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高級中學名校試卷PAGEPAGE1江蘇省徐州市睢寧縣2023-2024學年高二下學期期末適應性考試試卷一、單項選擇題:本部分包括14題,每題2分,共計28分。每題只有一個選項最符合題意1.下列關(guān)于細胞中化合物的敘述,正確的是()A.單糖的種類、數(shù)目和排列順序不同導致其構(gòu)成的多糖功能不同B.ATP中磷酸基團均帶負電荷而相互排斥導致特殊化學鍵易斷裂C.醛固酮和抗利尿激素都屬于蛋白質(zhì),都參與調(diào)節(jié)水鹽平衡D.蛋白質(zhì)變性時氨基酸之間的氫鍵、二硫鍵以及肽鍵會遭到破壞〖答案〗B〖祥解〗多糖的單體大多是葡萄糖。蛋白質(zhì)因空間結(jié)構(gòu)被破壞而變性,蛋白質(zhì)變性時,肽鍵一般不會斷裂?!驹斘觥緼、單糖的數(shù)目和連接方式不同導致其構(gòu)成的多糖功能不同,A錯誤;B、ATP中磷酸基團均帶負電荷而相互排斥導致特殊化學鍵易斷裂,ATP中磷酸基團具有較高的轉(zhuǎn)移勢能,B正確;C、醛固酮屬于脂質(zhì),C錯誤;D、蛋白質(zhì)變性時肽鍵未遭到破壞,D錯誤。故選B。2.膠原蛋白是細胞外基質(zhì)的主要成分之一,其非必需氨基酸含量比蛋清蛋白高。下列敘述正確的是()A.膠原蛋白的氮元素主要存在于氨基中B.皮膚表面涂抹的膠原蛋白可被直接吸收C.膠原蛋白的形成與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體有關(guān)D.膠原蛋白比蛋清蛋白的營養(yǎng)價值高〖答案〗C〖祥解〗蛋白質(zhì)是以氨基酸為基本單位構(gòu)成的生物大分子,氨基酸結(jié)構(gòu)特點是至少含有一個氨基和一個羧基,并且都有一個氨基和羧基連接在同一個碳原子上。氨基酸通過脫水縮合反應形成蛋白質(zhì),氨基酸脫水縮合反應時,一個氨基酸的氨基與另一個氨基酸的羧基反應脫去一分子水?!驹斘觥緼、蛋白質(zhì)的氮元素主要存在于肽鍵中,A錯誤;B、膠原蛋白為生物大分子物質(zhì),涂抹于皮膚表面不能被直接吸收,B錯誤;C、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是蛋白質(zhì)的合成、加工場所和運輸通道,高爾基體主要是對來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì)進行加工、分類和包裝,膠原蛋白的形成與核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體有關(guān),C正確;D、由題膠原蛋白非必需氨基酸含量比蛋清蛋白高,而人體需要從食物中獲取必需氨基酸,非必需氨基酸自身可以合成,衡量蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值的高低主要取決于所含必需氨基酸的種類、數(shù)量及組成比例,因此并不能說明膠原蛋白比蛋清蛋白的營養(yǎng)價值高,D錯誤。故選C。3.完整的核糖體由大、小兩個亞基組成。下圖為真核細胞核糖體大、小亞基的合成、裝配及運輸過程示意圖,相關(guān)敘述錯誤的是()A.核仁是合成rRNA和核糖體蛋白的主要場所B.核糖體的合成同時受rDNA和核仁外DNA的控制C.核糖體大、小亞基裝配成核糖體是在細胞質(zhì)中完成D.真核細胞的遺傳信息主要儲存在核仁外的DNA分子中〖答案〗A〖祥解〗分析題圖可知,圖示為核糖體的合成過程,位于核仁的rDNA轉(zhuǎn)錄形成rRNA的前體物質(zhì),核糖體蛋白從核孔進入細胞核,與rRNA前體物質(zhì)結(jié)合,一部分生成核糖體小亞基,,另一部分與核仁外DNA轉(zhuǎn)錄形成的SSrRNA結(jié)合生成核糖體大亞基,核糖體大、小亞基均從核孔離開進入細胞質(zhì)?!驹斘觥緼、核仁是合成rRNA的主要場所,核糖體蛋白質(zhì)在細胞質(zhì)中合成進入細胞核,A錯誤;B、核糖體的合成需要rDNA轉(zhuǎn)錄的rRNA與核仁外DNA轉(zhuǎn)錄的SSrRNA,故其合成同時受rDNA和核仁外DNA控制,B正確;C、核糖體大、小亞基各自從核孔離開細胞核,可推測其裝配成核糖體是在細胞質(zhì)中完成的,C正確;D、真核細胞的遺傳信息主要儲存在核仁外的DNA分子中,D正確;故選A。4.蛋白質(zhì)分選信號可以引導蛋白質(zhì)從細胞質(zhì)基質(zhì)進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、葉綠體,也可以引導蛋白質(zhì)從細胞核進入細胞質(zhì)或從高爾基體進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等。組成這種分選信號的氨基酸有時呈線性排列,有時折疊成信號斑,如引導蛋白質(zhì)定向運輸?shù)饺苊阁w的信號斑,是溶酶體酸性水解酶被高爾基體選擇性加工的標識。下列敘述錯誤的是()A.線粒體、葉綠體內(nèi)的蛋白質(zhì)都是通過蛋白質(zhì)分選機制進入的B.蛋白質(zhì)分選信號有可能引導蛋白質(zhì)從細胞質(zhì)進入細胞核C.在某些細胞器或細胞的某種結(jié)構(gòu)上可能存在蛋白質(zhì)分選的受體D.通過蛋白質(zhì)是否攜有分選信號以及其種類,可將蛋白質(zhì)運送到細胞不同部位〖答案〗A〖祥解〗分泌蛋白的合成與分泌過程大致是:首先在游離的核糖體中以氨基酸為原料開始多肽鏈的合成,當合成了一段肽鏈后,這段肽鏈會與核糖體一起轉(zhuǎn)移到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)其合成過程,并且邊合成邊轉(zhuǎn)移到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi),再經(jīng)過加工、折疊,形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜鼓出形成囊泡,包裹著蛋白質(zhì)離開內(nèi)質(zhì)網(wǎng),到達高爾基體,與高爾基體膜融合,囊泡膜成為高爾基體膜的一部分。高爾基體對蛋白質(zhì)做進一步的修飾加工,然后由高爾基體膜形成包裹著蛋白質(zhì)的囊泡,囊泡轉(zhuǎn)運到細胞膜,與細胞膜融合,將蛋白質(zhì)分泌到細胞外。在分泌蛋白的合成、加工、運輸?shù)倪^程中,需要消耗能量,這些能量主要來自線粒體?!驹斘觥緼、存在于線粒體、葉綠體內(nèi)的蛋白質(zhì),有些是自身含有的核糖體合成的,并不是通過分選進入的,A錯誤;B、細胞核不是蛋白質(zhì)的合成場所,細胞核內(nèi)有蛋白質(zhì),由此推測蛋白質(zhì)分選信號也有可能引導蛋白質(zhì)從細胞質(zhì)進入細胞核,B正確;C、信號分子要與匹配的受體結(jié)合才能發(fā)揮作用,故細胞內(nèi)的某些細胞器或結(jié)構(gòu)上可能存在著蛋白質(zhì)分選的受體,C正確;D、通過蛋白質(zhì)是否攜有分選信號以及其種類,蛋白質(zhì)分選有利于蛋白質(zhì)的正確定位,進而發(fā)揮其相應的功能,D正確。故選A。5.線粒體外膜分布著孔蛋白構(gòu)成的通道蛋白,丙酮酸可以經(jīng)此通道通過。而線粒體內(nèi)膜通透性低,丙酮酸需通過與H+協(xié)同運輸?shù)姆绞接赡らg隙進入線粒體基質(zhì),如下圖所示。下列敘述錯誤的是()A.線粒體內(nèi)膜的蛋白質(zhì)/脂質(zhì)的值大于線粒體外膜B.丙酮酸穿過線粒體外膜的方式為協(xié)助擴散C.H+通過質(zhì)子泵由線粒體基質(zhì)進入膜間隙的方式為主動運輸D.加入細胞呼吸抑制劑不會改變線粒體內(nèi)膜對丙酮酸的運輸速率〖答案〗D〖祥解〗物質(zhì)運輸方式:(1)被動運輸:分為自由擴散和協(xié)助擴散:①自由擴散:順相對含量梯度運輸;不需要載體;不需要消耗能量。②協(xié)助擴散:順相對含量梯度運輸;需要載體參與;不需要消耗能量。(2)主動運輸:能逆相對含量梯度運輸;需要載體;需要消耗能量。(3)胞吞胞吐:物質(zhì)以囊泡包裹的形式通過細胞膜,從細胞外進或出細胞內(nèi)的過程?!驹斘觥緼、線粒體內(nèi)膜是有氧呼吸第三階段的場所,其上附著有多種酶,因此線粒體內(nèi)膜的蛋白質(zhì)/脂質(zhì)的比值大于線粒體外膜,A正確;B、丙酮酸借助孔蛋白通過線粒體外膜,不需要消耗能量,因此為協(xié)助擴散,B正確;C、H+(質(zhì)子)通過質(zhì)子泵由線粒體基質(zhì)進入膜間隙是逆濃度梯度,且需要載體蛋白,所以運輸方式為主動運輸,C正確;D、細胞呼吸抑制劑會抑制細胞呼吸,阻礙供能,使線粒體內(nèi)膜對丙酮酸的運輸速率降低,丙酮酸的運輸不直接消耗呼吸生成的ATP,ATP用于氫離子的主動運輸,形成濃度差,這個濃度差影響丙酮酸的運輸。D錯誤。故選D。6.下圖表示用馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基對酵母菌純培養(yǎng)的結(jié)果,有關(guān)敘述正確的是()A.培養(yǎng)基的制備流程為:計算→稱量→溶化→定容→滅菌→調(diào)pH→倒平板B.用高壓蒸汽滅菌法滅菌結(jié)束后,待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右開始倒平板C.用平板劃線法接種可獲得圖示培養(yǎng)結(jié)果,接種過程中接種環(huán)需要灼燒3次D.用液體培養(yǎng)基能提高目的菌對營養(yǎng)物質(zhì)的利用效率以及分離的成功率〖答案〗B〖祥解〗微生物常見的接種的方法:①平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板,接種,劃線,在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分,微生物往往連在一起生長,隨著線的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后,均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?!驹斘觥緼、培養(yǎng)基配制的基本流程為:計算→稱量→溶化(包括瓊脂)→調(diào)節(jié)pH→分裝(定容)→滅菌→倒平板→(冷卻后)倒置平板,即應選調(diào)pH后再滅菌,A錯誤;B、用高壓蒸汽滅菌法滅菌結(jié)束后,待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右開始倒平板操作,B正確;C、據(jù)圖可知,要獲得圖示培養(yǎng)結(jié)果,需要用平板劃線法進行接種,劃線區(qū)域有三個,因此接種過程中接種環(huán)需要灼燒4次,C錯誤;D、用液體培養(yǎng)基能提高目的菌對營養(yǎng)物質(zhì)的利用效率,但不能分離出目的菌,D錯誤。故選B。7.某科學小組探索長壽花組織培養(yǎng)過程中外植體的消毒條件,實驗結(jié)果如下表。下列分析錯誤的是()次氯酸鈉處理時間(min)81012酒精處理時間(min)203040203040203040污染率(%)25.621.113.322.216.712.22017.88.9褐化率(%)008.905.614.47.816.716.7注:褐化是指培養(yǎng)材料在組培過程中向培養(yǎng)基中釋放褐色物質(zhì),并變褐死亡的現(xiàn)象。A.消毒處理時間越長,組織培養(yǎng)成功率越高B.消毒處理時間越長,外植體的污染率越低C.誘導培養(yǎng)外植體脫分化為愈傷組織的過程中一般不需要光照D.組織培養(yǎng)過程中提高生長素與細胞分裂素的比例有助于生根〖答案〗A〖祥解〗表格分析:本實驗的自變量為次氯酸鈉處理時間和酒精處理時間,因變量為污染率和褐化率?!驹斘觥緼、由表格信息可知,消毒處理時間越長褐化率越高,死亡率越高,組織培養(yǎng)成功率越低,A錯誤;B、表中數(shù)據(jù)顯示消毒處理時間越長,外植體的污染率越低,B正確;C、誘導愈傷組織形成過程中一般不需要光照,因為光可以誘導產(chǎn)生微管組織,不利于愈傷組織形成,C正確;D、生長素和細胞分裂素的比值大時有利于根的形成,因此提高生長素與細胞分裂素的比例有助于生根,D正確。故選A。8.灌流式培養(yǎng)是在細胞培養(yǎng)管內(nèi),一邊不斷注入新鮮培養(yǎng)基,一邊將培養(yǎng)液的上清液不斷移出。關(guān)于灌流式培養(yǎng)的敘述正確的是()A.灌流速率越高,營養(yǎng)物質(zhì)利用越充分B.連續(xù)灌流系統(tǒng)使細胞穩(wěn)定處在較好的營養(yǎng)環(huán)境中,有害代謝廢物濃度較低C.制備灌流式培養(yǎng)所需的培養(yǎng)基不需要考慮培養(yǎng)基的滲透壓D.向培養(yǎng)管注入的新鮮培養(yǎng)基中補充動物血清是為了防止雜菌污染〖答案〗B〖祥解〗動物細胞培養(yǎng):(1)概念:動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細胞生長和繁殖。(2)原理:細胞增殖。(3)動物細胞培養(yǎng)的流程:取動物組織塊(動物胚胎或幼齡動物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。【詳析】A、過高的灌流速率,都會導致培養(yǎng)的細胞沒有及時利用營養(yǎng)物質(zhì),而使營養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用,A錯誤;B、連續(xù)灌流系統(tǒng)一邊不斷注入新鮮培養(yǎng)基,一邊將培養(yǎng)液的上清液不斷移出,使細胞穩(wěn)定的處在較好的營養(yǎng)環(huán)境中,有害代謝廢物濃度較低,B正確;C、配制灌流式培養(yǎng)所需培養(yǎng)基時應考慮細胞生存的液體環(huán)境的滲透壓,以防止細胞吸收漲破和失水皺縮,C錯誤;D、生物反應器中加入血清是為了提供動物細胞培養(yǎng)所需要的營養(yǎng)物質(zhì)和某種生長因子,D錯誤。故選B。9.下列有關(guān)哺乳動物受精過程和胚胎早期發(fā)育的敘述,選項中正確的有幾項()①動物排出的卵子成熟程度不同,但都需要到MII期時才能受精②自然情況下,在雌性動物的子宮內(nèi)精子進入卵細胞完成受精過程③獲能的精子與卵細胞相遇時,會引起透明帶反應和卵細胞膜反應④受精卵在輸卵管內(nèi)進行卵裂時,胚胎總體積并不增加,細胞數(shù)量增加⑤原腸胚時期三個胚層的形成是由遺傳物質(zhì)改變引起的A.1項 B.2項 C.3項 D.4項〖答案〗C〖祥解〗受精卵形成后即在輸卵管內(nèi)進行有絲分裂,開始發(fā)育。胚胎發(fā)育早期,有一段時間是在透明帶內(nèi)進行分裂,細胞數(shù)量不斷增加,但胚胎總體積并不增加,這種受精卵的早期分裂稱為卵裂。根據(jù)胚胎形態(tài)的變化,可將早期發(fā)育的胚胎分為以下幾個階段:桑葚胚、囊胚、原腸胚?!驹斘觥竣賱游锱懦龅穆炎映墒斐潭炔煌夹枰組II期時才具備與精子受精的能力,①正確;②自然情況下,在雌性動物的輸卵管內(nèi)精子進入卵細胞完成受精過程,②錯誤;③獲能精子與卵細胞相遇時,會引起透明帶反應和卵細胞膜反應,阻止多精入卵,③正確;④受精卵在輸卵管內(nèi)進行卵裂時,胚胎總體積并不增加,細胞數(shù)量增加,④正確;⑤原腸胚時期三個胚層的形成是基因選擇性表達的結(jié)果,⑤錯誤。綜上所述,①③④正確,有三項是正確的,所以C正確,ABD錯誤。故選C。10.下圖表示“DNA的粗提取與鑒定”實驗中的兩個操作步驟,下列敘述錯誤的是()A.可以用菜花、洋蔥、豬肝等作為實驗材料粗提取DNAB.圖中的絲狀物是粗提取的DNA,溶液b是2mol/L的NaCl溶液C.圖l操作的原理是DNA能溶于酒精,而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不溶于酒精D.圖2所示實驗的結(jié)果是試管1不變藍,試管2變藍色〖答案〗C〖祥解〗DNA的溶解性:(1)DNA和蛋白質(zhì)等其它成分在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同;(2)DNA不溶于酒精溶液,但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA和蛋白質(zhì)進一步分離?!驹斘觥緼、菜花、洋蔥、豬肝等細胞富含DNA,可以作為實驗材料粗提取DNA,A正確;B、DNA不溶于酒精溶液,但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精,所以圖1中溶液a為酒精溶液,其中用玻璃棒卷起的絲狀物為粗提取的DNA,DNA在2mol/L的NaCl溶液中溶解度較大,可用二苯胺沸水浴鑒定DNA,將絲狀物DNA溶解于2mol/L的NaCl溶液,故溶液b是2mol/L的NaCl溶液,B正確;C、DNA不溶于酒精溶液,但是細胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精,利用這一原理,可以將DNA和蛋白質(zhì)進一步分離,C錯誤;D、試管2將絲狀物DNA溶解于2mol/L的NaCl溶液,加入二苯胺試劑,沸水浴冷卻后呈藍色,因此圖2所示實驗的結(jié)果是試管1不變藍,試管2變藍色,D正確。故選C。11.下圖是PCR擴增目的基因時的參數(shù)設(shè)定,圖中線上、線下分別為溫度和時間設(shè)定。下列敘述錯誤的是()A.步驟2的溫度及時間設(shè)定主要保障模板DNA的完全解聚B.步驟3的溫度及時間設(shè)定主要依據(jù)引物的長度及G、C含量C.步驟4延伸時間的設(shè)定主要依據(jù)目的基因的堿基數(shù)目D.步驟5除設(shè)定循環(huán)次數(shù)(25次)外,還應將“GOTO”設(shè)定為步驟3〖答案〗D〖祥解〗PCR原理:在高溫的作用下,打開DNA雙鏈,每條DNA單鏈作為母鏈,以4種游離脫氧核苷酸為原料,合成子鏈,在引物作用下,DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈,即DNA的合成方向是從子鏈的5'端向3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA的復制過程。DNA的復制需要引物,其主要原因是DNA聚合酶只能從3'端延伸DNA鏈。PCR反應過程是:變性→復性→延伸?!驹斘觥緼、步驟2是變性過程,是在高溫條件下使DNA分子解旋的過程,因此步驟2的溫度及時間設(shè)定主要保障模板DNA的完全解聚,A正確;B、步驟3是復性過程,一般情況下,引物的長度越長,G和C比例越高,則復性步驟中的復性溫度設(shè)定就越高,B正確;C、步驟4是延伸過程,時長的設(shè)置依據(jù)目的基因的長度,即主要依據(jù)目的基因的堿基數(shù)目,C正確;D、“GOTO”是設(shè)置返回的步驟序號,參數(shù)應設(shè)置為步驟“2”,D錯誤。故選D。12.鹽堿地中過量的鈉鹽會對水稻的生存造成威脅,由我國農(nóng)業(yè)科學家陳日勝培育的“海稻86”具有良好的抗鹽堿能力。如圖為“海稻86”抗鹽堿相關(guān)的生理過程示意圖,相關(guān)說法錯誤的是()A.水分子主要是以圖中方式②進入根細胞的,這與細胞膜的結(jié)構(gòu)有關(guān)B.“海稻86”將根細胞細胞質(zhì)基質(zhì)中的Na+轉(zhuǎn)運儲存在液泡中,有利于根系從外界吸水C.SOS1和NHX對Na+的轉(zhuǎn)運速率不受細胞呼吸強度影響D.根細胞將Na+和H+排出細胞外的運輸方式相同〖答案〗C〖祥解〗不同物質(zhì)跨膜運輸?shù)姆绞讲煌?,包括主動運輸、被動運輸和胞吞、胞吐,其中被動運輸包括協(xié)助擴散和自由擴散。(1)主動運輸?shù)奶攸c:①消耗能量(來自于ATP水解或離子電化學勢能),②需要轉(zhuǎn)運蛋白協(xié)助,③逆濃度梯度進行。(2)協(xié)助擴散的特點:①不消耗能量,②需要轉(zhuǎn)運蛋白協(xié)助,③順濃度梯度進行。(3)自由擴散的特點:①不消耗能量,②不需要轉(zhuǎn)運蛋白協(xié)助,③順濃度梯度進行?!驹斘觥緼、水進入海水稻的運輸方式有自由擴散(方式①)和協(xié)助擴散(方式②)兩種,水更多的是以方式②進入根細胞的,這與細胞膜上的水通道蛋白有關(guān),A正確;B、海水稻通過液泡吸收Na?是從低濃度到高濃度,為主動運輸,導致細胞液濃度增大,有利于根細胞吸水,B正確;C、SOS1將Na+由細胞質(zhì)基質(zhì)轉(zhuǎn)運到細胞外,NHX將Na+由細胞質(zhì)基質(zhì)轉(zhuǎn)運到液泡的細胞液中,這兩種運輸都是逆濃度梯度的運輸,都是主動運輸,直接利用的是勢能,由H+的濃度差維持,不直接受O2濃度的影響,但H+的轉(zhuǎn)運受O2濃度的影響,C錯誤;D、海水稻將Na?排出細胞外是從低濃度到高濃度,為主動運輸,H+排出細胞外需要消耗ATP,也為主動運輸,兩者運輸方式相同,D正確。故選C。13.斑點印跡雜交是一種簡單的DNA分子雜交技術(shù),其技術(shù)流程如圖。據(jù)此分析,下列說法正確的是()A.放射性自顯影技術(shù)可顯示原培養(yǎng)皿中含目的基因的菌落位置B.p和q片段能夠雜交的主要原因是兩單鏈的堿基排列順序相同C.p和q片段的雜交雙鏈區(qū)域形成過程中有氫鍵和磷酸二酯鍵生成D.斑點印跡雜交技術(shù)可用于檢測目的基因是否在受體細胞中成功表達〖答案〗A〖祥解〗目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)?!驹斘觥緼、斑點印跡雜交技術(shù)是將目的基因片段用放射性同位素或熒光進行標記,與受體細胞的基因組DNA進行雜交,如果目的基因整合到受體細胞上,那么標記基因就會與其結(jié)合,通過放射性自顯影就可以檢測出整合有目的基因的受體細胞。所以該技術(shù)可以顯示原培養(yǎng)基中含目的基因的菌落位置,A正確;B、p和q雜交是因為兩單鏈的堿基可以互補配對,B錯誤;C、在雜交過程中,雙鏈區(qū)域會有氫鍵形成,但不會形成磷酸二酯鍵,C錯誤;D、斑點印跡雜交是一種簡單的DNA分子雜交技術(shù),該技術(shù)可以檢測目的基因的導入和轉(zhuǎn)錄,但無法用于檢測目的基因是否在受體細胞中表達,目的基因是否在受體細胞中表達常用抗原-抗體雜交法,D錯誤。故選A。14.由于某目的基因酶切后的末端為平末端,載體E只有產(chǎn)生黏性末端的酶切位點,需借助中間載體P將目的基因接入載體E。據(jù)圖分析,下列敘述正確的是()A.通過PCR擴增獲取目的基因是基因工程的核心工作B.為了便于該目的基因接入載體E,可用限制酶EcoRV或SmaI切割載體PC.載體P不能作為基因表達載體,是因為其沒有表達該目的基因的啟動子與終止子D.若受體細胞表現(xiàn)出抗性基因的相應性狀,表明重組載體成功導入受體細胞〖答案〗C〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟:(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因?qū)胧荏w細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣。(4)目的基因的檢測與鑒定?!驹斘觥緼、基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達載體,不是通過PCR擴增獲取目的基因,A錯誤;B、由于載體E只有產(chǎn)生黏性末端的酶切位點,要使中間載體P接入載體E,同時防止載體E自身環(huán)化,需要用兩種限制酶分別切割載體E和中間載體P,據(jù)圖可知,中間載體P和載體E均含有XhoI和PstI酶識別序列,故可選用XhoI和PstI酶進行酶切,載體P的這兩種酶識別序列中含有EcoRV識別位點,并且其切割的為平末端,可以用于連接目的基因,SmaI酶雖然也能切割得到平末端,但是其識別位點沒有位于XhoI和PstI酶識別位點之間,故不能選擇其對中間載體P進行切割,B錯誤;C、由圖可知,載體P是中間質(zhì)粒,不含有有表達MT基因的啟動子和終止子,C正確;D、受體細胞表現(xiàn)出抗性基因的相應性狀,可能是導入了重組質(zhì)粒,也可能只導入了空質(zhì)粒(不含目的基因的質(zhì)粒),D錯誤。故選C。二、多項選擇題;本部分共4題,每題3分,共計12分。每題有不止一個選項符合題意。每題全選對者得3分,選對但不全的得1分,錯選或不答的得0分。15.微管由微管蛋白構(gòu)成,是構(gòu)成細胞骨架、中心體、紡錘體的重要結(jié)構(gòu)。某些細胞中微管以中心體為核心組裝延伸形成細胞骨架和紡錘體等結(jié)構(gòu)。細胞內(nèi)許多膜性細胞器和囊泡通過與微管結(jié)合從而分布在特定的空間或沿特定方向運動。秋水仙素可以抑制微管的組裝。下列說法正確的是()A.中心體在洋蔥根尖細胞分裂前期參與形成紡錘體B.中心體由兩個中心粒構(gòu)成,是合成微管蛋白的細胞器C.若用秋水仙素處理洋蔥根尖可能會誘導細胞染色體數(shù)目加倍D.若用秋水仙素處理動物細胞,細胞的分泌、運動、分化會出現(xiàn)紊亂〖答案〗CD〖祥解〗細胞骨架是真核細胞中由蛋白質(zhì)聚合而成的三維的纖維狀網(wǎng)架體系。細胞骨架包括微絲、微管和中間纖維。細胞骨架在細胞分裂、細胞生長、細胞物質(zhì)運輸、細胞壁合成等等許多生命活動中都具有非常重要的作用。有絲分裂不同時期的特點:(1)間期:進行DNA的復制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成;(2)前期:核膜、核仁逐漸解體消失,出現(xiàn)紡錘體和染色體;(3)中期:染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰;(4)后期:著絲點分裂,姐妹染色單體分開成為染色體,并均勻地移向兩極;(5)末期:核膜、核仁重建、紡錘體和染色體消失?!驹斘觥緼、洋蔥是高等植物,不具有中心體,A錯誤;B、微管蛋白在核糖體上合成,B錯誤;C、秋水仙素可以抑制微管的組裝,若用秋水仙素處理洋蔥根尖,使根尖分生區(qū)的細胞不能形成紡錘體,染色體著絲粒斷粒后,染色體數(shù)量加倍,但是染色體不能移向兩級,誘導細胞染色體數(shù)目加倍,C正確;D、若用秋水仙素處理動物細胞,影響細胞骨架和紡錘體,細胞的分泌、運動、分化會出現(xiàn)紊亂,D正確。故選CD。16.圖為細胞內(nèi)普遍存在的分子開關(guān)調(diào)節(jié)機制,磷酸化與去磷酸化使各種靶蛋白處于“開啟”或“關(guān)閉”的狀態(tài)。相關(guān)敘述正確的是()A蛋白質(zhì)去磷酸化后仍能與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應B.蛋白質(zhì)磷酸化的過程往往是一個放能反應的過程C.磷酸化與去磷酸化可改變靶蛋白的電荷分布與分子構(gòu)象D.碳酸化與去磷酸化過程體現(xiàn)了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能相適應〖答案〗ACD〖祥解〗磷酸化是指蛋白質(zhì)在蛋白激酶的作用下,其氨基酸的羥基被磷酸基團取代,變成有活性有功能的蛋白質(zhì),去磷酸化是指磷酸化的蛋白質(zhì)在蛋白磷酸酶的作用下去掉磷酸基團,復原成羥基,失去活性的過程?!驹斘觥緼、蛋白質(zhì)去磷酸化后仍具有肽鍵,能與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應,A正確;B、蛋白質(zhì)磷酸化過程是一個吸能反應,與ATP的水解相聯(lián)系,B錯誤;C、蛋白質(zhì)在蛋白激酶作用下發(fā)生磷酸化后空間結(jié)構(gòu)會發(fā)生改變,也可改變靶蛋白的電荷分布;同理,磷酸化的蛋白質(zhì)在去磷酸化后,其蛋白質(zhì)的構(gòu)象也會發(fā)生改變,靶蛋白的電荷分布也會改變,C正確;D、在信號的刺激下,蛋白激酶催化ATP將蛋白質(zhì)磷酸化,形成ADP和磷酸化的蛋白質(zhì),使蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變;而蛋白磷酸酶又能催化磷酸化的蛋白質(zhì)上的磷酸基團脫落,形成去磷酸化的蛋白質(zhì),從而使蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的恢復,所以蛋白質(zhì)磷酸化和去磷酸化的過程體現(xiàn)了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能相適應,D正確。故選ACD。17.科研人員從木材場土壤中篩選分離出木質(zhì)素分解菌,實驗流程如下圖所示。已知木質(zhì)素能與苯胺藍結(jié)合形成藍色復合物,采用含苯胺藍培養(yǎng)基篩選得到了如圖⑥所示的菌落。下列有關(guān)敘述正確的是()A.圖示操作過程共將土壤稀釋了10000倍B.圖示所用的接種方法是平板劃線法,且接種后需倒置培養(yǎng)C.圖⑥中所用的培養(yǎng)基以木質(zhì)素為唯一碳源,其上的菌1∽5均為異養(yǎng)型D.若要進一步篩選降解木質(zhì)素能力強的菌株,可以從圖⑥中菌3獲取〖答案〗AD〖祥解〗微生物常見的接種的方法。①平板劃線法:將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板,接種,劃線,在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分,微生物往往連在一起生長,隨著線的延伸,菌數(shù)逐漸減少,最后可能形成單個菌落;②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過梯度稀釋后,均勻涂布在培養(yǎng)皿表面,經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?!驹斘觥緼、10g土壤溶于90ml無菌水被稀釋了10倍,三個試管內(nèi)各自被稀釋了10倍,因此圖示操作過程共將土壤稀釋了10000倍,A正確;B、圖中菌落分布均勻,屬于稀釋涂布平板法接種的,B錯誤;C、若圖⑥中所用的培養(yǎng)基以木質(zhì)素為唯一碳源,由于菌5周圍沒有透明圈,故菌5可能是自養(yǎng)型菌,C錯誤;D、依據(jù)題干信息,透明圈直徑/菌落直徑的比值越大,說明降解木質(zhì)素的能力越強,所以若要進一步篩選降解木質(zhì)素能力強的菌株,應從圖⑥中選擇菌種3號獲取,D正確。故選AD。18.用A和B兩種限制酶同時和分別處理同一DNA片段,假設(shè)限制酶對應切點一定能切開。兩種酶切位點及酶切產(chǎn)物電泳分離結(jié)果如圖1和圖2所示。下列敘述正確的是()A.用A和B兩種限制酶同時處理圖中同一DNA片段得到6個游離的磷酸基團B.圖1中X代表的堿基對數(shù)為4500,Y是限制酶A的酶切位點C.電泳凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子大小和構(gòu)象等有關(guān)D.利用PCR技術(shù)從圖1DNA中擴增出等長的X片段,至少需要3次循環(huán)〖答案〗BCD〖祥解〗限制性核酸內(nèi)切酶酶切,是一項基于DNA限制性核酸內(nèi)切酶的基因工程技術(shù),其基本原理是利用限制性核酸內(nèi)切酶對DNA上特定序列的識別,來確定切割位點并實現(xiàn)切割,從而獲得所需的特定序列?!驹斘觥緼、由題可知,圖2中三列條帶分別對應用A和B兩種限制酶同時以及單獨使用限制酶A、限制酶B處理DNA片段的酶切產(chǎn)物電泳分離結(jié)果,再通過①和②的結(jié)果結(jié)合圖1,分析可知①是單獨使用限制酶A處理DNA片段的酶切產(chǎn)物電泳分離結(jié)果,②是單獨使用限制酶B處理DNA片段的酶切產(chǎn)物電泳分離結(jié)果。限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。用A和B兩種限制酶同時處理圖中同一DNA片段最終得到8個游離的磷酸基團,A錯誤;B、結(jié)合圖1和圖2中第一列A+B酶同時處理的電泳條帶結(jié)果分析可知,圖1中X代表的堿基對數(shù)為4500,根據(jù)圖2中①電泳分離結(jié)果存在3500bp長度的條帶可知①是單獨使用限制酶A處理DNA片段的酶切產(chǎn)物電泳分離結(jié)果,再根據(jù)①電泳分離結(jié)果存在500bp長度和6000bp長度的條帶可知Y是限制酶A的酶切位點,B正確;C、電泳凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子大小和構(gòu)象等有關(guān),C正確;D、設(shè)計引物從圖1中完整DNA片段中擴增出完整X,至少需要3次PCR,D正確。故選BCD。三、非選擇題:本部分包括5題,共計57分。19.血紅蛋白(HbA)是紅細胞的主要組成部分,能與氧結(jié)合并運輸氧。每個血紅蛋白分子由1個珠蛋白和4個血紅素(血紅素中心為1個鐵原子)組成。每個珠蛋白有4條肽鏈,a鏈、β鏈各2條,每條α鏈由141個氨基酸構(gòu)成,每條β鏈由146個氨基酸構(gòu)成。圖1是血紅蛋白的四級結(jié)構(gòu)示意圖,請回答下列問題:(1)根據(jù)圖1推測,HbA的一級結(jié)構(gòu)是指________。(2)HbA中含有________個氨基酸,形成HbA的過程中需脫去_________個水分子。(3)HbA的合成場所為____________,初始合成的珠蛋白中______________(填“含”或“不含”)鐵元素。人體缺鐵會貧血,說明無機鹽具有_________的作用。(4)血紅蛋白與氧氣的結(jié)合和釋放是通過變構(gòu)現(xiàn)象來進行的。當血紅蛋白的一個亞基與氧氣結(jié)合后,整個分子的空間結(jié)構(gòu)會發(fā)生變化,使得其他亞基對氧氣的親和力增強,這屬于_________調(diào)節(jié)。(5)若每條a鏈含有丙氨酸5個,分別位于第26、71、72、99、141位(如圖2所示)。肽酶E專門水解丙氨酸氨基端的肽鍵。肽酶E完全作用于1條a鏈后,產(chǎn)生的多肽中氫原子數(shù)比a鏈_______(填“多”或“少”)__________個。(6)蛋白質(zhì)表面吸附的水構(gòu)成“水膜”以保護蛋白質(zhì)。強酸能破壞蛋白質(zhì)表面的“水膜”使蛋白質(zhì)變性,導致其空間結(jié)構(gòu)都變得伸展、松散,從而暴露出更多的肽鍵,雙縮脲試劑可與肽鍵發(fā)生絡(luò)合反應顯紫色。為驗證鹽酸能使蛋白質(zhì)變性,可選用________(填“HbA”或“豆?jié){”)為材料,對照組滴加1mL蒸餾水,實驗組滴加__________,并用雙縮脲試劑檢測,預測實驗結(jié)果是________?!即鸢浮剑?)肽鏈中氨基酸的排列順序(2)①.574②.570(3)①.核糖體②.不含③.組成細胞中重要的化合物(4)正反饋(5)①.少②.4(6)①.豆?jié){②.1mL鹽酸③.實驗組樣液的紫色程度比對照組的深【小問1詳析】依據(jù)圖1所示,HbA的一級結(jié)構(gòu)是指肽鏈中氨基酸的排列順序?!拘?詳析】依據(jù)題干信息,HbA的氨基酸分子數(shù)為,在形成HbA的過程中需脫去的水分子數(shù)為氨基酸分子數(shù)-肽鏈的條數(shù)=574-4=570?!拘?詳析】血紅蛋白是蛋白質(zhì),其合成的場所為核糖體,依據(jù)題干信息可知,初合成的珠蛋白不含鐵元素。人體缺鐵會貧血,說明無機鹽具有組成細胞中重要的化合物的作用。小問4詳析】依據(jù)題干信息,當血紅蛋白的一個亞基與氧氣結(jié)合后,整個分子的空間結(jié)構(gòu)會發(fā)生變化,使得其他亞基對氧氣的親和力增強,輸入與輸出的信號方向一致,這屬于正反饋調(diào)節(jié)?!拘?詳析】若每條a鏈含有丙氨酸5個,分別位于第26、71、72、99、141位。肽酶E專門水解丙氨酸氨基端的肽鍵,用肽酶E完全作用于1條a鏈后,會得到5種產(chǎn)物4條多肽(1-25、26-70、72-98、99-140)和2個丙氨酸(71號、141號),需要消耗5分子水,而1分子水中含有2個氫原子,一個丙氨酸含有7個氫原子,所以產(chǎn)物中的氫原子數(shù)比a鏈少了4個。【小問6詳析】蛋白質(zhì)表面吸附的水構(gòu)成“水膜”以保護蛋白質(zhì)。強酸能破壞蛋白質(zhì)表面的“水膜”使蛋白質(zhì)變性,導致其空間結(jié)構(gòu)都變得伸展、松散,從而暴露出更多的肽鍵,雙縮脲試劑可與肽鍵發(fā)生絡(luò)合反應顯紫色。為驗證鹽酸能使蛋白質(zhì)變性,所以是否含有鹽酸是自變量,可選用豆?jié){為材料,HbA是紅色,會干擾實驗結(jié)果,對照組滴加1mL蒸餾水,實驗組滴加1mL鹽酸,并用雙縮脲試劑檢測,預測實驗結(jié)果:由于鹽酸使蛋白質(zhì)變性,導致空間結(jié)構(gòu)改變,肽鍵暴露出來,所以實驗組樣液的紫色程度比對照組的深。20.土壤含鹽量過高對植物生長造成的危害稱為鹽脅迫,堿蓬等耐鹽植物能夠在鹽脅迫逆境中正常生長。圖1是堿蓬葉肉細胞結(jié)構(gòu)模式圖,圖2是堿蓬根細胞參與抵抗鹽脅迫有關(guān)的示意圖,其根細胞生物膜兩側(cè)H+形成的電化學梯度,在物質(zhì)轉(zhuǎn)運過程中發(fā)揮了十分重要的作用。(1)圖1中細胞與動物細胞相比特有的結(jié)構(gòu)有___________(填序號)。鹽堿地上大多數(shù)植物很難生長,主要原因是土壤溶液濃度大于_____________(填序號)處溶液濃度,植物的根細胞發(fā)生質(zhì)壁分離,此處的“質(zhì)”指____________,由____________三個部分組成。(2)當鹽浸入到根周圍的環(huán)境時,Na+以____________方式大量進入根部細胞,使細胞內(nèi)的酶失活,影響正常的生命活動。(3)根細胞的細胞質(zhì)基質(zhì)與細胞液、細胞膜外的pH不同,這種差異主要由____________來維持。H+的這種分布特點的意義是____________(4)生物膜上____________的變化,對物質(zhì)的跨膜運輸起著決定性的作用,這也是生物膜具有____________的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)?!即鸢浮剑?)①.①②⑨②.②③.原生質(zhì)層④.細胞膜、液泡膜和兩層膜之間的細胞質(zhì)(2)協(xié)助擴散##易化擴散(3)①.H+-ATP泵將H+以主動運輸方式轉(zhuǎn)運到液泡內(nèi)和細胞膜外②.為載體蛋白NHX和SOS1運輸Na+提供了動力,保持細胞質(zhì)基質(zhì)中Na+含量相對穩(wěn)定(4)①.轉(zhuǎn)運蛋白的種類、數(shù)量(空間結(jié)構(gòu))②.選擇透過性〖祥解〗題圖2分析,根細胞的細胞質(zhì)基質(zhì)中pH為7.5,而細胞膜外和液泡膜內(nèi)pH均為5.5,細胞質(zhì)基質(zhì)中H+含量比細胞膜外和液泡膜內(nèi)低,H+運輸?shù)郊毎ね夂鸵号輧?nèi)是逆濃度梯度運輸,運輸方式為主動運輸。SOS1將H+運進細胞質(zhì)基質(zhì)的同時,將Na+排出細胞。NHX將H+運入細胞質(zhì)基質(zhì)的同時,將Na+運輸?shù)揭号輧?nèi),即鈉離子的排出消耗的是氫離子的梯度勢能。小問1詳析】圖1為高等植物(堿蓬)葉肉細胞,與動物細胞相比,特有的結(jié)構(gòu)為①細胞壁、②大液泡、⑨葉綠體,鹽堿地土壤鹽分過多,土壤溶液濃度大于植物根部細胞②處細胞液濃度,植物無法從土壤中獲取充足的水分甚至萎蔫,故鹽堿地上大多數(shù)植物很難生長。原生質(zhì)層是由細胞膜、液泡膜和兩層膜之間的細胞質(zhì)組成?!拘?詳析】根據(jù)各部分的pH可知,H+借助轉(zhuǎn)運蛋白SOS1順濃度梯度從細胞膜外運輸?shù)郊毎|(zhì)基質(zhì)形成的勢能,為Na+從細胞質(zhì)基質(zhì)運輸?shù)郊毎ね馓峁┝藙恿?,說明細胞膜外鈉離子濃度高于細胞質(zhì)基質(zhì),因此Na+以協(xié)助擴散的方式順濃度梯度大量進入根部細胞?!拘?詳析】由圖可知,H+-ATP泵運輸H+進入液泡時,以及將細胞質(zhì)基質(zhì)的H+運輸?shù)郊毎ね庑枰腁TP,故為主動運輸。同時H+借助轉(zhuǎn)運蛋白NHX順濃度梯度從液泡內(nèi)運輸?shù)郊毎|(zhì)基質(zhì)形成的勢能,為Na+從細胞質(zhì)基質(zhì)運輸?shù)揭号輧?nèi)提供了動力。因此H+的分布特點為NHX和SOSI運輸Na+提供了動力,保持細胞質(zhì)基質(zhì)中Na+含量相對穩(wěn)定?!拘?詳析】細胞膜的功能主要由膜上的蛋白質(zhì)種類和數(shù)量決定,耐鹽植物根細胞膜具有選擇透過性的基礎(chǔ)是細胞膜上轉(zhuǎn)運蛋白的種類和數(shù)量,轉(zhuǎn)運蛋白空間結(jié)構(gòu)的變化。21.某生物興趣小組試圖探究牛和山羊的瘤胃中的微生物對尿素是否有分解作用,設(shè)計了以下實驗,并成功篩選到能降解尿素的細菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如表1所示,實驗步驟如圖1所示。請分析回答問題:KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4?7H2O0.2g葡萄糖10g尿素1g瓊脂15g溶解后自來水定容到1000mL表1(1)從成分上看,表1所示培養(yǎng)基能篩選到降解尿素的細菌的原因是_______,制成的培養(yǎng)基常用_______法進行滅菌,富集培養(yǎng)過程中不需要振蕩培養(yǎng)來提高溶氧量,原因是_______。(2)用來篩選降解尿素得細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO?和Na2HPO?,其作用有_______。(3)在實驗中,每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目,并選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為實驗結(jié)果,這樣可以防止_______。梯度稀釋時,每個稀釋梯度下要涂布至少3個平板,這樣做的目的是_______,該結(jié)果往往比實際值偏小,原因是_______。(4)分離降解尿素的細菌實驗時,甲同學從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落,而其他同學只選擇出大約50個菌落。甲同學實驗結(jié)果差異的原因可能有_______(填序號)。①取樣不同②培養(yǎng)基污染③操作失誤④沒有設(shè)置對照(5)為進一步確定取自瘤胃中液體的適當稀釋倍數(shù),各稀釋倍數(shù)下降解尿素的細菌菌落數(shù)統(tǒng)計結(jié)果見表2,其中合理的稀釋倍數(shù)為_______。稀釋倍數(shù)10310410510610?菌落數(shù)>500427248365表2(6)上述實驗過程中,關(guān)于無菌操作的敘述錯誤的有。A.取自瘤胃中的液體稀釋時加入清水,且在無菌操作臺進行B.實驗中用到的試管、培養(yǎng)皿等工具,用干熱滅菌法進行滅菌C.進行稀釋涂布操作時,接種環(huán)需進行灼燒滅菌D.實驗結(jié)束后,將實驗產(chǎn)生的廢棄物進行滅菌處理〖答案〗(1)①.該培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源②.濕熱滅菌##高壓蒸汽滅菌③.瘤胃中的微生物多為厭氧型(2)為細菌生長提供無機鹽,作為緩沖物質(zhì)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH穩(wěn)定(3)①.因為培養(yǎng)時間不足遺漏菌落數(shù)目,導致統(tǒng)計數(shù)目偏?、?求平均值,避免偶然性,減少實驗誤差③.當2個或2個以上的細胞連在一起時,培養(yǎng)基上觀察到的只是一個菌落(4)①②③(5)10?或105(6)AC〖祥解〗目的細菌之所以能分解尿素,是因為它們能合成脲酶,尿素在脲酶的催化下可以分解成NH3和CO2,以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基具有選擇作用,是因為只有能合成脲酶的細菌才能利用尿素,能在該培養(yǎng)基上生長,不能利用尿素的細菌不能生長?!澳康木焙铣傻碾迕缚蓪⑴囵B(yǎng)基中的尿素分解成氨,氨會使培養(yǎng)基的pH增高,使酚紅指示劑變紅,在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,檢測培養(yǎng)基pH的變化,可判斷尿素是否被分解。通常需選用一定稀釋范圍的樣品進行培養(yǎng),以保證獲得菌落數(shù)在30~300之間的平板?!拘?詳析】實驗目的是探究牛和山羊的瘤胃中的微生物對尿素是否有分解作用,該培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源,可篩選能高效降解尿素的目的菌,其原理是:只有能合成脲酶的細菌才能分解尿素,在以尿素為氮源的培養(yǎng)基上生長。培養(yǎng)基的滅菌方法是濕熱滅菌(或高壓蒸汽滅菌)。目的菌為來自于牛和山羊的瘤胃中的微生物,因此,實驗中不需要振蕩培養(yǎng)來提高溶氧量,因為瘤胃中的微生物多為厭氧菌,接觸空氣后會死亡?!拘?詳析】用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4,可以為細菌生長提供鉀、鈉、磷等無機鹽,同時,二者構(gòu)成緩沖對,作為緩沖劑調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中pH的相對穩(wěn)定?!拘?詳析】選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果,可以防止因培養(yǎng)時間不足而導致遺漏菌落的數(shù)目,避免統(tǒng)計數(shù)目偏??;稀釋涂布平板法在操作中需要將菌液進行一系列的濃度梯度稀釋,每個稀釋度至少涂3個平板,并計算平均值,減小實驗誤差,避免偶然性。計數(shù)時由于可能存在2個或2個以上的細胞連在一起時,培養(yǎng)基上觀察到的只是一個菌落,所以計數(shù)結(jié)果比實際值偏小?!拘?詳析】甲同學的實驗結(jié)果比其他同學多,可能是培養(yǎng)基污染造成的,還可能是甲同學實驗操作過程中污染造成的,也可能是與其他同學所取土壤樣品不同造成的:①土樣不同可能導致計數(shù)偏差,①符合題意;②培養(yǎng)基污染會導致菌落數(shù)增加,②符合題意;③操作失誤可能增加微生物的數(shù)量和種類,菌落會增多,③符合題意;④沒有設(shè)置對照不會增加菌落數(shù)目,④不符合題意。因此,甲同學的實驗結(jié)果產(chǎn)生的原因可能是①②③?!拘?詳析】在實際操作中,通常選用一定稀釋范圍的樣品進行培養(yǎng),以保證獲得菌落數(shù)在30~300之間的平板。由表可知,106或105倍的稀釋菌落數(shù)比較合適?!拘?詳析】A、為避免雜菌污染,取自瘤胃中的液體稀釋時加入無菌水,且在無菌操作臺進行,A錯誤;B、實驗中用到的試管、培養(yǎng)皿等工具需要滅菌處理,通常用干熱滅菌法進行滅菌,B正確;C、進行稀釋涂布操作時,將需要用到的涂布器進行灼燒滅菌,C錯誤;D、實驗結(jié)束后,將實驗產(chǎn)生的廢棄物進行集中滅菌處理,避免污染環(huán)境和操作者,D正確。故選AC。22.癌癥的免疫療法通過重新激活抗腫瘤的免疫細胞,克服腫瘤的免疫逃逸,在癌癥治療方法中取得越來越突出地位,科研人員在不斷研究中發(fā)現(xiàn)多種免疫治療方法的結(jié)合是提高治療效果的途徑之一。(1)某些種類癌細胞表面高表達膜蛋白PSMA和PD-L1,如圖1.PD-L1能抑制T細胞的活化,使癌細胞發(fā)生免疫逃逸。臨床上可利用PD-1的單克隆抗體進行癌癥治療。單克隆抗體的優(yōu)點在于____。將等量的純化PD-1蛋白分別注射到5只小鼠體內(nèi),經(jīng)過二次免疫后測定小鼠抗PD-1抗體的免疫效果,取其中免疫效果最好的1號小鼠用于后面的融合實驗。在融合前三天,對1號小鼠加強免疫一次,目的是____。然后取小鼠的脾臟細胞用____試劑誘導與骨髓瘤細胞融合,用選擇培養(yǎng)基進行篩選得到雜交瘤細胞。(2)一段時間后,將(1)所得細胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進行抗體陽性檢測,檢測原理如圖2。①在檢測時需要將PD-1蛋白固定于固相載體表面制成____,并加入多孔板培養(yǎng)槽中的____(填“細胞”或“上清液”),即待測樣本。②加入酶標抗體后一段時間,需要用洗滌劑將未與___結(jié)合的酶標抗體洗去。③加入相應酶促反應底物顯色后,顏色的深淺可代表____。(3)CD28是T細胞表面受體,T細胞的有效激活依賴于CD28在癌細胞與T細胞結(jié)合部位的聚集??蒲腥藛T在雜交瘤細胞的基礎(chǔ)上,獲得了雙雜交瘤細胞以產(chǎn)生雙特異性抗體PSMA×CD28,可誘導T細胞定向殺傷腫瘤細胞,如圖3。①制備雙雜交瘤細胞過程:先將____分別注射到小鼠體內(nèi),分離出B淋巴細胞,誘導其與小鼠的骨髓瘤細胞融合,篩選得到兩種雜交瘤細胞,再誘導兩種細胞融合。成功融合的細胞會同時表達出抗體的重鏈A、B和輕鏈a、b,這種細胞稱作雙雜交瘤細胞。②雙特異性抗體還可以攜帶抗腫瘤藥物應用于腫瘤治療,其優(yōu)勢是____?!即鸢浮剑?)①.特異性強、靈敏度高、可大量制備②.刺激機體產(chǎn)生更多免疫過的B細胞(漿細胞)③.PEG(2)①.固相抗原②.上清液③.抗PD-1抗體④.抗PD-1抗體的量(3)①.PSMA、CD28②.既能與腫瘤細胞特異性結(jié)合,又能與抗腫瘤藥物特異性結(jié)合,從而降低了抗腫瘤藥物的副作用(提高了抗腫瘤藥物的靶向性)〖祥解〗單克隆抗體制備流程:先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應,之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞;誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合,利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞;進行抗體檢測,篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞;進行克隆化培養(yǎng),即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng);最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?!拘?詳析】某些種類癌細胞表面高表達膜蛋白PSMA和PD-L1,如圖1。PD-L1能抑制T細胞的活化,使癌細胞發(fā)生免疫逃逸。臨床上可利用PD-1的單克隆抗體進行癌癥治療。單克隆抗體是由單個雜交瘤細胞經(jīng)過增殖產(chǎn)生的細胞器合成并分泌的,因而其最主要的優(yōu)點在于特異性強、靈敏度高、可大量制備。將等量的純化PD-1蛋白分別注射到5只小鼠體內(nèi),經(jīng)過二次免疫后測定小鼠抗PD-1抗體的免疫效果,取其中免疫效果最好的1號小鼠用于后面的融合實驗。在融合前三天,對1號小鼠加強免疫一次,目的是刺激機體產(chǎn)生更多免疫過的B細胞(漿細胞)。然后取小鼠的脾臟細胞用PEG試劑誘導與骨髓瘤細胞融合,而后用選擇培養(yǎng)基進行篩選得到雜交瘤細胞,再通過進一步篩選獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞?!拘?詳析】①在檢測時需要將PD-1蛋白固定于固相載體表面制成固相抗原,并加入多孔板培養(yǎng)槽中的“上清液”(其中含有是相應的抗體),即待測樣本。②加入酶標抗體后一段時間,需要用洗滌劑將未與抗PD-1抗體結(jié)合的酶標抗體洗去,在載體上留下的是帶有酶標抗體的抗原-抗體復合物。③加入相應酶促反應底物顯色后,顏色的深淺可代表抗PD-1抗體的量,顏色越深說明待測樣液中抗體含量越多?!拘?詳析】①結(jié)合題意可知,制備雙雜交
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