【雞大腸桿菌病治療探究4600字（論文）】

雞大腸桿菌病治療研究目錄TOC\o"1-2"\h\u21263摘要 282261前言 2126581.1國內(nèi)外雞大腸桿菌病治療研究的進展 2134861.2雞大腸桿菌病的病理特征 2290901.3本試驗的研究目的意義 3251492材料與方法 3265492.1材料 3103382.1.2試驗試劑 3212862.1.3試驗器材 3322432.2試驗方法 3123982.2.1試驗動物分組及處理 3100422.2.2確定雞的感染成功 4207352.2.3治療考核指標 513522.2.4統(tǒng)計分析 5200333結(jié)果與分析 5234413.1試驗各組對人工感染雞大腸桿菌病的治療作用 5290473.2試驗各組對人工感染大腸桿菌雞只血清生化指標的影響 632754表2試驗各組雞血清生化指標的對比 617743.3試驗各組對人工感染大腸桿菌雞只血常規(guī)指標的影響 612774表3試驗各組雞血常指標的對比 7111784討論 7243284.1雞大腸桿菌治療效果討論 7288944.2黃連解毒湯的作用機理 8198995結(jié)論 8摘要摘要：目的:探究黃連解毒湯對肉雞人工感染大腸桿菌病的治療效果和最佳使用濃度。方法：試驗選取100只健康的雛雞，隨機選取20只為健康組，其余的雛雞人工感染雞大腸桿菌后將其隨機分成4組，分別為感染對照組和低、中、高濃度黃連解毒湯治療組。觀察各組臨床癥狀變化和檢測血清生化指標及血常規(guī)指標。結(jié)果:感染組與中、高濃度黃連解毒湯治療組的死亡率相比差異極顯著(p<0.01)，中濃度黃連解毒湯治療組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性極顯著低于攻毒對照組（p<0.01），中濃度黃連解毒湯治療組的白細胞數(shù)分別極顯著低于攻毒對照組（p<0.01），中濃度黃連解毒湯治療組的凝血細胞數(shù)顯著高于攻毒對照組（p<0.05）。結(jié)論：中濃度黃連解毒湯對肉雞人工感染大腸桿菌病的治療效果良好。關(guān)鍵詞：黃連解毒湯雞大腸桿菌治療效果1前言雞大腸桿菌病是一種由雞致病性大腸桿菌局部或全身感染引起的急性或慢性傳染病[1],是雞類養(yǎng)殖的常見病和高發(fā)病，發(fā)展速度較快，不僅通過接觸傳播還可通過空氣進行呼吸道傳播[2]，春、冬發(fā)病多，夏、秋發(fā)病少各日齡都有，是嚴重危害世界養(yǎng)禽業(yè)的三大細菌病之一，給養(yǎng)雞業(yè)造成了嚴重經(jīng)濟損失。1.1國內(nèi)外雞大腸桿菌病治療研究的進展前人對雞大腸桿菌病的治療進行了許多研究，大量研究表明復方中藥對雞大腸桿菌病有治療作用，沈永恕[3]等用復方中藥“禽痢康”對雞大腸桿菌病進行了治療試驗，連用5d對雞大腸桿菌病平均治愈率可達97％。張丁華等[4]試驗研究表明，用黃柏、黃連、秦皮等13味藥物組方的復方中草藥添加到飼料中去治療雞大腸桿菌病的平均治愈率和有效率分別達到89.1%和94.1%。以上研究均表明，中藥對雞大腸桿菌病有很好的治療作用。1.2雞大腸桿菌病的病理特征發(fā)病雛雞主要以肝周炎、氣囊炎、敗血癥和心包炎為主要特征；病理癥狀為發(fā)熱，被毛松亂，離群呆立，精神不振,食欲降低或廢絕，排綠色水樣糞便或黃白色水樣腹瀉,嚴重者臥地不起，隨后出現(xiàn)死亡。剖檢可見脾臟、肝臟腫大易碎，肝臟充血，有大量滲出物，心包發(fā)炎，心包腔中有大量纖維素性滲出物；氣囊渾濁，有干酪樣物質(zhì)覆蓋[5]。1.3本試驗的研究目的意義探究合適的黃連解毒湯濃度來治療雞大腸桿菌病，為以后治療大腸桿菌病提供依據(jù)。2材料與方法2.1材料2.1.1試驗動物采用的試驗動物購自張家口養(yǎng)雞專業(yè)戶，試驗雞只選用體況相當而且未經(jīng)過免疫雞大腸桿菌疫苗的健康雛雞。2.1.2試驗試劑大腸桿菌購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所；試驗用中藥購于利民大藥房；蛋白胨、瓊脂、牛肉浸膏，深圳康泰生物制品股份有限公司。2.1.2.1菌液的制備大腸桿菌菌種復壯后用接種環(huán)劃線接種在瓊脂平皿上,放于37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h至長出菌落,選取典型大腸桿菌菌株于肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h，采用傾注法倒平板，最后用稀釋法計數(shù)。2.1.2.2中藥的制備根據(jù)所選處方稱量中草藥黃連15g、黃芩10g、黃柏10g、梔子5g三份，分別加蒸餾水1200mL浸泡一小時，武火煎沸改用文火煎煮，三份體積分別加熱濃縮至80ml、40ml、20ml，其濃度分別為0.5g·mL-1（低）、1.0g·mL-1（中）、2.0g·mL-1（高），放冷，冷藏于4℃冰箱中備用。2.1.3試驗器材普通光學顯微鏡，型號XSP3B，上海巴拓儀器有限公司；生化測定試劑盒，中生北控生物科技股份有限公司；血細胞計數(shù)板，上海市求精生化試劑儀器有限公司。2.2試驗方法2.2.1試驗動物分組及處理本試驗選用15日齡未經(jīng)免疫雞大腸桿菌疫苗的健康雛雞100只，隨機選取20只為健康組，其余的雛雞均用雞大腸桿菌O1于胸部肌肉注射攻毒，每只1ml，然后根據(jù)病理癥狀、染色鏡檢和生化試驗鑒定確認感染成功后，將其隨機分成四組，每20只一組。1組為健康對照組，隔離飼養(yǎng)；2組為感染對照組，只攻毒不給藥；3組為低濃度黃連解毒湯治療組，早晚各灌胃1次，每次1ml\只；4組為中濃度黃連解毒湯治療組，早晚各灌胃1次，每次1ml\只；5組為高濃度黃連解毒湯治療組，早晚各灌胃1次，每次1ml\只；1，3，4，5組連續(xù)用藥治療5天后，停止用藥，一周后觀察記錄。2.2.2確定雞的感染成功2.2.2.1根據(jù)病理癥狀確定雛雞表現(xiàn)為精神沉郁，食欲下降，羽毛松亂，閉眼縮頸，擠堆，腹瀉，嚴重者出現(xiàn)死亡。2.2.2.2染色鏡檢分離菌培養(yǎng)物涂片，干燥固定后做革蘭氏染色鏡檢于顯微鏡下觀察，鏡檢可見兩端鈍圓、散在或成對存在的革蘭氏陰性紅色短桿菌[6]，有菌毛，無可見的莢膜，無芽孢[7]，可初步判斷為大腸桿菌。2.2.2.3生化試驗鑒定將鏡檢結(jié)果為陽性的細菌接種于葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、吲哚、M-R、V-P細菌生化微量鑒定管中及三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基中進行生化試驗鑒定。菌株使麥芽糖、甘露醇、葡萄糖、蔗糖、乳糖、山梨醇發(fā)酵；能在三糖鐵培養(yǎng)基上產(chǎn)酸產(chǎn)氣并使培養(yǎng)基變黃，M-R試驗、吲哚試驗為陽性，V-P試驗為陰性，為符合雞大腸桿菌的生化特性[8]。呈現(xiàn)上述病理癥狀、染色鏡檢并做生化試驗鑒定方可確定感染成功。2.2.3治療考核指標2.2.3.1測定死亡率和治愈率、有效率試驗期間每天觀察并記錄雛雞的病理癥狀，在試驗期結(jié)束后分別計算各組的有效率、治愈率、死亡率、。2.2.3.2血清生化指標測定試驗結(jié)束后,把所有活著的雞稱重,每組抓三只進行采血,每只采兩份，一份用于血清生化指標：谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST)活性的測定。2.2.3.3血常規(guī)指標測定另一份用于血常規(guī)指標：紅細胞、白細胞和凝血細胞的數(shù)量的測定。2.2.4統(tǒng)計分析所有原始數(shù)據(jù)均先用MicrosoftExcel軟件進行簡單的匯總，有效率和治愈率、死亡率用卡方檢驗進行系統(tǒng)分析；再將血清生化指標和血常規(guī)指標結(jié)果用SPSS統(tǒng)計軟件分析軟件對進行單因素方差分析和Duncan's多重比較，其數(shù)據(jù)用“x-±s”表示。3結(jié)果與分析3.1試驗各組對人工感染雞大腸桿菌病的治療作用由表1可知：健康對照組無死亡，感染對照組病死率為85﹪，健康對照組與感染對照組對比差異極顯著(p<0.01)。低濃度黃連解毒湯治療組和感染組的死亡率對比差異顯著(p<0.05)，中、高濃度黃連解毒湯治療組和感染組的死亡率對比差異極顯著(p<0.01)。表1試驗各組對雞大腸桿菌病的治療作用的對比組別試驗雞數(shù)//羽死亡數(shù)//羽發(fā)病數(shù)//羽存活數(shù)//羽死亡率/％治愈率/％有效率/％健康對照組2000200——感染對照組201720385——低濃度黃連解毒湯治療組2051915256575中濃度黃連解毒湯治療組2021818108590高濃度黃連解毒湯治療組20320171580853.2試驗各組對人工感染大腸桿菌雞只血清生化指標的影響由表2可知：健康對照組和中濃度黃連解毒湯治療組的ALT、AST活性分別極顯著低于攻毒對照組（p<0.01），低、高濃度黃連解毒湯治療組與攻毒對照組的ALT、AST活性對比差異顯著（p<0.05），低、高濃度黃連解毒湯治療組與中濃度黃連解毒湯治療組的ALT、AST活性對比差異顯著（p<0.05），但低、高濃度黃連解毒湯治療組ALT、AST活性對比差異不顯著（p>0.05）。表2試驗各組雞血清生化指標的對比組別AST（卡門氏單位）ALT（卡門氏單位）健康對照組62.6±11.1A12.5±A攻毒對照組220.5±39.0C59.8±25.7C低濃度黃連解毒湯治療組118.8±35.8B18.9±8.6B中濃度黃連解毒湯治療組80.9±25.3A13.5±4.8A高濃度黃連解毒湯治療組103.7±27.5B17.4±5.5B注：同列數(shù)據(jù)右上標相同字母一樣表示差異不顯著（p＞0.05）；相鄰字母表示差異顯著（p＜0.05）；相隔字母表示差異極顯著（p＜0.01）。3.3試驗各組對人工感染大腸桿菌雞只血常規(guī)指標的影響由表3可知：試驗各組紅細胞數(shù)均有變化，但各組的紅細胞數(shù)之間對比差異不顯著（p>0.05），健康對照組和中濃度黃連解毒湯治療組的白細胞數(shù)分別極顯著低于攻毒對照組（p<0.01），低濃度黃連解毒湯治療組的白細胞數(shù)顯著低于攻毒對照組（p<0.05），高濃度黃連解毒湯治療組的白細胞數(shù)與攻毒對照組的白細胞數(shù)差異不顯著（p>0.05），但低、中、高濃度黃連解毒湯治療組之間的白細胞也有顯著差異（p<0.05）。對比凝血細胞數(shù)能看出：健康對照組和中濃度黃連解毒湯治療組的凝血細胞數(shù)顯著高于攻毒對照組（p<0.05），高濃度黃連解毒湯治療組凝血細胞數(shù)量與攻毒對照組相比無顯著差異（p>0.05），低、高濃度黃連解毒湯治療組分別與中濃度黃連解毒湯治療組有顯著差異（p<0.05），但低、高濃度黃連解毒湯治療組之間無顯著差異（p>0.05）。表3試驗各組雞血常指標的對比組別紅細胞數(shù)（×1012個/L）白細胞數(shù)（×1011個/L）凝血細胞數(shù)（×1012個/L）健康對照組23.48±6.22A0.40±0.41C2.60±0.16B攻毒對照組20.16±8.86A1.52±0.16A2.05±0.45A低濃度黃連解毒湯治療組20.45±2.17A0.78±0.22B2.24±0.27A中濃度黃連解毒湯治療組21.75±4.44A0.42±0.16C2.56±0.34B高濃度黃連解毒湯治療組20.25±3.27A0.91±0.38A1.98±0.25A注：同列數(shù)據(jù)右上標相同字母一樣表示差異不顯著（p＞0.05）；相鄰字母表示差異顯著（p＜0.05）；相隔字母表示差異極顯著（p＜0.01）。4討論4.1雞大腸桿菌治療效果討論各濃度黃連解毒湯對雞大腸桿菌均有效果，而且在血液指標上也表現(xiàn)出一定的療效，但中濃度治療效果顯著，有效率達到了90%[9]。以上結(jié)果可以得出中濃度的黃連解毒湯能有效抑制白細胞的迅速增長，提高紅細胞和凝血細胞數(shù)，高濃度黃連解毒湯治療組的紅細胞數(shù)、凝血細胞數(shù)與其他濃度治療組相比略少，而白細胞數(shù)略多，分析其原因大概是由于高濃度黃連解毒湯治療組用藥劑量稍大，使其出現(xiàn)了輕微的中毒現(xiàn)象。雞患大腸桿菌病會造成肝損傷，從而影響谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性升高，當肝損傷輕微時，ALT指標會明顯升高；肝損傷嚴重時，AST指標會明顯升高。黃連解毒湯各濃度均能恢復肝損傷，但中濃度黃連解毒湯治療組肝損傷恢復相較其他兩組效果更好。因此在治療雞大腸桿菌病時采用中濃度黃連解毒湯治療。大量試驗研究結(jié)果表明：中藥組方和各種中藥制劑對雞大腸桿菌病都有一定的治療作用，對大腸桿菌也有很好的抑制作用[10]。

郭永剛等[11]以金銀花、黃連、黃芩、魚腥草復方制劑對人工感染肉仔雞大腸桿菌病進行了治療及預防保護試驗，其制劑對大腸桿菌具一定的抑制作用。國內(nèi)外報道的致病性雞大腸桿菌的血清型很多，但是以O1、O2、O78為常見的致病力強的血清型[12]。本試驗結(jié)果表示中濃度黃連解毒湯對O1血清型大腸桿菌具有良好的治療效果,黃連解毒湯對其他血清型的雞大腸桿菌作用是否顯著還有待探索。4.2黃連解毒湯的作用機理中獸醫(yī)理論認為雞大腸桿菌病屬于外感溫熱病范疇，病邪依次進入衛(wèi)分、氣分、營分和血分，由表及里、逐漸加重的發(fā)展趨勢，基于此對該病辨證論治，治則以清熱解毒為主，以涼血止痢、清肝瀉火等為輔[13]。黃連解毒湯由黃芩、黃連、黃柏、梔子四味中藥組成，黃芩含有的黃芩苷和黃芩素具有較強的抗菌作用，而且不產(chǎn)生抗藥性，對急性、慢性炎癥均有抑制作用[14]，黃芩具有清熱燥濕、瀉火解毒的功效，為臣藥；黃連高濃度殺菌，低濃