山東省日照農(nóng)業(yè)學(xué)校2025屆生物高三第一學(xué)期期末考試模擬試題含解析

山東省日照農(nóng)業(yè)學(xué)校2025屆生物高三第一學(xué)期期末考試模擬試題考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準考證號。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列有關(guān)核酸的敘述正確的是（）A．發(fā)菜的遺傳物質(zhì)有DNA和RNA兩種B．人體細胞內(nèi)的DNA和轉(zhuǎn)運RNA中均含有堿基對C．洋蔥根尖細胞的葉綠體和線粒體中均含有少量DNAD．RNA合成時，RNA聚合酶與基因的起始密碼子相結(jié)合2．植物光合作用的作用光譜是通過測量光合作用對不同波長光的反應(yīng)（如O2的釋放）來繪制的。下列敘述錯誤的是（）A．類胡蘿卜素在紅光區(qū)吸收的光能可用于光反應(yīng)中ATP的合成B．葉綠素的吸收光譜可通過測量其對不同波長光的吸收值來繪制C．光合作用的作用光譜也可用CO2的吸收速率隨光波長的變化來表示D．葉片在640～660nm波長光下釋放O2是由葉綠素參與光合作用引起的3．將人的紅細胞移入低滲溶液后，很快吸水膨脹而溶血，而水生動物的卵母細胞在低滲溶液中不膨脹。后來科學(xué)家從人的紅細胞的細胞膜上成功分離出一種具有通道作用的蛋白質(zhì)——水通道蛋白，下列相關(guān)敘述正確的是（）A．水分子從低滲溶液單方向進入高滲溶液中B．人的紅細胞與水生動物的卵母細胞的吸水方式相同C．人的紅細胞通過水通道蛋白吸收水的速率大于自由擴散吸收水的速率D．紅細胞吸水膨脹是因為組成細胞膜的磷脂和蛋白質(zhì)分子都具有流動性4．下為能量流經(jīng)某生態(tài)系統(tǒng)中第二營養(yǎng)級的示意圖（單位J/cm2·a），下列說法正確的是（）A．圖中B表示用于生長、發(fā)育和繁殖的能量是80B．該生態(tài)系統(tǒng)第一營養(yǎng)級同化的能量至少為400C．能量由第二營養(yǎng)級到第三營養(yǎng)級的傳遞效率是20%D．畜牧業(yè)中，放養(yǎng)與圈養(yǎng)相比，可提高圖中C/B的比值5．種粒少而小的狗尾巴草經(jīng)過人類長時間的馴化，逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)樗氪?、籽粒飽滿的小米，小米具有很高的營養(yǎng)價值。下列有關(guān)說法正確的是A．沒有人工馴化，狗尾巴草種群中不會出現(xiàn)穗大基因B．小米和狗尾巴草性狀差異較大，故二者不屬于同一物種C．人工馴化過程中，直接受選擇的是狗尾巴草的基因型D．人工馴化會使狗尾巴草的種群基因頻率發(fā)生定向改變6．下列關(guān)于細胞工程和胚胎工程的敘述，正確的是（）A．動物細胞培養(yǎng)中，需定期更換培養(yǎng)液，以防止培養(yǎng)過程中的雜菌污染B．人工種子制備中，需向人工薄膜內(nèi)添加植物激素，以促進愈傷組織發(fā)育C．胚胎移植中，需向受體注射免疫抑制劑，以避免受體對植入胚胎產(chǎn)生排斥反應(yīng)D．胚胎干細胞可在飼養(yǎng)層細胞上進行培養(yǎng)，從而維持其分裂而不分化的狀態(tài)二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）回答下列（一）、（二）小題：（一）開發(fā)山楂果醋恰好讓山楂中的有機酸豐富了果醋的酸味，同時也彌補生食山楂酸味大的缺陷，具體釀制山楂果醋分為以下三個階段，請將具體過程補充完整。（1）制備山楂果原汁：選成熟的山楂果，在清水沖洗山楂果_______（填“之前”或“之后”）去梗。將山楂果切片并去籽，再添加_______，酶解適宜時間后壓榨取果汁。（2）乙醇發(fā)酵：由于山楂果原汁_______，故發(fā)酵液中添加適量蔗糖，以獲得酒精含量較高的果酒。果汁中加入活化的________后，在適宜環(huán)境下發(fā)酵一段時間，當(dāng)發(fā)酵液中停止_______，發(fā)酵完畢待過濾，或發(fā)酵至_______，上清液即為果酒，用虹吸法取出。（3）醋酸發(fā)酵：將醋化醋桿菌進行擴大培養(yǎng)后，經(jīng)檢查菌體生長正常并無雜菌污染后接種于山楂酒-水中進行發(fā)酵，整個發(fā)酵過程需要通入_______。在發(fā)酵后期加入1．3~1．4%的食鹽，其目的是調(diào)味和_______，以防止果醋被發(fā)酵分解。（二）下圖為轉(zhuǎn)基因抗蟲煙草的培育流程，①②③④表示過程，其中②表示利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入受體細胞。回答下列相關(guān)問題：（1）在①過程構(gòu)建重組質(zhì)粒時，若用同一種限制性核酸內(nèi)切酶處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，使兩者形成粘性末端用于拼接，這種方法的明顯缺點是目的基因和質(zhì)粒________（答出2點即可）。另外，影響拼接效率的主要因素，除以上缺點和鹽離子濃度、滲透壓、溫度等環(huán)境因素外，還有_______（答出2點即可）。（2）在②過程中，將圖示重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌時可用______處理農(nóng)桿菌，以提高轉(zhuǎn)化效率。操作之后，需要特定的培養(yǎng)基對農(nóng)桿菌進行篩選，其原因是_______，最終篩選到的對象在相應(yīng)選擇培養(yǎng)基上的存活情況是________。（3）在③過程常通過調(diào)節(jié)_______的適當(dāng)配比，從愈傷組織誘導(dǎo)出芽和根的_____，并由此再生出新植株。獲得轉(zhuǎn)基因煙草后，再通過[④]_______過程實現(xiàn)多個世代組織培養(yǎng)。8．（10分）回答下列（一）（二）小題（一）回答下列與果酒和果醋的制作的有關(guān)問題：（1）葡萄酒是酵母菌在無氧條件下的發(fā)酵產(chǎn)物，即將__________氧化成乙醇，當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過_________時，酵母菌就會死亡。果醋則是醋桿菌在有氧條件下將____________氧化而來的。如能獲得醋化醋桿菌的菌種，可先在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)繁殖。用300mL的錐形瓶并用___________振蕩培養(yǎng)48小時后，再接種到發(fā)酵瓶中。（2）用葡萄汁制葡萄酒：發(fā)酵瓶裝量不能超過________。開始時，酵母菌的____________會使發(fā)酵瓶出現(xiàn)負壓，若這種負壓情況持續(xù)3天以上，必須加入___________，使發(fā)酵盡快發(fā)生。（二）某研究小組欲利用抗病毒基因，通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育抗病毒玫瑰。圖1和圖2分別表示出了抗病毒基因和農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點和抗生素抗性基因（PstⅠ、SmaⅠ、AluⅠ表示限制性核酸內(nèi)切酶切割位點；amp為氨芐青霉素抗性基因，tet為四環(huán)素抗性基因）。請回答：（1）為獲得大量抗病毒基因，且保證形成重組質(zhì)粒時，目的基因以唯一方向接入，可選用________________________________分別切割目的基因和Ti質(zhì)粒，再用DNA連接酶連接，形成重組DNA分子，再與經(jīng)過______________處理的_________（A．有amp和tetB．有amp，無tetC．無amp，有tetD．無amp和tet）農(nóng)桿菌液混合，使重組DNA進入農(nóng)桿菌。再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入培養(yǎng)的玫瑰細胞，使目的基因?qū)朊倒寮毎小＃?）將含有導(dǎo)入了目的基因的玫瑰細胞的試管放在搖床上，進行____________________獲得胚性細胞，進而培育成抗蟲玫瑰。（3）這種借助基因工程方法，將外源基因?qū)胧荏w細胞，再通過這些轉(zhuǎn)基因細胞進行培養(yǎng)，獲得具有特定性狀的新植株的技術(shù)就是______________。（4）當(dāng)前多地過度開發(fā)旅游造成生態(tài)環(huán)境的破壞，為減緩生態(tài)環(huán)境的破壞，可發(fā)展_______工程，并在旅游區(qū)種植抗蟲玫瑰，可有效降低農(nóng)藥對環(huán)境的污染，并獲得較佳的經(jīng)濟效益、社會效益和________________。9．（10分）近年來，在處理富營養(yǎng)化水體的污水過程中，與化學(xué)、物理除氮方法比較，目前認為微生物反硝化去除氮素污染更為經(jīng)濟有效?？蒲泄ぷ髡卟捎没蚬こ碳夹g(shù)構(gòu)建具有定向高效降解含氮化合物能力的工程菌，進行了相關(guān)研究。請回答問題。（1）微生物的反硝化作用，是氮循環(huán)中一個重要的生物過程。亞硝酸鹽還原酶（Nir）是該過程的關(guān)鍵酶，是由野生菌株YP4的反硝化基因（nirS）轉(zhuǎn)錄后，再翻譯出具有___________作用的蛋白質(zhì)。（1）工程菌的構(gòu)建①研究者利用NCBI數(shù)據(jù)庫查到nirS基因的堿基序列，設(shè)計引物，利用PCR技術(shù)擴增nirS基因。PCR技術(shù)利用了___________的原理，使用耐高溫Taq酶而未使用普通DNA聚合酶的主要原因是______________________。②研究者用HindⅢ和BamHI兩種限制酶處理nirS基因與p質(zhì)粒，在_______________酶的作用下進行體外連接，用連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5，在含慶大霉素的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)并提取質(zhì)粒，如果用HindⅢ和BamHI雙酶切，得到兩個片斷電泳結(jié)果分別與_______________電泳結(jié)果基本一致，說明獲得重組質(zhì)粒pYP4S。③將pYP4S轉(zhuǎn)化到野生菌株YP4中形成工程菌YP4S，培養(yǎng)后進行PCR鑒定。為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計引物進行PCR鑒定。圖1所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，PCR鑒定時應(yīng)選擇的最佳一對引物組合是_________。某學(xué)生錯選了圖中的另外一對引物組合，擴增出長度為1．1kb的片段，原因是_______________。（3）檢測工程菌YP4S除氮的效能①工程菌株YP4S在已滅菌的模擬污水中培養(yǎng)36h后，檢測結(jié)果如圖1。結(jié)果表明___________________。②要進一步證明工程菌對含氮污水治理更有效，應(yīng)___________________________。10．（10分）菊花很美，但其害蟲較多，利用基因工程培育抗蟲菊花是害蟲防治的有效手段。胰蛋白酶抑制劑能干擾昆蟲的代謝，引起昆蟲死亡，但對人體無害?？茖W(xué)家將馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑基因（Pin﹣Ⅱ）通過農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花細胞，培育成了抗蟲菊花。圖1表示含目的基因的DNA分子，圖2表示質(zhì)粒，圖中Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，復(fù)制原點是質(zhì)粒DNA復(fù)制的起點，使其能在受體細胞中存在和遺傳。箭頭表示識別序列完全不同的4種限制酶的酶切位點。請回答下列有關(guān)問題：（1）上述基因工程中，受體細胞是______________，屬于__________（填“動物”“植物”或“微生物”）基因工程。（2）為使目的基因與質(zhì)粒高效重組，最好選用_______________（限制酶）作用于含目的基因的DNA和質(zhì)粒，然后在___________的作用下形成重組質(zhì)粒。（3）用農(nóng)桿菌感染時，應(yīng)優(yōu)先選用菊花___________（填“受傷的”或“完好的”）葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，選用這種葉片的理由是_________________________________。成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細胞會表現(xiàn)為______________________________。（4）用轉(zhuǎn)基因菊花葉片喂養(yǎng)某種菊花害蟲，發(fā)現(xiàn)害蟲死亡率顯著增加。試從分子水平寫出轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因菊花的葉片細胞的不同點：___________________________________。11．（15分）如圖甲表示某豆科植物種子萌發(fā)過程中CO2釋放和O2吸收速率的變化趨勢；圖乙表示該豆科植物葉肉細胞中C3的相對含量在夏季某天24h內(nèi)（有一段時間烏云遮蔽）的變化趨勢；請據(jù)圖回答：（1）圖甲中，在12-24h期間，萌發(fā)種子的呼吸方式主要是_________________，判斷的依據(jù)是___________________；第48h后，萌發(fā)種子O2吸收速率超過CO2釋放速率，其原因是細胞呼吸的底物中可能還有___________等物質(zhì)。（2）圖乙中，葉肉細胞進行光合作用的區(qū)間是曲線_________段對應(yīng)的時間，烏云消失的時間可能是曲線上_______點對應(yīng)的時刻。與F點相比，G點葉綠體中NADPH的含量較____（填“高”或“低”）。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、B【解析】

1、除少數(shù)病毒外，生物的遺傳物質(zhì)是DNA。2、發(fā)菜為原核生物?！驹斀狻緼、發(fā)菜的遺傳物質(zhì)是DNA，A錯誤；B、人體細胞內(nèi)的DNA分子中堿基成對存在，轉(zhuǎn)運RNA中含有部分堿基對，B正確；C、洋蔥根尖細胞中無葉綠體，C錯誤；D、轉(zhuǎn)錄時RNA聚合酶與基因的某一部位相結(jié)合，起始密碼子位于mRNA上，D錯誤。故選B?！军c睛】本題考查DNA和RNA在生物體內(nèi)的存在部位、結(jié)構(gòu)以及RNA的合成，考查對基礎(chǔ)知識的理解和歸納。2、A【解析】

葉綠體中的色素主要有葉綠素和類胡蘿卜素，葉綠體又分為葉綠素a和葉綠素b，類胡蘿卜素又分為胡蘿卜素和葉黃素。光合作用中葉綠素主要吸收紅光和藍紫光；類胡蘿卜素主要吸收藍紫光?！驹斀狻緼、類胡蘿卜素只吸收藍紫光，基本不吸收紅光，所以不能利用紅光的能量合成ATP，A錯誤；B、葉綠素主要吸收紅光和藍紫光，其吸收光譜可通過測量其對不同波長光的吸收值來繪制，B正確；C、由于光反應(yīng)產(chǎn)生的[H]和ATP能用于暗反應(yīng)，暗反應(yīng)要吸收CO2，所以光合作用的作用光譜也可用CO2的吸收速率隨光波長的變化來表示，C正確；D、根據(jù)吸收光譜可知，葉片在640～660nm波長（紅光區(qū)域）光下釋放O2是由葉綠素參與光合作用引起的，D正確。故選A。【點睛】本題考查葉綠體色素種類和作用、光合作用的相關(guān)知識，識記光反應(yīng)的過程和各種色素對不同光的吸收是解答該題的關(guān)鍵。3、C【解析】

據(jù)題意可知，水生動物的卵母細胞在低滲溶液不膨脹。而紅細胞細胞膜上有一種水通道蛋白，在低滲溶液中，很快吸水膨脹而溶血，說明水的吸收與水通道蛋白有關(guān)?！驹斀狻緼、水分子的進出是雙方向的，但總體是低滲溶液進入高滲溶液中，A錯誤；B、人的紅細胞吸水與水生動物的卵母細胞的吸水方式不同，B錯誤；C、人的紅細胞存在水通道蛋白介導(dǎo)的協(xié)助擴散，在低滲溶液中很快就吸水漲破，可知人的紅細胞通過水通道蛋白吸收水的速率大于自由擴散吸收水的速率，C正確；D、紅細胞吸水膨脹是因為存在水通道蛋白介導(dǎo)的協(xié)助擴散，D錯誤。故選C。4、B【解析】

分析題圖：圖示表示能量流經(jīng)某生態(tài)系統(tǒng)第二營養(yǎng)級的示意圖，其中A表示該營養(yǎng)級攝入的能量；B表示該營養(yǎng)級同化的能量；C表示用于生長、發(fā)育和繁殖的能量；D表示呼吸作用中以熱能的形式散失的能量；E表示糞便中的能量?！驹斀狻緼、圖中B表示該營養(yǎng)級同化的能量，即第二營養(yǎng)級同化的能量是80J/cm2?a，A錯誤；

B、圖中B表示該營養(yǎng)級同化的能量，即第二營養(yǎng)級同化的能量是80J/cm2?a，按能量最高傳遞效率20%計算，第一營養(yǎng)級同化的能量至少為80÷20%=400J/cm2?a，B正確；

C、由于第三營養(yǎng)級能量只知道攝入量，不知道同化量，不能計算能量由第二營養(yǎng)級到第三營養(yǎng)級的傳遞效率，C錯誤；

D、B表示該營養(yǎng)級同化的能量，C表示用于生長、發(fā)育和繁殖的能量，放養(yǎng)自身呼吸消耗較多，畜牧業(yè)中，圈養(yǎng)與放養(yǎng)相比，可提高圖中C/B的比值，D錯誤。

故選B。5、D【解析】

現(xiàn)代生物進化理論的基本觀點：種群是生物進化的基本單位，生物進化的實質(zhì)在于種群基因頻率的改變；突變和基因重組產(chǎn)生生物進化的原材料；自然選擇使種群的基因頻率發(fā)生定向的改變并決定生物進化的方向；隔離是新物種形成的必要條件?！驹斀狻緼、若不經(jīng)人工馴養(yǎng)，狗尾巴草種群中也可能會出現(xiàn)穗大基因，A錯誤；B、小米和狗尾巴草性狀差異較大，但不存在生殖隔離，故二者屬于同一物種，B錯誤；C、人工馴化過程中，直接受選擇的是狗尾巴草的表現(xiàn)型，C錯誤；D、人工馴化會使狗尾巴草的種群基因頻率發(fā)生定向改變，D正確。故選D。6、D【解析】

1、動物培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物；（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；（3）適宜的溫度和PH；（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。2、胚胎干細胞的特點：具有胚胎細胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造?！驹斀狻緼、動物細胞培養(yǎng)中，需定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物，A錯誤；B、人工種子是以胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子，在適宜條件下能夠萌發(fā)長成幼苗，不需要添加植物激素，B錯誤；C、受體對移入子宮的外來胚胎，基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，不需要向受體注射免疫抑制劑，C錯誤；D、胚胎干細胞在飼養(yǎng)層細胞上，或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)，D正確。故選D?！军c睛】本題考查了細胞工程、胚胎工程的有關(guān)知識，要求考生能夠識記動物細胞培養(yǎng)的條件，識記胚胎干細胞的特點，掌握胚胎移植的生理基礎(chǔ)，并結(jié)合所學(xué)知識準確答題。二、綜合題：本大題共4小題7、之后果膠酶（和果膠甲酯酶）含糖量較低干酵母（懸液）出現(xiàn)氣泡酵母下沉無菌空氣/氧氣抑制雜菌反向拼接/倒接、（自身）環(huán)化且的基因的濃度、質(zhì)粒的濃度、反應(yīng)時間氯化鈣CaCl2不是所有的農(nóng)桿菌都接納了重組質(zhì)粒在含四環(huán)素培養(yǎng)基上存活，在含青霉素培養(yǎng)基上死亡營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑/植物激素項端分生組織繼代培養(yǎng)【解析】

1.釀酒和制醋是最古老的生物技術(shù)。與酒和醋的生產(chǎn)有關(guān)的微生物分別是酵母菌和醋桿菌，它們各有不同的菌種。菌種的不同，所產(chǎn)生的酒和醋的風(fēng)味也不同。本實驗的內(nèi)容是制作果酒和果醋，所用的原料是葡萄或其他果汁。葡萄酒是酵母利用葡萄糖進行酒精發(fā)酵(乙醇發(fā)酵)的產(chǎn)物。酵母菌只有在無氧條件下才能進行酒精發(fā)酵，即將葡萄糖氧化成乙醇，而且當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反應(yīng)式如下。醋桿菌在有氧條件下才能將乙醇氧化為醋酸，醋桿菌所產(chǎn)生的醋酸可使培養(yǎng)液中醋酸的含量高達13%。2.基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法．（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．【詳解】（一）（1）制備山楂果原汁通常選成熟的山楂果，為了避免雜菌污染，通常在用清水沖洗山楂果之后去梗。將山楂果切片并去籽，為了提高出汁率和澄清度，通常需要添加果膠酶（和果膠甲酯酶）處理，酶解適宜時間后壓榨取果汁。（2）乙醇發(fā)酵時通常需要在發(fā)酵液中添加適量蔗糖，以彌補山楂果原汁含糖量較低的不足，同時也是為了滿足酵母菌發(fā)酵需要的底物量，從而獲得酒精含量較高的果酒。然后在果汁中加入活化的干酵母（懸液）后，置于適宜環(huán)境下進行發(fā)酵，由于酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物是酒精和二氧化碳，所以在發(fā)酵過程中會有氣泡產(chǎn)生，當(dāng)發(fā)酵液中不再出現(xiàn)氣泡時，意味著發(fā)酵完成，然后過濾獲得果酒；也可發(fā)酵至酵母下沉后，用虹吸法取出上清液即為果酒。（3）醋酸發(fā)酵中，由于醋化醋桿菌在有氧氣的條件下將酒精變?yōu)闉橐胰?，進而變?yōu)橐掖?，所以整個發(fā)酵過程需要通入無菌空氣/氧氣。在發(fā)酵后期加入1．3~1．4%的食鹽，食鹽起到了調(diào)味和抑制雜菌的作用，進而防止果醋被其他微生物發(fā)酵分解。（二）（1）①為構(gòu)建基因表達載體的過程，若用同一種限制性核酸內(nèi)切酶處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，則兩者會出現(xiàn)相同的粘性末端從而使得拼接變得容易，但這種方法存在明顯的缺點是在拼接時會出現(xiàn)反向拼接/倒接、（自身）環(huán)化等情況。影響拼接效率的因素主要有鹽離子濃度、滲透壓、溫度等環(huán)境因素，除此外，還有且的基因的濃度、質(zhì)粒的濃度和反應(yīng)時間也會影響拼接的效率。（2）②過程為將目的基因?qū)胧荏w細胞的過程，將圖示重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌時，為了提高導(dǎo)入的成功率，可用氯化鈣CaCl2處理農(nóng)桿菌，以提高轉(zhuǎn)化效率。因為導(dǎo)入的成功率較低，也就是說，并不是所有的農(nóng)桿菌都接納了重組質(zhì)粒，可能有的導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒，或者沒有導(dǎo)入成功，所以需要在特定的培養(yǎng)基對農(nóng)桿菌進行篩選，由于圖中重組質(zhì)粒上含有標記基因四環(huán)素抗性基因，而抗青霉素的基因被破壞，為了篩選出成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，需要將待篩選的農(nóng)桿菌分別接種在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基和含青霉素的培養(yǎng)基上進行篩選，最終篩選到成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌在相應(yīng)選擇培養(yǎng)基上的存活情況是在含四環(huán)素培養(yǎng)基上存活，在含青霉素培養(yǎng)基上死亡。（3）③過程為再分化成植株的過程，該過程中需要通過調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)和生長調(diào)節(jié)劑/植物激素的適當(dāng)配比，從而實現(xiàn)由愈傷組織誘導(dǎo)出芽和根的項端分生組織的目的，并由此再生出新植株。獲得轉(zhuǎn)基因煙草后，再通過[④]繼代培養(yǎng)過程實現(xiàn)多個世代組織培養(yǎng)，從而實現(xiàn)了轉(zhuǎn)基因煙草的擴大培養(yǎng)?！军c睛】熟知果酒、果醋的制作原理以及基因工程的基本原理和操作要點是解答本題的關(guān)鍵，辨圖分析能力是本題考查的主要能力。8、葡萄糖16%乙醇搖床2/3需氧呼吸（或有氧呼吸）酵母SmaI和PstICaCl2D液體懸浮培養(yǎng)植物細胞工程生態(tài)（旅游）生態(tài)效益【解析】

釀酒和制醋是最古老的生物技術(shù)，至今已經(jīng)有五六千年的歷史。與酒與醋的生產(chǎn)有關(guān)的微生物，分別是酵母菌（真菌）和醋桿菌（細菌），它們各有不同的菌種，菌種的不同，所產(chǎn)生的酒和醋的風(fēng)味也不同。釀酒所用的原料是葡萄或其它果汁，酵母菌在無氧條件下利用葡萄糖進行酒精發(fā)酵，當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。果醋的制作是以果酒為原料，利用醋化醋桿菌，將酒精氧化成醋酸的過程?；蚬こ淌仟M義的遺傳工程，基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因（即目的基因）在宿主細胞中穩(wěn)定高效地表達。為了實現(xiàn)基因工程的目標，通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細胞等基本要素，并按照一定的程序進行操作，它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成，重組DNA導(dǎo)入受體細胞也稱（宿主）細胞、篩選含有目的基因的受體細胞和目的基因的表達等幾個方面?！驹斀狻浚ㄒ唬?）酵母菌是兼性厭氧型生物，在無氧條件下可將葡萄糖氧化成乙醇。乙醇對酵母菌的生長不利，當(dāng)培養(yǎng)液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。醋桿菌是好氧型生物，在有氧條件下將乙醇氧化成醋酸。液體培養(yǎng)可擴增菌種，常用搖床振蕩提高溶氧量以及菌和營養(yǎng)物質(zhì)的接觸。（2）用葡萄汁制葡萄酒：發(fā)酵瓶裝量不能超過2/3，否則溢出易染菌。酵母菌的需氧呼吸（或有氧呼吸）會消耗瓶內(nèi)的O2，而CO2易溶于水，因此發(fā)酵瓶出現(xiàn)負壓。使發(fā)酵盡快發(fā)生，必須增加菌種的量，使酵母菌快速進行厭氧呼吸。（二）（1）AluI會破壞目的基因，使用兩種不同的限制性核酸內(nèi)切酶（Sma和Pst）可防止質(zhì)粒自連，且能保證目的基因接入方向唯一。重組DNA分子中的標記基因為ampr，再與經(jīng)過CaCl2處理(使其成為感受態(tài)細胞)的無ampr和tet的農(nóng)桿菌液混合，使重組DNA進入農(nóng)桿菌。（2）將含有導(dǎo)入了目的基因的玫瑰細胞的試管放在搖床上，這種培養(yǎng)稱為液體懸浮培養(yǎng)。（3）從細胞和基因的角度，將外源基因?qū)胧荏w細胞，再通過將這些轉(zhuǎn)基因細胞進行培養(yǎng)，獲得具有特定性狀的新植株的技術(shù)就是植物細胞工程技術(shù)。（4）生態(tài)旅游工程生態(tài)（旅游）工程是指不消耗、不破壞當(dāng)?shù)刈匀宦糜钨Y源，旅游設(shè)施盡量生態(tài)化，促進地方經(jīng)濟發(fā)展。的可以減緩生態(tài)環(huán)境的破壞。發(fā)展生態(tài)旅游工程，可減緩生態(tài)環(huán)境的破壞。在旅游區(qū)種植抗蟲玫瑰，可有效降低農(nóng)藥對環(huán)境的污染，并獲得較佳的經(jīng)濟效益、社會效益和生態(tài)效益?！军c睛】熟悉微生物的培養(yǎng)以及基因工程的原理及過程是解答本題的關(guān)鍵。9、催化DNA復(fù)制PCR過程中DNA在高溫下解鏈，這樣的高溫下，普通的DNA聚合酶的生物活性喪失DNA連接p質(zhì)粒和插入片段（目的基因）乙和丙目的基因反向連接工程菌株除氮效果優(yōu)于野生菌Ⅰ．工程菌YP4S與野生菌分別處理實際污水36hⅡ．檢測除氮率【解析】

分析題干可知：目前認為微生物反硝化去除氮素污染更為經(jīng)濟有效，科研工作者采用基因工程技術(shù)構(gòu)建具有定向高效降解含氮化合物能力的工程菌，故需依據(jù)基因工程的相關(guān)原理進行分析作答?！驹斀狻浚?）亞硝酸鹽還原酶（Nir）是該過程的關(guān)鍵酶，酶是經(jīng)基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程形成的有催化作用的蛋白質(zhì)。（1）①PCR技術(shù)依據(jù)的原理是DNA分子的復(fù)制；因PCR過程中DNA解旋是在在高溫下進行的（90-95℃），這樣的高溫下，普通的DNA聚合酶的生物活性喪失，故在PCR技術(shù)中應(yīng)采用使用耐高溫的Taq酶。②連接兩個DNA片段所用的酶是DNA連接酶；因?qū)嶒炛衝irS基因與p質(zhì)粒是分別用HindⅢ和BamHI兩種限制酶處理的，故若再用HindⅢ和BamHI雙酶切之后，得到兩個片斷電泳結(jié)果分別與p質(zhì)粒和插入片段（nirS基因）電泳結(jié)果基本一致，可說明獲得重組質(zhì)粒pYP4S。③PCR技術(shù)要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結(jié)合，沿相反方向合成子鏈，結(jié)合目的基因的插入位置可知，PCR鑒定時應(yīng)選擇的最佳一對引物組合是乙和丙；若某學(xué)生錯選了圖中的另外一對引物組合（甲和乙），只有反向連接后才能擴增出長度為1．1kb的片段（1＋0.1kb）。（3）①圖1結(jié)果表明，無論是總氮還是NH4＋、NO3—的去除率，工程菌株除氮效果優(yōu)于野生菌。②因圖1是工程菌株YP4S在已滅菌的模擬污水中的處理結(jié)果，故要進一步證明工程菌對含氮污水治理更有效，應(yīng)用工程菌YP4S與野生菌分別處理實際污水36h，檢測除氮率。【點睛】解答本題需要透徹理解基因工程的基本工具、PCR技術(shù)的原理，并能讀懂實驗結(jié)果的數(shù)據(jù)分析，進而分析作答。10、菊花細胞植物EcoRI和PstIDNA連接酶受傷的葉片傷口處的細胞釋放出大量酚類物質(zhì)，可吸引農(nóng)桿菌移向這些細胞不抗氨芐青霉素，抗新霉素比較轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因兩種菊花的葉片細胞，轉(zhuǎn)基因菊花細胞中含有胰蛋白酶抑制劑基因、胰蛋白酶抑制劑的mRNA、胰蛋白酶抑制劑【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）該基因工程需要將胰蛋白酶抑制劑基因?qū)刖栈毎咕栈ň哂锌瓜x性，所以受體細胞是菊花細胞，屬于植物基因工程。（2）目的基因的兩端含有EcoRI、TthIIII、PstI三種限制酶的酶切位點，為了避免目的基因自身環(huán)化，不能只用EcoRI這一種限制酶進行切割，若用EcoRI和TthIIII切割目的基因，相應(yīng)的在對質(zhì)粒進行切割時會將復(fù)制原點切去，因此、為使目的基因與質(zhì)粒高效重組，最好選用EcoRI和PstI作用于含目的基因的DNA和質(zhì)粒，然后在DNA連接酶的作用下形成重組質(zhì)粒。（3）用農(nóng)桿菌感染時，應(yīng)優(yōu)先選