第七章 各類顯微鏡簡介課件

第七章各類顯微鏡簡介第七章各類顯微鏡簡介

普通生物顯微鏡

第七章各類顯微鏡簡介熒光顯微鏡

熒光顯微鏡和普通顯微鏡的區(qū)別：

1.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上。

2.光源為紫外光，波長較短，分辨力高于普通顯微鏡。

3.有兩個(gè)特殊的濾光片

激發(fā)濾光片：位于光源前，濾除可見光，透過紫外光。

吸收濾光片：位于目鏡和物鏡之間，濾除紫外線，用以保護(hù)人的眼睛。

第七章各類顯微鏡簡介落射式熒光顯微鏡第七章各類顯微鏡簡介微管呈綠色、微絲呈紅色、細(xì)胞核呈蘭色熒光顯微照片第七章各類顯微鏡簡介偏光顯微鏡（polarizingmicroscope）

用于檢測具有雙折射性的物質(zhì)，如纖維絲、紡錘體、膠原、染色體等等。和普通顯微鏡不同的是：

1.光源前有偏振片（起偏器），使進(jìn)入顯微鏡的光線為偏振光。

2.鏡筒中有檢偏器（一個(gè)偏振方向與起偏器垂直的的檢偏器）。

3.載物臺是可以旋轉(zhuǎn)的，當(dāng)載物臺上放入單折射的物質(zhì)時(shí)，無論如何旋轉(zhuǎn)載物臺，由于兩個(gè)偏振片是垂直的，顯微鏡里看不到光線，而放入雙折射性物質(zhì)時(shí)，由于光線通過這類物質(zhì)時(shí)發(fā)生偏轉(zhuǎn)，因此旋轉(zhuǎn)載物臺便能檢測到這種物體。第七章各類顯微鏡簡介偏光顯微鏡的光路圖第七章各類顯微鏡簡介偏光顯微鏡第七章各類顯微鏡簡介偏光顯微鏡下的碎屑巖組分第七章各類顯微鏡簡介相差顯微鏡（phasecontrastmicroscope）

觀察未經(jīng)染色的標(biāo)本和活細(xì)胞。

結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：

1.環(huán)形光闌（annular

diaphragm）

位于光源與聚光器之間，使透過聚光器的光線形成空心光錐，焦聚到標(biāo)本上。

2.相位板（annularphaseplate）在物鏡中加了涂有氟化鎂的相位板，可將直射光或衍射光的相位推遲1/4λ。分為兩種：A+相板：將直射光推遲1/4λ，兩組光波合軸后光波相加，振幅加大，標(biāo)本結(jié)構(gòu)比周圍介質(zhì)更加明亮，形成亮反差（或稱負(fù)反差）。

B+相板：將衍射光推遲1/4λ，兩組光線合軸后光波相減，振幅變小，形成暗反差（或稱正反差），結(jié)構(gòu)比周圍介質(zhì)更加變暗。

第七章各類顯微鏡簡介相差顯微鏡第七章各類顯微鏡簡介相差顯微鏡的工作原理第七章各類顯微鏡簡介相差顯微鏡顯微照片第七章各類顯微鏡簡介倒置顯微鏡物鏡在載物臺之下，照明系統(tǒng)在載物臺之上，用于觀察培養(yǎng)的活細(xì)胞，具有相差物鏡。

第七章各類顯微鏡簡介微分干涉差顯微鏡（differentialinterferencecontrastmicroscope）簡稱DIC顯微鏡。顯示結(jié)構(gòu)的三維立體投影影像，適合于顯微操作。像基因注入、核移植、轉(zhuǎn)基因等的顯微操作常在這種顯微鏡下進(jìn)行。

DIC利用的是偏振光，有四個(gè)特殊的光學(xué)組件：偏振器（polarizer）、DIC棱鏡、DIC滑行器和檢偏器（analyzer）。第七章各類顯微鏡簡介微分干涉差顯微鏡的光學(xué)原理第七章各類顯微鏡簡介微分干涉差顯微鏡下的硅藻第七章各類顯微鏡簡介暗視野顯微鏡（darkfieldmicroscope）

特點(diǎn)：聚光鏡中央有擋光片，使照明光線不直接進(jìn)入物鏡，只允許被標(biāo)本反射和衍射的光線進(jìn)入物鏡。因而視野的背景是黑的，物體的邊緣是亮的。利用這種顯微鏡能看到小至4~200nm的微粒子，分辨率可比普通顯微鏡高50倍。

第七章各類顯微鏡簡介暗視野顯微鏡的光學(xué)原理第七章各類顯微鏡簡介暗視野顯微鏡下的萊姆病毒第七章各類顯微鏡簡介激光掃描共聚焦顯微鏡（LaserscanningConfocalMicroscopy，簡稱LSCM）

在熒光顯微鏡成像的基礎(chǔ)上加裝激光掃描裝置，使用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針，利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖像處理，從而得到細(xì)胞或組織內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖象。由于物鏡和會聚透鏡的焦點(diǎn)在同一光軸上，因而稱這種方式成像的顯微鏡為共聚焦顯微鏡。第七章各類顯微鏡簡介激光掃描共聚焦顯微鏡成像原理激光器發(fā)出的激光束經(jīng)過擴(kuò)束透鏡和光束整形鏡，變成一束直徑較大的平行光束，長通分色反射鏡使光束偏轉(zhuǎn)90度，經(jīng)過物鏡會聚在物鏡的焦點(diǎn)上，樣品中的熒光物質(zhì)在激光的激發(fā)下發(fā)射沿各個(gè)方向的熒光，一部分熒光經(jīng)過物鏡、長通分色反射鏡、聚焦透鏡會聚在聚焦透鏡的焦點(diǎn)處，再通過焦點(diǎn)處的針孔，由檢測器接收。再利用計(jì)算機(jī)的圖像處理及三維重建軟件，可以得到高清晰度的圖片。

第七章各類顯微鏡簡介第七章各類顯微鏡簡介激光共聚焦顯微鏡第七章各類顯微鏡簡介綠色為微管，蘭色為細(xì)胞核第七章各類顯微鏡簡介掃描電子顯微鏡（scanningelectronmicroscope，SEM）

觀察標(biāo)本的表面結(jié)構(gòu)。工作原理：用一束極細(xì)的電子束掃描樣品，在樣品表面激發(fā)出次級電子，次級電子由探測器收集，并被閃爍器轉(zhuǎn)變?yōu)楣庑盘枺俳?jīng)光電倍增管和放大器轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘杹砜刂茻晒馄辽想娮邮膹?qiáng)度，顯示出與電子束同步的掃描圖像。第七章各類顯微鏡簡介掃描電子顯微鏡

第七章各類顯微鏡簡介小麥籽粒中的淀粉粒第七章各類顯微鏡簡介胡桃葉表皮第七章各類顯微鏡簡介透射電子顯微鏡用電子束作光源，用電磁場作透鏡。電子