xùn)、包括消防器材的使用、火災(zāi)發(fā)生時的應(yīng)急行動等。五、自然災(zāi)害風(fēng)險評估與安全防護措施自然災(zāi)害可能導(dǎo)致的實驗室緊急狀況主要包括水災(zāi)和地震等。（一）水災(zāi)1.風(fēng)險點識別水災(zāi)可能導(dǎo)致實驗室維護結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞，實驗室內(nèi)感染性材料隨水外溢。2.安全防護措施（1）在安全手冊中制訂《實驗室緊急事件應(yīng)急預(yù)案》，并對所有實驗室人員進行培訓(xùn)。（2）實驗室一旦發(fā)生水災(zāi)報警時，應(yīng)立刻停止工作。首先，考慮實驗室內(nèi)感染性物質(zhì)和人員的轉(zhuǎn)移，實驗室負責(zé)人、中心主任根據(jù)條件及時采取對策，第一時間聯(lián)系相關(guān)消防人員。消防人員應(yīng)有防護措施，并在受過訓(xùn)練的實驗室工作人員陪同下，進入實驗室完成菌毒種和人員的安全轉(zhuǎn)移工作。（二）地震1.風(fēng)險點識別發(fā)生地震等自然災(zāi)害會導(dǎo)致實驗室維護結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞，存在人員傷害和實驗室感染性材料外溢的風(fēng)險。2.安全防護措施實驗室應(yīng)采取措施降低自然災(zāi)害帶來的風(fēng)險，保證災(zāi)害發(fā)生后能夠安全撤離實驗室，減少對人員和環(huán)境的影響。發(fā)生地震后，首先設(shè)立距實驗室維護結(jié)構(gòu)20m范圍內(nèi)的封鎖區(qū)。其次，對封鎖區(qū)進行消毒，然后由專業(yè)人員在做好個人防護的前提下對實驗內(nèi)部環(huán)境邊消毒邊清理，清理到樣品保存地點。如果保藏樣品的容器沒有被破壞，可把它安全轉(zhuǎn)移到其他安全的實驗室存放。如果保藏樣品的容器已被破壞和發(fā)生外溢，應(yīng)立即用可靠方法進行徹底消毒滅菌。六、生物安全及其他緊急事件（事故）處理預(yù)案（一）實驗室生物安全事件（事故）處理措施（1）當(dāng)生物安全柜或潔凈實驗室出現(xiàn)持續(xù)正壓時，室內(nèi)人員應(yīng)立即停止操作，通知運行保障人員采取措施恢復(fù)負壓。如果不能及時恢復(fù)和保持負壓，應(yīng)停止實驗，按規(guī)程退出。發(fā)生此類事故或發(fā)生意外停電，造成具有傳染性物質(zhì)暴露潛在危險的事故和污染時，工作人員除了采取緊急措施外，還應(yīng)立即報告實驗室安全負責(zé)人，組織對實驗室進行終末消毒。（2）離心過程中離心管破裂時，應(yīng)馬上關(guān)閉電源，讓離心機停止工作，并禁止30min。然后緩慢打開離心機蓋，將離心杯平穩(wěn)地拿到生物安全柜中。如果發(fā)生泄漏，用1%的次氯酸鈉消毒液灌入離心杯腔體中消毒30min，然后棄去消毒液和離心管碎片，將離心杯清洗后擦干。（3）發(fā)生污染物潑濺或溢出時，立即用清潔布或吸水紙覆蓋污染處，并倒上10~25倍稀釋的施康消毒液，作用至少30min，方可清理全部污染物，用消毒劑擦拭污染區(qū)域。所有這些操作過程中都應(yīng)戴手套。如發(fā)生大范圍污染擴散事故時，應(yīng)立即通知實驗室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負責(zé)人到達事故現(xiàn)場。待其查清情況，確定消毒方案，并組織對實驗室進行終末消毒。（二）其它緊急事件（事故）處理措施在制定的應(yīng)急預(yù)案中應(yīng)包括消防人員和其他緊急救助人員。應(yīng)事先告知他們哪些實驗室有潛在的感染性物質(zhì)，讓他們熟悉實驗室的布局和設(shè)備。實驗室人員要熟悉緊急撤離的情況及緊急撤離的路線標(biāo)識，在實驗室發(fā)生不可控制的火災(zāi)、水災(zāi)、爆炸或其他危險情況時，為確保工作人員的安全，要進行緊急撤離。所有實驗室人員須了解緊急撤離的行動計劃、撤離路線和緊急撤離的集合地點，每年至少參加一次緊急撤離演習(xí)，包括急救設(shè)備使用和采取相應(yīng)急救措施。（三）生物安全及其他緊急事件（事故）報告和記錄（1）發(fā)生生物安全及其他緊急事件時，在緊急處理的同時必須向中心主管領(lǐng)導(dǎo)和生物安全委員會報告。（2）對于生物安全事件必須進行登記，記錄發(fā)生的時間、地點及詳細經(jīng)過、處理方法等。七、生物安全和生物安全保障風(fēng)險管理（一）生物安全風(fēng)險評估依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)風(fēng)險評估所依據(jù)的數(shù)據(jù)及擬采取的風(fēng)險控制措施、安全操作規(guī)程等均應(yīng)以國家衛(wèi)生和計劃生育委員會、世界衛(wèi)生組織、國際標(biāo)準(zhǔn)化組織等機構(gòu)或行業(yè)權(quán)威機構(gòu)發(fā)布的指南、標(biāo)準(zhǔn)等為依據(jù)。（二）危險發(fā)生的概率評估（見表7-8）表7-8產(chǎn)氣莢膜梭菌實驗活動危險發(fā)生的概率評估序號潛在危險因素危害程度發(fā)生概率固有風(fēng)險措施合理性殘留風(fēng)險風(fēng)險可控程度1樣品運輸過程中容器意外側(cè)翻、泄露、破裂造成污染中度可能中度合理低風(fēng)險可控2樣品的接收、開啟及加樣等常規(guī)實驗活動中產(chǎn)生的氣溶膠中度較大可能中度合理低風(fēng)險可控3離心、加樣等實驗活動中意外事故造成盛裝標(biāo)本容器破裂、溢出瞬間產(chǎn)生的氣溶膠中度可能中度合理低風(fēng)險可控4檢測未經(jīng)滅火的樣品對儀器與環(huán)境造成的污染中度較大可能中度合理低風(fēng)險可控5標(biāo)本、實驗材料、設(shè)施設(shè)備等被誤用的風(fēng)險中度可能中度合理低風(fēng)險可控6陽性標(biāo)本被惡意使用的風(fēng)險高度較小可能高度合理低風(fēng)險可控7實驗器材未經(jīng)規(guī)范消毒造成污染中度可能中度合理低風(fēng)險可控8廢棄物處理不當(dāng)造成病原微生物擴散中度較大可能中度合理低風(fēng)險可控9滅菌裝置不符合要求，滅菌不徹底造成污染中度較小可能中度合理低風(fēng)險可控10檢測人員和工勤人員被銳器誤傷造成職業(yè)暴露高度可能高度合理低風(fēng)險可控11檢測人員個人防護不當(dāng)造成的病原微生物擴散中度可能中度合理低風(fēng)險可控12非檢測人員、進修實習(xí)等外來人員進