2024年高中生物新教材選擇性第3章章末檢測(cè)試卷(三)

章末檢測(cè)試卷(三)(滿分：100分)一、選擇題(本題包括18小題，每小題3分，共54分)1．(2023·江蘇泰州高二模擬)下列有關(guān)酶的敘述，正確的是()A．DNA連接酶以DNA的一條鏈為模板，將單個(gè)脫氧核苷酸連接起來(lái)B．限制性內(nèi)切核酸酶識(shí)別特定的核苷酸序列并在特定位點(diǎn)切割DNA分子C．DNA聚合酶可將兩個(gè)DNA分子片段連接起來(lái)D．逆轉(zhuǎn)錄酶是以RNA為模板指導(dǎo)核糖核苷酸連接合成DNA的酶答案B解析DNA連接酶連接兩個(gè)DNA分子片段，A錯(cuò)誤；DNA聚合酶催化脫氧核苷酸形成長(zhǎng)鏈，C錯(cuò)誤；逆轉(zhuǎn)錄酶是以RNA為模板指導(dǎo)脫氧核苷酸連接合成DNA的酶，D錯(cuò)誤。2．基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。根據(jù)圖示判斷，下列操作正確的是()A．目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅱ切割B．目的基因和質(zhì)粒均用限制酶Ⅰ切割C．質(zhì)粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割D．質(zhì)粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割答案C解析限制酶Ⅱ也能將限制酶Ⅰ識(shí)別序列切割，而限制酶Ⅰ不能將限制酶Ⅱ的識(shí)別序列切割。獲得目的基因需將目的基因兩端切割，所以用限制酶Ⅱ切割；切割質(zhì)粒只需切出一個(gè)切口，且用限制酶Ⅱ會(huì)同時(shí)破壞兩個(gè)標(biāo)記基因，不利于后期篩選目的細(xì)胞，所以用限制酶Ⅰ切割，故選C。3．如圖為某質(zhì)粒限制酶酶切圖譜。某基因不含圖中限制酶識(shí)別序列。為使PCR擴(kuò)增的該基因與該質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒，則擴(kuò)增的該基因兩端需分別引入哪兩種限制酶的識(shí)別序列()A．NdeⅠ和BamHⅠ B．NdeⅠ和XbaⅠC．XbaⅠ和BamHⅠ D．EcoRⅠ和KpnⅠ答案A解析構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，要將目的基因插入到啟動(dòng)子和終止子之間，而且不能破壞啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)、抗生素抗性基因等部位。故只能選用NdeⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，因此在PCR擴(kuò)增的該基因的兩端需分別引入NdeⅠ和BamHⅠ兩種限制酶的識(shí)別序列。4．(2023·貴州遵義高二檢測(cè))下列與DNA粗提取和鑒定有關(guān)的敘述，正確的是()A．預(yù)冷的酒精可使DNA更容易析出B．DNA在2mol·L－1的NaCl溶液中溶解度較低C．鑒定粗提取的DNA時(shí)，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組的區(qū)別是加不加二苯胺試劑D．用同樣方法從等體積兔血和雞血中提取的DNA量相近答案A解析DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，在2mol·L－1的NaCl溶液中溶解度較高，B錯(cuò)誤；鑒定粗提取的DNA時(shí)，對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組的區(qū)別是加不加DNA，兩組都需要加二苯胺試劑，C錯(cuò)誤；哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中無(wú)細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器，不能提取到DNA，故兔血不宜作為該實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)材料，D錯(cuò)誤。5.科學(xué)家設(shè)法將生長(zhǎng)激素基因?qū)肫渌矬w(細(xì)胞)內(nèi)，從而獲取大量的生長(zhǎng)激素，應(yīng)用于侏儒癥的早期治療。部分過(guò)程如圖所示，下列有關(guān)分析錯(cuò)誤的是()A．人的生長(zhǎng)激素mRNA只能從人的垂體細(xì)胞中提取B．過(guò)程①需要逆轉(zhuǎn)錄酶的參與C．過(guò)程②之前可用同一種限制性內(nèi)切核酸酶處理目的基因和質(zhì)粒D．人的生長(zhǎng)激素基因可以導(dǎo)入其他生物細(xì)胞內(nèi)，說(shuō)明生物之間共用一套遺傳密碼答案D解析人的生長(zhǎng)激素基因可以在其他生物細(xì)胞內(nèi)表達(dá)出人的生長(zhǎng)激素，說(shuō)明生物之間共用一套遺傳密碼，D錯(cuò)誤。6．(2023·河北邯鄲高二診斷)下列有關(guān)抗蟲基因表達(dá)載體的敘述，正確的是()A．切割含抗蟲基因的DNA片段和載體必須用同一種限制酶B．抗蟲基因表達(dá)載體中要有啟動(dòng)子和終止密碼子C．抗蟲基因表達(dá)載體必須具備標(biāo)記基因，其作用是篩選含有目的基因的受體細(xì)胞D．抗蟲基因的表達(dá)啟動(dòng)于復(fù)制原點(diǎn)答案C解析切割含抗蟲基因的DNA片段和載體可以用不同的限制酶，只要切割出的黏性末端相同即可，A錯(cuò)誤；抗蟲基因表達(dá)載體必須具備啟動(dòng)子和終止子，終止密碼子位于mRNA上，B錯(cuò)誤；抗蟲基因的表達(dá)開(kāi)始于啟動(dòng)子，D錯(cuò)誤。7．如圖1為某種質(zhì)粒簡(jiǎn)圖，圖2表示某外源DNA上的目的基因，小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切核酸酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位點(diǎn)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．在基因工程中若只用一種限制酶完成對(duì)質(zhì)粒和外源DNA的切割，則可選EcoRⅠB．如果將一個(gè)外源DNA分子和一個(gè)質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個(gè)含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRⅠ酶切位點(diǎn)有1個(gè)C．為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時(shí)可使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理D．一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoRⅠ切割后，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)答案B解析目的基因兩側(cè)都有，且質(zhì)粒也有的限制酶是EcoRⅠ，所以在基因工程中若只用一種限制酶完成對(duì)質(zhì)粒和外源DNA的切割，可選EcoRⅠ，A正確；如果將一個(gè)外源DNA分子和一個(gè)質(zhì)粒分別用EcoRⅠ酶切后，再用DNA連接酶連接，形成一個(gè)含有目的基因的重組DNA，此重組DNA中EcoRⅠ酶切位點(diǎn)有2個(gè)，B錯(cuò)誤；為了防止質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化，酶切時(shí)可使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理，C正確；一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)EcoRⅠ切割后，產(chǎn)生兩個(gè)黏性末端，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，D正確。8．如圖為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過(guò)程，下列有關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．a(chǎn)→b過(guò)程中一般用4種脫氧核苷酸為原料，并加入兩種引物B．b→c為轉(zhuǎn)基因綿羊的培育過(guò)程，常選用的受體細(xì)胞是受精卵C．a(chǎn)→b過(guò)程利用了DNA半保留復(fù)制的原理，需要使用RNA聚合酶D．b→d為轉(zhuǎn)基因植物的培育過(guò)程，其中④過(guò)程常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法答案C解析a→b過(guò)程是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段的過(guò)程，利用了DNA半保留復(fù)制的原理，需要使用耐高溫的DNA聚合酶，C錯(cuò)誤。9．(2023·安徽六安高二期末)有些膀胱上皮細(xì)胞可以產(chǎn)生一種稱為尿血小板溶素的膜蛋白。科學(xué)家將人的生長(zhǎng)激素基因插入小鼠基因組內(nèi)制成膀胱生物反應(yīng)器，使小鼠膀胱可以合成人的生長(zhǎng)激素，并分泌到尿液中。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是()A．人的生長(zhǎng)激素基因只存在于小鼠的膀胱上皮細(xì)胞中B．需要將尿血小板溶素基因與生長(zhǎng)激素基因的啟動(dòng)子重組在一起C．需用顯微注射法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入膀胱上皮細(xì)胞中D．只在小鼠細(xì)胞中檢測(cè)到人的生長(zhǎng)激素基因，不能說(shuō)明該技術(shù)已獲得成功答案D解析人的生長(zhǎng)激素基因存在于小鼠所有細(xì)胞中，但只在小鼠的膀胱上皮細(xì)胞中表達(dá)，A錯(cuò)誤；需要將生長(zhǎng)激素基因與尿血小板溶素基因的啟動(dòng)子重組在一起，B錯(cuò)誤；需用顯微注射法將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中，C錯(cuò)誤。10．某研究小組為了研制預(yù)防禽流感病毒的疫苗，開(kāi)展了前期研究工作。其簡(jiǎn)要的操作流程如圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()eq\x(禽流感病毒)eq\o(→,\s\up7(提取))eq\x(RNA)eq\o(→,\s\up7(①))eq\x(DNA)eq\o(→,\s\up7(選擇性),\s\do5(擴(kuò)增))eq\x(Q基因)eq\o(→,\s\up7(②))eq\x(攜帶Q基因的重組質(zhì)粒)eq\o(→,\s\up7(③))eq\x(導(dǎo)入大腸桿菌)eq\o(→,\s\up7(④))eq\x(表達(dá)Q蛋白)A．步驟①所代表的過(guò)程是逆轉(zhuǎn)錄B．步驟②需使用限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶C．步驟③可用Ca2＋處理大腸桿菌，使細(xì)胞從一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)恢復(fù)到常態(tài)D．答案C解析步驟③可用Ca2＋處理大腸桿菌，使其從常態(tài)轉(zhuǎn)化為一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，C錯(cuò)誤。11．(2023·江蘇徐州高二期中)科學(xué)家為提高玉米中賴氨酸的含量，計(jì)劃將天冬氨酸激酶中第352位的蘇氨酸替換為異亮氨酸，將二氫吡啶二羧酸合成酶中第104位的天冬酰胺替換為異亮氨酸。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是()A．蛋白質(zhì)工程和基因工程的根本區(qū)別是操作對(duì)象的差異B．對(duì)天冬氨酸激酶的改造需要以基因工程為基礎(chǔ)C．蛋白質(zhì)工程操作過(guò)程中，不需要酶和載體作為工具D．經(jīng)改造后的玉米賴氨酸含量提高這一性狀不可遺傳答案B解析蛋白質(zhì)工程和基因工程的操作對(duì)象都是基因，A錯(cuò)誤；蛋白質(zhì)工程的操作對(duì)象是基因，故需要酶和載體作為工具，C錯(cuò)誤；蛋白質(zhì)工程的操作對(duì)象是基因，經(jīng)改造后的玉米賴氨酸含量提高這一性狀是可以遺傳的，D錯(cuò)誤。12．胰島素可以用于治療糖尿病，但是胰島素被注射到人體后，會(huì)堆積在皮下，要經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)的時(shí)間才能進(jìn)入血液，而進(jìn)入血液的胰島素又容易分解，因此，治療效果受到影響。如圖是用蛋白質(zhì)工程設(shè)計(jì)速效胰島素的生產(chǎn)過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖推斷，下列相關(guān)說(shuō)法不正確的是()A．新的胰島素的預(yù)期功能是構(gòu)建新胰島素結(jié)構(gòu)模型的主要依據(jù)B．通過(guò)人工合成形成的新基因應(yīng)與原基因結(jié)合后轉(zhuǎn)移到大腸桿菌等受體細(xì)胞中才能得到準(zhǔn)確表達(dá)C．D．圖中合成出新的胰島素基因最關(guān)鍵的一步是構(gòu)建新的胰島素模型答案B解析通過(guò)人工合成形成的新基因應(yīng)與載體構(gòu)建基因表達(dá)載體，之后再導(dǎo)入受體細(xì)胞中使之得以表達(dá)，B錯(cuò)誤。13．基因編輯是指將外源DNA片段導(dǎo)入到細(xì)胞染色體特定位點(diǎn)或刪除基因內(nèi)部的片段，定點(diǎn)改造基因，獲得預(yù)期的生物體基因序列發(fā)生遺傳改變的技術(shù)。如圖是對(duì)某生物B基因進(jìn)行編輯的過(guò)程，該過(guò)程中用sgRNA可指引Cas9酶(一種能切割DNA的酶)結(jié)合到特定的切割位點(diǎn)。下列敘述正確的是()A．sgRNA是合成Cas9酶的模板B．sgRNA的堿基序列與靶基因堿基序列能夠全部互補(bǔ)C．Cas9酶可在特定切割位點(diǎn)斷裂核苷酸之間的磷酸二酯鍵D．B基因被編輯后因不能轉(zhuǎn)錄而無(wú)法表達(dá)相關(guān)蛋白質(zhì)答案C解析據(jù)題干和圖示可知，sgRNA是一段單鏈RNA，可指引Cas9酶結(jié)合到特定的切割位點(diǎn)，A錯(cuò)誤；靶基因部分堿基序列與sgRNA的堿基序列互補(bǔ)，B錯(cuò)誤；Cas9酶可在特定切割位點(diǎn)進(jìn)行切割，使相應(yīng)部位的核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，C正確；被編輯后的B基因仍能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，D錯(cuò)誤。14．如圖1表示某DNA片段及限制酶酶切位點(diǎn)，用限制酶XhoⅠ和SalⅠ分別處理該DNA片段后，酶切產(chǎn)物電泳分離的結(jié)果如圖2所示。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．不同的限制酶切割DNA后形成的黏性末端可能相同B．限制酶XhoⅠ與限制酶SalⅠ識(shí)別的核苷酸序列不同C．泳道①②分別是限制酶XhoⅠ和限制酶SalⅠ處理得到的產(chǎn)物D．用限制酶XhoⅠ和限制酶SalⅠ同時(shí)處理該DNA片段，可得到6種電泳產(chǎn)物答案C解析不同的限制酶識(shí)別的序列不同，但可能會(huì)產(chǎn)生相同的黏性末端，A正確；由題圖分析可知，泳道①②分別是限制酶SalⅠ和限制酶XhoⅠ處理得到的產(chǎn)物，C錯(cuò)誤；用限制酶XhoⅠ和限制酶SalⅠ同時(shí)處理該DNA片段，該片段共有5個(gè)酶切位點(diǎn)，可得到6種電泳產(chǎn)物，D正確。15．如圖為利用基因工程培育抗蟲植株的示意圖。下列相關(guān)敘述不正確的是()A．②的構(gòu)建需要限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶參與B．③侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒整合到④的染色體上C．即使④的染色體上含抗蟲基因，⑤也不一定能表現(xiàn)出抗蟲性狀D．⑤只要表現(xiàn)出抗蟲性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異答案B解析構(gòu)建重組質(zhì)粒需要用到限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶，A正確；含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒的T－DNA整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上，B錯(cuò)誤；導(dǎo)入受體細(xì)胞的目的基因表達(dá)后，轉(zhuǎn)基因植株方能表現(xiàn)出相應(yīng)性狀，若目的基因在受體細(xì)胞中不表達(dá)，轉(zhuǎn)基因植株不能表現(xiàn)出相應(yīng)性狀，C正確；⑤表現(xiàn)出抗蟲性狀，則表明該植株細(xì)胞發(fā)生了基因重組，基因重組是可遺傳變異，D正確。16．研究人員通過(guò)RNA沉默技術(shù)，特異性降低蘋果細(xì)胞內(nèi)多酚氧化酶基因的表達(dá)水平，使蘋果被切開(kāi)后即使長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中也不會(huì)被氧化褐變。如圖是此過(guò)程原理示意圖，下列有關(guān)敘述不正確的是()A．細(xì)胞內(nèi)多酚氧化酶基因的表達(dá)包括圖示中的①②過(guò)程B．將目的基因成功導(dǎo)入蘋果細(xì)胞中需限制酶、DNA連接酶和RNA聚合酶C．“RNA沉默”的含義是mRNA不能翻譯產(chǎn)生多酚氧化酶D．目的基因的表達(dá)序列與多酚氧化酶基因的表達(dá)序列互補(bǔ)，且要同時(shí)在同一細(xì)胞內(nèi)表達(dá)答案B解析圖示中的①②過(guò)程分別為轉(zhuǎn)錄、翻譯，多酚氧化酶基因的表達(dá)指多酚氧化酶基因控制多酚氧化酶合成的過(guò)程，需要經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄、翻譯兩個(gè)過(guò)程，A正確；將目的基因成功導(dǎo)入蘋果細(xì)胞中需要構(gòu)建基因表達(dá)載體，該過(guò)程需要限制酶和DNA連接酶，不需要RNA聚合酶，B錯(cuò)誤；據(jù)圖分析可知，目的基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA可以和多酚氧化酶基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA互補(bǔ)配對(duì)，形成RNA雙鏈，使mRNA不能與核糖體結(jié)合，從而阻止了翻譯過(guò)程，C正確；使目的基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA和多酚氧化酶基因轉(zhuǎn)錄形成的mRNA互補(bǔ)配對(duì)，應(yīng)使目的基因的表達(dá)序列與多酚氧化酶基因的表達(dá)序列互補(bǔ)，且要同時(shí)在同一細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，D正確。17．(2023·河南開(kāi)封高二期中)引物的設(shè)計(jì)是影響PCR擴(kuò)增反應(yīng)的效率和特異性的關(guān)鍵因素。下列相關(guān)敘述正確的是()A．引物的堿基數(shù)量越少則復(fù)性溫度越低，目標(biāo)DNA獲得率越高B．根據(jù)需要可在引物的5′端添加限制酶識(shí)別序列、點(diǎn)突變序列等C．兩種引物的復(fù)性溫度差異較大，可減少引物與模板的非特異性結(jié)合D．引物的G、C含量越高，結(jié)合特異性越強(qiáng)，越利于目標(biāo)DNA的擴(kuò)增答案B解析引物的堿基數(shù)量越少則復(fù)性溫度越低，特異性越弱，目標(biāo)DNA獲得率越低，A錯(cuò)誤；兩種引物的復(fù)性溫度差異較大，導(dǎo)致不能同時(shí)復(fù)性，會(huì)增加引物與模板的非特異性結(jié)合，C錯(cuò)誤；引物的G、C含量越高，結(jié)合特異性越強(qiáng)，但G、C過(guò)高，不利于復(fù)性，不利于目標(biāo)DNA的擴(kuò)增，D錯(cuò)誤。18．(2023·河北保定高二聯(lián)考)亞洲棉的突變型光籽和野生型毛籽是一對(duì)相對(duì)性狀，研究發(fā)現(xiàn)，亞洲棉某突變體的光籽表型與8號(hào)染色體的～880kb至～903kb區(qū)間相關(guān)，研究人員根據(jù)野生型毛籽棉的該區(qū)間設(shè)計(jì)連續(xù)的重疊引物進(jìn)行PCR，擴(kuò)增后電泳結(jié)果如圖所示。下列有關(guān)說(shuō)法不正確的是()A．提取該突變體和野生型亞洲棉的8號(hào)染色體上的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增B．圖中PCR產(chǎn)物的鑒定是通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)進(jìn)行的C．據(jù)圖分析可知，相對(duì)分子質(zhì)量較大的擴(kuò)增產(chǎn)物與點(diǎn)樣處的距離較近D．該突變體出現(xiàn)的根本原因是引物6對(duì)應(yīng)區(qū)間發(fā)生了堿基對(duì)的替換答案D解析由于8號(hào)染色體的～880kb至～903kb區(qū)間與突變體的光籽表型相關(guān)，故提取突變體和野生型的8號(hào)染色體上的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，A正確；題圖中PCR產(chǎn)物的鑒定是通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)進(jìn)行的，相對(duì)分子質(zhì)量較大的擴(kuò)增產(chǎn)物遷移速率較慢，與點(diǎn)樣處的距離較近，B、C正確；根據(jù)題圖所示，野生型和突變體經(jīng)引物6擴(kuò)增的產(chǎn)物不同，其中突變體的相應(yīng)擴(kuò)增產(chǎn)物較大，故可推知8號(hào)染色體上的引物6對(duì)應(yīng)的區(qū)間發(fā)生堿基對(duì)的插入是該突變體光籽性狀出現(xiàn)的根本原因，D錯(cuò)誤。二、非選擇題(本題包括4小題，共46分)19．(9分)將乙肝病毒表面抗原基因?qū)氩葺?xì)胞中，由此可獲得用來(lái)預(yù)防乙肝的一種新型疫苗，為預(yù)防乙肝開(kāi)辟了一條新途徑。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)獲得乙肝病毒表面抗原基因后，常利用____________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。把基因轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌內(nèi)(2)使用農(nóng)桿菌將乙肝病毒表面抗原基因?qū)氩葺?xì)胞中，農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T－DNA可將乙肝病毒表面抗原基因轉(zhuǎn)移至草莓細(xì)胞中的____________上。目的基因進(jìn)入草莓細(xì)胞內(nèi)并在草莓細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)，這個(gè)過(guò)程稱為_(kāi)_____________________________________。(3)在基因工程操作過(guò)程中，需要用__________酶和__________酶構(gòu)建基因表達(dá)載體，基因表達(dá)載體要有________________，以便篩選出含有目的基因的受體細(xì)胞。(4)在分子水平上，可采用______________的方法來(lái)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因草莓果實(shí)提取液中有無(wú)相應(yīng)的抗原。答案(1)PCRCa2＋(2)染色體DNA轉(zhuǎn)化(3)限制DNA連接標(biāo)記基因(4)抗原—抗體雜交20．(11分)(2023·四川內(nèi)江高二期中)近十年來(lái)，PCR技術(shù)(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室里的一種常規(guī)手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖)，在很短的時(shí)間內(nèi)，將DNA擴(kuò)增幾百萬(wàn)倍甚至幾十億倍，使實(shí)驗(yàn)所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)加熱至94℃的目的是打開(kāi)________鍵，這一步稱為變性。(2)當(dāng)溫度降低時(shí)，引物與模板__________端結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最終合成兩個(gè)DNA分子。(3)PCR技術(shù)的必要條件，除了模板、原料、能量、酶以外，至少還需要三個(gè)條件，即：液體環(huán)境、適宜的________和________，前者由PCR儀自動(dòng)調(diào)控，后者則靠________來(lái)維持。(4)DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是________________________________________。復(fù)性溫度的設(shè)置跟引物有關(guān)，________________________________________，復(fù)性溫度設(shè)定越高；若復(fù)性溫度太低，會(huì)造成________________________，不但會(huì)造成非目標(biāo)DNA片段多，而且會(huì)出現(xiàn)無(wú)序擴(kuò)增。答案(1)氫(2)3′(3)溫度酸堿度緩沖液(4)DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈引物越長(zhǎng)、引物中G、C含量越高引物的特異性下降21．(12分)(2023·河北石家莊高二調(diào)研)如圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因(TetR)和氨芐青霉素抗性基因(AmpR)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)EcoRⅤ酶切位點(diǎn)為eq\a\vs4\al\co1(…GAT↓ATC…,…CTA↑TAG…)，EcoRⅤ酶切出來(lái)的線性載體P1為_(kāi)_______末端。(2)用TaqDNA聚合酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得的目的基因片段，其兩端各自帶有一個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個(gè)堿基為_(kāi)_______的脫氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在______________酶作用下，形成重組質(zhì)粒P3。(3)為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選，得到A、B、C三類菌落，其生長(zhǎng)情況如表(“＋”代表生長(zhǎng)，“－”代表不生長(zhǎng))。根據(jù)表中結(jié)果判斷，應(yīng)選擇的菌落是______(填表中字母)類，另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是___________________、________________________。平板類型菌落類型ABC無(wú)抗生素＋＋＋氨芐青霉素＋＋－四環(huán)素＋－－氨芐青霉素＋四環(huán)素＋－－(4)為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR鑒定。圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，PCR鑒定時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是__________________________。某學(xué)生用圖中另外一對(duì)引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp片段，原因是________________________________________________________。答案(1)平(2)胸腺嘧啶(T)DNA連接(3)BA類菌落含有P0C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒(4)乙和丙目的基因反向連接22．(14分)(2023·湖南永州高二期末)科研人員通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出超量表達(dá)P蛋白的轉(zhuǎn)基因甜玉米。在超量表達(dá)P基因載體的構(gòu)建中，含P基因的DNA片段以及Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖所示，其中強(qiáng)啟動(dòng)子能驅(qū)動(dòng)基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：(1)以RNA為模板，通過(guò)RT－PCR技術(shù)可獲取P基因。進(jìn)行RT－PCR時(shí)一般要加入4種脫氧核糖核苷三磷酸(dNTP)而不是脫氧核苷酸，其原因是________________________________________________________________________________________________________________，同時(shí)需加入的酶有________________________。為了特異性擴(kuò)增P基因序