DB5115T 127-2024 小琴絲竹組培快繁技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.40CCSB66

5115??發(fā)布202406152024-05-14發(fā)布四川?。ㄒ速e市）地方標(biāo)準(zhǔn)DB5115/T127—2024小琴絲竹組培快繁技術(shù)規(guī)程CodeofpracticefortissuecultureofBambusamultiplexⅠDB5115/T127-2024Ⅰ目 次前 言 III范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語和定義 1組培設(shè)施 1培養(yǎng)基配制 1誘導(dǎo)培養(yǎng) 2增殖培養(yǎng) 3生根培養(yǎng) 4煉苗 4組培苗移栽管理 4檔案管理 5IIIDB5115/T127-2024III前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由宜賓林竹產(chǎn)業(yè)研究院提出。本文件由宜賓市林業(yè)和竹業(yè)局歸口。本文件起草單位：宜賓林竹產(chǎn)業(yè)研究院、浙江農(nóng)林大學(xué)、宜賓標(biāo)計(jì)商品檢測研究院。本文件主要起草人：周國強(qiáng)、高會彬、楊海蕓、余英、趙翔。本文件為首次制定。小琴絲竹組培快繁技術(shù)規(guī)程

DB5115/T127-2024115.1 培養(yǎng)基類型的選擇5 培養(yǎng)基配制按照NY/T2306第4章中的相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。4 組培設(shè)施組培苗plantlet利用植物組織、器官或細(xì)胞等作為起始材料，通過植物組織培養(yǎng)方式生產(chǎn)獲得的植株。3.4消毒disinfection通過物理、化學(xué)方法去除物體表面大部分有害病原微生物的過程。3.3接種inoculation將消毒后的外植體或干凈培養(yǎng)材料在無菌條件下接入培養(yǎng)容器內(nèi)培養(yǎng)基中的過程。3.2外植體explant從自然生長的活體植物上獲取的用于建立植物組培快繁體系的起始材料。3.1范圍本文件適用于小琴絲竹組培苗快速培育。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用（包括所有的修改單）適用于本文件。NY/T2306花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程術(shù)語和定義NY/T2306界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。6.1 外植體選擇6.1 外植體選擇宜選擇小琴絲竹當(dāng)年生枝條的節(jié)間帶芽部分，節(jié)上部保留0.5cm，節(jié)下部保留1.0cm。26 誘導(dǎo)培養(yǎng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基宜使用直徑3.0cm、高度1.2cm的培養(yǎng)皿分裝，每個培養(yǎng)皿分裝5ml；增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基宜使用外徑2.5cm、高度15.0cm的試管分裝，每個試管分裝15ml。分裝時(shí)培養(yǎng)基不應(yīng)沾附在培養(yǎng)容器口及周圍。滅菌培養(yǎng)基滅菌配制的培養(yǎng)基應(yīng)在12h內(nèi)宜使用高壓滅菌鍋滅菌，在121℃條件下滅菌15min；滅菌后不應(yīng)與未滅菌物品混放。接種工具滅菌剪刀、鑷子等接種工具應(yīng)使用高壓滅菌鍋滅菌，在121℃條件下滅菌25min；滅菌后不應(yīng)與未滅菌物品混放。超凈工作臺滅菌將已滅菌的培養(yǎng)基和接種工具放置在超凈工作臺上，打開超凈工作臺風(fēng)機(jī)和紫外燈滅菌30min，滅菌后關(guān)閉紫外燈。5.6.3.2 75%乙醇擦拭一遍。宜選擇MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基。MS按照NY/T2306第7章中的相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。培養(yǎng)基配方誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+蔗糖30g/L+瓊脂3.5g/L。增殖培養(yǎng)基MS+6-BA（6-芐氨基腺嘌呤）3mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂3.5g/L。生根培養(yǎng)基MS+NAA（萘乙酸）0.1mg/L+6-BA（6-芐氨基腺嘌呤）0.3mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂3.5g/L。PH應(yīng)用1mol/LHCl或1mol/LNaOH調(diào)節(jié)培養(yǎng)基pH值至5.8。培養(yǎng)基分裝轉(zhuǎn)接應(yīng)將生長健壯的無菌小琴絲竹組培苗切成含2個～3個芽的小叢，轉(zhuǎn)接至增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)。轉(zhuǎn)接應(yīng)將生長健壯的無菌小琴絲竹組培苗切成含2個～3個芽的小叢，轉(zhuǎn)接至增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)。培養(yǎng)條件培養(yǎng)環(huán)境溫度宜設(shè)置為24℃～26℃，環(huán)境光照強(qiáng)度宜設(shè)置為2500lx，連續(xù)定時(shí)光照時(shí)間宜設(shè)置為16h/d。培養(yǎng)時(shí)間培養(yǎng)時(shí)間宜為14d～21d。培養(yǎng)代數(shù)37 增殖培養(yǎng)容器上。培養(yǎng)條件培養(yǎng)環(huán)境溫度宜設(shè)置為24～2624h，后續(xù)環(huán)境光照強(qiáng)度宜設(shè)置為1500lx，連續(xù)定時(shí)光照時(shí)間宜設(shè)置為16h/d。培養(yǎng)時(shí)間培養(yǎng)時(shí)間宜為7d～14d。外植體清洗應(yīng)將剪取的外植體用洗潔精沖洗1h。外植體消毒在超凈工作臺上，宜用75%的酒精消毒30sec，然后用0.5%次氯酸鈉消毒8min，至外植體略微發(fā)黃后取出；再用無菌水沖洗5遍～6遍后備用。外植體接種接種工具消毒接種時(shí)，應(yīng)將接種工具剪刀、手術(shù)刀和鑷子等用電熱滅菌器或酒精燈消毒后，冷卻至室溫備用。外植體處理應(yīng)將已消毒的外植體切除兩端消毒后發(fā)黃的部分，用無菌吸水紙吸干表面水分備用。接種將已處理好的外植體接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上。每個培養(yǎng)皿宜接種1個莖段。標(biāo)記接種后,每批應(yīng)用記號筆將品種代號、培養(yǎng)基編號、工作人員編號及接種日期等信息標(biāo)注在培養(yǎng)設(shè)施移裁階段的圃區(qū)宜建有可控溫控光的溫室，雙層以上可活動遮陽網(wǎng)，溫室內(nèi)宜設(shè)有頂部噴淋的苗床或可數(shù)字化調(diào)控溫濕度的育苗箱。設(shè)施移裁階段的圃區(qū)宜建有可控溫控光的溫室，雙層以上可活動遮陽網(wǎng)，溫室內(nèi)宜設(shè)有頂部噴淋的苗床或可數(shù)字化調(diào)控溫濕度的育苗箱。育苗容器育苗容器宜使用邊長8cm～10cm的方形容器。育苗基質(zhì)基質(zhì)應(yīng)以泥炭土、珍珠巖為主，體積比例宜為3:7。移栽煉苗后，用鑷子將組培苗從培養(yǎng)基中取出，應(yīng)洗掉基部附著的培養(yǎng)基，在溫室內(nèi)，栽植于基質(zhì)中。管理410 組培苗移栽管理開或半打開培養(yǎng)瓶蓋煉苗。9.3 煉苗時(shí)間煉苗時(shí)間宜為7d。繼代增殖可以達(dá)到15代。如果組培苗繼代后出現(xiàn)玻璃化、褐化等不良情況，應(yīng)終止繼代。生根培養(yǎng)增殖培養(yǎng)后，切取生長健壯、長勢一致，含有2個～3個分支的叢苗，轉(zhuǎn)接至生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)。培養(yǎng)條件按7.2。培養(yǎng)時(shí)間7.3。瓶苗要求培養(yǎng)瓶內(nèi)組培苗長出2條～3條長度1.5cm～3.0cm的不定根，便可煉苗。煉苗條件培養(yǎng)瓶宜放置在遮光率為70%～75%，相對濕度為70%～90%，溫度為24℃～26℃的溫室中，打5DB5115/T127-20245組培苗移裁后，應(yīng)立即澆透水，30min～60min800倍～1000倍多菌靈或百菌清。然后根據(jù)天氣情況，每天澆水2次～4次。光照及溫濕度環(huán)境宜按照表1的要求執(zhí)行。表1移栽環(huán)境條件要求栽植后時(shí)間溫度光照空氣濕度1d～14d20℃～32℃遮光度為75%的遮陽網(wǎng)75%14d～28d20℃～32℃全光照自然濕度10.6 出圃標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)植株