實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

目錄

實驗室人員進(jìn)出實驗室

實驗室檢測樣品采集

實驗室檢測樣品包裝和運(yùn)送

實驗室檢測樣品接收

樣品檢測操作規(guī)程

電氣設(shè)備操作規(guī)程

實驗室消毒劑配制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

無菌間使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

實驗室廢棄物處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

實驗室消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序

實驗室意外事故處理

實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）

檢驗科實驗室人員進(jìn)出實驗室

1目的

制定檢驗科實驗室人員進(jìn)出的標(biāo)準(zhǔn)操作程序，保障實驗室生物安全。

2適用范圍

適用于檢驗科實驗室人員進(jìn)出程序。

3職責(zé)

實驗室工作人員執(zhí)行本程序的規(guī)定。實驗室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)監(jiān)督執(zhí)行。

4規(guī)程要求

4.1進(jìn)入程序

實驗室人員需將外衣掛入（避免將外衣與工作服混放），穿上工作服，按要求戴手

套、口罩等防護(hù)用品方可進(jìn)入實驗室。

4.2退出程序

工作結(jié)束后，實驗室人員在實驗室將一次性口罩、手套、鞋套等放入指定容器。先

用0.5%新潔爾滅對手進(jìn)行消毒，再用消毒肥皂洗手。在指定區(qū)域脫下工作服，必要時

進(jìn)行紫外消毒。實驗室人員退出實驗室后，必須將實驗室入口門關(guān)好，方可離開實驗

室。

實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）

實驗室檢測樣品采集

1目的

為保障檢測實驗的順利進(jìn)行，規(guī)范采樣程序，防止病原微生物在實驗室采樣過程

中產(chǎn)生污染。

2適用范圍

適用于實驗室內(nèi)采集、處理動物樣品。

3職責(zé)

3.1采集檢測樣品的工作人員在采集過程中應(yīng)當(dāng)防止病原擴(kuò)散，并對樣本的來源、采

集過程和處理方法等作詳細(xì)記錄。

3.2檢驗人員必須嚴(yán)格按照本操作規(guī)程操作，不可擅自做出超出本規(guī)程的操作，所有

實驗人員對所從事的工作負(fù)相應(yīng)的責(zé)任。

4過程要求

4.1工作條件

4.1.1具有采集、處理樣品所需要的生物安全防護(hù)設(shè)備；

4.1.2具有掌握相關(guān)專業(yè)知識和操作技能的工作人員；

4.1.3具有有效的防止病原擴(kuò)散的措施；

4.1.4具有保證檢測樣品質(zhì)量的技術(shù)方法和手段。

4.2實驗材料

準(zhǔn)備滅菌的解剖器械（剪刀、鏡子、手術(shù)刀、大刀、斧頭等）、滅菌試管、平皿

或自封袋、載玻片、棉簽、營養(yǎng)肉湯、30%,50%甘油鹽水緩沖液、加抗生素的PBS（病

毒保存液）、50%甘油磷酸鹽緩沖液、酒精燈、滅菌注射器、15mL的離心管、1.5mLEP

管、記號筆、簽字筆、防護(hù)服、無粉乳膠手套、防護(hù)口罩、鉛筆、空白標(biāo)簽紙、膠布、

75%酒精棉球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消毒藥品、采樣單等。

4.3活畜樣品的采集

4.3.1血清樣品的采集4.3.1.1采血方法

對采血部位的皮膚先剃（拔）毛，碘酊消毒，75%的酒精消毒，待干燥后采血。

采血方法推行生豬站立式前腔靜脈、牛羊站立式頸靜脈、禽類翅靜脈采血，采血過程

嚴(yán)格無菌。

4.3.1.2采血數(shù)量

單一病種抗體監(jiān)測的每頭（只）采集2?3mL全血，多病種抗體檢測的每頭（只）

采集5?10mL全血。

4.3.1.3全血保存

采集好的全血轉(zhuǎn)入盛血試管，斜面存放，室溫凝固后直接放在盛有冰塊的保溫箱,

送實驗室。從全血采出到血清分出的時間不超過10h。

4.3.1.4血清分離

凝固全血在室溫2?4h后，有血清析出時，用無菌針剝離血凝塊，然后放入46

冰箱4?8h后，待大量血清析出時，吸出血清。必要時經(jīng)離心機(jī)3000rpm、30min離

心，吸出血清。分離的血清，一般不加防腐劑。血清若在1?2周內(nèi)即可檢驗，可放

在4c冰箱內(nèi)保存；如果保存時間較長，應(yīng)放在-20C?-80C冰箱內(nèi)保存。運(yùn)送血清

時可將血清放在盛有冰塊的保溫箱中運(yùn)送。

4.3.2全血樣品的采集

全血采集后應(yīng)直接注入盛有抗凝劑的試管中，立即搖動，充分混合。也可將全血

液注入盛有玻璃珠的滅菌瓶中，立即連續(xù)振蕩脫纖維蛋白。

4.4活禽樣品的采集

咽喉拭子的采集：將棉簽插入喉頭口及上顆裂處來回刮3?5次取咽喉分泌液，

泄殖腔拭子的采集：將棉簽插入取泄殖腔轉(zhuǎn)2?3圈并沾取少量糞便，再將咽喉拭子、

泄殖腔拭子一并放入盛有0.8?1.0mL加有抗生素PBS的EP管中，加蓋，編號。

4.5病死（屠宰）畜禽樣品的采集

4.5.1解剖前檢查

急性死亡的牛、羊、豬、馬等動物，解剖之前應(yīng)作臨床檢查，疑似炭疽病的應(yīng)采

血、鏡檢，排除炭疽病時，方可解剖。動物死亡后應(yīng)在6h內(nèi)進(jìn)行剖檢。解剖人員要

做好自我防護(hù)工作。

4.5.2肝、脾、腎、淋巴結(jié)、肺和牛、馬心臟樣品的采集

在肝、脾、腎、淋巴結(jié)、肺和牛、馬心臟有病變的部位各采取2?3cm的小方塊,

分別置于滅菌的試管或平皿中。其他畜禽采集整個心臟，置于自封袋中。細(xì)菌分離樣

品的采集可用燒紅的刀片燙烙臟器表面，在燒烙部位刺一孔，用滅菌后的伯金耳伸入

孔內(nèi)，取少量組織或液體，作涂片鏡檢或劃線接種于適宜的培養(yǎng)基上。

4.5.3腦、脊髓樣品的采集

取腦、脊髓2?3cm3浸入50原甘油鹽水中或?qū)⒄麄€頭部（豬、牛、馬除外）害U下,

用消毒紗布包裹，置于不漏水的容器中。

4.5.4腸、腸內(nèi)容物及糞便樣品的采集

腸樣品的采集：選擇病變最嚴(yán)重的部分，將其中的內(nèi)容物棄去，用滅菌的生理鹽

水輕輕沖洗后，置于試管中。腸內(nèi)容物樣品的采集：燒烙腸壁表面，用吸管扎穿腸壁,

從腸腔內(nèi)吸取腸內(nèi)容物，放入盛有30%甘油鹽水中或者直接將帶有糞便的腸管兩端結(jié)

扎，從兩端剪斷。糞便樣品的采集：用棉簽插到直腸黏膜表面采集糞便，然后將拭子

放入盛有30%甘油鹽水中。

4.5.5液體病料樣品的采集

采集膽汁、膿、粘液、關(guān)節(jié)液、水泡液等樣品時，用藥物或燙烙法消毒采樣部位,

用滅菌吸管（毛細(xì)吸管、注射器）經(jīng)消毒部位插入，吸取內(nèi)部液體，然后將病料注入

滅菌試管中，加蓋。也可用接種環(huán)經(jīng)消毒部位插入，提取病料直接接種在培養(yǎng)基上。

4.5.6胎兒樣品的采集

取流產(chǎn)后的整個胎兒，裝入自封袋或不透水塑料薄膜中。

4.5.7皮膚樣品的采集

用清水清洗病變皮膚后，取病變皮膚3?5g放入滅菌小瓶中，加適量50%甘油磷

酸鹽緩沖液（PH7.4）,加蓋密封。

4.5.8死（屠宰）禽樣品的采集

死（屠宰）禽樣品的采集除按上述方法采集，也可將整個死禽裝入不透水塑料薄

膜袋或自封袋中或其他容器內(nèi)。

4.6組織樣品采集完后的無害化處理

活畜禽、病死畜禽組織樣品采集完后，應(yīng)做好樣品外包裝和環(huán)境消毒以及病死畜

禽及其產(chǎn)品的無害化處理。

4.7樣品編號、抽樣單填寫

4.7.1樣品編號

每頭動物的不同部位的組織樣品應(yīng)單獨包裝。包裝好后，在樣品袋或平皿外貼上

標(biāo)簽，標(biāo)簽注明樣品名、樣品編號、采樣日期等。采集好不同部位的樣品后，同一動

物的樣品集中包裝。

4.7.2采樣單填寫

可根據(jù)具體要求填寫。

實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）

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實驗室檢測樣品包裝和運(yùn)送

1目的

維護(hù)檢測樣品的質(zhì)量，防止病原的泄漏和擴(kuò)散，保障樣品檢測的順利開展。

2適用范圍

適用于檢測樣品的包裝和運(yùn)送。

3職責(zé)

3.1操作者必須嚴(yán)格按照本程序操作，不可擅自做出超出本程序的操作，所有實驗人

員對所從事的工作負(fù)相應(yīng)的責(zé)任。

3.2實驗室負(fù)責(zé)人負(fù)有對樣品包裝、運(yùn)輸?shù)谋O(jiān)督和管理職責(zé)，并監(jiān)督檢查相關(guān)工作人

員的安全工作程序和行為。

4過程要求

擬運(yùn)輸?shù)臉悠?，要求?yán)密包裝，外表加以消毒，編號、登記后，貼上“生物危險”

標(biāo)識，并嚴(yán)防標(biāo)識脫落。樣品必須經(jīng)三層包裝。

4.1樣品的包裝

4.1.1內(nèi)包裝

4.1.1.1必須是不透水、防泄漏的主容器，保證完全密封。

4.1.1.2必須是結(jié)實、不透水和防泄漏的輔助包裝。

4.1.1.3必須在主容器和輔助包裝之間填充吸附材料。吸附材料必須充足，能夠吸收

所有的內(nèi)裝物。多個主容器裝入一個輔助包裝時，必須將它們分別包裝。

4.1.1.4主容器的表面貼上標(biāo)簽，注明樣品類別、編號、名稱、數(shù)量等信息。

4.1.1.5相關(guān)文件，例如毒種或樣本數(shù)量表格、危險性聲明、信件、毒種或樣本鑒定

資料、發(fā)送者和接收者的信息等應(yīng)當(dāng)放入一個防水袋中，并貼在輔助包裝的外面。

4.1.2外包裝

4.1.2.1外包裝的強(qiáng)度應(yīng)當(dāng)充分滿足對于其容器、重量及預(yù)期使用方式的要求。

4.1.2.2外包裝應(yīng)當(dāng)印上生物危險標(biāo)識。4.1.3包裝要求

4.1.3.1液體或者固體樣品

在輔助包裝周圍必須放置冰、干冰或者其他冷凍劑，或者按照規(guī)定將冷凍劑放在

由一個或者多個完整包裝件組成的合成包裝件中，內(nèi)部要有支撐物，干冰或者干冰消

耗掉以后，仍可以把輔助包裝固定在原位置上。如果使用冰，包裝必須不透水；如果

使用干冰，外包裝必須能排出二氧化碳?xì)怏w；如果使用冷凍劑，主容器和輔助包裝必

須保持良好的性能，在冷凍劑消耗完以后，仍能承受運(yùn)輸中的溫度和壓力。

4.1.3.2凍干樣品

主容器必須是火焰封口的玻璃安甑或者是用金屬封口的膠塞玻璃瓶。在輔助包裝

周圍還必須放置冰、干冰或者其他冷凍劑。

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實驗室檢測樣品接收

1目的

規(guī)范接收檢測樣品，保證生物安全。

2適用范圍

適用于送檢樣品的交接管理。

3職責(zé)

專人負(fù)責(zé)接收樣品和接樣的生物安全。

4過程要求

4.1檢測樣品由專人接收，在接收送檢樣品時應(yīng)作好樣品登記，填寫《樣品接收登記

表》，并對樣品進(jìn)行符合性檢查，檢查包括：

(1)樣品包裝、標(biāo)志及外觀是否完好；

(2)對照抽樣單核查樣品的名稱、采樣地點、樣品數(shù)量、性狀等信息；

(3)樣品是否損壞、污染或已過有效期。

4.2接樣人進(jìn)行樣品登記、保存后，報告實驗室負(fù)責(zé)人安排檢測工作。

4.3檢驗后的剩余樣品，由樣品保管人負(fù)責(zé)留存。

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樣品檢測操作規(guī)程

1目的

為規(guī)范樣品的檢測，特制定本規(guī)程。

2適用范圍

適用不同待檢樣品的檢測。

3職責(zé)

3.1實驗室工作人員嚴(yán)格依照本規(guī)程進(jìn)行樣品的檢測。

3.2實驗室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)監(jiān)督實驗室工作人員樣品的檢測工作。

4過程要求

樣品的檢測方法應(yīng)采用《作業(yè)指導(dǎo)書-檢測標(biāo)準(zhǔn)》(GTCADC-ZYBZ-2016)規(guī)定的方

法。

5.相關(guān)文件

《作業(yè)指導(dǎo)書-檢測標(biāo)準(zhǔn)》(GTCADC-ZYBZ-2016)

實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)

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電氣設(shè)備操作規(guī)程

1目的

為規(guī)范實驗室電氣設(shè)備的使用和維護(hù)，特制定本規(guī)程。

2適用范圍

適用于電氣設(shè)備的操作和維護(hù)。

3職責(zé)

實驗室工作人員嚴(yán)格依照本規(guī)程進(jìn)行使用電氣設(shè)備。

4過程要求

4.1實驗室工作人員必須熟悉儀器的性能、用途、使用方法，嚴(yán)格按照說明書使用，

遵守儀器操作規(guī)程。

4.2儀器使用過程中發(fā)生故障必須立即停止使用，并報告實驗室負(fù)責(zé)人，及時查找原

因，盡快排除，并登記。

4.3使用完畢必須對使用過的儀器設(shè)備按相關(guān)要求去除污染，以減少污染風(fēng)險。

5相關(guān)文件

《作業(yè)指導(dǎo)書-儀器設(shè)備操作規(guī)程》(GTCADC-ZYGC-2016)

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實驗室消毒劑配制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1目的

規(guī)范實驗室消毒劑配制，保證消毒液的有效性和實驗室生物安全。

2.適用范圍

適用于檢驗科實驗室常用消毒劑的配制。

3.職責(zé)

實驗室工作人員負(fù)責(zé)常用消毒劑的配制。

4.過程要求

4.1消毒劑配制

4.1.1配制前，實驗室工作人員應(yīng)洗凈配制容器及量具，自然晾干。按試劑配制的配

方和配質(zhì)量量取所需藥品。按配制要求的先后順序加入藥品，攪拌均勻配制試劑。

4.3配制過程產(chǎn)熱的試劑待自然冷卻后分裝，并將填寫好品名、濃度、配制時間、有

效期的標(biāo)簽貼于盛裝容器上。做好配制記錄。常用消毒劑的配方及注意事項見下表lo

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實驗室消毒劑配制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

表1常用消毒劑種類和配制方法表

消毒劑名稱用途配制方法備注

手消毒，儀器表面消量取5%新潔爾滅溶液100mL置于配制容器

0.2%新潔爾滅

毒等中，加入2400mL純化水?dāng)嚢杌靹颉?/p>

稱取20gNaOH固體，緩慢加入純化水定容到強(qiáng)堿pH值大

2%NaOH溶液原位消毒

1000mLo于13

75%乙醇手表面消毒取750mL無水乙醇加純化水定容到1000mLo

配制好的過

氧乙酸需室

冰醋酸：H2O2：濃H2s04按體積比

溫放置48h后

140.0:60.0:2.1配制。根據(jù)需要量分別量取所

15%~18%過氧乙使用。超過

實驗室薰蒸消毒需的過氧化氫、冰醋酸和濃硫酸。置于配制容

酸20%的過氧乙

器中攪拌均勻。使用時可加入催化劑高鋸酸鉀

酸會發(fā)生爆

或加熱。

炸。一周內(nèi)用

一

兀O

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無菌間使用標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1目的

確保無菌室環(huán)境的無菌狀態(tài)。

2適用范圍

適用于無菌間空氣微生物監(jiān)測。

3職責(zé)

實驗室工作人員負(fù)責(zé)實驗室空氣微生物監(jiān)測和實施。

4過程要求

4.1實驗室工作人員在進(jìn)無菌間之前，應(yīng)先用2%石碳酸或來蘇爾對手進(jìn)行浸泡消毒。

4.2緩沖間在每次使用前，應(yīng)先打開紫外燈，紫外照射30min；工作人員在進(jìn)入無菌

室前，必須于緩沖間內(nèi)更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。檢驗用的有關(guān)器材（待

檢品除外），搬入無菌室前必須分別進(jìn)行滅菌消毒。

4.3將無菌間和生物安全柜的紫外燈打開照射30min后，才能進(jìn)行工作。

4.4實驗完畢后，用0.2%新潔爾滅消毒液擦拭生物安全柜臺面，打開生物安全柜內(nèi)紫

外燈，照射30min。同時無菌間和緩沖間的紫外燈一并打開，照射30min。

4.5工作人員在緩沖間脫下工作服、工作帽及工作鞋。

4.6適時應(yīng)對無菌間進(jìn)行熏蒸消毒。

4.7每月應(yīng)對無菌間進(jìn)行一次無菌檢查記錄

4.7.1營養(yǎng)瓊脂平板的制備

按營養(yǎng)瓊脂說明書配制營養(yǎng)瓊脂，120℃15min高壓滅菌后，冷卻到50℃左右傾

倒于9cm的平板。待瓊脂凝固后，放37℃48h培養(yǎng)，無菌生長，方可以使用。

4.7.2沉降菌數(shù)測定

先打開無菌室內(nèi)紫外燈照射30min后，將備妥的營養(yǎng)瓊脂平板5個。以無菌方式移入

操作間，置四個角落和中央各1個，開蓋，暴露30分鐘后將蓋蓋上。在37c培養(yǎng)箱

內(nèi)倒置培養(yǎng)48h,取出檢查。分別數(shù)出5個平板的生長菌落數(shù)并得出5個平板的平均

菌落數(shù)。

4.7.3結(jié)果判定

無菌室內(nèi)的潔凈級別應(yīng)達(dá)到10000級，即在進(jìn)行沉降菌數(shù)測定時，平均菌落數(shù)應(yīng)

小于或等于3個(690mm,0.5h)。如所測得的平均菌落數(shù)小于3個，則證明該無

菌室無菌程度符合要求，否則該無菌室的無菌程度不符合要求，需要對無菌間進(jìn)行徹

底消毒，直至重復(fù)檢查符合要求為止。

實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）

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實驗室廢棄物處理標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1目的

制定實驗室廢棄物安全處理操作規(guī)程，保障實驗室生物安全。

2適用范圍

適用于實驗室廢棄物的處理。

3職責(zé)

3.1實驗室工作人員嚴(yán)格遵守本規(guī)程，并對所從事的工作負(fù)有生物安全責(zé)任。

3.2實驗室負(fù)責(zé)人負(fù)有監(jiān)督和管理責(zé)任。

4過程要求

4.1實驗室工作人員做好個人防護(hù)。穿好工作服、戴好手套、口罩和帽子等。

4.2實驗室廢棄物使用防滲專用包裝容器（袋）或者防銳器穿透密閉容器收集，及

時進(jìn)行無害化處理，并做好實驗室廢棄物處理記錄。

4.3廢棄物分類處理

4.3.1感染性廢棄物處理

培養(yǎng)基、標(biāo)本和菌（毒）種保存液、血液、血清、臨床標(biāo)本等感染性廢棄物須進(jìn)

行壓力蒸汽滅菌。用過的一次性實驗用品（包括手套、口罩、帽子等）及試管、吸管、

移液器吸頭等感染性廢棄物可進(jìn)行壓力蒸汽滅菌或消毒液浸泡24h。

4.3.2損傷性廢棄物處理

針頭、縫合針、解剖刀、手術(shù)刀、備皮刀、手術(shù)鋸，試驗玻片、玻璃試管、玻璃

安甑等能夠刺傷或割傷人體的廢棄的實驗利（銳）器等損傷性廢棄物需放入符合要求

的利器盒里，容器裝滿3/4后封蓋，進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理。

4.3.3藥物性廢棄物處理

過期、淘汰、變質(zhì)或者被污染的診斷試劑可采用壓力蒸汽滅菌處理。

4.3.4病理性廢棄物處理

動物組織及動物尸體使用兩層防滲專用包裝容器（袋）包裝好（外包裝進(jìn)行徹底

的消毒處理），按要求進(jìn)行焚燒、深埋或送往無害化處理場處理。做好廢棄物處理記

錄。

4.3.5化學(xué)品廢棄按組分收集后，倒入專用化學(xué)廢棄物收集桶內(nèi)，集中處理。

實驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（SOP）

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實驗室消毒標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

1目的

保護(hù)實驗室的生物安全，防止病原逃逸。

2適用范圍

實驗室日常清潔，實驗過程中產(chǎn)生的污染廢棄物、使用過的防護(hù)裝備及設(shè)施設(shè)備

等的消毒。

3職責(zé)

實驗室工作人員按照本標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行日常消毒。

4過程要求

4.1儀器設(shè)備表面：用0.2%新潔爾或0.1%~0.2%有效氯消毒液擦拭，30min后再用清

潔的濕抹布擦拭2次。

4.2廢棄的病毒材料和操作過程中使用的一次性耗材先置于2%NaOH溶液浸泡2h,按

照廢棄物的處理程序處理。

4.3生物安全柜臺面：用0.5%新潔爾、0.1%~0.2%有效氯等消毒液浸濕的無紡抹布擦

拭，30min后再用清潔的濕抹布擦拭2次。使用生物安全柜前后，要用紫外線照射消

毒30min,,

4.4個人防護(hù)裝備：工作鞋、橡膠手套可用0.1%?0.2%有效氯消毒液浸泡2h,工作

衣帽和口罩高溫高壓消毒后清洗。

4.5手消毒：用75%乙醇進(jìn)行消毒。

4.6地面及墻壁：用