新教材2024高中生物第3章基因工程第2節(jié)基因工程的基本操作程序同步測試新人教版選擇性必修3

第3章基因工程 第2節(jié)基因工程的基本操作程序[基礎檢查]1.(2024·普寧)下列關于基因工程的敘述中,正確的是()①基因工程打破了物種與物種之間的界限②基因治療是基因工程技術的應用③載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細胞④所須要的工具酶有限制性內(nèi)切核酸酶、DNA連接酶和運載體⑤常運用的運載體有大腸桿菌、質(zhì)粒和動植物病毒等A.②③⑤B.①②③C.①②⑤ D.①③④解析:基因工程的優(yōu)點是能定向地變更生物的性狀,突破了物種之間的生理隔離界限,可用于基因治療;載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細胞;運載體不是工具酶;常運用的運載體是質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒等,大腸桿菌不能作為運載體。答案:B2.下列獲得目的基因的方法中須要模板鏈的是 ()①從基因文庫中獲得目的基因②利用PCR擴增目的基因③逆轉(zhuǎn)錄④通過DNA合成儀利用化學方法人工合成A.①② B.②③ C.③④ D.①③解析:PCR的原理是DNA半保留復制,即將雙鏈DNA之間的氫鍵打開,變成單鏈DNA,作為反應的模板,②須要;逆轉(zhuǎn)錄則是以目的基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下,先形成互補的單鏈DNA,再合成雙鏈DNA,③須要;①④則均不須要模板。答案:B3.(2024·東莞)PCR是一項體外擴增DNA的技術,需在反應溶液中添加模板、原料、酶等物質(zhì),通過加熱(90℃以上)使模板DNA解旋,冷卻后在肯定溫度(72℃左右)下利用DNA聚合酶合成子代脫氧核苷酸鏈,如此循環(huán)往復,可使特定DNA片段以指數(shù)形式擴增。與體內(nèi)DNA復制相比,有關PCR技術敘述錯誤的是 ()A.以DNA分子的一條鏈作為模板B.添加的DNA聚合酶熱穩(wěn)定性較高C.反應溶液中無須額外添加解旋酶D.新合成的DNA分子會作為復制模板解析:PCR的原理是DNA復制,以DNA分子的兩條鏈分別作為模板。答案:A4.(2024·佛山)實時熒光RT-PCR技術可快速檢測新型冠狀病毒的核酸,為疫情防控供應了有力保障。檢測原理如下圖所示,探針是含熒光基團并有特定序列的DNA單鏈。下列說法錯誤的是 ()病毒RNA單鏈DNA雜交DNADNA(發(fā)出熒光)A.逆轉(zhuǎn)錄和雜交DNA擴增所需的原料相同B.逆轉(zhuǎn)錄、擴增和分子雜交中堿基配對狀況相同C.病毒RNA的遺傳信息通過逆轉(zhuǎn)錄傳遞給單鏈DNAD.逆轉(zhuǎn)錄和雜交DNA擴增所需酶種類不同解析:逆轉(zhuǎn)錄和雜交DNA擴增的產(chǎn)物都是DNA,故所需的原料都是脫氧核苷酸;逆轉(zhuǎn)錄堿基配對原則是U—A、A—T、C—G、G—C,擴增和分子雜交中堿基配對原則是T—A、A—T、C—G、G—C;病毒RNA的遺傳信息傳遞給單鏈DNA,該過程叫逆轉(zhuǎn)錄;逆轉(zhuǎn)錄須要逆轉(zhuǎn)錄酶,雜交DNA擴增所需酶是DNA聚合酶。答案:B5.將目的基因?qū)氪竽c桿菌細胞和小鼠受精卵,常用的方法分別是 ()A.顯微注射,農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法B.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,花粉管通道法C.Ca2+轉(zhuǎn)化法,顯微注射D.基因槍法,顯微注射解析:大腸桿菌作為受體細胞,一般用Ca2+處理,使其處于一種能汲取四周環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài);對于動物細胞來說,常用的方法是顯微注射。答案:C6.下圖為基因工程的部分過程示意圖,甲~丁代表各不同階段參加的成分。下列敘述正確的是 ()A.甲可以是細菌的質(zhì)粒B.乙是某種激素分子C.丙可以是植物的RNA分子D.丁為抗體分子解析:甲、乙、丙、丁可分別表示質(zhì)粒、限制酶、目的基因、DNA連接酶。答案:A7.(2024·廣東)下列有關人胰島素基因表達載體的敘述,正確的是 ()A.表達載體中的胰島素基因可通過人肝細胞mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得B.表達載體的復制和胰島素基因的表達均啟動于復制原(起)點C.借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細胞篩選出來D.啟動子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用解析:人肝細胞中胰島素基因不表達,因而不存在胰島素mRNA;復制原點是基因表達載體復制的起點,而胰島素基因表達的起點是啟動子;借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細胞篩選出來;啟動子與RNA聚合酶結(jié)合啟動轉(zhuǎn)錄過程,終止密碼子是翻譯的終止信號。答案:C8.下列技術依據(jù)堿基互補配對原理的是()①檢測轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA③檢測目的基因是否翻譯產(chǎn)生蛋白質(zhì)④通過視察害蟲吃棉葉是否死亡推斷棉花是否被給予了抗蟲特性A.①②③④ B.①②C.①②④ D.①②③解析:檢測目的基因是否翻譯產(chǎn)生蛋白質(zhì)采納抗原—抗體雜交,③不符合題意;通過用棉葉飼喂害蟲推斷棉花是否被給予了抗蟲特性,屬于個體水平的檢測,④不符合題意。答案:B9.利用外源基因在受體細胞中表達,可生產(chǎn)人類所須要的產(chǎn)品。下列能說明目的基因完成了在受體細胞中表達的是 ()A.棉花二倍體細胞中檢測到細菌的抗蟲基因B.大腸桿菌中檢測到人胰島素基因及其mRNAC.山羊乳腺細胞中檢測到人生長激素DNA序列D.酵母菌細胞中提取到人干擾素蛋白解析:基因表達的產(chǎn)物是蛋白質(zhì),因此,只有在受體細胞中檢測或提取到了相應蛋白質(zhì)才能證明目的基因在受體細胞中完成了表達。答案:D10.(2024·佛山)新型冠狀病毒由RNA與蛋白質(zhì)等成分構(gòu)成。在新冠肺炎疫情防控中,通過核酸檢測可快速精確地發(fā)覺人群中的傳染源,所用的檢測原理或方法是 ()A.核酸易與一些堿性染料結(jié)合產(chǎn)生顏色反應,即可確定有新型冠狀病毒B.用水解法處理采樣,因變量是測定能否產(chǎn)生基本單位核糖核苷酸C.用同位素標記新型冠狀病毒的RNA或蛋白質(zhì),能鑒別遺傳物質(zhì)D.用有特異性堿基序列的熒光探針進行檢測,測定熒光產(chǎn)生的狀況解析:堿性染料可以鑒別核酸,但不能精確推斷是否為新型冠狀病毒的核酸;即使測定出水解產(chǎn)物中含有核糖核苷酸,也只能說明其含有RNA,但不能確定是否為新型冠狀病毒的RNA;用同位素標記新型冠狀病毒的RNA或蛋白質(zhì),可以確定新型冠狀病毒的遺傳物質(zhì),但不能在人群中確定個體是否被新型冠狀病毒感染;不同核酸的堿基排列依次不同,因此用有特異性堿基序列的熒光探針進行檢測,利用堿基互補配對的原則測定熒光產(chǎn)生的狀況,可以用于檢測人群中的傳染源。答案:D11.下圖為某種質(zhì)粒載體的簡圖,小箭頭所指部位分別為限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的切割位點,AmpR為氨芐青霉素抗性基因,TetR為四環(huán)素抗性基因,P為啟動子,T為終止子,ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在內(nèi)的多種酶的切割位點。請分析回答下列問題。(1)將含有目的基因的DNA片段與質(zhì)粒分別用EcoRⅠ切割,產(chǎn)物用DNA連接酶進行連接后,其中由兩個DNA片段連接形成的產(chǎn)物有、、三種。

(2)在上述試驗中,為了防止目的基因和質(zhì)粒用限制酶切割后產(chǎn)生的末端發(fā)生隨意連接,應選用的限制酶是。

解析:(1)將含有目的基因的DNA片段與質(zhì)粒分別用EcoRⅠ切割后,所產(chǎn)生的黏性末端相同,用DNA連接酶處理后,不同的片段隨機結(jié)合,其中由兩個DNA片段連接可形成三種不同的連接物,即目的基因—質(zhì)粒連接物、質(zhì)?！|(zhì)粒連接物、目的基因—目的基因連接物。(2)由圖示和題干信息可知,同時運用EcoRⅠ和BamHⅠ可有效防止末端隨意連接的發(fā)生。答案:(1)目的基因—質(zhì)粒連接物質(zhì)粒—質(zhì)粒連接物目的基因—目的基因連接物(2)EcoRⅠ和BamHⅠ[拓展應用]12.農(nóng)桿菌中含有一個大型的Ti質(zhì)粒(如下圖所示),在侵染植物細胞的過程中,其中的T-DNA片段可以轉(zhuǎn)入植物的基因組。若想用基因工程技術通過農(nóng)桿菌向某種植物中導入抗旱基因,下列分析錯誤的是 ()A.若用Ti質(zhì)粒作為抗旱基因的載體,目的基因的插入位置應當在T-DNA片段內(nèi),且要保證復制原點和用于轉(zhuǎn)移T-DNA的基因片段不被破壞B.將重組Ti質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌中時,可以用Ca2+處理農(nóng)桿菌C.轉(zhuǎn)基因抗旱植物培育是否勝利,最簡潔的檢測方法是看該植物是否具有抗旱性狀D.若能夠在植物細胞中檢測到抗旱基因,則說明該基因工程項目獲得勝利解析:若用Ti質(zhì)粒作為抗旱基因的載體,目的基因的插入位置應當在T-DNA片段內(nèi),且要保證復制原點和用于轉(zhuǎn)移T-DNA的基因片段不被破壞,否則不會勝利,A項正確;將重組Ti質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌中時,可以用Ca2+處理農(nóng)桿菌,使農(nóng)桿菌處于易于汲取四周DNA分子的狀態(tài),便于完成轉(zhuǎn)化,B項正確;轉(zhuǎn)基因抗旱植物培育是否勝利,最簡潔的檢測方法是看該植物是否具有抗旱性狀,C項正確;能夠在植物細胞中檢測到抗旱基因,并能勝利表達出抗旱性狀,則說明基因工程項目獲得勝利,D項錯誤。答案:D13.PCR一般要經(jīng)過30多次循環(huán),從其次次循環(huán)起先,上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參加反應,由引物Ⅰ延長而成的DNA單鏈作模板時將 ()A.仍與引物Ⅰ結(jié)合進行DNA子鏈的延長B.與引物Ⅱ結(jié)合進行DNA子鏈的延長C.同時與引物Ⅰ和引物Ⅱ結(jié)合進行子鏈的延長D.無須與引物結(jié)合,在酶的作用下從頭合成子鏈解析:當由引物Ⅰ延長而成的DNA單鏈作模板時,此單鏈引物端為5'端,因此與它互補的子鏈應從另一端起先合成,即與引物Ⅱ結(jié)合延長DNA子鏈。答案:B14.某線性DNA分子含有5000個堿基對(bp),先用限制酶a切割,再把得到的產(chǎn)物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如下表。限制酶a、b的識別序列和切割位點如下圖所示。下列有關說法正確的是 ()酶a切割產(chǎn)物(bp)酶b再次切割產(chǎn)物(bp)2100,1400,1000,5001900,200,800,600,1000,500A.該DNA分子中,酶a與酶b分別識別了3個和2個序列B.酶a與酶b切出的黏性末端不能相互連接C.酶a與酶b切斷的化學鍵不相同D.若酶a切割與該DNA序列相同的質(zhì)粒,得到的切割產(chǎn)物為4種解析:酶a切完有4個不同的片段,識別了3個序列,而酶b只切了2100和1400兩個片段,則識別了2個序列;酶a與酶b切出的黏性末端相同,用DNA連接酶可以將它們連接起來;限制酶切割的化學鍵都是磷酸二酯鍵;質(zhì)粒是環(huán)狀DNA分子,與線性DNA相同堿基序列的質(zhì)粒含有3個酶a的切割位點,則其被酶a切割后可以得到3種切割產(chǎn)物。答案:A15.(2024·東莞)下圖是用基因工程技術培育抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉花過程,有關該過程敘述錯誤的是 ()A.抗蟲基因的表達產(chǎn)物為蛋白質(zhì)B.抗蟲基因的插入引起的變異屬于基因重組C.用Ca2+處理農(nóng)桿菌利于重組DNA分子的導入D.通過Ti質(zhì)粒上的抗性基因篩選試管苗解析:抗蟲基因的表達包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個過程,產(chǎn)物是蛋白質(zhì);抗蟲基因被插入到受體細胞的染色體DNA中,該過程屬于基因重組;用Ca2+處理農(nóng)桿菌會使農(nóng)桿菌處于簡潔汲取外來DNA分子的狀態(tài),因此利于重組DNA分子的導入;通過Ti質(zhì)粒上的抗性基因篩選含有目的基因的受體細胞,而試管苗的篩選須要用個體生物學鑒定的方法,即用蟲食用棉花,視察其存活狀況,來鑒定棉花幼苗是否具有抗蟲特性。答案:D16.(2024·海南)為獲得某轉(zhuǎn)基因生物,下圖為基因工程操作步驟示意圖。請回答下列問題。(1)從基因文庫中提取的目的基因通過技術進行擴增。與細胞內(nèi)同類酶相比,該技術所利用的DNA聚合酶所具有的特點是。

(2)在過程①中,需酶將已切開的載體DNA與目的基因結(jié)合成基因表達載體。載體DNA上必須要有標記基因,標記基因的作用是

。過程②中若選用的受體細胞為大腸桿菌,一般需用Ca2+進行處理,其目的是

。

(3)若將病毒外殼蛋白基因?qū)虢湍妇虿溉閯游锛毎?使之表達出病毒外殼蛋白,經(jīng)純化后而制得的疫苗可用于生產(chǎn)基因工程疫苗,接種基因工程疫苗比接種滅活減毒的病毒疫苗更平安,從疫苗的結(jié)構(gòu)組成來看,其緣由是

。

解析:(1)通常運用PCR技術對目的基因進行擴增。在PCR技術中應用的關鍵酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶,其特點是耐高溫。(2)DNA連接酶能將已切開的載體DNA與目的基因連接起來形成磷酸二酯鍵;標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來;由于未處理的大腸桿菌汲取四周環(huán)境中DNA分子的實力較弱,所以常用Ca2+處理大腸桿菌,使大腸桿菌處于簡潔汲取四周環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。(3)基因工程疫苗不含有遺傳物質(zhì),但可以引發(fā)機體發(fā)生特異性免疫反應形成抗體和記憶細胞,由于其不增殖和感染人體,所以比滅活疫苗平安性更高。答案:(1)PCR耐高溫(2)DNA連接鑒別受體細胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細胞篩選出來使大腸桿菌處于簡潔汲取四周環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)(3)基因工程疫苗僅具有病毒外殼蛋白,不具有遺傳物質(zhì),不會出現(xiàn)病毒增殖和感染探究實踐課:DNA片段的擴增及電泳鑒定一、試驗目的1.了解PCR和電泳鑒定的基本原理。2.嘗試進行PCR的基本操作并用電泳鑒定PCR的產(chǎn)物。二、試驗原理1.解旋。PCR利用了DNA的熱變性原理,通過調(diào)整溫度來限制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。2.鑒定。(1)DNA分子具有可解離的基團,在肯定的pH下,這些基團可以帶上正電荷或負電荷。在電場的作用下,這些帶電分子會向著與它所帶電荷相反的電極移動(即電泳)。(2)PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。(3)凝膠中的DNA分子通過染色,可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。三、試驗材料PCR儀、微量離心管、微量移液器、一次性吸液槍頭、電泳裝置、4種脫氧核苷酸的等量混合液、2種引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA、擴增緩沖液、無菌水、電泳緩沖液、凝膠載樣緩沖液、瓊脂糖和核酸染料等。四、探究過程1.DNA片段的擴增。打算:用微量移液器依據(jù)PCR反應體系的配方或PCR試劑盒的說明書,在微量離心管中依次加入各組分離心:待全部的組分都加入后,蓋嚴離心管的蓋子。將微量離心管放入離心機里,離心約10s,使反應液集中在管的底部擴增:設置好PCR儀的循環(huán)程序,將裝有反應液的微量離心管放入PCR儀中進行反應2.電泳鑒定。配制瓊脂糖溶液:依據(jù)待分別DNA片段的大小,用電泳緩沖液配制瓊脂糖溶液,一般配制質(zhì)量分數(shù)為0.8%~1.2%的瓊脂糖溶液,加熱至瓊脂糖熔化。稍冷卻后,加入適量的核酸染料混勻制備瓊脂糖凝膠:將溫熱的瓊脂糖溶液快速倒入模具,并插入合適大小的梳子,以形成加樣孔填充電泳槽:待凝膠溶液完全凝固,當心拔出梳子,取出凝膠放入電泳槽內(nèi),并將電泳緩沖液加入電泳槽中,電泳緩沖液沒過凝膠1mm為宜加PCR產(chǎn)物:將擴增得到的PCR產(chǎn)物與凝膠載樣緩沖液(內(nèi)含指示劑)混合,再用微量移液器將混合液緩慢注入凝膠的加樣孔內(nèi)。留一個加樣孔加入指示分子大小的標準參照物電泳:接通電源,依據(jù)電泳槽陽極至陰極之間的距離來設定電壓,一般為1~5V/cm,待指示劑前沿遷移接近凝膠邊緣時,停止電泳結(jié)果分析:取出凝膠置于紫外燈下視察和照相五、試驗操作1.操作提示。(1)為避開外源DNA等因素的污染,PCR試驗中運用的微量離心管、槍頭和蒸餾水等在運用前必需進行高壓滅菌處理。(2)試驗用到的酶和緩沖液應分裝成小份,并在-20℃儲存。運用前,將所需試劑從冰箱中拿出,放在冰塊上緩慢溶化。(3)在向微量離心管中添加反應組分時,每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭都必需更換。(4)待凝膠溶液完全凝固(一般須要20~30min)才能拔出梳子,方向肯定要垂直向上,不要弄壞加樣孔。(5)凝膠放入電泳槽后,將電泳緩沖液加入電泳槽時應確保加樣孔內(nèi)充溢電泳緩沖液且沒有氣泡,電泳緩沖液沒過凝膠1mm為宜。(6)本試驗部分試劑對人體有害,操作時肯定要穿好試驗服、戴好口罩和手套。2.試驗報告。試驗時間某年某月某日。試驗地點試驗室。試驗環(huán)境常溫、常壓等。試驗結(jié)果試驗記錄試驗結(jié)論PCR后,將擴增片段進行瓊脂糖凝膠電泳鑒定,顯示片段大約為××bp,與預期大小一樣,表明DNA片段擴增勝利。試驗反思勝利之處微量移液器運用規(guī)范,PCR反應體系配比合理。不足之處個別加樣孔內(nèi)有微量氣泡,導致加樣時有微量樣品飄出,但不影響試驗結(jié)果。3.試驗拓展。你進行電泳鑒定的結(jié)果是幾條條帶?假如不止一條條帶,請分析產(chǎn)生這個結(jié)果的可能緣由。提示:假如擴增結(jié)果不止一條條帶,可能的緣由有引物設計不合理,它們與非目的序列有同源性或簡潔聚合形成二聚體;退火溫度過低;DNA聚合酶的質(zhì)量不好等。試驗評價1.PCR限制DNA的解聚與結(jié)合是利用了DNA的 ()A.特異性B.穩(wěn)定性C.熱變性 D.多樣性解析:DNA分子在超過90℃的溫度條件下變性,雙鏈解開成單鏈;當溫度緩慢降低時,又能重新結(jié)合形成雙鏈。因此,PCR限制DNA的解聚與結(jié)合是利用了DNA的熱變性。答案:C2.運用PCR儀的詳細試驗操作依次應為 ()①設計好PCR儀的循環(huán)程序②按配方打算好各組分③用微量移液器向微量離心管中依次加入各組分④進行PCR反應⑤離心,使反應液集中在離心管底部A.②③⑤④① B.①⑤③②④C.②③⑤①④ D.④②⑤③①解析:PCR反應的操作步驟一般分為打算(包括將配方所需各組分放于試驗臺上)→移液→混合→離心→反應。因PCR儀是一種能自動限制溫度的儀器,設計好循環(huán)程序就可以進行反應了。答案:C3.下圖表示PCR擴增的產(chǎn)物,則它是哪次循環(huán)的產(chǎn)物? ()A.第一次循環(huán) B.其次次循環(huán)C.第三次循環(huán) D.第四次循環(huán)解析:在PCR反應中以引物為標記,第一次循環(huán)時,以加入的DNA為模板,兩條DNA鏈可分別由引物Ⅰ和引物Ⅱ與其結(jié)合,并在DNA聚合酶的作用下延長,所以,形成的每個子代DNA中只有一種引物。從其次次循環(huán)起先,第一次產(chǎn)生的DNA分子又可作為模板參加反應,形成的DNA分子中,只有兩個僅一端含有引物,其他DNA分子兩端都含有引物。答案:A4.下圖為DNA變性和復性示意圖,下列相關說法正確的是 ()A.向左的過程為加熱(90~100℃)變性的過程B.向右的過程是DNA雙鏈快速制冷復性C.變性與生物體內(nèi)的解旋過程的實質(zhì)相同D.圖中左側(cè)DNA片段共有4個游離的磷酸基團、4個3'端解析:向右的過程為加熱(90~100℃)變性的過程,即高溫變性,使DNA解旋,A項錯誤;向左的過程是DNA雙鏈緩慢降溫復性,B項錯誤;DNA體外的變性和體內(nèi)的解旋,其實質(zhì)是相同的,都是使氫鍵斷裂,DNA雙螺旋打開,只是體內(nèi)解旋須要解旋酶,體外變性須要高溫條件,C項正確;由于DNA雙鏈是反向平行的,所以圖中DNA雙鏈片段共有2個游離的磷酸基團、2個3'端,D項錯誤。答案:C5.在PCR擴增DNA的試驗中,依據(jù)設計,一分子DNA經(jīng)30次循環(huán)后,應得到約230個DNA分子,但結(jié)果只有約210個DNA分子。出現(xiàn)該現(xiàn)象的緣由可能是 ()①循環(huán)次數(shù)不夠②TaqDNA聚合酶活力不夠或其活性受到抑制③引物不能與親鏈結(jié)合④系統(tǒng)設計欠妥A.①②③ B.①②④C.①③④ D.②③④解析:①循環(huán)次數(shù)過少,會導致產(chǎn)物的量比預期的少;②TaqDNA聚合酶活力不夠或其活性受到抑制,會導致擴增效率低,得到的產(chǎn)物比預期的少;③假如引物設計不合理,則無法進行擴增;④PCR儀的系統(tǒng)設置不妥,將達不到預期的效果。答案:B6.下列有關PCR試驗操作的敘述,錯誤的是 ()A.在向微量離心管中添加各種試劑時,只須要一個槍頭B.離心管的蓋子肯定要蓋嚴C.用手指輕彈離心管側(cè)壁D.離心的目的是使反應液集中在離心管的底部解析:在向微量離心管中添加反應組分時,每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭都必需更換,以確保試驗的精確性;離心管的蓋子需蓋嚴,目的是防止試驗中外源DNA的污染;用手指輕彈離心管側(cè)壁,目的是使反應液混合勻稱;離心的目的是使反應液集中在離心管的底部,提高反應效果。答案:A7.若用XhoⅠ和SalⅠ兩種限制性內(nèi)切核酸酶分別處理同一DNA片段,酶切位點及酶切產(chǎn)物分別結(jié)果如圖。下列敘述錯誤的是 ()A.圖中兩種酶識別的核苷酸序列不同B.圖中酶切產(chǎn)物可用于構(gòu)建重組DNAC.泳道①中是用SalⅠ處理得到的酶切產(chǎn)物D.圖中被酶切的DNA片段是單鏈DNA解析:限制性內(nèi)切核酸酶可以識別特定的脫氧核苷酸序列,不同的酶能識別不同的核苷酸序列;同種限制酶分別切割載體和目的基因,再用DNA連接酶進行連接,目的基因和運載體結(jié)合,構(gòu)成重組DNA;SalⅠ將DNA片段切成4段,XhoⅠ將DNA片段切成3段,依據(jù)電泳結(jié)果可知泳道①為SalⅠ,泳道②為XhoⅠ;限制酶切割雙鏈DNA。答案:D8.(2024·天津)下列有關電泳的敘述,錯誤的是 ()A.電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程B.待測樣品中DNA分子的大小和構(gòu)象、凝膠的濃度等都會影響DNA在電泳中的遷移速率C.進行電泳時,帶電粒子會向著與其所帶電荷相同的電極移動D.PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定解析:電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程;待測樣品中各種分子的構(gòu)象、大小及帶電性質(zhì)的差異等都會影響其在電泳中的遷移速率;由于同性相斥、異性相吸,帶電粒子會向著與其所帶電荷相反的電極移動;PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。答案:C9.(2024·遼寧)染色質(zhì)是由肯定長度的核小體為基本單位構(gòu)成的。將大鼠肝細胞中分別出的染色質(zhì)用非特異性核酸酶水解后去除染色質(zhì)蛋白,對得到的DNA片段進行凝膠電泳,結(jié)果如圖所示。若先將染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)去掉后用同樣的非特異性核酸酶處理,則得到隨機長度的DNA片段。據(jù)此分析,下列有關敘述錯誤的是 ()A.凝膠中的DNA分子通過染色,可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來B.染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)可能對DNA具有愛護作用C.構(gòu)成核小體的基本單位是脫氧核糖核苷酸D.在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關解析:凝膠中的DNA分子經(jīng)染色后,對波長為300nm的紫外光汲取性強,可在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來;由圖可知,染色質(zhì)用核酸酶處理后,得到的是部分水解的染色質(zhì),但若先將染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)去掉后用核酸酶處理,則得到隨機長度的DNA片段,說明染色質(zhì)中的蛋白質(zhì)可能對DNA具有愛護作用;染色質(zhì)是由肯定長度的核小體為基本單位構(gòu)成的,核小體的組成成分是蛋白質(zhì)和DNA,其基本單位是脫氧核糖核苷酸和氨基酸;在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關。答案:C10.現(xiàn)有一長度為3000堿基對(bp)的線性DNA分子,用限制性內(nèi)切核酸酶酶切后,進行凝膠電泳,使降解產(chǎn)物分開。用酶H單獨酶切,結(jié)果如圖1。用酶B單獨酶切,結(jié)果如圖2。用酶H和酶B同時酶切,結(jié)果如圖3。該DNA分子的結(jié)構(gòu)及其酶切圖譜是 ()A.B.C.D.解析:據(jù)圖1、圖2分析,該線性DNA分子上有一個酶H的切割位點