分光光度法測(cè)定水中微量鐵

分光光度法測(cè)定水中微量鐵黃菊分光光度法測(cè)定水中微量鐵1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?實(shí)驗(yàn)原理3儀器和試劑4實(shí)驗(yàn)步驟5思考與討論1實(shí)驗(yàn)?zāi)康?）掌握鄰二氮菲分光光度法測(cè)定微量鐵的方法原理。2）掌握分光光度計(jì)的儀器構(gòu)造和使用方法。

朗伯-比耳定律:A=lgIi/It=-lgT=bc

A--吸光度,表征物質(zhì)對(duì)光吸收程度的量Ii--入射光強(qiáng)It--透射光強(qiáng)T--透過(guò)率

--摩爾吸光系數(shù)b--液層厚度（光程長(zhǎng)度）c--被測(cè)物濃度

2實(shí)驗(yàn)原理

根據(jù)朗伯-比耳定律：A=εbc，當(dāng)入射光波長(zhǎng)λ及光程b一定時(shí)，在一定濃度范圍內(nèi)，有色物質(zhì)的吸光度A與該物質(zhì)的濃度c成正比。只要繪出A-c標(biāo)準(zhǔn)曲線，測(cè)出試液的吸光度，就可以由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得對(duì)應(yīng)的濃度值，即未知樣中鐵的含量。

2實(shí)驗(yàn)原理在pH=2～9的溶液中，F(xiàn)e2+與鄰二氮菲(phen)生成穩(wěn)定的桔紅色配合物Fe(phen)32+。此配合物的lgK穩(wěn)=21.3，摩爾吸光系數(shù)ε510=1.1×104L·mol-1·cm-1，而Fe3+能與鄰二氮菲生成3∶1配合物，呈淡藍(lán)色，lgK穩(wěn)=14.1。所以在加入顯色劑之前，應(yīng)用鹽酸羥胺(NH2OH·HCl)將Fe3+還原為Fe2+，其反應(yīng)式如下：2Fe3++2NH2OH·HCl→2Fe2++N2+2H2O+4H++2Cl-

測(cè)定時(shí)控制溶液的酸度為pH≈5較為適宜。酸度太高，反應(yīng)進(jìn)行較慢；酸度太低則水解，影響顯色。

3儀器和試劑儀器規(guī)格/型號(hào)分光光度計(jì)T6新世紀(jì)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(含比色皿)容量瓶50、100、1000mL等移液管1、2、5、10mL等1）主要儀器2）主要試劑3儀器和試劑試劑配制濃度鐵標(biāo)準(zhǔn)液10ug/mL鹽酸羥胺10%鄰二氮菲0.15%乙酸鈉1mol/L光源吸收池檢測(cè)器單色器數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)1)可見(jiàn)光區(qū)用玻璃吸收池（比色皿）；2)吸收池用于盛放分析試樣，使用前用試液潤(rùn)洗2-3次；使用完畢后，立即用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗干凈，并擦凈水漬；比色皿透光面切勿直接用手接觸，保持潔凈，先用濾紙吸干、再用擦鏡紙擦凈外部液體；儀器基本結(jié)構(gòu)和使用注意事項(xiàng)（1）配制溶液4實(shí)驗(yàn)步驟序號(hào)鐵標(biāo)準(zhǔn)液（mL）鹽酸羥胺（mL）鄰二氮菲（mL）乙酸鈉（mL）0012512125241253612548125510125標(biāo)準(zhǔn)曲線作圖區(qū)標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定區(qū)未知濃度試樣測(cè)定區(qū)標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)區(qū)樣品池控制區(qū)（2）吸收曲線的繪制和測(cè)量波長(zhǎng)的選擇存在一個(gè)最大的吸收峰，該處吸光度為0.507，對(duì)應(yīng)的吸收波長(zhǎng)為510nm。（3）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制用1cm比色皿，以試劑空白為參比溶液，在選定波長(zhǎng)（510nm）下，測(cè)定1-5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度。以鐵標(biāo)準(zhǔn)液濃度c為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，繪制A-c標(biāo)準(zhǔn)曲線。4實(shí)驗(yàn)步驟（4）未知試樣中鐵含量的測(cè)定在與標(biāo)準(zhǔn)溶液相同的條件下測(cè)定未知試樣的吸光度，根據(jù)吸光度A值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得未知液中鐵的濃度。4實(shí)驗(yàn)