如何分離標(biāo)本中污染了變形桿菌的其他細(xì)菌

2/2如何分離標(biāo)本中污染了變形桿菌的其他細(xì)菌發(fā)布時(shí)間:2013-09-11如何分離標(biāo)本中污染了變形桿菌的其他細(xì)菌

一、如何從變形桿菌中分離G+球菌？

A、用棉簽沾無水乙醇涂布于MH平板上，置入溫箱中烘干，讓瓊脂脫水。將球菌接種到該平板上即可。此平板可抑制變形桿菌的遷徙生長(zhǎng)。

B、在分離平板上貼氨曲南紙片可以分出G+菌。

二、同一標(biāo)本中同時(shí)存在金葡和變形桿菌的分離方法？

A、解決的辦法：以前曾經(jīng)討論過多種解決奇異變形桿菌和其他細(xì)菌混合生長(zhǎng)時(shí)的單菌落分離方法，如加大瓊脂硬度、接種高鹽肉湯等。我個(gè)人比較喜歡貼藥敏紙片的方法。挑取含有金葡菌的菌苔劃線分離后，在第一區(qū)和第二區(qū)的交界處貼一張頭孢西丁紙片。經(jīng)培養(yǎng)后，頭孢西丁紙片周圍生長(zhǎng)的奇異變形桿菌被抑制，而金葡菌仍可以生長(zhǎng)。此時(shí)應(yīng)即使挑取抑菌圈中的金葡菌進(jìn)行純分離，從而達(dá)到將兩種細(xì)菌完全分離的目的。

B、貼氨曲南紙片可抑制變形桿菌生長(zhǎng)，而金葡菌耐藥，這樣就可以把金葡分出來。

C、分純方法應(yīng)根據(jù)目標(biāo)菌不同而異。我喜歡用時(shí)間差的方發(fā)來分純，這樣不會(huì)使目標(biāo)菌受抑制。這要看那株變形桿菌的遷徙速度了，一般4-6h可以分離到目標(biāo)菌。

D、我用過一種弱選擇的麥慷慨，成品的，葡萄球菌可以生長(zhǎng)，變形遷徙生長(zhǎng)可以被抑制，oxoid的。

評(píng)價(jià)一：老師的方法不錯(cuò)，有空試試！我試過用時(shí)間差的方法，比較麻煩．操作過程如下：挑起混合菌分區(qū)接種于血平板上，待平板上剛長(zhǎng)出小菌落后，挑取菌落涂片染色，找到革蘭陽性球菌就立刻轉(zhuǎn)種．這個(gè)過程比較麻煩，一定要在變形菌沒有明顯擴(kuò)大的時(shí)候挑取菌落涂片，培養(yǎng)時(shí)間一般４～６小時(shí)，這個(gè)時(shí)間內(nèi)葡萄球菌和變形菌只形成小菌落，而變形還沒有明顯遷徙．涂片時(shí)可以只看濕片．

評(píng)價(jià)二：我認(rèn)為幾種方法各有長(zhǎng)處：如果變形桿菌生長(zhǎng)慢的話，時(shí)間差法很好，可以節(jié)省時(shí)間，早些發(fā)出報(bào)告；如果變形生長(zhǎng)快，只能用傾倒酒精法或貼紙片法，貼紙片法不是萬能的，如都敏感或都耐藥，很難分離出純菌，酒精法沒試過不知效果如何：至于增加瓊脂硬度，我覺得有些麻煩，還要單獨(dú)配一些這樣平皿（是現(xiàn)配還是提前備一些？）

三、總結(jié)解決的辦法有：

1、貼藥敏紙片的方法。挑取含有金葡菌的菌苔劃線分離后，在第一區(qū)和第二區(qū)的交界處貼一張頭孢西丁紙片。經(jīng)培養(yǎng)后，頭孢西丁紙片周圍生長(zhǎng)的奇異變形桿菌被抑制，而金葡菌仍可以生長(zhǎng)。此時(shí)應(yīng)即使挑取抑菌圈中的金葡菌進(jìn)行純分離，從而達(dá)到將兩種細(xì)菌完全分離的目的。

2、配制平皿時(shí)混入少許95%的酒精，混勻后倒平板；或者在血平板上倒入95%酒精后，把剩余酒精倒掉，平板表面干后即可。用于分離金葡菌和變形桿菌。酒精主要起抑制變形桿菌的遷徙作用。

注：酒精平板：90mm平板加無水乙醇0.5ml加20ml血液瓊脂基礎(chǔ)（最好用進(jìn)口的哥倫比亞瓊脂配制）或Ｍ－Ｈ瓊脂基礎(chǔ)。

3、加了結(jié)晶紫的麥康凱葡萄球菌不長(zhǎng)，變形不遷徙。另外，提高血平板的瓊脂含量到4%，也可以將二者分開。

4、時(shí)間差的方法，操作過程如下：挑起混合菌分區(qū)接種于血平板上，待平板上剛長(zhǎng)出小菌落后，挑取菌落涂片染色，找到革蘭陽性球菌就立刻轉(zhuǎn)種。這個(gè)過程比較麻煩，一定要在變形菌沒有明顯擴(kuò)大的時(shí)候挑取菌落涂片，培養(yǎng)時(shí)間一般４～６小時(shí)，這個(gè)時(shí)間內(nèi)