檢測(cè)案39　微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

檢測(cè)案39微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用[基礎(chǔ)鞏固練]考點(diǎn)一微生物的分離和培養(yǎng)1．下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．操作順序?yàn)橛?jì)算→稱量→溶化→倒平板→滅菌B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)倒平板D．待平板冷卻凝固后將平板倒過來放置2．[2024·江蘇南通校考]制備篩選支原體的培養(yǎng)基時(shí)，需要在基礎(chǔ)培養(yǎng)基里添加動(dòng)物血清、酵母浸液、青霉素等。多數(shù)4～5d長(zhǎng)出“油煎蛋”狀菌落。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．動(dòng)物血清可以提供營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子促進(jìn)支原體的生長(zhǎng)和增殖B．可以在篩選支原體的培養(yǎng)基里添加青霉素以防止雜菌污染C．實(shí)驗(yàn)時(shí)用無水乙醇對(duì)實(shí)驗(yàn)員的手消毒效果差且有安全隱患D．臨床上根據(jù)菌落特征確診是否支原體感染是高效而準(zhǔn)確的3．[2024·衡水高三聯(lián)考]秸稈還田可增加土壤肥力，緩解環(huán)境污染。為分離分解纖維素的微生物菌種，實(shí)現(xiàn)廢物的資源化利用，研究人員設(shè)計(jì)了“土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→涂布平板→挑選菌株”的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．配制培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)在濕熱滅菌之后調(diào)節(jié)pHB．選擇培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)使用纖維素為唯一碳源培養(yǎng)基C．進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，應(yīng)在酒精燈火焰旁完成各種操作D．挑選菌株后，應(yīng)將使用過的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌后再丟棄考點(diǎn)二某種微生物數(shù)量的測(cè)定4．如圖所示，自來水經(jīng)濾膜過濾后，轉(zhuǎn)移到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上，適宜條件下培養(yǎng)48h，染色后統(tǒng)計(jì)變色菌落數(shù)目為165個(gè)。下列說法正確的是（）A．若培養(yǎng)基含伊紅—亞甲藍(lán)，大腸桿菌菌落呈藍(lán)綠色B．自來水中大腸桿菌濃度是33個(gè)·L－1，比真實(shí)值偏大C．為了提高準(zhǔn)確度，需設(shè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)，但不用空白對(duì)照D．若培養(yǎng)基菌落數(shù)目大于300，可適當(dāng)減少自來水量5．如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是（）A．3號(hào)試管中的菌液稀釋倍數(shù)為103倍B．4號(hào)試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)可能是5號(hào)的10倍C．5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×107個(gè)D．該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要高考點(diǎn)三培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用6．通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上，大部分微生物無法生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌的生長(zhǎng)；在培養(yǎng)基中加入10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)。利用上述方法能從混雜的微生物群體中分別分離出（）①大腸桿菌②霉菌③放線菌④固氮細(xì)菌A．④②③B．①②③C．①③④D．只有③④7．[2024·青島模擬]高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如圖1所示。將得到的菌懸液轉(zhuǎn)接于同時(shí)含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如圖2所示情況。下列分析錯(cuò)誤的是（）A．過程①②合稱為稀釋涂布平板法B．甲、乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C．Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法D．圖2中周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種[提能強(qiáng)化練]8．菌種M和菌種N在發(fā)酵工程應(yīng)用上具有不同的優(yōu)越性，為了獲得具有它們共同優(yōu)良性狀的融合菌，進(jìn)行了下圖所示的實(shí)驗(yàn)。已知菌種M為組氨酸依賴（組氨酸合成相關(guān)基因突變?yōu)锽－），菌種N為色氨酸依賴（色氨酸合成相關(guān)基因突變?yōu)锳－），下列分析錯(cuò)誤的是（）A．菌種M和N可通過人工誘變和選擇性培養(yǎng)篩選獲得B．用PEG誘導(dǎo)融合之前需要去除菌種M和N的細(xì)胞壁C．在培養(yǎng)基X中添加組氨酸和色氨酸以篩選出雜種融合菌D．從培養(yǎng)基X中分離出的雜種融合菌P對(duì)兩種氨基酸均不依賴9．（不定項(xiàng)）幽門螺桿菌（含有脲酶）感染是慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后，進(jìn)行分離培養(yǎng)。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．分離純化幽門螺桿菌時(shí)應(yīng)使用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基B．鑒別幽門螺桿菌時(shí)應(yīng)在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑和緩沖物質(zhì)C．可用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對(duì)照證明選擇培養(yǎng)基的選擇作用D．對(duì)幽門螺桿菌進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)可用平板劃線法或稀釋涂布平板法10．（不定項(xiàng)）聚羥基脂肪酸酯（PHA）是由嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯，它具有類似于合成塑料的理化特性，且廢棄后易被生物降解，可用于制造無污染的“綠色塑料”?？茖W(xué)家從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種的流程圖如下。下列說法正確的是（）①取湖水→②eq\o(\s\up7(接種在),\s\do5(培養(yǎng)基上))→③培養(yǎng)→④eq\o(\s\up7(挑取單菌落并),\s\do5(分別擴(kuò)大培養(yǎng)))→⑤eq\o(\s\up7(檢測(cè)菌的數(shù)目),\s\do5(和PHA的產(chǎn)量))→⑥eq\o(\s\up7(獲得目),\s\do5(標(biāo)菌株))A．步驟②可用稀釋涂布平板法接種到含合成塑料的選擇培養(yǎng)基上B．步驟③需要將接種后的培養(yǎng)基放入恒溫箱中倒置培養(yǎng)C．步驟④所用到的培養(yǎng)基應(yīng)加入瓊脂，以便挑取單菌落獲得純化菌株D．挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落并分別測(cè)定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量11．（不定項(xiàng)）苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，①為土壤樣品。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．使用平板劃線法可以在⑥上獲得單個(gè)菌落B.如果要測(cè)定②中活細(xì)菌數(shù)量，常采用平板劃線法C．圖中②培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為唯一碳源D．微生物培養(yǎng)前，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿進(jìn)行滅菌處理12．[2024·沈陽二中模擬]（不定項(xiàng)）金黃色葡萄球菌（SAU）是細(xì)菌性肺炎的病原體之一，A、B、C、D四種抗生素均可治療SAU引起的肺炎，為選出最佳療效的抗生素，研究者將分別含等劑量抗生素A、B、C、D的四張大小相同的濾紙片a、b、c、d置于SAU均勻分布的平板培養(yǎng)基上，在適宜條件下培養(yǎng)48h，結(jié)果如圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．可采用干熱滅菌的方法對(duì)該實(shí)驗(yàn)使用的培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌B．抗生素D治療SAU感染的效果最好C．接種涂布后的培養(yǎng)皿正向放置于37℃的恒溫箱中培養(yǎng)D．濾紙片b周圍抑菌圈中出現(xiàn)一個(gè)菌落，可能是形成該菌落的SAU發(fā)生了基因突變[大題沖關(guān)練]13．國(guó)際上廣泛關(guān)注的新污染物有四大類，一是持久性有機(jī)污染物，二是內(nèi)分泌干擾物，三是抗生素，四是微塑料。微塑料是指直徑小于5mm的塑料顆粒，是造成污染的主要載體。某興趣小組嘗試從土壤中分離能分解微塑料的微生物（如圖所示）。請(qǐng)回答下列問題：（1）若想找到能分解微塑料的微生物，應(yīng)從采集土壤，制備土壤懸浮液，接種到的培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選，這種培養(yǎng)基從功能上劃分屬于培養(yǎng)基。（2）圖示接種方法為。若某同學(xué)制作的三個(gè)平板的菌落數(shù)分別是33、38、31可推測(cè)1g土壤中微塑料分解菌數(shù)為個(gè)，利用該方法得到的結(jié)果可能偏，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。（3）除圖示計(jì)數(shù)法之外，利用也是一種常用的、快速直觀的測(cè)定微生物數(shù)量的方法，該方法需利用特定的或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板。14．解磷菌是一種能將土壤中植物不能利用的磷轉(zhuǎn)化為植物可以利用磷的功能微生物（主要為細(xì)菌），在提高土壤中有效磷含量、促進(jìn)磷循環(huán)方面發(fā)揮著重要作用。解磷菌能分解含磷化合物使得菌落周圍出現(xiàn)透明圈。下圖為從某植物根際土壤中篩選出高效解磷菌的部分流程示意圖，步驟Ⅰ表示將1g土壤加入到100mL滅過菌的PVK培養(yǎng)基培養(yǎng)。36h后，取10mL培養(yǎng)液接種于100mLPVK培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)；連續(xù)培養(yǎng)3次后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)步驟Ⅱ－Ⅳ（B、C中培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分與A相同）。請(qǐng)據(jù)圖回答：（1）用于培養(yǎng)解磷菌的培養(yǎng)基在接種前需要通過法進(jìn)行滅菌。從成分上看，與A相比，B培養(yǎng)基中多了（填物質(zhì)名稱）。為篩選解磷菌，A培養(yǎng)基的碳源最合適的是（填寫字母）。A．葡萄糖B．難溶性磷酸鹽C．二氧化碳D．碳酸鹽（2）操作Ⅰ的目的是，在操作Ⅱ、Ⅲ中，采用的接種方法分別是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。（3）為了盡快觀察到解磷菌培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)將接種了樣品的平板倒置于中培養(yǎng)，并同時(shí)在另一平板上接種無菌水作為對(duì)照進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。（4）在固體培養(yǎng)基中分離培養(yǎng)出解磷菌后，需通過測(cè)量直徑，比較它們的比值以確定其解磷能力從而篩選出目標(biāo)菌株。（5）為進(jìn)一步測(cè)定初步篩選的三種菌株實(shí)際溶解磷的能力，研究人員將它們接種到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，并在37、200r·min－1搖床培養(yǎng)，定期?。ㄌ顚憽吧锨逡骸被颉俺恋怼保?，測(cè)定可溶性磷含量，得到如圖所示曲線。用搖床進(jìn)行培養(yǎng)的好處：、。結(jié)果表明最優(yōu)良的解磷菌株是。15．[2024·九省聯(lián)考·江西]蒽是石油化工領(lǐng)域常見的一種多環(huán)芳烴化合物，對(duì)生物有毒且難以降解，會(huì)帶來嚴(yán)重的環(huán)境問題。研究人員成功地從環(huán)境樣品中分離得到能降解蒽的菌株A和B?；卮鹣铝袉栴}：（1）用于分離菌株A和B的固體培養(yǎng)基含有（NH4）3SO4、MgSO4、CaCl2、NaH2PO4、K2HPO4、NaCl、FeSO4、H2O、瓊脂、蒽等成分。其中為細(xì)菌生長(zhǎng)提供碳源的成分是；該碳源在菌株A和B內(nèi)的代謝產(chǎn)物可以參與合成（答出2種即可）等生物大分子。（2）為鑒定菌株A和B，研究人員提取了菌株A和B的基因組DNA，并用PCR擴(kuò)增16SrRNA基因。為了驗(yàn)證提取基因組DNA是否成功，采用二苯胺試劑鑒定，其原理是