細(xì)菌藥敏試驗(yàn)及耐藥機(jī)制研究進(jìn)展

細(xì)菌藥敏試驗(yàn)及耐藥機(jī)制研究進(jìn)展細(xì)菌藥敏試驗(yàn)-宏量稀釋法Minimalinhibitoryconcentration(MIC)Referencemethod、Addstandardinoculumtodilutionsofantibiotic、Incubateovernight、MICislowestconcentrationthatinhibitsgrowth(canalsobeperformedbyagardilution)、Interpretation(SorR)isbasedonachievabledruglevels104

cfu4210.50.250.120mg/ml微量液體稀釋法細(xì)菌藥敏試驗(yàn)-E-test法E-testStripscontainingagradientofantibioticareplacedonlawnofbacteriaandincubatedovernight、MICisdeterminedatpointwherezoneofinhibitionintersectsscaleonstrip、bineseaseofKBwithanMICmethod、ParticularlyusefulforS、pneumoniae、二、藥敏試驗(yàn)基本條件(1)對于從糞便中分離得沙門菌和志賀菌屬,常規(guī)僅測試和報(bào)告氨芐西林,一種喹酮類藥和甲氧芐啶/磺胺甲噁唑。此外對于胃腸外分離得沙門菌屬還一定要測試并報(bào)告氯霉素及其某一種Ⅲ代頭孢菌素得結(jié)果。

(2)所有確認(rèn)產(chǎn)ESBLs得菌株應(yīng)當(dāng)報(bào)告為耐所有青霉素類,頭孢菌素類和氨曲南。(3)出于對流行性,治療及感染控制方面得考慮,應(yīng)該把從尿中分離得所有菌株做ESBLs篩選試驗(yàn)作為一個(gè)基本制度。(4)僅當(dāng)被認(rèn)為與臨床有關(guān)時(shí)(如菌血癥)才進(jìn)行奇異變形桿菌ESBLs篩選試驗(yàn)(5)腸桿菌屬、枸櫞酸桿菌屬和沙雷菌屬可發(fā)展為耐藥。最初分離得敏感菌株在開始治療3~4天內(nèi)可變?yōu)槟退?因此對重復(fù)分離菌株應(yīng)重新進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。。用紙片擴(kuò)散法能可靠地測定分離于囊性纖維化病人得銅綠假單菌得敏感性,但在作為敏感結(jié)果報(bào)告前,應(yīng)將孵育時(shí)間延長至24小時(shí)。12大家應(yīng)該也有點(diǎn)累了，稍作休息大家有疑問的，可以詢問和交流(1)對于腸球菌屬,頭孢菌素,氨基糖苷類(篩選高水平耐藥除外),克林霉素和甲氧芐啶-磺胺甲噁唑可以在體外顯示活性但臨床上無效,因此這些菌株不應(yīng)該報(bào)告為敏感。(2)腸球菌心內(nèi)膜炎要求大劑量青霉素或氨芐西林,或萬古霉素或替考拉寧聯(lián)合慶大霉素或鏈霉素以增加殺菌作用。(3)慶大霉素和鏈霉素篩選試驗(yàn),能夠預(yù)測氨芐西林、青霉素或萬古霉素與一種氨基糖苷類抗生素之間得協(xié)同效應(yīng)。其她得氨基糖苷類不需進(jìn)行測試,因?yàn)樗齻儗δc球菌得活性并不優(yōu)于慶大霉素和鏈霉素。(4)對血和腦脊液分離株推薦用頭孢硝噻吩β-內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)。β-內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)陽性提示青霉素耐藥,同時(shí)也對酰胺基,羧基和脲基青霉素耐藥。(1)肺炎鏈球菌對苯唑西林得抑菌環(huán)≥20mm得菌株對青霉素敏感(MIC≤0、06μg/ml)

(2)苯唑西林得抑菌環(huán)≤19mm得菌株應(yīng)當(dāng)測定青霉素、美洛培南和頭孢噻肟或頭孢曲松得MICs

三、耐藥表型得檢驗(yàn)1、肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希菌和奇異變形桿菌中ESBLs檢測得篩選與確證試驗(yàn)

紙片法:初篩和確證液體稀釋法:初篩和確證

3、D試驗(yàn)-克林霉素誘導(dǎo)耐藥試驗(yàn)(1)機(jī)制:對大環(huán)內(nèi)酯耐藥得葡萄球菌可能有天然或誘導(dǎo)性對克林霉素得耐藥[通過erm基因編碼得23SrRNA甲基化也稱為MLSB(大環(huán)內(nèi)酯、林可和B型鏈陽霉素)耐藥],或只對大環(huán)內(nèi)酯類耐藥(由msrA基因編碼得外排機(jī)制)。(2)方法:MHA或血平板,紙片相鄰試驗(yàn),對于葡萄球菌,距紅霉素紙片(15μg/片)邊緣15~26mm處放置克林霉素紙片(2μg/片)來進(jìn)行檢測;對于β-溶血鏈球菌,將克林霉素紙片(2μg/片)和紅霉素紙片(15μg/片)貼在相鄰得位置,紙片邊緣相距12mm。(3)結(jié)果判讀:35℃空氣,16-20小時(shí)孵育后,克林霉素抑菌環(huán)不出現(xiàn)“截平”現(xiàn)象,應(yīng)報(bào)告分離株對其敏感。鄰近紅霉素紙片側(cè)克林霉素抑菌環(huán)出現(xiàn)“截平”現(xiàn)象(稱為“D”抑菌環(huán)),