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白紋伊蚊規(guī)模化輻照雄性不育技術(shù)要求發(fā)布IT/CIRA58—2023 Ⅲ1范圍 12規(guī)范性引用文件 1 14輻照前要求 25輻照處理要求 26輻照不育關(guān)鍵指標(biāo) 27輻照管理 2附錄A(資料性)輻照不育關(guān)鍵指標(biāo)的計(jì)算方法 4Ⅲ1T/CIRA58—2023白紋伊蚊規(guī)?;椪招坌圆挥夹g(shù)要求本文件規(guī)定了X射線對(duì)白紋伊蚊(Aedesalbopictus)雄蚊進(jìn)行規(guī)?;椪詹挥募夹g(shù)要求,包括輻本文件適用于對(duì)規(guī)模化飼養(yǎng)的白紋伊蚊雄蚊進(jìn)行輻照不育,對(duì)規(guī)模化飼養(yǎng)的埃及伊蚊(Aedesae-gypti)、致倦庫蚊(Culexquinquefasciatus)和斯氏按蚊(Anophelesstephensi)等雄蚊進(jìn)行輻照不育,參照使用。2規(guī)范性引用文件本文件沒有規(guī)范性引用文件。3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.2通過整個(gè)地區(qū)飽和式釋放不育昆蟲來減少田間同一種昆蟲種群密度的有害生物防制方法。規(guī)?;曫B(yǎng)mass-rearing3.7在工廠條件下按照蚊蟲的生長發(fā)育過程來大規(guī)模飼養(yǎng)蚊蟲。為達(dá)到滅活病毒目的所需要的最低吸收劑量,即工藝劑量下限值。誘導(dǎo)絕育強(qiáng)度inducedsterility正常雌蚊與絕育雄蚊交配后,抑制雌蚊產(chǎn)下的蚊卵成功孵化變成幼蟲的效率。輻照誘導(dǎo)雄蚊≥99%絕育強(qiáng)度的最低有效劑量。經(jīng)輻照處理而不能繁殖的雄性成蚊。23.8競爭交配力指數(shù)malematingcompetitivenessindex輻照絕育雄蚊與正常雄蚊競爭交配正常雌蚊的能力。4輻照前要求4.1.1取2日齡~3日齡的白紋伊蚊雄蚊置于溫度(10±2)℃、相對(duì)濕度70%±10%的冷庫中,待雄蚊凍麻后,收集、稱重并分裝到培養(yǎng)皿中。直徑為100mm的培養(yǎng)皿約放4.8g~6.0g(約4000只~5000只)雄蚊。5輻照處理要求5.2設(shè)定最低有效輻照不育劑量為(60±2)Gy,輻照處理的劑量率應(yīng)≥7.0Gy/min。該劑量通過兩次輻照累積獲得,單次輻照時(shí)間的設(shè)置以達(dá)到最低有效輻照不育劑量的50%為宜。5.3將裝有雄蚊的輻照杯從冷庫中取出,每2個(gè)輻照杯疊放固定,置于輻照腔體內(nèi)的旋轉(zhuǎn)臺(tái)上。首次6輻照不育關(guān)鍵指標(biāo)輻照雄蚊的飛行率應(yīng)≥85%。計(jì)算方法見附錄A的公式(A.1)。輻照雄蚊誘導(dǎo)絕育強(qiáng)度應(yīng)≥99%。計(jì)算方法見公式(A.2)和公式(A.3)。輻照雄蚊的競爭交配力指數(shù)應(yīng)≥0.7。計(jì)算方法見公式(A.2)和公式(A.4)。7輻照管理37.2每批次的包裝應(yīng)貼上含有輻照批次、輻照日期、輻照劑量等信息的標(biāo)簽,并保留7.3將包裝好的輻照雄蚊存放在冷庫中,待后續(xù)進(jìn)行野外釋放。7.4從事輻照人員應(yīng)嚴(yán)格遵守工廠輻照管理制度。4T/CIRA58—2023(資料性)輻照不育關(guān)鍵指標(biāo)的計(jì)算方法A.1飛行率隨機(jī)挑選7.3輻照雄蚊,記錄雄蚊總數(shù)N。將雄蚊轉(zhuǎn)移至室溫,立即放在直徑12cm和高度60cm的測試筒底部。約30min,用蓋子蓋住測試筒,記錄仍停留在測試筒的雄蚊數(shù)量n。輻照雄蚊飛行率Fb(%),按公式(A.1)計(jì)算?!?A.1)A.2誘導(dǎo)絕育強(qiáng)度隨機(jī)挑選7.3輻照雄蚊100只,轉(zhuǎn)移至室溫并置于30cm×30cm×30cm的籠子,再放入100只未經(jīng)交配、未經(jīng)輻照的1日齡~2日齡雌蚊。同時(shí)設(shè)定對(duì)照組100只未經(jīng)輻照雄蚊與100只未經(jīng)交配、未經(jīng)輻照雌蚊。所有籠子中成蚊飼喂10%的葡萄糖溶液。6d~7d后,給雌蚊提供血餐。喂血結(jié)束2d后,將帶有濕潤濾紙的塑料杯放入籠中,收集蚊卵2d~3d。蚊卵取出后,重復(fù)1次喂血及收集蚊卵。取出的蚊卵干燥7d,然后孵化1d。分別記錄兩次蚊卵總數(shù)N?,兩次孵化幼蟲數(shù)n?。蚊卵的孵化率H(%),按公式(A.2)計(jì)算。將雌蚊與未輻照雄蚊交配后產(chǎn)下蚊卵的孵化率記為H?,與絕育雄蚊交配后產(chǎn)下蚊卵的孵化率記為Hs。誘導(dǎo)絕育強(qiáng)度IS(%),按公式(A.3)計(jì)算。A.3競爭交配力指數(shù)隨機(jī)挑選7.3輻照雄蚊30只,轉(zhuǎn)移至室溫并置于30cm×30cm×30cm的籠子,然后再按照1:1比例放入30只未經(jīng)輻照雄蚊。約3h~4h后,再放入30只未經(jīng)交配、未經(jīng)輻照的1日齡~2日齡雌蚊,記為競爭交配組(30只輻照雄蚊:30只未經(jīng)輻照雄蚊:30只未經(jīng)交配、未經(jīng)輻照雌蚊=1:1:1)。按照相似的方法,設(shè)定可育交配對(duì)照組(30只未經(jīng)輻照雄蚊:30只未經(jīng)交配、未經(jīng)輻照雌蚊=1:1)、不育交配對(duì)照組(30只經(jīng)輻照雄蚊:30只未經(jīng)交配、未經(jīng)輻照雌蚊=1:1)。所有籠子中成蚊飼喂10%的葡萄糖溶液。6d~7d后,給雌蚊提供血餐。喂血結(jié)束2d后,將帶有濕潤濾紙的塑料杯放入籠中,收集蚊卵2d~3d。蚊卵取出后,重復(fù)1次喂血及收集蚊卵。取出的蚊卵干燥7d,然后孵化
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