DB37T-海水中7種三嗪類除草劑的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

Q/LB.□XXXXX-XXXX目次TOC\o"1-1"\h\t"標(biāo)準(zhǔn)文件_一級條標(biāo)題,2,標(biāo)準(zhǔn)文件_附錄一級條標(biāo)題,2,"前言 II1范圍 32規(guī)范性引用文件 33術(shù)語和定義 34原理 35試劑及配制 36儀器和設(shè)備 47樣品 47.1樣品的采集和預(yù)處理 47.2提取與凈化 47.3空白試樣的制備 58分析步驟 58.1液相色譜質(zhì)譜條件 58.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 68.3試樣測定 69結(jié)果計(jì)算和表示 69.1定性分析 69.2定量分析 69.3結(jié)果計(jì)算 79.4結(jié)果表示 710準(zhǔn)確度和精密度 710.1準(zhǔn)確度 710.2精密度 711質(zhì)量控制和質(zhì)量保證 711.1空白試驗(yàn) 711.2校準(zhǔn) 711.3平行樣 711.4基體加標(biāo) 712廢物處置 8附錄A（資料性）中英文名稱、分子式、CAS號及分子量 9附錄B（資料性）色譜圖 10前言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由山東省海洋局提出并組織實(shí)施。本文件由山東省海洋標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。海水中7種三嗪類除草劑的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法警告：實(shí)驗(yàn)中使用的標(biāo)準(zhǔn)溶液、有機(jī)溶劑等均具有一定的毒性和揮發(fā)性，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)避免與其直接接觸，樣品前處理過程應(yīng)在通風(fēng)櫥中進(jìn)行。范圍本文件描述了液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜方法測定海水中7種三嗪類除草劑的原理、試劑及配制、儀器和設(shè)備、樣品、分析步驟、結(jié)果計(jì)算和表示、準(zhǔn)確度和精密度、質(zhì)量控制和質(zhì)量保證以及廢物處置。本文件適用于海水中莠去津、撲草凈、西草凈、西瑪津、莠滅凈、特丁凈和特丁津等7種三嗪類除草劑的測定。當(dāng)取樣量為500?mL時(shí)，7種三嗪類除草劑的檢出限均為5.0?ng/L，定量限均為10?ng/L。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB17378.3海洋監(jiān)測規(guī)范第3部分：樣品采集、貯存與運(yùn)輸術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。原理海水試樣中的三嗪類除草劑，在堿性條件下用二氯甲烷萃取，萃取液經(jīng)濃縮后，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定，內(nèi)標(biāo)法定量。試劑及配制以下所用試劑除另有指定外，均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T6682中一級水標(biāo)準(zhǔn)。甲醇（CH3OH）：色譜純。乙腈（CH3CN）：色譜純。氨水（NH3·H2O）：優(yōu)級純。二氯甲烷(CH2Cl2)：色譜純。0.1%甲酸溶液。取甲酸500?μL，加水溶解并定容至500?mL。0.1%甲酸-乙腈溶液。量取0.1%甲酸溶液95?mL和乙腈5?mL，混勻。標(biāo)準(zhǔn)品：莠去津、撲草凈、西草凈、西瑪津、莠滅凈、特丁凈、特丁津、撲草凈-D6、莠去津-D5和特丁津-D5，純度均大于等于98.0%。中英文名稱、分子式、CAS號和分子量見附錄A。標(biāo)準(zhǔn)儲備液：濃度100?μg/mL。分別準(zhǔn)確稱取莠去津、撲草凈、西草凈、西瑪津、莠滅凈、特丁凈和特丁津標(biāo)準(zhǔn)品各適量，加甲醇溶解并稀釋定容于100?mL棕色容量瓶中，配制成濃度均為100?μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液。于-18?℃及以下避光保存，有效期為6個(gè)月?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)工作液：濃度1.0?μg/mL。分別準(zhǔn)確移取莠去津、撲草凈、西草凈、西瑪津、莠滅凈、特丁凈和特丁津標(biāo)準(zhǔn)儲備液各1.0?mL于100?mL棕色容量瓶，用甲醇稀釋至刻度，配制成濃度均為1.0μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液。于2?℃～8?℃及以下避光保存，有效期為1個(gè)月。內(nèi)標(biāo)儲備液：濃度100?μg/mL。取撲草凈-D6、莠去津-D5和特丁津-D5標(biāo)準(zhǔn)品各適量（相當(dāng)于各活性成分約10?mg），精密稱定，加甲醇適量使溶解并稀釋定容至100?mL棕色容量瓶，配制成濃度均為100?μg/mL的內(nèi)標(biāo)儲備液。于-18?℃及以下避光保存，有效期6個(gè)月?；旌蟽?nèi)標(biāo)工作液：濃度1.0?μg/mL。分別準(zhǔn)確量取內(nèi)標(biāo)儲備液適量，用甲醇稀釋，配制成濃度為1.0?μg/mL的混合內(nèi)標(biāo)工作液。于2?℃～8?℃及以下避光保存，有效期為1個(gè)月。儀器和設(shè)備液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀：配有電噴霧離子源（ESI）。分析天平：感量0.000?01?g。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)裝置。氮吹儀。玻璃砂芯過濾裝置。玻璃纖維濾膜（GF/F）：0.45?μm。有機(jī)濾膜：0.22?μm。分液漏斗：1?L。真空泵。樣品樣品的采集和預(yù)處理樣品的采集、貯存及運(yùn)輸應(yīng)按照GB17378.3中的規(guī)定執(zhí)行，海水樣品采集后貯存于棕色玻璃瓶中，用玻璃砂芯過濾裝置，經(jīng)玻璃纖維濾膜過濾后備用。提取與凈化量取500

mL過濾后的樣品，倒入1

L分液漏斗中，加入50

μL混合內(nèi)標(biāo)工作液（5.11），振蕩混勻，用氨水（5.3）調(diào)節(jié)pH至9左右；加入40

mL二氯甲烷（5.4），振蕩10

min，靜置分層，收集萃取液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中；繼續(xù)用30

mL和20

mL二氯甲烷分兩次萃取水樣，合并萃取液至上述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，濃縮至約1

mL，40

℃氮?dú)獯抵两?；?.1%甲酸-乙腈溶液（5.6）1.0

mL溶解殘留物，經(jīng)有機(jī)濾膜（6.7）過濾至進(jìn)樣瓶中，待上機(jī)測定?？瞻自嚇拥闹苽涑患釉嚵贤猓?.2步驟進(jìn)行。分析步驟液相色譜質(zhì)譜條件液相色譜參考條件推薦的液相色譜參考條件如下：色譜柱：C18柱（2.1

mm×100

mm，5

μm），或性能相當(dāng)者；流速：0.25

mL/min；柱溫：35

℃；進(jìn)樣量：10

μL；流動相：A為0.1%甲酸溶液（5.5），B為乙腈(5.2)，梯度洗脫程序見表1。流動相梯度洗脫程序時(shí)間minA%B%0.09553.09553.15956.35956.59558.0955質(zhì)譜參考條件推薦的質(zhì)譜參考條件如下：離子源：電噴霧（ESI）離子源；掃描方式：正離子掃描；檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；噴霧電壓：3

500

V；離子傳輸管溫度：350

℃；鞘氣流量：35

L/min；輔助氣流量：10

L/min；碰撞氣壓力：氬氣；母離子、子離子和碰撞能量見表2。7種三嗪類除草劑的母離子、子離子和碰撞能量參數(shù)化合物母離子m/z子離子m/z碰撞能量ev莠去津216.1174a,13218,23撲草浄242.0200a,15817,25西草凈214.0124a,9617,20西瑪津202.0132a,12420,20莠滅凈228.1186a,9618,36特丁凈242.1186a,15820,25特丁津230.0174a,13216,23撲草凈-D6248.0206a17莠去津-D5221.0179a20特丁津-D5235.0179a16表示定量離子。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制移取混合標(biāo)準(zhǔn)工作液（5.9）和混合內(nèi)標(biāo)工作液（5.11）適量，用甲醇配制成濃度為1.00?ng/mL、5.00ng/mL、10.0ng/mL、50.0ng/mL和100ng/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液，其中內(nèi)標(biāo)溶液濃度均為50.0ng/mL。以測得特征離子質(zhì)量色譜峰外標(biāo)和內(nèi)標(biāo)峰面積比值為縱坐標(biāo)，對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求回歸方程和相關(guān)系數(shù)。試樣測定按照儀器條件（8.1），分別測定三嗪類除草劑標(biāo)準(zhǔn)工作液（8.2）、試樣（7.2）、空白試樣（7.3），三嗪類除草劑標(biāo)準(zhǔn)溶液的特征離子質(zhì)量色譜圖見附錄B。結(jié)果計(jì)算和表示定性分析在同樣測試條件下，試樣液中待測物的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)工作液中待測物的保留時(shí)間偏差在±2.5%以內(nèi)，在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，所選擇的特征離子均應(yīng)出現(xiàn)，且檢測到的離子的相對豐度，應(yīng)與濃度相當(dāng)?shù)男Ｕ龢?biāo)準(zhǔn)溶液相對豐度一致。其允許偏差應(yīng)符合表3要求。定性確證時(shí)相對離子豐度的允許偏差相對離子豐度%允許偏差%＞50±2020～50（不包含20）±2510～20（不包含10）±30≤10±50定量分析按8.1設(shè)定儀器條件，取試樣溶液和混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液等體積進(jìn)樣測定，作單點(diǎn)或多點(diǎn)校準(zhǔn)，以色譜峰面積定量，按內(nèi)標(biāo)法計(jì)算，其中莠去津和西瑪津以莠去津-D5為內(nèi)標(biāo)，撲草凈、西草凈、莠滅凈和特丁凈以撲草凈-D6為內(nèi)標(biāo)，特丁津以特丁津-D5為內(nèi)標(biāo)。標(biāo)準(zhǔn)溶液及試樣溶液中待測物的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測的線性范圍內(nèi)。結(jié)果計(jì)算樣品中三嗪類除草劑的含量按標(biāo)準(zhǔn)曲線或按公式（1）計(jì)算：QUOTEω=Ci×VV1………………（1）公式中：X?——樣品中被測組分三嗪類除草劑的含量，單位為納克每升（ng/L）；Ci——測試溶液中對應(yīng)的被測組分濃度，單位為納克每毫升（ng/mL）；V1——測試溶液定容體積，單位為毫升（mL）；V2——樣品的體積，單位為升（L）。結(jié)果表示計(jì)算結(jié)果扣除空白值，測定結(jié)果用兩次平行測定的算術(shù)平均值表示，保留三位有效數(shù)字。準(zhǔn)確度和精密度準(zhǔn)確度本文件在10?ng/L～100?ng/L添加水平時(shí)，回收率均為70%～120%。精密度本文件批內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于15%，批間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于15%。質(zhì)量控制和質(zhì)量保證空白試驗(yàn)每20個(gè)樣品或每批次（少于20個(gè)樣品/批）應(yīng)至少分析1個(gè)空白試驗(yàn)，空白中三嗪類除草劑的濃度應(yīng)低于方法檢出限。校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)曲線建立應(yīng)與批樣測定同時(shí)進(jìn)行；每20個(gè)樣品或每批次（少于20個(gè)樣品/批）應(yīng)至少分析1個(gè)中間點(diǎn)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，測定值與該點(diǎn)初始濃度的相對誤差應(yīng)不大于30%；7種三嗪類除草劑標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)r一般應(yīng)大于0.99。平行樣每20個(gè)樣品或每批次（少于20個(gè)樣品/批）應(yīng)至少測定一個(gè)平行樣。平行樣測定結(jié)果的相對偏差應(yīng)在±10%以內(nèi)。基體加標(biāo)每20個(gè)樣品或每批次（少于20個(gè)樣品/批）應(yīng)至少測定一個(gè)基體加標(biāo)樣品，三嗪類除草劑回收率應(yīng)在70%～120%之間。廢物處置實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的廢液和廢物應(yīng)分類收集，集中保管，委托有資質(zhì)的單位進(jìn)行處理。

（資料性）

中英文名稱、分子式、CAS號及分子量三嗪類除草劑及內(nèi)標(biāo)的中英文名稱、分子式、CAS號及分子量見表A.1。三嗪類除草劑及內(nèi)標(biāo)的中英文名稱、分子式、CAS號及分子量中文名稱英文名稱分子式CAS號分子量莠去津AtrazineC8H14ClN51912-24-9215撲草凈PrometrynC10H19N5S7287-19-6241西草凈SimetrynC8H15N5S1014-70-6213西瑪津SimazineC7H12ClN5122-34-9201莠滅凈AmetrynC9H17N5S834-12-8227特丁凈TerbutrynC10H19N5S886-50-0241特丁津Terb