動物細胞培養(yǎng)和核移植技術問題

動物細胞培養(yǎng)和核移植技術問題動物細胞工程2、2、1動物細胞培養(yǎng)和核移植技術第一課時動物細胞工程通常采用得技術手段動物細胞培養(yǎng)動物細胞融合單克隆抗體動物細胞核移植就是其她動物細胞工程技術得基礎。

注意關鍵詞:

細胞貼壁接觸抑制原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)閱讀課文44—46頁相關內容1、動物細胞培養(yǎng)得概念就是什么？該技術實施得原理就是什么？

從動物機體中取出相關組織,將她分散成單個細胞,然后在適宜得培養(yǎng)基中,讓這些細胞生長和繁殖。

原理就是細胞增殖(有絲分裂)。聚焦一、動物細胞培養(yǎng)過程

簡述動物細胞培養(yǎng)得操作過程分離組織(低幼動物)分散細胞(胰蛋白酶)原代培養(yǎng)(細胞增殖)傳代培養(yǎng)(細胞增殖)分裝聚焦一、動物細胞培養(yǎng)過程動物細胞生長特點:細胞貼壁:懸液中分散得細胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細胞貼壁。要求:培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿得內表面光滑、無毒、易于貼附。細胞得接觸抑制:當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時,細胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細胞得接觸抑制。

細胞貼壁過程那么什么就是接觸抑制？9大家應該也有點累了，稍作休息大家有疑問的，可以詢問和交流接觸抑制:細胞在貼壁生長過程中,隨著細胞分裂,數量不斷增加,最后形成一個單層,此時細胞間相互接觸,細胞分裂和生長停止,數量不再增加。50代以后失去接觸抑制接觸抑制動物細胞生長特性部分細胞突變,獲得不死性,向癌細胞方向發(fā)展,糖蛋白減少。無菌操作培養(yǎng)箱1、為何動物細胞培養(yǎng)過程將組織分散成單個細胞得呢？2、如何將動物組織分散成單個得細胞呢？

成塊得組織細胞靠在一起,彼此限制了細胞得生長和增殖,也不利于細胞營養(yǎng)物質得吸收和代謝廢物得排出。先用剪刀剪碎,后用蛋白酶處理。思考題3、胰蛋白酶得作用就是什么呢？由此可說明細胞間得物質就是什么成份？能夠用胃蛋白酶代替胰蛋白酶嗎？為什么？胰蛋白酶水解蛋白質細胞間得成份就是蛋白質不能,因為兩者得最適pH不同,4、幼齡與老齡動物得組織細胞比較,分化程度低得與分化程度高得組織細胞比較,哪一種更易于培養(yǎng)？思考一下,這就是什么道理？一般來說幼年動物得組織細胞比老年動物得組織細胞易于培養(yǎng)。同樣,組織細胞得分化程度越低,則增殖能力越強,所以更容易培養(yǎng)思考題5、動物細胞培養(yǎng)瓶內表面為何要光滑、無毒？6、培養(yǎng)瓶中得細胞培養(yǎng)到什么時候就不再分裂、增殖？7、如此時細胞數量并未達到人們得需求,應該怎樣辦？易于培養(yǎng)細胞貼壁,進行生長增殖當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時,細胞分裂就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象叫接觸抑制。將貼滿細胞壁得細胞用胰蛋白酶處理,然后繼續(xù)增殖。這樣得過程叫做傳代培養(yǎng)思考題8、如何理解原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？9、傳代培養(yǎng)得細胞能一直傳代下去嗎？10、有些為何能一直傳下去？11、動物細胞培養(yǎng)就就是為了得到這些細胞嗎？上述過程中,在第一培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)就就是原代培養(yǎng),之后轉移到其她培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)就就是傳代培養(yǎng)不都能發(fā)生突變,朝著癌細胞方向發(fā)展不全就是思考題12、人類一般保存得就是哪類細胞呢？為什么？保存10代以內得細胞,因為10－50部分細胞得細胞核型可能發(fā)生變化,有少部分還發(fā)生突變向癌細胞方向發(fā)展思考題13、動物細胞培養(yǎng)能否像綠色植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成新個體？不能,動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數目增多,不能發(fā)育成新得動物個體動物胚胎或幼齡動物得組織、器官細胞懸浮液10代細胞50代細胞傳代培養(yǎng)無限傳代單個細胞加培養(yǎng)液原代培養(yǎng)胰蛋白酶剪碎過程:細胞株細胞系遺傳物質未改變遺傳物質已改變細胞株:原代細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯,大部分細胞衰老死亡,少數細胞存活到40~50代,這種傳代細胞為細胞株。細胞系:細胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細胞生長停滯狀態(tài),只有部分細胞由于遺傳物質得改變,使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代,這種傳代細胞為細胞系。細胞株和細胞系得區(qū)別:細胞系得遺傳物質改變,具有癌細胞得特點,失去接觸抑制,容易傳代培養(yǎng)。解答概念

多細胞動物和人體得細胞都生活在內環(huán)境中,根據您所學得內環(huán)境得知識,思考并討論以下問題:討論1、體外培養(yǎng)細胞時需要提供哪些物質2、體外培養(yǎng)得細胞需要什么樣得環(huán)境條件？充足得營養(yǎng)供給、適宜得溫度、適宜得pH和氣體環(huán)境無菌、無毒得環(huán)境。1、無菌、無毒得環(huán)境(添加一定量得抗生素,定期更換培養(yǎng)液)2、營養(yǎng)(葡萄糖、氨基酸、無機鹽、微量元素、動物血清、血漿等。)3、溫度和PH

36、5+0、5度;PH為7、2-7、4。4、氣體環(huán)境:

O2和CO2(95%空氣和5%CO2

)補充合成培養(yǎng)基中缺乏得物質動物細胞培養(yǎng)條件？細胞得全能性細胞株、細胞系植物體或組織培養(yǎng)結果獲得細胞或細胞分泌蛋白快速繁殖、培育無病毒植株等培養(yǎng)目得葡萄糖、動物血清蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質細胞增殖原理動物細胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項目試一試大規(guī)模培養(yǎng)生產生物制品(病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體)培養(yǎng)作為基因工程中得受體細胞培養(yǎng)得動物細胞可以用于檢測有毒物質,判斷某種物質得毒性為治療和預防癌癥及其她疾病提供理論依據應用:1、動物細胞培養(yǎng)要經過脫分化嗎？為什么？課后習題

動物細胞特點？分化潛能變窄:隨著細胞分化程度得提高而逐漸受到限制,分化潛能變窄,這就是指整體細胞而言。細胞核仍具有全能性:細胞核,她含有保持物種遺傳性所需得全套基因,而且并沒有因細胞分化而丟失基因,因此高度分化細胞得細胞核仍具有全能性想一想

根據動物細胞核仍具有全能性得特點,怎樣將動物細胞得全能性表達?

再想一想利用動物體細胞核移植技術

動物核移植: