國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《氨基酸中鐵和鉛的測(cè)定方法原子吸收光譜法》

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《氨基酸中鐵和鉛的測(cè)定方法原子吸收光譜法》編制說(shuō)明概述1.1項(xiàng)目的意義及任務(wù)來(lái)源鐵是人體所需一種微量元素，缺鐵會(huì)引起缺鐵性貧血和引起心理活動(dòng)和智力發(fā)育的損害及行為改變。同時(shí)鐵一旦被人體吸收，除了部分隨失血丟失外，很少有其他排泄途徑。如果攝入過(guò)量的鐵元素，體內(nèi)多余的鐵以鐵蛋白的形式儲(chǔ)存起來(lái)，而鐵儲(chǔ)備過(guò)多會(huì)增加患心臟病的危險(xiǎn)。研究發(fā)現(xiàn)，血紅蛋白與氧的結(jié)合、分離，同鐵的關(guān)系十分密切，鐵過(guò)多會(huì)促進(jìn)氧自由基增加，而氧自由基對(duì)機(jī)體有顯著的超氧化作用，鐵貯存過(guò)多會(huì)促使不穩(wěn)定的自由基破壞健康的機(jī)體組織。此外，血液中的鐵蛋白與膽固醇相互作用能使心臟病惡化，鐵蛋白高的人心臟病發(fā)病率是正常人的兩倍。人體從食物中攝取所需的大部分鐵，并小心控制著鐵含量。鉛是一種具有積淀性的重金屬元素，人體吸收到一定量后會(huì)引起重金屬中毒事故。聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織(FAO/WHO)，食品法典委員會(huì)(CAC)1993年食品添加劑和污染物聯(lián)合專家委員會(huì)(JECFA)，建議每人每周允許攝人量(PTWD為25pg/(kg"bw)。為控制人體鉛的攝人量，在食品監(jiān)督領(lǐng)域中列為重要監(jiān)測(cè)項(xiàng)目。所以，氨基酸中的鐵和鉛是氨基酸檢驗(yàn)項(xiàng)目中重要的一部分，目前我國(guó)對(duì)食品中鐵和鉛的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)有GB/T5009.12-2003和GB/T5009.90-2003，國(guó)內(nèi)還沒有建立對(duì)氨基酸中的鐵和鉛的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)方法，國(guó)外對(duì)其已建立了標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)鐵和鉛含量有嚴(yán)格的控制，因此，為突破國(guó)際技術(shù)壁壘，維護(hù)本國(guó)企業(yè)利益，保障國(guó)民的身體健康，對(duì)于氨基酸中的鐵和鉛的檢驗(yàn)具有重要意義。本標(biāo)準(zhǔn)制訂小組參考國(guó)內(nèi)外氨基酸中鐵和鉛的各種檢測(cè)方法，研究提出了原子吸收法測(cè)定氨基酸中鐵和鉛的檢測(cè)方法，向國(guó)標(biāo)委提出了制標(biāo)申請(qǐng)，得到了國(guó)標(biāo)委的立項(xiàng)批準(zhǔn)，計(jì)劃號(hào)：20080731-T-606本標(biāo)準(zhǔn)的制定填補(bǔ)了國(guó)內(nèi)空白。1.2項(xiàng)目承擔(dān)單位本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國(guó)湖北出入境檢驗(yàn)檢疫局起草完成。二、編制依據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)的編制依據(jù)GB/T1.1-2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則》、GB/T20001.4-2001《標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則第4部分：化學(xué)分析方法》的要求進(jìn)行編制制定的。三、國(guó)內(nèi)外方法概況目前對(duì)于鐵的測(cè)定，國(guó)內(nèi)外有一些相關(guān)研究。在國(guó)外，AACC(美國(guó)谷物化學(xué)師協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn))40-40[1]中規(guī)定了一種定性檢測(cè)方法,該方法利用鐵與顯色劑反應(yīng)使面粉表面出現(xiàn)紅色斑點(diǎn)的特性,可定性檢測(cè)面粉中的三價(jià)鐵。根據(jù)肉眼觀測(cè)的斑點(diǎn)特點(diǎn)也可以對(duì)面粉中的鐵做半定量分析。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定谷物中鐵的強(qiáng)化量為24mg/kg～48mg/kg。對(duì)于食品中的鐵，已有國(guó)標(biāo)GB/T5009.90-2003[2]《食物中鐵、鎂、錳的測(cè)定方法》（石墨爐原子吸收光譜法）；國(guó)標(biāo)GB/T18932.12-2002[3]《蜂蜜中鉀、鈉、鈣、鎂、鋅、鐵、銅、錳、鉻、鉛含量的測(cè)定方法原子吸收光譜法》；國(guó)標(biāo)GB/T18932.11-2002[4]《蜂蜜中鉀、磷、鐵、鈣、鋅、鋁、鈉、鎂、硼、錳、銅、鋇、欽、釩、鎳、鉆、鉻含量的測(cè)定方法電感藕合等離子體原子發(fā)射光譜(ICP-AES)法》；對(duì)于飼料中的鐵有國(guó)標(biāo)GB/T13885-2003[5]《動(dòng)物飼料中鈣、銅、鐵、鎂、錳、鉀、鈉和鋅含量的測(cè)定原子吸收光譜法》；其它還有等離子體發(fā)射光譜法、比色法測(cè)定鐵、重鉻酸鉀容量法等；在我國(guó)，鉛的檢驗(yàn),現(xiàn)已有多種方法見報(bào)道：食品中的鉛，已有國(guó)標(biāo)GB/T5009.12-2003[6]《食品中鉛的測(cè)定》（石墨爐原子吸收光譜法、氫化物原子熒光光譜法、火焰原子吸收光譜法、雙硫腙比色法、單掃描極譜法）；國(guó)標(biāo)GB/T5009.75-2003[7]《食品添加劑中鉛的測(cè)定》（雙硫蹤比色法）；對(duì)大米中鉛有行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)sN/T0778一1999[8]《出口大米中銅、鋅、鉛、鎬的測(cè)定方法原子吸收分光光度法》；對(duì)飼料中的鉛有國(guó)標(biāo)GB/T13080-2004[9]《飼料中鉛的測(cè)定原子吸收光譜法》；對(duì)茶葉中的鉛有雙硫腙比色法、微分電位溶出法、微分脈沖陽(yáng)極溶出伏安法、氫化物－原子熒光光譜法等；對(duì)化妝品中鉛有國(guó)標(biāo)GB7917.3-87[10]《化妝品衛(wèi)生化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法鉛》（雙硫腙萃取分光光度法、火焰原子吸收分光光度法），化妝品中的鉛其它檢測(cè)方法有ICP-AES法、電位溶出法等。目前，在我國(guó)對(duì)于氨基酸中的鐵和鉛的測(cè)定還沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)方法。雖然已有食品中的鐵和鉛的國(guó)標(biāo)，但與食品相比，氨基酸有其特殊性，本標(biāo)準(zhǔn)擬采用目前常用的原子吸收光譜法，建立測(cè)定氨基酸中鐵和鉛的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)的制定對(duì)于氨基酸中的鐵和鉛的檢驗(yàn)具有重要意義。四、主要實(shí)驗(yàn)技術(shù)論證4.1樣品預(yù)處理方法4.1.1試樣制備微量元素分析的試樣制備過(guò)程應(yīng)特別注意防止各種污染。所用設(shè)備如電磨、勻漿器、打碎機(jī)等必須是不銹鋼制品。所用容器必須使用玻璃或聚乙烯制品。樣品取樣后，去雜物后、磨碎、過(guò)20目篩，立即裝容器密封保存，防止空氣中的灰塵和水分污染。4.1.2試樣消解選用干法灰化和濕法消解對(duì)樣品進(jìn)行前處理，實(shí)際操作時(shí)可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件選用以下任何一種方法消解。干法灰化:稱取2.5g（精確至0.0001g）試樣于瓷坩堝中，先用小火在可調(diào)式電熱板上炭化至無(wú)煙，然后移入馬弗爐500℃灰化6h～8h時(shí)，取出冷卻。若個(gè)別試樣灰化不徹底，則加1mL混合酸在可調(diào)式電爐上小火加熱，反復(fù)多次直到消化完全，放冷，用硝酸(0.5mol/L)將灰分溶解，用滴管將試樣消化液洗入或過(guò)濾入(視消化后試樣的鹽分而定)25mL容量瓶中，用水少量多次洗滌瓷坩堝，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混勻備用;同時(shí)作試劑空白。濕式消解法:稱取試樣2.5g（精確至0.0001g）于錐形瓶或高腳燒杯中，放數(shù)粒玻璃珠加10mL混合酸，加蓋浸泡過(guò)夜，加一小漏斗在電爐上消解，若變棕黑色，再加混合酸，直至冒白煙，消化液呈無(wú)色透明或略帶黃色，放冷用滴管將試樣消化液洗入或過(guò)濾入(視消化后試樣的鹽分而定)25mL容量瓶中，用水少量多次洗滌錐形瓶或高腳燒杯，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混勻備用;同時(shí)作試劑空白。4.2儀器和分析條件4.2.1儀器所用玻璃儀器均需以硝酸(1+5)浸泡過(guò)夜，用水反復(fù)沖洗，最后用去離子水沖冼干凈。原子吸收分光光度計(jì)。4.3測(cè)定（石墨爐法）4.3.1原子吸收石墨爐法測(cè)定鉛的測(cè)定參考條件為波長(zhǎng)283.3nm,狹縫0.2nm-1.0nm，燈電流5mA-7mA，干燥溫度120℃,20s;灰化溫度450℃，持續(xù)15s～20s，原子化溫度1700℃～2300℃，持續(xù)4s～5s。;空氣流量8L/min。4.3.2按照標(biāo)準(zhǔn)草案，制備鉛的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，其濃度分別為：0μg/L、10μg/L、20μg/L、40μg/L、80μg/L。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法見表2。在本方法所確定的試驗(yàn)條件下從低到高濃度同時(shí)放入儀器進(jìn)行測(cè)定，得到上述各濃度的吸光值。以鉛的濃度（ug/L）為橫坐標(biāo)，以其吸光值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算線性回歸方程。線性方程及相關(guān)線性系數(shù)見表1，標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1。由此可見，在0μg/L～80μg/L濃度范圍內(nèi)，鉛的濃度與相應(yīng)的峰面積呈良好的線性關(guān)系。表1不同濃度系列標(biāo)準(zhǔn)稀釋液的配制方法元素貯備液濃度（mg/L）吸取貯備量mL定容體積（容量瓶）（mL）稀釋溶液標(biāo)準(zhǔn)稀釋液濃度（μg/L）鉛1001000.5mol/L硝酸溶液00.15150.30250.45450.60600.8080表2鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液線性方程和相關(guān)系數(shù)鉛標(biāo)液濃度吸光值STD1(0μg/L)0.0096STD1(15μg/L)0.1199STD2(30μg/L)0.2123STD3(45μg/L)0.3097STD4(60μg/L)0.4078STD5(80μg/L)0.5362線性方程：y=0.0065x+0.0155，R=0.9998圖1Pb標(biāo)準(zhǔn)曲線圖4.3.3被測(cè)組分的濃度能產(chǎn)生比空白足夠大的信號(hào)，這個(gè)信號(hào)能夠被良好實(shí)驗(yàn)室在常規(guī)操作條件下以指定的置信水平定量檢出，這個(gè)濃度就是測(cè)定低限。一般以產(chǎn)生10倍試劑空白的標(biāo)準(zhǔn)偏差的信號(hào)所對(duì)應(yīng)的濃度作為測(cè)定低限。本標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)以下試驗(yàn)方案：按樣品前處理方法處理試劑空白樣，平行做10個(gè)空白樣，計(jì)算空白樣品的標(biāo)準(zhǔn)偏差S空白，見表5。表3試劑空白鉛的含量測(cè)定ug/L空白樣品（μg/L）1234567平均標(biāo)準(zhǔn)偏差Pb3.22.10.52.21.40.53.01.91.2Pb：S空白1＝1.2μg/L測(cè)定低限＝10×S空白1×25/2.5g＝10×1.2μg/L×25mL/2.5g＝0.12mg/kg將濃度分別為1μg/L、2μg/L、5μg/L的Pb標(biāo)準(zhǔn)溶液依次進(jìn)樣，吸光度值明顯，綜合考慮，取2μg/mL為Pb的測(cè)定低限濃度，經(jīng)換算，氨基酸中的Pb測(cè)定低限為0.12mg/kg,綜合考慮，用原子吸收光譜-石墨爐法測(cè)定氨基酸中的鉛，測(cè)定低限取為0.2mg/kg。4.3.4為確定本方法的回收率和精密度良好，設(shè)計(jì)以下實(shí)驗(yàn)方案：選取三個(gè)點(diǎn)即測(cè)定低限、兩倍測(cè)定低限、四倍測(cè)定低限進(jìn)行回收率和精密度試驗(yàn)，選取谷氨酸和丙氨酸進(jìn)行回收率和精密度試驗(yàn)，谷氨酸加標(biāo)量為0.2mg/kg、0.4mg/kg、0.8mg/kg，丙氨酸加標(biāo)量為0.2mg/kg、0.4mg/kg、0.8mg/kg。表4谷氨酸中鉛加標(biāo)回收率及精密度試驗(yàn)次數(shù)本底（mg/kg）加標(biāo)量Pb=0.2mg/kg加標(biāo)量Pb=0.4mg/kg加標(biāo)量Pb=0.8mg/kg實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）1未檢出0.1890.000.3895.000.7897.52未檢出0.1995.000.3997.500.82102.53未檢出0.1890.000.40100.000.7897.54未檢出0.20100.000.3895.000.7796.255未檢出0.21105.000.41102.500.76956未檢出0.21105.000.3792.500.82102.57未檢出0.1890.000.3895.000.7695平均%――――96.4――96.8――98.0RSD%――7.2――3.6――3.3――‘表5丙氨酸中鉛加標(biāo)回收率及精密度試驗(yàn)次數(shù)本底（mg/kg）加標(biāo)量Pb=0.2mg/kg加標(biāo)量Pb=0.4mg/kg加標(biāo)量Pb=0.8mg/kg實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）1未檢出0.1995.00.3690.00.7594.02未檢出0.21105.00.3997.50.7796.03未檢出0.21105.00.41102.50.80100.04未檢出0.1890.00.3895.00.82102.05未檢出0.1890.00.40100.00.7898.06未檢出0.20100.00.3895.00.7594.07未檢出0.1995.00.41102.50.80100.0平均%――――97.1――97.5――97.7RSD%――6.5――4.7――3.2――4.4鐵和鉛的測(cè)定(火焰原子吸收法)4.4.1鉛和鐵的原子吸鉛的測(cè)定參考條件為波長(zhǎng)283.3nm，鐵的參考條件波長(zhǎng)248.3nm,火焰為空氣-乙炔；稀釋溶液0.5mol/L硝酸。4.4.2方法線性范圍按照標(biāo)準(zhǔn)草案，制備鐵和鉛的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，鉛濃度分別為：0mg/L、1mg/L、2mg/L、4mg/L、6mg/L、8mg/L、10mg/L。鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度分別為0、0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、4mg/L、8mg/L、10mg/L；標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法見表6。在本方法所確定的試驗(yàn)條件下從低到高濃度依次放入儀器進(jìn)行測(cè)定，得到上述各濃度的吸光值。以鉛和鐵的濃度（mg/L）為橫坐標(biāo)，以其吸光值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算線性回歸方程。線性方程及相關(guān)線性系數(shù)見表1，標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1。由此可見，鉛在0mg/L～10mg/L濃度范圍內(nèi)，鉛的濃度與相應(yīng)的吸光值呈良好的線性關(guān)系,鐵在0～10mg/L濃度范圍內(nèi)，鐵的濃度與相應(yīng)的吸光值呈良好線性關(guān)系。表6不同濃度標(biāo)液稀釋元素貯備液濃度（mg/L）吸取貯備量mL定容體積（容量瓶）（mL）稀釋溶液標(biāo)準(zhǔn)稀釋液濃度（mg/L）鉛10001000.5mol/L硝酸溶液01122446688101000.5mol/L硝酸溶液10鐵100000.50.5112244881010表7鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液線性方程和相關(guān)系數(shù)鉛標(biāo)液濃度吸光值STD0(0mg/L)0.0001STD1(1mg/L)0.0392STD2(2mg/L)0.0775STD3(4mg/L)0.1532STD4(6mg/L)0.2349STD5(8mg/L)0.3017STD6(10mg/L)0.3917線性方程：y=0.0387x-0.0002，R=0.9996圖2鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線表8鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液線性方程和相關(guān)系數(shù)鐵標(biāo)液濃度吸光值STD0(0mg/L)0.001STD1(0.5mg/L)0.0332STD2(1mg/L)0.0627STD3(2mg/L)0.1219STD4(4mg/L)0.2408STD5(8mg/L)0.4812STD6(10mg/L)0.6193線性方程：y=0.0611x+0.0002，R=0.9998圖3鐵標(biāo)準(zhǔn)曲線4.4.3方法測(cè)定低限被測(cè)組分的濃度能產(chǎn)生比空白足夠大的信號(hào)，這個(gè)信號(hào)能夠被良好實(shí)驗(yàn)室在常規(guī)操作條件下以指定的置信水平定量檢出，這個(gè)濃度就是測(cè)定低限。一般以產(chǎn)生10倍試劑空白的標(biāo)準(zhǔn)偏差的信號(hào)所對(duì)應(yīng)的濃度作為測(cè)定低限。本標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)以下試驗(yàn)方案：按樣品前處理方法處理試劑空白樣，平行做10個(gè)空白樣，計(jì)算空白樣品的標(biāo)準(zhǔn)偏差S空白，見表5。表9試劑空白鉛和鐵的含量測(cè)定mg/L空白樣品（μg/L）1234567平均標(biāo)準(zhǔn)偏差Pb0.090.110.070.100.080.070.060.080.018Fe0.060.080.110.080.080.190.090.0850.016Pb：S空白1＝0.018mg/L測(cè)定低限＝10×S空白1×25/2.5g＝10×0.018mg/L×25mL/2.5g＝1.8mg/kgFe：S空白2＝0.016mg/L測(cè)定低限＝10×S空白2×25/2.5g＝10×0.016mg/L×25mL/2.5g＝1.6mg/kg將濃度分別為0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L的Pb、Fe標(biāo)準(zhǔn)溶液依次進(jìn)樣，吸光度值明顯，經(jīng)換算，氨基酸中的Pb測(cè)定低限為1.8mg/kg,Fe測(cè)定低限位1.6mg/kg綜合考慮，用原子吸收光譜-火焰法測(cè)定氨基酸中的鉛測(cè)定低限取為2mg/kg、鐵為2mg/kg。4.4.5樣品中的鉛和鐵的精密度和回收率試驗(yàn)為確定本方法的回收率和精密度良好，設(shè)計(jì)以下實(shí)驗(yàn)方案：選取三個(gè)點(diǎn)即測(cè)定低限、兩倍測(cè)定低限、十倍測(cè)定低限進(jìn)行回收率和精密度試驗(yàn)，選取谷氨酸和丙氨酸進(jìn)行回收率和精密度試驗(yàn)，谷氨酸加標(biāo)量為2mg/kg、4mg/kg、20mg/kg，丙氨酸加標(biāo)量為2mg/kg、4mg/kg、20mg/kg。表9谷氨酸中鉛加標(biāo)回收率及精密度試驗(yàn)次數(shù)本底（mg/kg）加標(biāo)量Pb=2mg/kg加標(biāo)量Pb=4mg/kg加標(biāo)量Pb=20mg/kg實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）1未檢出1.8592.5410019.798.52未檢出1.9899.03.997.520.5102.53未檢出2.05102.54.1102.519.2964未檢出1.9597.53.89520.3101.55未檢出1.9095.04.1102.520.1100.56未檢出1.8592.53.997.519.6987未檢出2.07103.53.895.019.999.5平均%――――97.5――98.6――99.5RSD%――4.6――3.2――2.2――表10谷氨酸中鐵加標(biāo)回收率及精密度試驗(yàn)次數(shù)本底（mg/kg）加標(biāo)量Fe=2mg/kg加標(biāo)量Fe=4mg/kg加標(biāo)量Fe=20mg/kg實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）14.025.8189.57.7793.825.22106.024.025.7787.57.9097.024.52102.534.025.9094.08.13102.823.8299.044.025.8591.57.9798.824.12100.554.025.9295.08.10102.024.72103.564.025.8491.07.9498.023.8299.074.025.9998.58.0099.524.12100.5平均%――――92.4――98.8――101.5RSD%――4.0――3.1――2.5――表11丙氨酸中鉛加標(biāo)回收率及精密度試驗(yàn)次數(shù)本底（mg/kg）加標(biāo)量Pb=2mg/kg加標(biāo)量Pb=4mg/kg加標(biāo)量Pb=20mg/kg實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）1未檢出1.8291.03.8395.819.196.02未檢出1.995.03.7894.520.3101.53未檢出2.01100.54.05101.319.296.04未檢出1.9597.53.997.519.597.55未檢出1.995.04.12103.019.899.06未檢出1.9296.03.8696.519.497.07未檢出2.07103.53.9197.820.1100.5平均%――――96.9――98.0――98.1RSD%――4.3――3.1――2.3――表12丙氨酸中鐵加標(biāo)回收率及精密度試驗(yàn)次數(shù)本底（mg/kg）加標(biāo)量Fe=2mg/kg加標(biāo)量Fe=4mg/kg加標(biāo)量Fe=20mg/kg實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）實(shí)測(cè)值（mg/kg）回收率（%）13.855.6389.07.6194.023.3597.523.855.8097.57.7798.024.15101.533.855.7494.57.90101.323.5598.543.855.87101.07.6895.823.3597.553.855.7796.07.7697.824.65104.063.855.6690.57.97103.023.0596.073.855.8198.07.8098.822.6594.0平均%――――95.2――98.4――98.4RSD%――4.5――3.1――3.4――4.5驗(yàn)證試驗(yàn)取氨基酸樣品，谷氨酸和丙氨酸。經(jīng)荊州出入境檢驗(yàn)檢疫局、山東出入境檢驗(yàn)檢疫局、廣西出入境檢驗(yàn)檢疫局、廣東出入境檢驗(yàn)檢疫局、南通出入境檢驗(yàn)檢疫局、襄樊出入境檢驗(yàn)檢疫局、六家單位對(duì)添加了鉛和鐵的樣品進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，精密度試驗(yàn)原始數(shù)據(jù)見表14和15。根據(jù)GB/T6379.2-2004《測(cè)量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度（正確度與精密度）第2部分：確定標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量方法重復(fù)性與再現(xiàn)性的基本方法》，分別用格拉布斯法和柯克倫法對(duì)每一單元的平均值、各實(shí)驗(yàn)室的方差值進(jìn)行檢驗(yàn)，計(jì)算總平均值、重復(fù)性和再現(xiàn)性，結(jié)果見表16(火焰法)添加水平4mg/kg驗(yàn)證單位谷氨酸+4mg/kg丙氨酸+4mg/kg本底（未檢出）本底4mg/kg本底（未檢出）本底3.5mg/kgPb(mg/kg)Fe(mg/kg)Pb(mg/kg)Fe(mg/kg)荊州出入境檢驗(yàn)檢驗(yàn)局4.157.894.087.364.227.953.977.52山東出入境檢驗(yàn)檢驗(yàn)局4.088.213.867.284.208.154.007.47廣西出入境檢驗(yàn)檢驗(yàn)局3.687.723.767.193.757.813.927.30廣東出入境檢驗(yàn)檢驗(yàn)局3.898.053.837.424.017.913.907.36南通出入境檢驗(yàn)檢驗(yàn)局3.797.883.717.553.947.763.827.68襄樊出入境檢驗(yàn)檢驗(yàn)局3.728.074.057.403.568.204.107.49(石墨爐法)添加水平0.4mg/kg驗(yàn)證單位谷氨酸+0.4mg/kg丙氨酸+0.4mg/kgPb(mg/kg)Pb(mg/kg)荊州出入境檢驗(yàn)檢驗(yàn)局0.350.380.410.42山東出入境檢驗(yàn)檢驗(yàn)局0.320.450.370.38廣西出入境檢驗(yàn)檢驗(yàn)局0.370.340.410.36廣東出入境檢驗(yàn)檢驗(yàn)局0.360.350.390.38南通出入境檢驗(yàn)檢驗(yàn)局0.380.410.380.38海南出入境檢驗(yàn)檢驗(yàn)局0.410.350.370.374.6各種氨基酸鐵和鉛的測(cè)定表樣品中鐵和鉛含量mg/kg序號(hào)樣品名稱樣品編號(hào)生產(chǎn)廠家鉛含量鐵含量1Β-氨基丙酸200929145遠(yuǎn)華生物未檢出4.252L-色氨酸21200902678湖北八峰藥業(yè)未檢出4.013L-纈氨酸21000071三峽藥廠未檢出3.754L-異亮氨酸200917307宜昌三峽藥廠未檢出4.25L-組氨酸鹽酸鹽-水合物200916670宜昌檢驗(yàn)檢疫局未檢出2.266L-半胱氨酸鹽酸鹽-水合物200928444武漢遠(yuǎn)大宏遠(yuǎn)股份有限公司1.14.837L-半胱氨酸鹽酸鹽-水合物200928445武漢遠(yuǎn)大宏遠(yuǎn)股份有限公司0.833.638L-半胱氨酸鹽酸鹽-水合物200928446武漢遠(yuǎn)大宏遠(yuǎn)股份有限公司1.22.999L-半胱氨酸鹽酸鹽-水合物200928447武漢遠(yuǎn)大宏遠(yuǎn)股份有限公司1.34.7710L-半胱氨酸鹽酸鹽-水合物200928448武漢遠(yuǎn)大宏遠(yuǎn)股份有限公司1.32.7811L-絲氨酸200728448湖北友芝友生物科技有限公司0.43.6912L-精氨酸L-焦谷氨酸200921273武漢阿米諾科技有限公司0.294.2513N-乙酰L-酪氨酸200804481武漢武大宏遠(yuǎn)股份有限公司0.104.0614L-精氨酸鹽酸鹽200919252宜昌出入境檢驗(yàn)檢疫局未檢出3.2715L-精氨酸200919582宜昌出入境檢驗(yàn)檢疫局未檢出3.7816L-醋酸賴氨酸200803782三峽藥廠未檢出4.4317L-