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文檔簡介
廣西玉林市陸川縣2025屆高考沖刺模擬生物試題注意事項:1.答題前,考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚,將條形碼準確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2.答題時請按要求用筆。3.請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無效;在草稿紙、試卷上答題無效。4.作圖可先使用鉛筆畫出,確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5.保持卡面清潔,不要折暴、不要弄破、弄皺,不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.S型肺炎雙球菌具有多糖類莢膜,R型肺炎雙球菌則不具有,在含有R型活細菌的培養(yǎng)基中添加某些物質(zhì)后進行培養(yǎng),下列相應(yīng)的培養(yǎng)結(jié)果,表述錯誤的是()組別添加物具有莢膜的細菌AS型細菌的多糖類物質(zhì)有BS型細菌DNA有CS型細菌DNA的完全水解產(chǎn)物無DS型細菌的蛋白質(zhì)無A.A B.B C.C D.D2.以下高中生物學(xué)實驗中,操作不正確的是()A.在制作果酒的實驗中,將葡萄汁液裝滿整個發(fā)酵裝置B.鑒定DNA時,將粗提產(chǎn)物與二苯胺混合后進行沸水浴C.用蘇丹Ⅲ染液染色,觀察花生子葉細胞中的脂肪滴(顆粒)D.用龍膽紫染液染色,觀察洋蔥根尖分生區(qū)細胞中的染色體3.據(jù)報道,墨西哥男孩LuisMannel在10個月大的時候,體重達到60斤,相當于一名9歲男孩的體重,醫(yī)生對他進行檢查,認為他可能患有Prader-Willi綜合征,這是一種罕見的遺傳性疾病。該病是由于15號染色體微缺失引起的。下列敘述錯誤的是()A.引起此病的變異類型同貓叫綜合征一樣B.此病的致病基因不遵循孟德爾的遺傳規(guī)律C.醫(yī)生可通過觀察有絲分裂中期細胞對此病進行初步診斷D.此病可能是由于母方或父方的第15號染色體片段發(fā)生缺失引起的4.間充質(zhì)干細胞(MSC)最初在骨髓中發(fā)現(xiàn),是一類具有自我更新和多向分化能力的細胞。下列敘述錯誤的是()A.MSC在增殖時核膜與核仁可以周期性地消失和重建B.MSC能完成多向分化的根本原因是遺傳信息的執(zhí)行情況不同C.MSC是一類不具有凋亡基因的多能干細胞D.MSC中原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變會使其變成癌細胞5.下列有關(guān)細胞的成分。結(jié)構(gòu)或功能的敘述,正確的是()A.有絲分裂中期,細胞核的體積變大B.所有細胞內(nèi)核糖體的形成均與核仁有關(guān)C.真核細胞在生長過程中都會出現(xiàn)核DNA加倍現(xiàn)象D.核糖體和線粒體均參與了唾液淀粉酶的合成6.如圖的數(shù)學(xué)模型能表示的生物學(xué)含義是()A.植物細胞液濃度隨外界溶液濃度變化情況B.H2O2分解速率隨H2O2酶濃度變化的情況C.細胞有氧呼吸強度隨氧氣濃度的變化情況D.真光合作用速率隨光照強度的變化情況7.澳大利亞一項新研究發(fā)現(xiàn),女性在懷孕期間除多吃富含蛋白質(zhì)和脂質(zhì)的食物外,還應(yīng)多吃富含植物纖維素的食物,這有利于胎兒免疫系統(tǒng)的發(fā)育。下列相關(guān)敘述錯誤的是()A.蛋白質(zhì)、核酸和纖維素都以碳鏈作為基本骨架B.組成人體蛋白質(zhì)的某些氨基酸必須從食物中獲得C.人體內(nèi)的細胞能分泌分解纖維素的酶將其水解為單糖D.膽固醇既參與人體血脂的運輸,也參與細胞膜的構(gòu)成8.(10分)下列關(guān)于遺傳與變異的敘述,正確的是()A.染色體斷裂后必導(dǎo)致其結(jié)構(gòu)變異B.果蠅的復(fù)眼由橢圓形變成“棒眼”是基因突變的結(jié)果C.不同個體任何細胞內(nèi)均可發(fā)生基因突變,體現(xiàn)了其普遍性特點D.AAaa自交出現(xiàn)35:1的性狀分離比,這是基因重組和配子隨機結(jié)合的結(jié)果二、非選擇題9.(10分)膽固醇是人體內(nèi)一種重要的脂質(zhì),下圖表示人體細胞內(nèi)膽固醇的來源及調(diào)節(jié)過程。(1)細胞中的膽固醇可以來源于血漿。人體血漿中含有的某種低密度脂蛋白(LDL)的結(jié)構(gòu)如圖所示,其主要功能是將膽固醇轉(zhuǎn)運到肝臟以外的組織細胞(靶細胞)中,以滿足這些細胞對膽固醇的需要。①LDL能夠?qū)哪懝檀紲蚀_轉(zhuǎn)運至靶細胞中,與其結(jié)構(gòu)中的_____________________與靶細胞膜上的LDL受體結(jié)合直接相關(guān)。②LDL通過途徑①_____________________方式進入靶細胞,形成網(wǎng)格蛋白包被的囊泡,經(jīng)過脫包被作用后與胞內(nèi)體(膜包裹的囊泡結(jié)構(gòu))融合。由于胞內(nèi)體內(nèi)部酸性較強,LDL與受體分離,胞內(nèi)體以出芽的方式形成含有受體的小囊泡,通過途徑②回到細胞膜被重新利用。含有LDL的胞內(nèi)體通過途徑③(方框示意):途徑③_____________________,增加胞內(nèi)游離膽固醇的含量。(2)當細胞中的膽固醇含量過高時,會抑制LDL受體基因表達以及_____________________,從而使游離膽固醇的含量維持在正常水平。(3)如圖為不同溫度下膽固醇對人工膜(人工合成的脂質(zhì)膜)微粘度(與流動性負相關(guān))影響的曲線。據(jù)圖分析膽固醇對膜流動性的作用:____________________。(4)如你是高血脂患者,有人說要禁止攝入脂質(zhì)食物,對此你認為是否合理?請您給出高血脂患者建議。______________________。10.(14分)果蠅體內(nèi)的Ⅳ號染色體多一條(三體)或少一條(單體)均可以存活并能夠繁殖,沒有Ⅳ號染色體的個體不能存活。果蠅正常眼(E)和無眼(e)是一對相對性狀,基因E、e位于常染色體上?;卮鹣铝袉栴}:(1)現(xiàn)有染色體正常的純合正常眼和無眼果蠅、Ⅳ號染色體單體的純合正常眼和無眼果蠅可供選擇,若要通過一次雜交實驗確定E、e這對等位基因是否位于Ⅳ號染色體上,請寫出實驗思路,并預(yù)測實驗結(jié)果及結(jié)論:________。(2)現(xiàn)已證明E、e基因位于Ⅳ號染色體上,若將基因型為EEe的Ⅳ號染色體三體的果蠅與染色體正常的無眼果蠅雜交,則理論上子代的表現(xiàn)型及比例為________,子代正常眼中Ⅳ號染色體正常的果蠅占________。(3)果蠅眼的紅色(R)和白色(r)由等位基因R、r控制,現(xiàn)將一只染色體正常無眼雌果蠅和一只染色體正常紅眼雄果蠅交配,發(fā)現(xiàn)F1中雌果蠅全為紅眼,雄果蠅全為白眼。據(jù)此推測,雄性親本的基因型為________;F1雌雄果蠅交配,F(xiàn)2正常眼雌果蠅中純合子所占的比例為________。11.(14分)下圖是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖,載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。請回答下列問題:(1)EcoRⅤ酶切位點為,EcoRⅤ酶切出來的線性載體P1為_______末端。(2)用TaqDNA聚合酶進行PCR擴增獲得目的基因片段,其兩端各自帶有一個腺嘌呤脫氧核苷酸,載體P1用酶處理,在兩端各添加了一個堿基為_______的脫氧核苷酸,形成P2,P2和目的基因片段在_______酶作用下,形成重組質(zhì)粒P3。PCR技術(shù)中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的DNA聚合酶,其最主要的特點是_____________________________________。
(3)PCR技術(shù)可以臨床用于診斷感染性疾病、腫瘤及遺傳病等,它是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),其標準步驟為_______、退火、__________。(4)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了___________________。若該目的基因是從cDNA文庫中分離獲取的蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體中,然后在_______為唯一含碳營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng),以完成目的基因表達的初步檢測。12.人們通過如下圖所示的封育,種草等鹽堿化草地的改良活動,使重度鹽堿化草地恢復(fù)至中度鹽堿化草地,并最終恢復(fù)至輕度鹽堿化草地和良好草地。請根據(jù)所學(xué)知識回答問題。(1)要認識重度鹽堿化草地的群落,首先要分析____________。(2)改造的初始階段,擴大種植堿蓬等耐鹽的先鋒植物的目的是____________。(3)上述鹽堿化草地治理的過程中,群落發(fā)生了__________演替,理由是__(4)上述改造鹽堿化草地的活動主要利用了_________理論,特別是強調(diào)了生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力和生物的適應(yīng)性,輔以物質(zhì)和能量的投入,從而盡快使生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)和功能恢復(fù)到(或接近)受干擾前的狀態(tài)。該實例說明人類活動可以使群落按照不同于____________的速度和方向進行演替。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】
R型和S型肺炎雙球菌的區(qū)別是前者沒有莢膜(菌落表現(xiàn)粗糙),后者有莢膜(菌落表現(xiàn)光滑)。由肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗可知,只有S型菌有毒,會導(dǎo)致小鼠死亡,S型菌的DNA才能使R型菌轉(zhuǎn)化為S型菌?!驹斀狻緼、S型細菌的多糖類物質(zhì)不能使R型活細菌轉(zhuǎn)化成S型細菌,所以培養(yǎng)R型活細菌時加入S型細菌的多糖類物質(zhì),不可能產(chǎn)生一些有莢膜的S型細菌,A錯誤;B、S型細菌DNA能將R型活菌轉(zhuǎn)化為S型細菌,所以培養(yǎng)R型活細菌時加入S型細菌生物DNA,能產(chǎn)生有莢膜的S型細菌,B正確;C、S型細菌DNA的完全水解產(chǎn)物不攜帶遺傳信息,所以培養(yǎng)R型活細菌時加入S型細菌DNA的完全水解產(chǎn)物,不能產(chǎn)生有莢膜的細菌,C正確;D、S型細菌的蛋白質(zhì)不攜帶遺傳信息,所以培養(yǎng)R型活細菌時加入S型細菌的蛋白質(zhì),不能產(chǎn)生有莢膜的細菌,D正確。
故選A。2、A【解析】【分析】該題考查高中幾個主要實驗的材料選擇、試劑選擇、操作步驟等【詳解】在制作果酒的實驗中,葡萄汁液不能裝滿發(fā)酵裝置,要留出1/3的空間,A錯誤;在DNA鑒定實驗中,DNA遇二苯胺(沸水浴)會染成藍色,B正確;用蘇丹Ⅲ染液可以把花生子葉細胞中的脂肪顆粒染成橘黃色,C正確;用龍膽紫染液能將細胞中的染色體染成深紫色,在洋蔥根尖分生區(qū)細胞中能清晰地觀察到,D正確,所以選A?!军c睛】注意題目中的“果酒”、“裝滿”3、B【解析】
分析題干可知,Prader-Willi綜合征是由于15號染色體微缺失引起,屬于染色體異常遺傳病中染色體結(jié)構(gòu)異常引起的。【詳解】A、據(jù)上分析可知,引起此病的變異類型同貓叫綜合征一樣,屬于染色體結(jié)構(gòu)異常,A正確;B、此病由染色體微缺失引起的,不含致病基因,B錯誤;C、染色體異??赏ㄟ^觀察有絲分裂中期細胞染色體進行初步診斷,C正確;D、此病可能是由于母方或父方的第15號染色體片段發(fā)生缺失遺傳給該男孩的,D正確。故選B。4、C【解析】
題意分析:MSC為多能干細胞,其先進行細胞分裂產(chǎn)生了更多的MSC,在經(jīng)過細胞分化形成了脂肪細胞、成纖維細胞、肌細胞和成骨細胞,細胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達,即細胞中遺傳信息的執(zhí)行情況不同?!驹斀狻緼、MSC進行的分裂為有絲分裂,在增殖時核膜與核仁可以周期性地消失和重建,A正確;B、分化的本質(zhì)是基因的選擇性表達,因此,MSC能完成多向分化的根本原因是遺傳信息的執(zhí)行情況不同的結(jié)果,B正確;C、MSC細胞是具有凋亡基因的多能干細胞,C錯誤;D、癌變是因為原癌基因和抑癌基因發(fā)生基因突變導(dǎo)致的,因此MSC中原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變會使其變成癌細胞,D正確。故選C。5、D【解析】
分泌蛋白合成與分泌過程:核糖體合成蛋白質(zhì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進行粗加工內(nèi)質(zhì)網(wǎng)“出芽”形成囊泡高爾基體進行再加工形成成熟的蛋白質(zhì)高爾基體“出芽”形成囊泡細胞膜?!驹斀狻緼、有絲分裂中期不存在核膜和核仁,不存在細胞核結(jié)構(gòu),A錯誤;B、原核細胞有核糖體,但沒有核仁,其核糖體的形成與核仁無關(guān),B錯誤;C、不增殖的真核細胞在生長過程中,核DNA含量不變,C錯誤;D、唾液淀粉酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),核糖體是蛋白質(zhì)的合成場所,線粒體能為蛋白質(zhì)的合成提供能量,D正確。故選D。6、B【解析】
該數(shù)學(xué)模型橫坐標是自變量,縱坐標是因變量,從圖中可看出因變量有初始值,并且隨自變量的變化是先升高后基本保持穩(wěn)定,保持相對穩(wěn)定的原因可能是有某些限制增長的因素。【詳解】A、如果外界溶液中的溶質(zhì)能夠被細胞吸收,開始細胞失水細胞液濃度增大后,由于細胞能主動吸收溶質(zhì),這是細胞液濃度升高,反而會吸水使得細胞液濃度下降,不會存在一個穩(wěn)定期,A錯誤;B、無酶時,過氧化氫較慢分解,加酶時,反應(yīng)速率先隨著酶量的增加而增加,由于底物的量是有限的,當酶過量時,反應(yīng)速率不再隨酶增多而增大,B正確;C、氧氣濃度為0時有氧呼吸也應(yīng)該為零,C錯誤;D、光照強度為0,真光合也應(yīng)為0,D錯誤。故選B?!军c睛】數(shù)學(xué)模型是用來描述一個系統(tǒng)或它性質(zhì)的數(shù)學(xué)形式,可以是公式、曲線圖、表格等數(shù)學(xué)方式。7、C【解析】
所有生物體內(nèi)的生物大分子都是以碳鏈為骨架的,每一個單體都是以若干個相連的碳原子構(gòu)成的碳鏈為基本骨架,由許多單體連接成多聚體。在人體內(nèi)不能合成,只能從食物中獲得的氨基酸稱為必需氨基酸,能在體內(nèi)合成的氨基酸稱為非必需氨基酸。【詳解】A、蛋白質(zhì)、核酸、多糖(纖維素、糖原等)都是以碳鏈作為基本骨架,A正確;B、組成人體蛋白質(zhì)的氨基酸分為必需氨基酸和非必需氨基酸,必需氨基酸需從食物中獲得,B正確;C、人體細胞不能分泌分解纖維素的酶,C錯誤;D、人體中的膽固醇既參與血液中脂質(zhì)的運輸,也是細胞膜的重要組成成分,D正確。故選C。8、C【解析】
1、染色體結(jié)構(gòu)的變異:指細胞內(nèi)一個或幾個染色體發(fā)生片段的缺失、增添、倒位或易位等改變。2、染色體數(shù)目的變異:指細胞內(nèi)染色體數(shù)目增添或缺失的改變。3、基因突變是指基因中堿基對的增添、缺失或替換,基因突變具有普遍性、低頻性、隨機性、不定向性、多害少利性?!驹斀狻緼、染色體的斷裂若發(fā)生在同源染色體上的非姐妹染色單體之間,則不會引起其結(jié)構(gòu)的變異,A錯誤;B、果蠅X染色體上某個區(qū)段發(fā)生重復(fù),增加了某個相同的片段,導(dǎo)致其復(fù)眼由正常的橢圓形變成條形的“棒眼”,這屬于染色體結(jié)構(gòu)變異中的重復(fù),B錯誤;C、基因突變在生物個體發(fā)育的不同階段、不同個體的任何細胞內(nèi)均可發(fā)生,這說明基因突變具有普遍性,C正確;D、AAaa自交出現(xiàn)35:1的性狀分離比,這是染色體數(shù)目變異的結(jié)果,D錯誤。故選C。二、非選擇題9、載脂蛋白B胞吞進入溶酶體,被水解酶降解,釋放到細胞質(zhì)基質(zhì)(進入、降解、釋放)抑制乙酰CoA還原酶的活性,促進膽固醇的儲存在溫度較高時,膽固醇可以降低膜的流動性;在溫度較低時,又可以提高膜的流動性。膽固醇使細胞膜的流動性在較大溫度范圍內(nèi)保持相對穩(wěn)定的狀態(tài)。不合理,應(yīng)該少量攝入優(yōu)質(zhì)脂質(zhì),遵醫(yī)囑吃降血脂藥物,注意科學(xué)飲食,適度鍛煉【解析】
1、大分子物質(zhì)進出細胞的方式是胞吞和胞吐。2、由圖可知,細胞中膽固醇含量的相對穩(wěn)定是反饋調(diào)節(jié)的結(jié)果。3、膽固醇能參與動物細胞膜的組成、能夠促進血液中脂質(zhì)的運輸,但過多攝入膽固醇易沉積在血管壁,危害健康。【詳解】(1)①據(jù)圖可知,LDL能夠?qū)哪懝檀紲蚀_轉(zhuǎn)運至靶細胞中,與其結(jié)構(gòu)中的載脂蛋白B能與LDL受體特異性結(jié)合有直接相關(guān)。②LDL通過靶細胞膜的方式是胞吞。由圖可知,含有LDL的胞內(nèi)體通過途徑③進入溶酶體,溶酶體中含多種水解酶,能將其降解,釋放到細胞質(zhì)基質(zhì)。(2)根據(jù)題圖可知,當細胞中的膽固醇含量過高時,會抑制LDL受體基因表達以及抑制乙酰CoA還原酶的活性,促進膽固醇的儲存,從而使游離膽固醇的含量維持在正常水平。(3)根據(jù)題圖可知,膽固醇對膜流動性的作用是在溫度較高時,膽固醇可以降低膜的流動性;在溫度較低時,又可以提高膜的流動性。膽固醇使細胞膜的流動性在較大溫度范圍內(nèi)保持相對穩(wěn)定的狀態(tài)。(4)由于脂質(zhì)中的磷脂是構(gòu)成細胞膜的重要成分,脂質(zhì)中的膽固醇也參與動物細胞膜的構(gòu)成,還能參與血液中脂質(zhì)的運輸,所以高血脂患者不能不攝入脂質(zhì)。而應(yīng)該少量攝入優(yōu)質(zhì)脂質(zhì),遵醫(yī)囑吃降血脂藥物,注意科學(xué)飲食,適度鍛煉。【點睛】本題主要考查了脂質(zhì)在細胞中的代謝。意在考查學(xué)生的識圖能力和判斷能力,運用所學(xué)知識綜合分析問題和解決問題的能力。解題時需要根據(jù)題干及題圖并結(jié)合課本知識解題。10、方案一:將染色體正常的無眼果蠅與IV號染色體單體的純合野生正常眼果蠅雜交,觀察子代的表現(xiàn)型及比例。若F1表現(xiàn)型及比例為正常眼:無眼=1:1,則E、e基因位于IV號染色體上;若F1全為正常眼,則E、e基因不在IV號染色體上或方案二:將IV號染色體單體的純合野生正常眼果蠅與IV號染色體單體的無眼果蠅雜交,觀察子代的表現(xiàn)型及比例。若F1表現(xiàn)型及比例為正常眼:無眼=2:1,則E、e基因位于IV號染色體上;若F1全為正常眼,則E、e基因不在IV號染色體上正常眼:無眼=5:12/5EEXRY1/6【解析】
染色體變異是指染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目的改變。染色體結(jié)構(gòu)的變異主要有缺失、重復(fù)、倒位、易位四種類型。染色體數(shù)目變異可以分為兩類:一類是細胞內(nèi)個別染色體的增加或減少,另一類是細胞內(nèi)染色體數(shù)目以染色體組的形式成倍地增加或減少。【詳解】(1)若要通過一次雜交實驗確定E、e這對等位基因是否位于IV號染色體上,有兩種方案。方案一:將染色體正常的無眼果蠅與IV號染色體單體的純合野生正常眼果蠅雜交,觀察子代的表現(xiàn)型及比例。若F1表現(xiàn)型及比例為正常眼:無眼=1:1,則E、e基因位于IV號染色體上;若F1全為正常眼,則E、e基因不在IV號染色體上。方案二:將IV號染色體單體的純合野生正常眼果蠅與IV號染色體單體的無眼果蠅雜交,觀察子代的表現(xiàn)型及比例。若F1表現(xiàn)型及比例為正常眼:無眼=2:1,則E、e基因位于IV號染色體上;若F1全為正常眼,則E、e基因不在IV號染色體上。(2)E、e基因位于IV號染色體上,基因型為EEe的IN號染色體三體的果蠅產(chǎn)生4種配子:E、Ee、EE、e,它們的比例為2:2:1:1,染色體正常的無眼果蠅只產(chǎn)生一種配子e,因此子代的表現(xiàn)型及比例為正常眼:無眼=5:1,子代正常眼中IV號染色體正常的果蠅占2/5。(3)果蠅的眼的紅色(R)和白色(r)由等位基因R、r控制,將染色體正常無眼雌果蠅和染色體正常紅眼雄果蠅交配,發(fā)現(xiàn)F1中雌果蠅全為紅眼,雄果蠅全為白眼,據(jù)此推測,控制眼色的基因R、r位于X染色體上,雄性親本的基因型為EEXRY,雌性親本的基因型為eeXrXr。F1代雄果蠅(EeXrY)和雌果蠅(EeXRXr)交配,F(xiàn)2正常眼雌果蠅中純合子(EEXrXr)所占的比例為1/6?!军c睛】此題考查基因分離定律、伴性遺傳和自由組合定律的應(yīng)用,側(cè)重考查利用遺傳學(xué)基本原理進行分析推理和設(shè)計實驗方案的能力。11、平胸腺嘧啶(T)DNA連接酶耐高溫變性延伸鑒別和篩選含目的基因的細胞蔗糖【解析】
1、基因表達載體的基本結(jié)構(gòu)包括復(fù)制原點、目的基因、標記基因、啟動子、終止子等。其中標記基因的作用是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的受體細胞篩選出來,常用的標記基因是抗生素抗性基因。根據(jù)題干信息和圖形分析,P0是載體質(zhì)粒,其含有的氨芐青霉素抗性基因(ampr)和四環(huán)素抗性基因(tetr)都屬于標記基因,可以用檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細胞;EcoRV酶為限制酶,其切割質(zhì)粒后悔破壞了四環(huán)素抗性基因(tetr)。2、PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)做準備;②模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合;③引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復(fù)制鏈?!驹斀狻浚?)根據(jù)題意分析,EcoRV酶識別的序列是-GATATC-,并且兩條鏈都在識別序列的堿基的中軸線T與A之間進行切割,因此其切出來的線性載體P1為平末端。(2)據(jù)圖分析,目的基因兩側(cè)為粘性末端,且漏出的堿基為A,則在載體P1的兩端需要個加一個胸腺嘧啶堿基T形成具有粘性末端的載體P2,再用DNA連接酶將P2與目的基因連接起來形成重組質(zhì)粒P3。由于在PCR擴增技術(shù)中采用高溫使其變形解旋,因此需要使用的DNA聚合酶具有耐高溫的特點。(3)根據(jù)以上分析可知,PCR技術(shù)的標準步驟包括變性、退火、延伸。(4)根據(jù)以上分析可知,重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因?qū)儆跇擞浕颍渥饔檬氰b別和篩選含目的基因的細胞。根據(jù)題意可知,該目的基因是從cDNA文庫中分離獲取的蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因,將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體中,在個體水平上鑒定目的基因是否表達,可以在以蔗糖為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)大腸桿菌,如果大腸桿菌細胞內(nèi)目的基因表達出了蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白,該大腸桿菌能夠進行正常的生長和繁殖,則說明目的基因完成
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