番茄對主要病害抗性鑒定評價技術規(guī)程 第6部分：番茄抗灰葉斑病鑒定評價技術規(guī)程-送審討論稿

1本文件適用于所有種類的番茄，包括番茄屬（LycopersiconMiller.）下2個亞群和9個種，以及栽培24接種體制備4.1基本設備持在20℃~30℃)、塑料盆、鋁鍋、電爐、培養(yǎng)皿4.2接種體分離4.3接種體確定分別選擇分布較廣、致病力較強的番茄灰葉斑病菌的優(yōu)勢菌4.4接種體保存4.4.1短期保存將番茄灰葉斑病菌分別接種于PDA斜面養(yǎng)基上，在25℃~26℃培養(yǎng)7d后，置4℃冰箱中保存。25℃~26℃培養(yǎng)7d后，取出濾紙片，經真空干燥后于-20℃~-80℃的低溫冰箱中保存。34.5接種體懸浮液制備將保存在PDA培養(yǎng)基上的灰葉斑病菌，在無菌操作下，移植于PDA平板培養(yǎng)基上，置于25℃~26℃替，置于25℃~26℃條件下形成大量分生孢子，在用無菌蒸餾水洗下并收集分生孢子懸浮液，得到接5鑒定番茄苗培育露白發(fā)芽后播植于溫室，采用營養(yǎng)缽盆栽法進行育苗，基質應自來水澆透育苗基質，隨后將已催芽的待鑒定番茄種子播于上述塑料營養(yǎng)缽中，每缽1粒種子，然后用泥炭育苗基質覆蓋，以蓋住種子為宜。重復3次，每重復30缽，5.5接種前管理播種后將塑料缽置于溫室中，進行培育，出苗前，溫室溫度保持在25℃~30℃,保持盆中土壤濕度；番茄苗出土后，溫室溫度保持在23℃~25℃,土壤濕度保持在60%～80%，正常栽培管理，不施用每年4月～6月和10月～12月為番茄對灰葉斑病抗性鑒定與抗性番茄對灰葉斑病的抗病性鑒定接種，分別在番茄4用無菌水將接種體懸浮液稀釋，配制成接種體濃度為1.0×105個孢子/mL～4.0×105個孢子/mL的接接種后的番茄苗，置于溫度為20℃~22℃的溫室中，黑暗保濕（RH95%～100%）24h；以后每天光照12h～14h，溫室溫度保持在20℃~22℃,適時澆水，保持正常栽培管理，不施用殺菌劑。接種后7d～10d時進行調查。也可根據感病的對照品種病級擴展到最高病級的Ri=×100…………（1）59結果評價9.1鑒定有效性判別當感病對照品種達到其相應感病程度（DI≥50.0），該批9.2抗病性劃分12R345S69.3鑒定結果記錄編號品種/種質名稱來源重復病情級別病情指數平均病指抗性評價013579ⅠⅡⅢ……6播種日期接種日期接種生育期接種病原物分離編號接種病原物株系類型調查時間鑒定人（簽字）：校核人（簽字）：鑒定技術負責人（簽字）：鑒定單位蓋章）7200g，切成小塊放入鍋中，加水1000ml，在加熱器上加熱至沸騰，維持30min，用2層紗布趁熱在量杯上過濾，棄濾渣，取濾液補充水分到1000ml；把濾液放入鍋中，加入葡萄糖20g，瓊脂17g，然后至6.8～7.0。將配制的培養(yǎng)基分裝入試管或500ml三角瓶內，在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞或泡沫度的1/5，滅菌后制成斜面；三角瓶的分裝量以不超過其容積的一半為宜，滅菌后倒入滅菌培養(yǎng)皿，制8S.Solani分生孢子梗暗色，多隔、單生或1~5根束生，大小71.47μm~198.88μm×3~5μm；分生孢子