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學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精生物中圖版選修1第六章蛋白質(zhì)和DNA技術(shù)單元檢測(時間:45分鐘,滿分:100分)一、選擇題(每小題3分,共60分)1某個DNA分子的堿基總數(shù)腺嘌呤為200個,利用PCR技術(shù)循環(huán)數(shù)次后,消耗周圍環(huán)境中腺嘌呤的脫氧核苷酸3000個,該DNA分子已循環(huán)了幾次?()A.3次B.4次C.5次D.6次2實驗室內(nèi)模擬生物體DNA的復(fù)制必需的一組條件是().①酶②游離的脫氧核苷酸③ATP④DNA分子⑤mRNA⑥tRNA⑦適宜的溫度⑧適宜的酸堿度A.①②③④⑤⑥B.②③④⑤⑥⑦C.②③④⑤⑦⑧D.①②③④⑦⑧3有關(guān)凝膠色譜法和電泳法的說法正確的是()。A.它們都是分離蛋白質(zhì)的重要方法B.它們的原理相同C.使用凝膠色譜法需要使用緩沖溶液而電泳法不需要D.以上說法都正確4PCR一般要經(jīng)過三十多次循環(huán),從第二輪循環(huán)開始,上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應(yīng),由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈作模板時將()。A.仍與引物Ⅰ結(jié)合進行DNA子鏈的延伸B.無需與引物結(jié)合,在酶的作用下從頭合成子鏈C.同時與引物Ⅰ和引物Ⅱ結(jié)合進行子鏈延伸D.與引物Ⅱ結(jié)合進行DNA子鏈的延伸5緩沖液的作用是:在一定范圍內(nèi),抵制外界的影響來維持________基本不變().A.溫度B.pHC.滲透壓D.氧氣濃度6下列敘述中錯誤的是()。A.改變NaCl溶液的濃度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺試劑會呈現(xiàn)藍(lán)色C.用電泳法可分離帶電性質(zhì)、分子大小和形狀不同的蛋白質(zhì)D.用透析法可去除蛋白質(zhì)樣品中的小分子物質(zhì)7符合PCR反應(yīng)條件的一項是()。①穩(wěn)定的緩沖液環(huán)境②DNA模板③合成引物④四種脫氧核苷酸⑤DNA聚合酶⑥D(zhuǎn)NA解旋酶⑦限制性內(nèi)切酶⑧溫控設(shè)備A.①②③④⑤⑥B.①②③④⑤⑥⑦⑧C.③④⑤⑥⑦⑧D.①②③④⑤⑧8從細(xì)胞中提取某種特定的蛋白質(zhì)比提取DNA難度大,其原因不包括()。A.蛋白質(zhì)對溫度、鹽濃度、pH等條件更敏感,更易失活B.蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)多樣,理化性質(zhì)各不相同,使得蛋白質(zhì)的提取沒有統(tǒng)一的方法C.提取某種特定的蛋白質(zhì)時需據(jù)其特性摸索提取的程序D.提取血紅蛋白程序可分為樣品處理、粗分離、純化、純度的鑒定四大步9下圖為DNA分子復(fù)制的片段,圖中a、b、c、d表示各條脫氧核苷酸鏈。一般來說,下列各項正確的是().A.a(chǎn)和c的堿基序列互補B.b和c的堿基序列相同C.a(chǎn)鏈中(A+T)/(G+C)的比值與b鏈中同項比值不同D.a(chǎn)鏈中(A+T)/(G+C)的比值與c鏈中同項比值相同10下圖是哪次循環(huán)的產(chǎn)物?()A.第一次循環(huán)B.第二次循環(huán)C.第三次循環(huán)D.第四次循環(huán)11關(guān)于DNA聚合酶催化合成DNA子鏈的說法,正確的是().A.以DNA為模板,使DNA子鏈從5′端延伸到3′端的一種酶B.TaqDNA聚合酶必須在每次高溫變性處理后再添加C.DNA聚合酶能特異性地復(fù)制整個DNA的全部序列D.TaqDNA聚合酶是從深海生態(tài)系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的12DNA擴增過程中,DNA片段經(jīng)若干次擴增,與其數(shù)目的理論值變化相符的圖是()。13某考古學(xué)家在西伯利亞泰加林地區(qū)的冰中,發(fā)現(xiàn)了一種冰凍的已滅絕的巨型動物的肌肉。他想了解該巨型動物的DNA與現(xiàn)今印度大象的DNA的相似性,于是做了如下檢測工作,其中正確的操作步驟及順序是().①降低溫度,檢測處理后的雜合DNA雙鏈②通過PCR技術(shù)擴增巨型動物和大象的DNA③把巨型動物的DNA導(dǎo)入大象的細(xì)胞中④在一定溫度條件下,將巨型動物和大象的DNA水浴共熱A.②④①B.②④③①C.③④①D.②④③14已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子,其分子大小、電荷性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖所示,下列有關(guān)蛋白質(zhì)分離的敘述正確的是().A.分子甲與分子乙所帶電荷性質(zhì)不同B.若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì),則分子甲移動速度最慢C.若將樣品以2000r/min的速度離心10min,分子丁存在于沉淀中,則分子甲也一定存在于沉淀中D.將樣品裝入透析袋中透析12h,若分子丙保留在袋內(nèi),則分子乙也一定保留在袋內(nèi)15(多選)下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實驗的敘述,正確的有()。A.提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水漲破細(xì)胞B.用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)C.蛋白質(zhì)提取和分離過程中進行透析可去除溶液中的DNAD.蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進行分離純化16SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入SDS的作用是()。A.增大蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量B.改變蛋白質(zhì)的形狀C.掩蓋不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別D.減少蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量17下列有關(guān)蛋白質(zhì)提取和分離的說法,錯誤的是()。A.透析法分離蛋白質(zhì)的原理是利用蛋白質(zhì)不能通過半透膜的特性B.采用透析法使蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離開來C.離心沉降法通過控制離心速率使分子大小、密度不同的蛋白質(zhì)分離D.蛋白質(zhì)在電場中可以向與其自身所帶電荷相同的電極方向移動18將人紅細(xì)胞置于盛有下列液體的離心管中,10分鐘后離心,得到沉淀物和上清液,則上清液中K+含量最高的離心管內(nèi)盛有()。A.質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的氯化鈉溶液B.質(zhì)量分?jǐn)?shù)為20%的蔗糖溶液C.質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0。9%的氯化鈉溶液D.蒸餾水19PCR利用了DNA熱變性的原理,PCR儀實際上也是一種能自動調(diào)控溫度的儀器,對PCR過程中“溫度的控制”的下列說法錯誤的是()。A.酶促反應(yīng)需要高的溫度,是為了確保模板是單鏈B.延伸的溫度必須大于復(fù)性溫度,而小于變性溫度C.DNA聚合酶不能熱變性,要用耐高溫的聚合酶D.DNA解旋酶不能熱變性,為了確保模板是單鏈20下圖表示DNA變性和復(fù)性示意圖,下列相關(guān)說法正確的是()。A.向右的過程為加熱(80~100℃)變性的過程B.向左的過程是DNA雙鏈迅速致冷復(fù)性C.變性與在生物體內(nèi)解旋過程的條件、實質(zhì)都相同D.圖中DNA片段共有4個游離的磷酸基、4個3′端二、非選擇題(共40分)21(13分)已知蛋白質(zhì)混合液中硫酸銨濃度的不同可以使不同種類的蛋白質(zhì)析出(或沉淀),隨著硫酸銨濃度增加,混合液中析出的蛋白質(zhì)種類和總量增加。下表是某蛋白質(zhì)混合液中的不同蛋白質(zhì)從開始析出到完全析出所需要的蛋白質(zhì)混合液中的硫酸銨濃度范圍。蛋白質(zhì)混合液中的硫酸銨濃度(%)析出的蛋白質(zhì)15~20甲蛋白23~30乙蛋白25~35丙蛋白38~40丁蛋白請據(jù)表回答:(1)若只完全析出甲蛋白,混合液中最合適的硫酸銨濃度應(yīng)為________。(2)向該蛋白質(zhì)混合液中加入硫酸銨溶液(或硫酸銨),使混合液中的硫酸銨濃度達(dá)到30%,會析出若干種蛋白質(zhì),它們分別是_________________________________________.(3)通過改變混合液中的硫酸銨濃度________(能、不能)從混合液中得到所有的、不含有其他蛋白質(zhì)的乙蛋白,原因是___________________________________________________________________________________________________________________________。(4)簡要寫出從該蛋白質(zhì)混合液中分離出全部丁蛋白的實驗設(shè)計思路。(5)如果蛋白質(zhì)析出物中還含有一定量的硫酸銨,可用半透膜除去析出物中的硫酸銨.用半透膜能除去析出物中硫酸銨的原理是_________________________________________________________________________________________________________________.22(7分)Kornberg曾以噬菌體為引子,用四種脫氧核苷酸為原料,加入適量ATP和DNA聚合酶,在試管中把游離的脫氧核苷酸合成了噬菌體DNA,這種半人工合成的DNA也能夠在寄主(細(xì)菌)體內(nèi)繁殖。請據(jù)此回答下列問題。(1)該實驗說明的問題是_______________________________________________。(2)加入ATP的目的是__________________.說明該過程是_________________。(3)加入DNA聚合酶的目的是__________________________________________。(4)若DNA是在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)合成的,則其場所是________;若在真菌細(xì)胞內(nèi)合成,其場所可能是________;若在高等植物葉肉細(xì)胞內(nèi)合成,其場所又可能是________.23(9分)下圖為一種核酸分析方法,請據(jù)圖分析回答有關(guān)問題。(1)被分析的材料應(yīng)屬于一條________鏈。如果它存在另一條互補鏈,該互補鏈的堿基序列是:(2)如果選擇性斷開的位置是堿基G,那么隨機出現(xiàn)的被標(biāo)記片段應(yīng)有________種,在電泳帶上被分離的顯示位置應(yīng)有________處,在泳動方向最先端的片段應(yīng)是________序列段,與圖示泳動位置相比,在同樣電泳條件下該片段應(yīng)位于①的________(填“上方"或“下方”)。(3)應(yīng)用上述原理分析某種未知序列核酸的一條單鏈,結(jié)果如下圖所示:此結(jié)果說明,該核酸的此單鏈含________個核苷酸,其A∶T∶G∶C=________∶________∶________∶________24(6分)隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,人們越來越重視對蛋白質(zhì)的研究。測定蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量是研究蛋白質(zhì)的一項重要技術(shù),常用的測定方法是凝膠(由多孔性網(wǎng)狀物質(zhì)構(gòu)成的顆粒,其孔能讓小分子物質(zhì)進出)色譜法,即在一根垂直的玻璃柱中裝滿凝膠,然后在其上端加入蛋白質(zhì)混合液并用緩沖液進行洗脫。根據(jù)各種蛋白質(zhì)洗脫的先后順序可以比較它們的相對分子質(zhì)量大小.不同蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量大小與洗脫體積的關(guān)系如下圖所示。請回答下列問題。(1)蛋白質(zhì)的基本單位是____________,其結(jié)構(gòu)通式為__________________。(2)把含有肌紅蛋白(相對分子質(zhì)量為16900)、血清蛋白(相對分子質(zhì)量為35000)、牛胰島素(相對分子質(zhì)量為5700)的蛋白質(zhì)混合液進行凝膠過濾,最先洗脫出來的是________。(3)某人欲用凝膠色譜法比較A、B兩種蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量大小,請你選擇需要的材料,幫助其設(shè)計實驗步驟,并預(yù)測實驗結(jié)果,以得出相關(guān)結(jié)論。實驗步驟:_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。實驗結(jié)果:________________________________________________________________________________________________________________________________________.(4)若由凝膠色譜法測得某一由2條肽鏈構(gòu)成的蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量為m,且已知氨基酸的平均相對分子質(zhì)量為n。則該蛋白質(zhì)是由________個氨基酸經(jīng)脫水縮合而成的。25(5分)閱讀下列材料,回答問題。圓褐固氮菌是自生固氮菌,為經(jīng)濟有效地提高農(nóng)作物產(chǎn)量,人們一直在努力研究、尋找固氮基因.對基因的研究常常因研究樣品中DNA含量太低而難以進行,PCR技術(shù)有效地解決了這個問題。如今對基因的深入研究使人類跨入了蛋白質(zhì)組研究時代,從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)是該研究要做的基本工作之一.Ⅰ.用基因工程技術(shù)從經(jīng)過分離、提純的圓褐固氮菌中獲取固氮基因,然后進行PCR擴增.下表1和表2分別表示用PCR擴增固氮基因的反應(yīng)體系及反應(yīng)條件。從下表中可得出,PCR技術(shù)與DNA復(fù)制相比較,主要區(qū)別之一是______________________________________,此外,從反應(yīng)條件看,所使用的DNA聚合酶應(yīng)具有________的特點。每次循環(huán)都需要2種引物,其作用是__________________________________________________________。表1:PCR反應(yīng)體系緩沖液脫氧核苷酸引物A引物BDNA聚合酶模板DNA加去離子水5μL1μL0.5μL0.5μL0.5μL1~2μL補足至50μL表2:PCR反應(yīng)條件變性復(fù)性延伸30個循環(huán)后保溫溫度95℃55℃72℃適宜4℃時間30s30s1min5~10min2hⅡ.在對固氮基因產(chǎn)物的生產(chǎn)研究中,需要從復(fù)雜的細(xì)胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質(zhì)。(1)在樣品的處理中,除去樣品中小分子雜質(zhì)的步驟叫________。(2)上圖表示相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠色譜法分離的過程。試管中收集到的液體最先出現(xiàn)的是相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì),原因是_______________________________________________________________________________________________________。
參考答案1答案:B2答案:D3解析:它們都是分離蛋白質(zhì)的重要方法,但它們的原理不同,凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的方法,而電泳法利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離,這兩種方法都需要緩沖液。答案:A4解析:PCR擴增中,從第二輪循環(huán)開始由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈作模板時將與引物Ⅱ結(jié)合進行DNA子鏈的延伸;由引物Ⅱ延伸而成的DNA單鏈作模板時將與引物Ⅰ結(jié)合進行DNA子鏈的延伸.答案:D5答案:B6解析:當(dāng)NaCl溶液濃度為0.14mol·L-1時可以析出DNA。答案:A7解析:PCR反應(yīng)應(yīng)模擬生物細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制的條件,只是無需解旋酶(可熱變性),也不需要基因工程的工具酶(限制性內(nèi)切酶)。答案:D8答案:D9解析:因a和d、a和b、c和d的堿基序列互補,所以a和c的堿基序列相同;b和c的堿基序列互補;由于a和c的堿基序列相同,所以a鏈中(A+T)/(G+C)的比值與c鏈中同項比值相同.DNA分子中一條鏈上的(A+T)/(G+C)的比值等于另一條鏈上的(A+T)/(G+C)的比值。答案:D10解析:在PCR反應(yīng)中,以引物為標(biāo)記,第一次循環(huán)時,以加入的DNA為模板,兩條DNA鏈可分別由引物Ⅰ和引物Ⅱ與其結(jié)合并在DNA聚合酶的作用下延伸,所以形成的每個子DNA中只有一種引物;從第二次循環(huán)開始,上次產(chǎn)生的DNA分子又可作為模板參與反應(yīng),所以會形成DNA分子兩端均含引物的情況,如圖所示:因此題干中所出現(xiàn)的情況是第一次循環(huán)的產(chǎn)物.答案:A11解析:在PCR擴增DNA分子的過程中,各種組分要一次性加入;DNA聚合酶只能特異性地催化DNA特異片段的復(fù)制;TaqDNA聚合酶是從美國黃石國家公園的一個熱泉中發(fā)現(xiàn)的。答案:A12解析:DNA擴增過程中,DNA片段呈指數(shù)增長.答案:C13解析:PCR技術(shù)是分子生物學(xué)發(fā)展史上的一個里程碑,它大大簡化了基因克隆的步驟,已廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究的各個領(lǐng)域.PCR反應(yīng)通過變性、復(fù)性、延伸三個循環(huán)步驟,使目標(biāo)DNA片段呈指數(shù)擴增。因此,PCR系統(tǒng)是一個極其靈敏的信號放大系統(tǒng),能將極微弱,甚至是單拷貝的基因信號檢測出來。通過PCR技術(shù)擴增巨型動物和大象的DNA,然后利用DNA分子在高溫時解螺旋的特點,將巨型動物和大象的DNA水浴共熱,再降低溫度,檢測處理后的雜合DNA雙鏈。答案:A14答案:B15解析:A項中,提取細(xì)胞中的染色質(zhì)(染色體)需用蒸餾水漲破細(xì)胞;C項中,蛋白質(zhì)提取和分離過程中進行透析不能除去溶液中的DNA,因為透析袋能使小分子自由進出,而將大分子保留在袋內(nèi)。答案:BD16解析:加入SDS的作用:使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性,解聚成單條肽鏈;與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)—SDS復(fù)合物,SDS所帶電荷量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了蛋白質(zhì)原有帶電量,掩蓋了不同蛋白質(zhì)間的電荷差別,使電泳遷移率完全取決于分子大小。答案:C17答案:D18解析:人紅細(xì)胞在蒸餾水中滲透吸水漲破,K+含量較高。答案:D19答案:D20解析:變性后的DNA在緩慢降溫后才會復(fù)性;變性與在生物體內(nèi)解旋過程的條件不同、實質(zhì)相同;任一DNA片段都有2個游離的磷酸基(5′端)和2個3′端。答案:A21答案:(1)20%(2)甲蛋白、乙蛋白、丙蛋白(3)不能乙蛋白和丙蛋白析出所需的硫酸銨濃度范圍有重疊(4)向該蛋白質(zhì)混合液中加入硫酸銨溶液(或硫酸銨),使其濃度達(dá)到35%(或35%≤硫酸銨濃度<38%范圍內(nèi)任意一個濃度);分離析出物與溶液,保留溶液,取保留溶液,再加入硫酸銨溶液(或硫酸銨),使硫酸銨在溶液中的濃度達(dá)到40%(或40%以上),分離析出物與溶液,析出物即為丁蛋白。(5)半透膜是一種選擇性透過膜,只允許小分子的硫酸銨通過,不允許大分子蛋白質(zhì)通過22解析:本題考查DNA的復(fù)制過程及條件.在解答時應(yīng)結(jié)合DNA的復(fù)制條件、DNA復(fù)制過程的相關(guān)基礎(chǔ)知識,吃透問題題干,作出正確的解答.答案:(1)在一定條件下,DNA具有自我復(fù)制功能(2)為DNA復(fù)制提供能量一個耗能的過程(3)促進DNA新鏈的合成(4)原核細(xì)胞的擬核細(xì)胞核、線粒體細(xì)胞核、線粒體、葉綠體23解析:本題是電泳技術(shù)的應(yīng)用實例--電泳技術(shù)在
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