DB61T1520-2021實時熒光定量PCR分析儀性能評價規(guī)范

ICS11.040.55

CCSC44

DB61

陜西省地方標準

DB61/T1520—2021

實時熒光定量PCR分析儀性能評價規(guī)范

Evaluationspecificationforperformanceofreal-timefluorescentquantitative

Polymerase-Chain-Reactionanalyzer

2021-12-17發(fā)布2022-01-17實施

陜西省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB61/T1520—2021

目??次

前言.....................................................................................................................................................................II

1范圍.................................................................................................................................................................1

2規(guī)范性引用文件.............................................................................................................................................1

3術(shù)語和定義.....................................................................................................................................................1

4技術(shù)要求.........................................................................................................................................................2

5試驗方法.........................................................................................................................................................3

6評價規(guī)則.......................................................................................................................................................13

參考文獻.............................................................................................................................................................15

I

DB61/T1520—2021

前??言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由陜西省市場監(jiān)督管理局提出并歸口。

本文件起草單位：西北國家計量測試中心辦公室、西安天隆科技有限公司、陜西國華現(xiàn)代測控技術(shù)

有限公司、陜西省疾病預(yù)防控制中心、陜西科儀陽光檢測技術(shù)服務(wù)有限公司、陜西省計量科學(xué)研究院、

西安計量技術(shù)研究院、西安市質(zhì)量與標準化研究院、北京林電偉業(yè)電子技術(shù)有限公司、陜西省建筑科學(xué)

研究院。

本文件主要起草人：陳瑛、彭年才、胡暢、陳琛、田真、余鵬博、李天來、張莉、龔大江、李姣姣、

楊嘉泉、李征、張仁、楊悅、李元沉、馬騰、武文昀、李磊

本文件由西北國家計量測試中心負責(zé)解釋。

本文件首次發(fā)布。

聯(lián)系信息如下：

單位：西北國家計量測試中心辦公室

地址：陜西省西安市咸寧西路30號

電話/p>

郵編：710004

II

DB61/T1520—2021

實時熒光定量PCR分析儀性能評價規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了實時熒光定量PCR分析儀（以下簡稱RT-PCR儀）的術(shù)語定義、技術(shù)要求、試驗方法

和評價規(guī)則。

本文件適用于RT-PCR儀性能的檢測和評價。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB4793.1測量、控制和實驗室用電氣設(shè)備的安全要求第1部分：通用要求

GB4793.6測量、控制和實驗室用電氣設(shè)備的安全要求第6部分：實驗室用材料加熱設(shè)備的特殊

要求

GB4793.9測量、控制和實驗室用電氣設(shè)備的安全要求第9部分：實驗室用分析和其他目的自動

和半自動設(shè)備的特殊要求

GB/T14710醫(yī)用電器環(huán)境要求及試驗方法

GB/T18268.1測量、控制和實驗室用的電設(shè)備電磁兼容性要求第1部分：通用要求

GB/T18268.26測量、控制和實驗室用的電設(shè)備電磁兼容性要求第26部分：特殊要求體外診斷

(IVD)醫(yī)療設(shè)備

JJF1101環(huán)境試驗設(shè)備溫度、濕度參數(shù)校準規(guī)范

YY0648測量、控制和實驗室用電氣設(shè)備的安全要求第2-101部分：體外診斷（IVD）醫(yī)用設(shè)備

的專用要求

YY/T1173聚合酶鏈反應(yīng)分析儀

3術(shù)語和定義

JJF1101、YY/T1173界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

實時熒光定量PCR儀real-timePCRsystems

由實時熒光檢測系統(tǒng)，溫控系統(tǒng)，數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)組成，用來監(jiān)測PCR反應(yīng)過程的實時熒光隨循環(huán)數(shù)

的變化，并通過數(shù)據(jù)分析對檢測樣本進行定量分析。

3.2

控溫模塊temperaturecontrolmodule

通過感溫元件、導(dǎo)熱材料、恒溫塊等完成RT-PCR儀加熱、制冷功能的物理組件。

1

DB61/T1520—2021

3.3

熱蓋hotlid

具有加熱功能，防止蒸發(fā)的水汽在RT-PCR儀管蓋上凝結(jié)的裝置。

3.4

熒光干擾fluorescencecrosstalk

RT-PCR儀對某一熒光通道進行熒光檢測時，相鄰或相近熒光通道也會檢測到一定的熒光強度。

4技術(shù)要求

4.1溫度

4.1.1升溫速率

升溫速率技術(shù)要求見表1。

表1升溫速率技術(shù)要求

序號項目要求

1平均升溫速率50℃～90℃，≥1.5℃/s

2最大瞬時升溫速率50℃～90℃，≥2.5℃/s

4.1.2降溫速率

降溫速率技術(shù)要求見表2。

表2降溫速率技術(shù)要求

序號項目要求

1平均降溫速率90℃～50℃，≥1.5℃/s

2最大瞬時降溫速率90℃～50℃，≥2.0℃/s

4.1.3控溫模塊溫度示值誤差

控溫模塊O點溫度測得值與設(shè)定值差值的絕對值不大于0.5℃。

4.1.4控溫模塊溫度波動度

控溫模塊O點溫度波動度不大于±0.3℃。

4.1.5溫度均勻度

控溫模塊各檢測孔間溫度差值不大于1.0℃。

4.1.6溫度持續(xù)時間相對誤差

溫度持續(xù)時間與設(shè)定溫度持續(xù)時間的相對誤差不大于±5%。

4.1.7熱蓋溫度示值誤差

熱蓋溫度測得值與設(shè)定值差值的絕對值不大于3.0℃。

2

DB61/T1520—2021

4.1.8熱蓋溫度波動度

熱蓋溫度波動度不大于±3.0℃。

4.2熒光強度

4.2.1熒光強度重復(fù)性

熒光強度的重復(fù)性不大于1.5%。

4.2.2熒光檢測精密度

用高、中、低三種濃度的熒光染料進行試驗，每種濃度下檢測結(jié)果的精密度不大于5%。

4.2.3熒光線性

對系列稀釋熒光染料物質(zhì)的樣本（至少5個梯度）進行檢測，各濃度熒光測得值與稀釋比例的線性

回歸系數(shù)r不小于0.990。

4.3樣本檢測

4.3.1樣本檢測重復(fù)性

對高、中、低濃度核酸樣本或有證標準物質(zhì)進行檢測，重復(fù)性應(yīng)不大于3%。

4.3.2樣本線性

對系列稀釋梯度濃度的樣本（至少5個梯度）進行檢測，各濃度Ct值與濃度對數(shù)值的線性回歸系數(shù)r

絕對值應(yīng)不小于0.990。

4.3.3不同通道熒光干擾

進行RT-PCR試驗結(jié)果分析，其他通道熒光漲幅不高于目標通道試驗結(jié)果的自動分析閾值。

4.4電氣安全

電氣安全應(yīng)符合GB4793.1、GB4793.6、GB4793.9及YY0648的要求。

4.5環(huán)境

應(yīng)符合GB/T14710的要求。

4.6電磁兼容

應(yīng)符合GB/T18268.1及GB/T18268.26的要求。

5試驗方法

5.1溫度

5.1.1檢測點的選擇

控溫模塊溫度檢測點按表3進行選擇。熱蓋溫度檢測點應(yīng)選擇在熱蓋中心點。

3

DB61/T1520—2021

表3控溫模塊溫度檢測點選擇要求

內(nèi)容要求

檢測點數(shù)量≥6個，且不少于總檢測孔數(shù)的12%。

可以區(qū)分多控溫模塊的，檢測點應(yīng)包含每個控溫模塊內(nèi)距離其中心點最近的孔位（O點）及最遠

的孔位（F點）。

特征要求

無法區(qū)分多控溫模塊的，檢測點應(yīng)包括離PCR管放置區(qū)中心最近的孔位（O點）和最遠的孔位（F

點）。

分布要求整個控溫模塊的檢測點盡可能保持均勻分布，不包括O點和F點。

5.1.2溫度控制程序的設(shè)定

溫度控制程序按表4要求進行設(shè)定。

表4RT-PCR儀溫度控制標準程序表

控溫模塊熱蓋溫度

階段步驟

設(shè)定溫度范圍設(shè)定溫度持續(xù)時間循環(huán)數(shù)設(shè)定溫度范圍

1（50±0.5）℃

Ⅰ

2（90±0.5）℃

1(55±5)℃≥1.5min≥6次(105±6)℃

Ⅱ2(72±5)℃

3(95±5)℃

5.1.3測量設(shè)備的選擇

溫度測量設(shè)備可選用多通道溫度顯示儀表或多路溫度測量裝置，傳感器宜選用高精度熱敏電阻或四

線制鉑電阻溫度計，溫度測量設(shè)備溫度傳感器的數(shù)量應(yīng)滿足檢測布點要求，能與RT-PCR儀孔板接觸良

好，各通道應(yīng)采用同種型號規(guī)格的溫度傳感器。溫度測量設(shè)備的技術(shù)指標應(yīng)滿足以下要求：

a)測量范圍：（0～120）℃；

b)分辨力：0.01℃；

c)最大允許誤差：±0.17℃；

d)溫度采樣頻率：≥2Hz。

5.1.4升溫速率

5.1.4.1平均升溫速率

按5.1.2表4設(shè)定溫控程序，記錄“階段Ⅰ”的升溫過程中各檢測孔的溫度數(shù)據(jù)。在50℃±0.5℃內(nèi)取

任意溫度點，記為，在90℃±0.5℃內(nèi)取任意溫度點，記為，從到達的時間記為，

4

DB61/T1520—2021

按公式（1）計算每個檢測孔平均升溫速率。除第1個循環(huán)外連續(xù)檢測n≥5個循環(huán)，每個控溫模塊

的每個循環(huán)下平均升溫速率均應(yīng)符合表1的要求。

..........................................................................(1)

式中：

——在某一循環(huán)的升溫過程中，待測模塊內(nèi)第i個檢測孔的平均升溫速率，℃/s；

——在某一循環(huán)的升溫過程中，待測模塊內(nèi)第i個檢測孔的在50℃±0.5℃內(nèi)任意溫度點，℃；

——在某一循環(huán)的升溫過程中，待測模塊內(nèi)第i個檢測孔的在90℃±0.5℃內(nèi)任意溫度點，℃；

——某一循環(huán)的升溫過程中，待測模塊內(nèi)第i個檢測孔從Tu1,i到達Tu2,i的時間，s。

5.1.4.2最大瞬時升溫速率

按5.1.2表4設(shè)定溫控程序，記錄掃描溫度從50℃±0.5℃升至90℃±0.5℃過程中，各檢測孔相鄰兩

個溫度采集點在一個溫度采集時間間隔內(nèi)的溫度變化，取其中最大值，按照公式(2)計算最

大瞬時升溫速率。除第1個循環(huán)外連續(xù)檢測n≥5個循環(huán)，每個控溫模塊的每個循環(huán)下最大瞬時升

溫速率均應(yīng)符合表1的要求。

...........................................................................(2)

式中：

——在某一循環(huán)的升溫過程中，待測模塊內(nèi)所有檢測孔最大瞬時升溫速率，℃/s；

——在某一循環(huán)的升溫過程中，待測模塊內(nèi)所有檢測孔的采集數(shù)據(jù)中，相鄰兩個溫度采集

點溫度變化最大值，℃；

——溫度采集時間間隔，s。

5.1.5降溫速率

5.1.5.1平均降溫速率

按5.1.2表4設(shè)定溫控程序，記錄“階段Ⅰ”的降溫過程中各檢測孔的溫度數(shù)據(jù)。在90℃±0.5℃內(nèi)取

任意溫度點，記為，在50℃±0.5℃內(nèi)取任意溫度點，記為，從到達的時間記為，

5

DB61/T1520—2021

按公式（3）計算各檢測孔的平均降溫速率。除第1個循環(huán)外連續(xù)檢測n≥5個循環(huán)，每個控溫模塊

的每個循環(huán)下平均降溫速率均應(yīng)符合表2的要求。

.........................................................................(3)

式中：

——在某一循環(huán)的降溫過程中，待測模塊內(nèi)第i個檢測孔的平均降溫速率，℃/s；

——在某一循環(huán)的降溫過程中，待測模塊內(nèi)第i個檢測孔的在90℃±0.5℃內(nèi)任意溫度點，℃；

——在某一循環(huán)的降溫過程中，待測模塊內(nèi)第i個檢測孔的在50℃±0.5℃內(nèi)任意溫度點，℃；

——某一循環(huán)的降溫過程中，待測模塊內(nèi)第i個檢測孔從TD1，i到達TD2，i的時間，s。

5.1.5.2最大瞬時降溫速率

按5.1.2表4設(shè)定溫控程序，記錄掃描溫度從90℃±0.5℃降至50℃±0.5℃過程中，各檢測孔相鄰兩

個溫度采集點在一個溫度采集時間間隔內(nèi)的溫度變化（應(yīng)不大于0.5s并盡可能足夠?。?，取其中

最大值()，按照公式(4)計算最大瞬時降溫速率。除第1個循環(huán)外連續(xù)檢測n≥5個循環(huán)，每個控

溫模塊的每個循環(huán)下最大瞬時降溫速率均應(yīng)符合表2的要求。

............................................................................(4)

式中：

——在某一循環(huán)的升溫過程中，待測模塊內(nèi)所有檢測孔最大瞬時升溫速率，℃/s；

——在某一循環(huán)的升溫過程中，待測模塊內(nèi)所有檢測孔的采集數(shù)據(jù)中，相鄰兩個溫度采集

點溫度變化最大值，℃；

——溫度采集時間間隔，s。

5.1.6控溫模塊溫度示值誤差

按5.1.2表4設(shè)定溫控程序，采集“階段Ⅱ”要求的溫度測試數(shù)據(jù)。每個溫控模塊每個循環(huán)的中心

點檢測孔（O點）溫度分別到達(55±5)℃、(72±5)℃、(95±5)℃三個溫度設(shè)定值后，記錄20s~60s內(nèi)O

點的所有溫度測得值為有效溫度測量值。按公式（5）計算其平均值，按公式（6）計算模塊溫度示

值誤差。除第1個循環(huán)外連續(xù)檢測n≥5個循環(huán)，每個檢測點的溫度示值誤差均應(yīng)符合4.1.3的要求。

6

DB61/T1520—2021

...............................................................................(5)

式中：

——在某一循環(huán)的某個設(shè)定溫度下，待測模塊O點的有效溫度測量值的平均值，℃；

——在某一循環(huán)的某個設(shè)定溫度下，待測模塊O點的有效溫度測量值，℃

m——在某一循環(huán)的某個設(shè)定溫度下，待測模塊O點的有效溫度測量值的總數(shù)。

............................................................................(6)

式中：

——在某一循環(huán)的某個設(shè)定溫度下，某一溫度設(shè)定值的溫度示值誤差，℃；

——在某一循環(huán)的某個設(shè)定溫度下，待測模塊O點的有效溫度測量值的平均值，℃；

——在某一循環(huán)的某個設(shè)定溫度下，待測模塊O點的溫度設(shè)定值，℃。

1.1.1控溫模塊溫度波動度

按5.1.2表4設(shè)定溫控程序，采集“階段Ⅱ”要求的溫度測試數(shù)據(jù)。每個溫控模塊每個循環(huán)的中心點

檢測孔（O點）溫度分別到達(55±5)℃、(72±5)℃、(95±5)℃三個溫度設(shè)定值后，記錄20s~60s內(nèi)O點

的所有溫度測得值為有效溫度測量值。按公式（7）計算模塊溫度波動度，除第1個循環(huán)外連續(xù)檢

測n≥5個循環(huán)，每個控溫模塊的每個循環(huán)下每個溫度設(shè)定值的溫度波動度均應(yīng)符合4.1.4的要求。

.....................................................................(7)

式中：

——在某一循環(huán)的某個溫度下，待測模塊的溫度波動度，冠以“±”號，℃；

——在某一循環(huán)的某個設(shè)定溫度下，待測模塊O點的有效溫度測量值的最大值，℃；

——在某一循環(huán)的某個設(shè)定溫度下，待測模塊O點的有效溫度測量值的最小值，℃。

5.1.7溫度均勻度

按5.1.2表4設(shè)定溫控程序，采集“階段Ⅱ”要求的溫度測試數(shù)據(jù)。每個溫控模塊每個循環(huán)的每個檢

測孔溫度分別到達(55±5)℃、(72±5)℃、(95±5)℃三個溫度設(shè)定值后，記錄第70s時所有檢測點的讀數(shù)

為有效溫度測量值。按公式（8）計算模塊溫度均勻度ΔT，除第1個循環(huán)外連續(xù)檢測n≥5個循環(huán)，每個

循環(huán)下每個溫度設(shè)定值的溫度均勻度均應(yīng)符合4.1.5的要求。

7

DB61/T1520—2021

.............................................................................(8)

式中：

——在某一循環(huán)的某個設(shè)定溫度下，待檢儀器的溫度均勻性，℃；

——在某一循環(huán)的某個設(shè)定溫度下，所有檢測點的有效溫度測量值的最大值，℃；

——在某一循環(huán)的某個設(shè)定溫度下，所有檢測點的有效溫度測量值的最小值，℃。

1.1.2溫度持續(xù)時間相對誤差

按5.1.2表4設(shè)定溫控程序，采集“階段Ⅱ，步驟3”實時溫度測試數(shù)據(jù)。以95℃±0.5℃為計時參考點，

自每個溫控模塊每次循環(huán)中心點檢測孔（O點）顯示溫度首次到達計時參考點時開始計時，至末次到達

計時參考點時結(jié)束，記錄時間為t作為恒溫時間實測值ti。除第1個循環(huán)外連續(xù)檢測n≥5個循環(huán)，按公式（9）

計算連續(xù)n個循環(huán)恒溫時間實測值的平均值，按公式（10）計算相對誤差，每個控溫模塊的溫度持續(xù)時

間相對誤差均應(yīng)符合4.1.6的要求。

....................................................................................(9)

式中：

——待測模塊連續(xù)n個循環(huán)恒溫時間實測值的平均值，s；

——待測模塊的某一循環(huán)下恒溫時間實測值，s；

n——循環(huán)次數(shù)。

.........................................................................(10)

式中：

——某一模塊溫度持續(xù)時間相對誤差，s；

——連續(xù)n個循環(huán)恒溫時間實測值的平均值，s；

——設(shè)定溫度持續(xù)時間，s。

1.1.3熱蓋溫度示值誤差

按5.1.2表4設(shè)定溫控程序，采集熱蓋溫度測試點的實時溫度測試數(shù)據(jù)。當(dāng)熱蓋溫度到達（105±6）℃

設(shè)定值后，記錄2min~10min內(nèi)所有溫度測得值為有效溫度測量值。按公式（11）計算其均值。按公

式（12）計算熱蓋溫度示值誤差，其結(jié)果應(yīng)符合4.1.7的要求。

8

DB61/T1520—2021

..............................................................................(11)

式中：

——熱蓋溫度達到設(shè)定值，有效溫度測量值的平均值，℃；

——熱蓋溫度達到設(shè)定值，有效溫度測量值，℃

m——熱蓋溫度達到設(shè)定值，有效溫度測量值總數(shù)。

..........................................................................(12)

式中：

——熱蓋溫度示值誤差，℃；

——熱蓋溫度達到設(shè)定值，有效溫度測量值的平均值，℃；

——熱蓋的溫度設(shè)定值，℃。

5.1.8熱蓋溫度波動度

按5.1.2表4設(shè)定溫控程序，采集熱蓋溫度測試點的實時溫度測試數(shù)據(jù)。當(dāng)熱蓋溫度到達（105±6）℃

設(shè)定值后，記錄2min~10min內(nèi)所有溫度測得值的最大值和最小值，按公式（13）計算熱

蓋溫度波動度，其結(jié)果應(yīng)符合4.1.8的要求。

..................................................................(13)

式中：

——熱蓋溫度波動度，冠以“±”號，℃；

——熱蓋溫度達到設(shè)定值，2min~10min內(nèi)所有溫度測得值的最大值，℃；

——熱蓋溫度達到設(shè)定值，2min~10min內(nèi)所有溫度測得值的最小值，℃。

5.2熒光強度

5.2.1熒光強度重復(fù)性

在儀器測定范圍內(nèi)，隨機選取n(n≥l)個通道，每個通道隨機選取1個檢測孔，分別配置各通道高、中、

低三種濃度的校準熒光染料，每種檢測10次，光學(xué)系統(tǒng)收集目標通道的數(shù)據(jù)。按公式（14）計算熒光強

度重復(fù)性。每個通道高、中、低三種濃度的熒光強度重復(fù)性均應(yīng)符合4.2.1的要求。

9

DB61/T1520—2021

..........................................(14)

式中：

——某一通道的某一濃度下熒光強度重復(fù)性；

——某一通道的某一濃度下10次熒光重復(fù)測量結(jié)果的實驗標準差；

——某一通道的某一濃度下10次熒光重復(fù)測量結(jié)果的平均值；

——某一通道的某一濃度下熒光測量結(jié)果。

5.2.2熒光檢測精密度

在儀器測定范圍內(nèi)，隨機選取n(n≥l)個通道，每個通道隨機選取m(m≥10)個檢測孔（孔位數(shù)不足10

個時，則進行全部孔位檢測），分別配置各通道高、中、低三種濃度的校準熒光染料，每種濃度檢測1

次，光學(xué)系統(tǒng)收集目標通道的數(shù)據(jù)。按公式（15）計算熒光強度的變異系數(shù)作為熒光強度精密度，每個

通道高、中、低三種濃度的熒光強度精密度均應(yīng)符合4.2.2的要求。

...........................................(15)

式中：

——熒光強度精密度；

——實驗標準差。

——某一通道的某一濃度下第i個檢測孔的熒光測量結(jié)果；

——某一通道的某一濃度下所有檢測孔熒光測量結(jié)果的平均值；

m——選取的檢測孔總數(shù)。

5.2.3熒光線性

在儀器測定范圍內(nèi)，隨機選取n(n≥l)個通道，將已知濃度的校準熒光染料溶液梯度稀釋后（至少稀

釋5個梯度，m≥5）進行檢測，每一濃度梯度平行測試3孔，光學(xué)系統(tǒng)收集目標通道的數(shù)據(jù)。按公式（16）

計算某一通道某一梯度下3個檢測孔熒光測量結(jié)果的平均值，按公式（17）某一通道所有梯度下所

有檢測孔熒光測量結(jié)果的平均值，按公式（18）計算線性相關(guān)系數(shù)r作為熒光線性結(jié)果，每個通道

熒光線性結(jié)果均應(yīng)符合4.2.3的要求。

10

DB61/T1520—2021

...........................................................................(16)

式中：

——某一通道某一梯度下3個檢測孔熒光測量結(jié)果的平均值；

——某一通道某一梯度下第j個檢測孔熒光測量結(jié)果。

............................................................................(17)

式中：

——某一通道所有梯度下所有檢測孔熒光測量結(jié)果的平均值；

——某一通道某一梯度下3個檢測孔熒光測量結(jié)果的平均值；

m——稀釋梯度數(shù)

....................................................(18)

式中：

——某一通道熒光線性相關(guān)系數(shù)；

——某一通道某一濃度梯度下校準熒光染料標準值；

——某一通道所有濃度梯度下校準熒光染料標準值的平均值；

——某一通道某一梯度下3個檢測孔熒光測量結(jié)果的平均值；

——某一通道所有梯度下所有檢測孔熒光測量結(jié)果的平均值；

m——稀釋梯度數(shù)

5.3樣本檢測

5.3.1檢測樣本的技術(shù)要求

檢測樣本可采用已知濃度的核酸樣本或有證標準物質(zhì)。若使用有證標準物質(zhì)（如：質(zhì)粒DNA標準物

質(zhì)、核糖核酸標準物質(zhì)），則其技術(shù)要求如下：

a)拷貝數(shù)≥109copies/μL；

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b)相對擴展不確定度Urel≤6%，k=2。

5.3.2樣本檢測重復(fù)性

在儀器測定范圍內(nèi)，隨機選取n(n≥l)個通道，將已知濃度核酸樣本或有證標準物質(zhì)等倍數(shù)地稀釋為

高、中、低三種濃度的待檢樣本，選用生產(chǎn)企業(yè)規(guī)定的試劑盒進行檢測。對每個通道下的每種濃度待檢

樣本，隨機選取10個檢測孔同時進行檢測。按公式（19）計算某一通道在某濃度下樣本檢測重復(fù)性。每

個通道高，中，低三種濃度的樣本檢測重復(fù)性均應(yīng)符合4.3.1的要求。

...........................................(19)

式中：

——某一通道在某濃度下樣本檢測重復(fù)性；

——某一通道的某一濃度下核酸樣本或有證標準物質(zhì)10次重復(fù)測量結(jié)果的實驗標準差。

——某一通道的某一濃度下核酸樣本或有證標準物質(zhì)10次重復(fù)測量結(jié)果的平均值。

——某一通道的某一濃度下的第i次核酸樣本測量結(jié)果；

5.3.3樣本線性

在儀器測定范圍內(nèi)，隨機選取n(n≥l)個通道，將已知濃度核酸樣本或有證標準物質(zhì)按照10倍或5倍

梯度稀釋后（至少稀釋5個梯度，m≥5）進行檢測。對每個通道下的每種濃度待檢樣本，隨機地選取3

個檢測孔同時進行檢測。按公式（20）計算某一通道某一梯度下3個檢測孔核酸樣本或有證標準物質(zhì)測

量結(jié)果的平均值，按公式（21）計算某一通道所有梯度下所有檢測孔核酸樣本或有證標準物質(zhì)測量結(jié)果

的平均值，按公式（22）計算線性相關(guān)系數(shù)作為樣本線性，每個通道的樣本線性均應(yīng)符合4.3.2的要求。

............................................................................(20)

式中：

——某一通道某一梯度下3個檢測孔核酸樣本或有證標準物質(zhì)測量結(jié)果的平均值；

——某一通道某一梯度下第i個檢測孔核酸樣本或有證標準物質(zhì)測量結(jié)果。

............................................................................(21)

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式中：

——某一通道所有梯度下所有檢測孔核酸樣本或有證標準物質(zhì)測量結(jié)果的平均值；

——某一通道某一梯度下3個檢測孔核酸樣本或有證標準物質(zhì)測量結(jié)果的平均值。

.....................................................(22)

式中：

——某一通道樣本線性；

——某一通道某一梯度下核酸樣本或有證標準物質(zhì)標準值；

——某一通道所有梯度下核酸樣本或有證標準物質(zhì)標準值的平均值；

——某一通道某一梯度下3個檢測孔核酸樣本或有證標準物質(zhì)測量結(jié)果的平均值；

——某一通道所有梯度下所有檢測孔核酸樣本或有證標準物質(zhì)測量結(jié)果的平均值；

m——稀釋梯度數(shù)

5.3.4不同通道熒光干擾

5.3.4.1隨機選取n(n≥2)個通道進行檢測，選用生產(chǎn)企業(yè)規(guī)定的試劑盒進行不同通道熒光干擾試驗。

收集所有通道的數(shù)據(jù)，結(jié)果應(yīng)符合4.3.3的要求。

5.3.4.2軟件具有通道熒光串?dāng)_修正功能或顏色補償功能的，在修正后或補償后，結(jié)果應(yīng)符合4.3.3

的要求。

5.4電氣安全

按GB4793.1、GB4793.6、GB4793.9和YY0648規(guī)定的方法進行測試，結(jié)果應(yīng)符合4.4的要求。

5.5環(huán)境

按GB/T14710.11規(guī)定的方法進行測試，結(jié)果應(yīng)符合4.5的要求。

5.6電磁兼容

按GB/T18268.1及GB/T18268.26規(guī)定的方法進行測試，結(jié)果應(yīng)符合4.6的要求。

6評價規(guī)則

6.1的型式評價應(yīng)符合4的全部技術(shù)要求，出廠評價應(yīng)符合4.1～4.5全部技術(shù)要求。使用中評價應(yīng)符

合4.1～4.3全部技術(shù)要求。

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參?考?文?獻

[1]YY∕T1173—2010聚合酶鏈反應(yīng)分析儀

[2]JJF1527—2015聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準規(guī)范

[3]JJF(浙)1124—2016基因擴增儀（聚合酶鏈反應(yīng)分析儀）校準規(guī)范

[4]JJF1821—2020聚合酶鏈反應(yīng)分析儀溫度校準裝置校準規(guī)范

_________________________________

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目??次

前言.....................................................................................................................................................................II

1范圍.................................................................................................................................................................1

2規(guī)范性引用文件.............................................................................................................................................1

3術(shù)語和定義.....................................................................................................................................................1

4技術(shù)要求.........................................................................................................................................................2

5試驗方法.........................................................................................................................................................3

6評價規(guī)則..........................