福建省東山縣第二中學(xué)2025屆高三（最后沖刺）生物試卷含解析

福建省東山縣第二中學(xué)2025屆高三（最后沖刺）生物試卷注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號碼填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．黃曲霉毒素是毒性極強(qiáng)的致癌物質(zhì)，有關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，它能引起細(xì)胞中的核糖體不斷從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上脫落下來，這一結(jié)果直接導(dǎo)致（）A．核仁被破壞 B．染色體被破壞C．細(xì)胞膜被破壞 D．蛋白質(zhì)合成受到影響2．某種植物（2n=40）為XY型性別決定的生物，等位基因B和b位于X染色體上，分別控制闊葉（B）和細(xì)葉（b）。用闊葉雄株和雜合闊葉雌株進(jìn)行雜交得到子一代，再讓子一代相互雜交得到子二代，子二代的表現(xiàn)型及比例為：闊葉雌株：闊葉雄株：細(xì)葉雄株=2：3：1。根據(jù)上述雜交實驗結(jié)果推斷，下列敘述錯誤的是（）A．子二代中出現(xiàn)上述比例的原因可能是含有Xb的花粉不育B．子二代相互雜交得到的子三代中細(xì)葉植株所占比例為1/14C．若對該種植物基因組測序應(yīng)測定21條染色體上的堿基對序列D．該種植物與葉型有關(guān)的基因型共有5種3．下列關(guān)于“噬菌體侵染細(xì)菌”實驗的敘述，錯誤的是（）A．需分別用35S、32P對不同噬菌體進(jìn)行標(biāo)記B．?dāng)嚢枘康氖鞘辜?xì)菌外的噬菌體與細(xì)菌分離C．用35S標(biāo)記的噬菌體進(jìn)行實驗，保溫時間過長會使沉淀物中出現(xiàn)較強(qiáng)的放射性D．該實驗?zāi)茏C明DNA是噬菌體的遺傳物質(zhì)，但不能直接證明蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)4．土壤微生物是反映土壤質(zhì)量狀況的重要指標(biāo)，常以磷脂脂肪酸總量來表示?？蒲腥藛T開展芒萁（蕨類植物）對馬尾松林植被恢復(fù)過程中土壤微生物群落影響的研究，測定結(jié)果如下圖。以下推測或結(jié)論不成立的是（）A．土壤微生物細(xì)胞中磷脂脂肪酸的含量比較穩(wěn)定B．測定中隨機(jī)設(shè)置取樣地且同一類型樣地要重復(fù)取樣C．在植被恢復(fù)初期，芒萁對土壤微生物的影響較小D．隨著植被的恢復(fù)，芒萁對土壤微生物的影響變?nèi)?．如果給人體注射滅活的甲型H1N1流感病毒，可預(yù)防甲型H1N1流感，那么滅活病毒在體內(nèi)引起的免疫反應(yīng)，正確的是A．B細(xì)胞接受刺激后形成效應(yīng)B細(xì)胞，能使靶細(xì)胞裂解B．吞噬細(xì)胞接受刺激后形成效應(yīng)細(xì)胞，能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體C．T細(xì)胞接受刺激后形成效應(yīng)T細(xì)胞，能釋放淋巴因子D．淋巴細(xì)胞吞噬該病毒后形成記憶細(xì)胞，能釋放白細(xì)胞介素6．下列關(guān)于生命活動調(diào)節(jié)的敘述，正確的有：①嚴(yán)重腹瀉后只需補(bǔ)充水分就能維持細(xì)胞外液正常的滲透壓②刺激支配肌肉的神經(jīng)，引起該肌肉收縮的過程屬于非條件反射③垂體功能受損的幼犬會出現(xiàn)抗寒能力減弱等現(xiàn)象④突觸后膜上的受體與相應(yīng)神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合后,就會引起突觸后膜的電位變化為外負(fù)內(nèi)正⑤在寒冷環(huán)境中能促進(jìn)人體代謝產(chǎn)熱的激素主要是胰島素和腎上腺素⑥甲亢病人體內(nèi)促甲狀腺激素的含量低于正常值⑦細(xì)胞免疫的存在使得正常機(jī)體體內(nèi)無細(xì)胞癌變⑧糖尿病患者體內(nèi)細(xì)胞吸收利用血糖的速率加快A．一項 B．兩項C．三項 D．四項二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每毫升鮮奶產(chǎn)品中大腸桿菌數(shù)不得超過個，鮮奶中大腸桿菌的數(shù)目可用濾膜法來測定，流程為：用濾膜過濾1ml待測牛奶→牛奶中的細(xì)菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）上培養(yǎng)→統(tǒng)計菌落數(shù)目。（1）制備培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中能夠同時提供氮源和碳源的是_____________（填“蛋白胨”“乳糖”或“”），從培養(yǎng)基功能上劃分，EMB培養(yǎng)基屬于_____________。（2）為檢測該培養(yǎng)基滅菌是否徹底，對于該培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_____________。（3）培養(yǎng)與統(tǒng)計：在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間后，應(yīng)選擇顏色為_____________的菌落數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計，結(jié)果如下：培養(yǎng)時間12h24h平板對照組123對照組123大腸桿菌菌落數(shù)（個）01321211450132121145其他細(xì)菌菌落數(shù)（個）112253222244112253222244（4）培養(yǎng)12h和24h的大腸桿菌菌落特征有何差異？_____________。（5）根據(jù)表中的數(shù)據(jù)不能判斷該鮮奶樣品中的大腸桿菌數(shù)是否超標(biāo)，請說明理由：_____________。8．（10分）我國科學(xué)家從長白豬胎兒皮膚中分離出成纖維細(xì)胞，通過體外培養(yǎng)，然后將水母熒光蛋白基因?qū)氤衫w維細(xì)胞，并培育出轉(zhuǎn)基因克隆豬。請回答下列問題。（1）科學(xué)家依據(jù)_______原理，應(yīng)用PCR技術(shù)______水母熒光蛋白基因。（2）為確保水母熒光蛋白基因在成纖維細(xì)胞中表達(dá)，須在水母熒光蛋白基因的______添加啟動子。（3）體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時，會出現(xiàn)接觸_________________現(xiàn)象，為解決該問題，可用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理，然后繼續(xù)_______________。（4）科學(xué)家將水母熒光蛋白基因?qū)氤衫w維細(xì)胞，但其不能直接發(fā)育成豬。請以轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞為材料，設(shè)計培育轉(zhuǎn)基因克隆豬的一種簡要思路___________________________________________________。9．（10分）如圖是利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡化流程。回答下列問題：（1）進(jìn)行過程I的前提是要根據(jù)干擾素基因的____________設(shè)計引物。（2）過程I需加熱至90~95℃，然后冷卻至55~60℃，如此操作的目的是____________。據(jù)圖可知欲獲得干擾素基因，至少需要復(fù)制____________次。（3）圖中A的名稱是___________，A上與RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位稱為___________。（4）為檢測干擾素基因在酵母菌細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)錄，可用_____________作探針，與從細(xì)胞中提取的____________進(jìn)行分子雜交。10．（10分）為了研究手機(jī)屏幕上的細(xì)菌數(shù)量和種類，有人做了下圖所示的實驗?；卮鹣铝袉栴}：（1）在培養(yǎng)基的制備過程中，培養(yǎng)基中必須含有滿足微生物生長、繁殖所需的水、無機(jī)鹽、碳源和________等成分；在倒平板時，需待培養(yǎng)基冷卻至51℃左右時，在__________附近倒平板，待平板冷卻后需倒置，其原因是_______________________________________。（2）圖中采取的接種方法是________________，實驗結(jié)束后，所用的培養(yǎng)基必須經(jīng)過滅菌處理后才能倒掉的原因是_______________。（3）若按圖中方法取樣，測定某手機(jī)屏幕上的細(xì)菌數(shù)量，制成11mL菌懸液中，在3個平板上分別接入1．1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為38、41和42，則該手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)為__________個/cm2。該方法計數(shù)的結(jié)果往往比實際結(jié)果偏__________（填“高”或“低”），原因是_____________________________________。11．（15分）果蠅（2N=8）卷翅基因A是2號常染色體上的顯性基因，其等位基因a控制野生型翅型。（1）摩爾根用果蠅做實驗材料證明了基因位于染色體上，其研究方法是__________，因為果蠅有_________優(yōu)點因此常用來作為遺傳學(xué)研究的材料（至少答2點）。（2）卷翅基因A純合時致死，研究者發(fā)現(xiàn)2號染色體上的另一純合致死基因B，從而得到“平衡致死系”果蠅，其基因與染色體關(guān)系如圖。該品系的雌雄果蠅互交（不考慮交叉互換和基因突變），其子代中雜合子的概率是________。子代與親代相比，子代A基因的頻率________（上升/下降/不變）。（3）欲利用“平衡致死系”果蠅來檢測野生型果蠅的一條2號染色體上是否出現(xiàn)決定新性狀的隱性突變基因d，DD和Dd不影響翅型，dd決定新性狀翅型?？勺鱿铝须s交實驗（不考慮雜交過程中的交叉互換及新的基因突變）：實驗步驟：預(yù)期實驗結(jié)果并得出結(jié)論：若F2代的表現(xiàn)型及比例為_________，說明待檢野生型果蠅的2號染色體有決定新性狀的隱性突變基因。若F2代的表現(xiàn)型及比例為_________，說明待檢野生型果蠅的2號染色體沒有決定新性狀的隱性突變基因。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成和加工，以及脂質(zhì)合成的“車間”。核糖體有的附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，有的游離分布在細(xì)胞質(zhì)中，是“生產(chǎn)蛋白質(zhì)的機(jī)器”。分泌蛋白最初是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體中由氨基酸形成肽鏈，肽鏈進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行初步的加工后，進(jìn)入高爾基體經(jīng)過進(jìn)一步的加工形成分泌小泡與細(xì)胞膜融合，分泌到細(xì)胞外?！驹斀狻扛鶕?jù)題意分析可知：黃曲霉毒素能引起細(xì)胞中的核糖體不斷從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上脫落下來，由于粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上附著的核糖體不斷從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上脫落下來，核糖體合成的多肽不能進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)行初加工，從而阻斷了分泌蛋白的合成，這一結(jié)果直接導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成受到影響。綜上分析，D正確，ABC錯誤。

故選D。2、D【解析】

根據(jù)題意分析可知：用闊葉雄株（XBY）與雜合闊葉雌株（XBXb）雜交得到子一代，子一代的基因型有XBXB、XBXb、XBY和XbY，子二代沒有出現(xiàn)細(xì)葉雌株（XbXb），但有細(xì)葉雄株（XbY），可能是含有Xb的花粉不育，使子二代中闊葉雌株（XBXB、XBXb）：闊葉雄株（XBY）：細(xì)葉雄株（XbY）=（3/4×1/3+1/4×1/3）：（3/4×2/3）：（1/4×2/3）=2：3：1，據(jù)此答題?！驹斀狻緼、據(jù)上分析可知，子二代中出現(xiàn)上述比例的原因可能是含有Xb的花粉不育，A正確；B、據(jù)上分析可知，子二代中雌：雄=1：2，雌配子中XB：Xb=3：1，雄配子中XB：Xb（不育）：Y=3：1：4，故子三代中細(xì)葉植株（XbY）所占比例=1/2×1/4×4/7=1/14，B正確。C、若對該種植物基因組測序應(yīng)測定19條常染色體+X+Y=21條染色體上的堿基對序列，C正確；D、因含有Xb的花粉不育，故不存在XbXb基因型，該種植物與葉型有關(guān)的基因型有XBXB、XBXb、XBY和XbY共4種，D錯誤。故選D。3、C【解析】

噬菌體侵染細(xì)菌的過程：吸附→注入（注入噬菌體的DNA）→合成（控制者：噬菌體的DNA；原料：細(xì)菌的化學(xué)成分）→組裝→釋放。噬菌體侵染細(xì)菌的實驗步驟：分別用35S或32P標(biāo)記噬菌體→噬菌體與大腸桿菌混合培養(yǎng)→噬菌體侵染未被標(biāo)記的細(xì)菌→在攪拌器中攪拌，然后離心，檢測上清液和沉淀物中的放射性物質(zhì)?！驹斀狻緼、分別用35S、32P對不同噬菌體進(jìn)行標(biāo)記，其中35S標(biāo)記的是噬菌體的蛋白質(zhì)，32P標(biāo)記的是噬菌體的DNA，A正確；B、攪拌的目的是使細(xì)菌外的噬菌體蛋白質(zhì)外殼與細(xì)菌分離，B正確；C、35S標(biāo)記的是噬菌體的蛋白質(zhì)外殼，經(jīng)過攪拌離心后，蛋白質(zhì)外殼分布在上清液中，因此用35S標(biāo)記的噬菌體進(jìn)行實驗，保溫時間過長不會影響沉淀物中放射性的強(qiáng)弱，C錯誤；D、噬菌體侵染細(xì)菌時只有DNA進(jìn)入細(xì)菌，蛋白質(zhì)外殼留在細(xì)菌外，因此該實驗?zāi)茏C明DNA是遺傳物質(zhì)，不能直接證明蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)，D正確。故選C?！军c睛】本題考查噬菌體侵染細(xì)菌實驗，對于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實驗的原理、實驗采用的方法、實驗現(xiàn)象及結(jié)論等，需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中注意積累。4、C【解析】

分析圖示：自變量是恢復(fù)年限，因變量是磷脂脂肪酸總量，隨著恢復(fù)年限增長，磷脂脂肪酸總量含量增加，在植被恢復(fù)的初期芒萁對土壤微生物活體總量的影響較大，而隨著生態(tài)系統(tǒng)逐漸成熟，芒萁覆蓋對土壤微山物總量的影響減弱，有無芒萁覆蓋的差距變小?！驹斀狻緼、土壤微生物細(xì)胞中磷脂脂肪酸的含量比較穩(wěn)定，故土壤微生物總量常以磷脂脂肪酸總量來表示，A正確；B、為排除偶然性影響，測定中隨機(jī)設(shè)置取樣地且同一類型樣地要重復(fù)取樣，B正確；C、在植被恢復(fù)初期，芒萁對土壤微生物的影響較大，C錯誤；D、隨著植被的恢復(fù)，芒萁覆蓋對土壤微山物總量的影響減弱，有無芒萁覆蓋的差距變小，D正確。故選C。5、C【解析】

第三道防線的“作戰(zhàn)部隊”主要是眾多的淋巴細(xì)胞。其中B細(xì)胞主要靠產(chǎn)生“抗體”作戰(zhàn)，這種方式稱為體液免疫；T細(xì)胞主要靠直接接觸靶細(xì)胞“作戰(zhàn)”，這種方式稱為細(xì)胞免疫?！驹斀狻緼、B細(xì)胞受到抗原刺激，產(chǎn)生效應(yīng)B細(xì)胞核記憶細(xì)胞，效應(yīng)B細(xì)胞分泌抗體，不能使靶細(xì)胞裂解，A錯誤；B、吞噬細(xì)胞在特異性免疫中起到攝取、處理和呈遞抗原的作用，B錯誤；C、T細(xì)胞接受刺激后形成效應(yīng)T細(xì)胞，能釋放淋巴因子，C正確；D、吞噬細(xì)胞接受刺激后，攝取處理抗原，使其抗原決定簇暴露出來，呈遞給T細(xì)胞，T細(xì)胞識別抗原后增殖分化形成記憶細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞，D錯誤。故選C。6、B【解析】

嚴(yán)重腹瀉會流失大量水分和無機(jī)鹽，需補(bǔ)充水分和鹽分才能維持細(xì)胞外液正常的滲透壓，①錯誤；刺激支配肌肉的神經(jīng)、引起該肌肉收縮的過程，沒有經(jīng)過完整的反射弧，因此不屬于反射，②錯誤；垂體通過分泌促甲狀腺激素來促進(jìn)甲狀腺激素的合成和分泌，進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞代謝、增加產(chǎn)熱，所以垂體功能受損的幼犬會出現(xiàn)抗寒能力減弱等現(xiàn)象，③正確；突觸后膜上的受體，若與相應(yīng)的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合，則會引起突觸后膜的電位變化為外負(fù)內(nèi)正，若與相應(yīng)的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)結(jié)合，則會使突觸后膜的電位仍然維持外正內(nèi)負(fù)的靜息電位，④錯誤；在寒冷環(huán)境中能促進(jìn)人體代謝產(chǎn)熱的激素主要是甲狀腺激素和腎上腺素，⑤錯誤；甲亢病人體內(nèi)甲狀腺激素的含量高于正常水平，由于甲狀腺激素分泌的分級調(diào)節(jié)中存在著負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，因此甲亢病人體內(nèi)促甲狀腺激素的含量低于正常值，⑥正確；在環(huán)境中的致癌因子影響下，可能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變，因此正常機(jī)體內(nèi)也會存在細(xì)胞癌變，⑦錯誤；糖尿病患者，因胰島B細(xì)胞受損導(dǎo)致體內(nèi)胰島素分泌不足，所以體內(nèi)細(xì)胞吸收利用血糖的速率減慢，⑧錯誤。綜上所述，供選答案組合，B項正確，A、C、D三項均錯誤。【定位】神經(jīng)調(diào)節(jié)、體液調(diào)節(jié)、免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞癌變。二、綜合題：本大題共4小題7、蛋白胨鑒別培養(yǎng)基將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)1~2d黑色培養(yǎng)24h的菌落較大（或培養(yǎng)12h的菌落較?。φ战M有其他細(xì)菌菌落，說明培養(yǎng)基制作不合格或無菌操作存在問題，需重做實驗【解析】

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中，蛋白胨可以提供碳源、氮源和維生素。添加了伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基上，大腸桿菌可以和伊紅美藍(lán)發(fā)生反應(yīng)形成黑色菌落，從而鑒別大腸桿菌。整個微生物培養(yǎng)的實驗中需要防止其它雜菌的干擾，否則會影響實驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計?！驹斀狻浚?）蛋白胨可以同時提供碳源和氮源，乳糖只能提供碳源，氯化鈉只能提供無機(jī)鹽；按功能分，EMB培養(yǎng)基可以通過伊紅美藍(lán)鑒別大腸桿菌的有無，屬于鑒別培養(yǎng)基；（2）為檢測該培養(yǎng)基滅菌是否徹底，一般常常使用將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)1~2d，觀察是否有菌落產(chǎn)生；（3）伊紅美藍(lán)和大腸桿菌反應(yīng)產(chǎn)生黑色；（4）培養(yǎng)時間越長，細(xì)菌的繁殖數(shù)量就越多，因此培養(yǎng)24h的菌落較大；（5）分析表格數(shù)據(jù)可以發(fā)現(xiàn)，對照組有其他細(xì)菌菌落，說明培養(yǎng)基制作不合格或無菌操作存在問題，需重做實驗。【點睛】本題的易錯點為菌落數(shù)目統(tǒng)計的可用性的判斷，在菌落的計數(shù)實驗中都要求很嚴(yán)格的無菌技術(shù)，以防止為實驗數(shù)據(jù)的干擾。因此空白對照組中生長出菌落就是無菌技術(shù)不合格的證明，則在實驗組中的所有數(shù)據(jù)均存在明顯的誤差，因此該實驗需要重做。8、DNA雙鏈復(fù)制擴(kuò)增首端抑制分瓶培養(yǎng)將轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核導(dǎo)入去核卵母細(xì)胞，并進(jìn)行體外培養(yǎng)和胚胎移植【解析】

PCR的含義：是一項在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。原理：DNA雙鏈復(fù)制。胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)，這是胚胎工程的最后一道工序?！驹斀狻浚?）由分析可知，PCR技術(shù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制，應(yīng)用PCR技術(shù)可以實現(xiàn)擴(kuò)增水母熒光蛋白基因的目的。（2）因為啟動子是位于基因首端的一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，所以，為確保水母熒光蛋白基因在成纖維細(xì)胞中表達(dá)，須在水母熒光蛋白基因的首端添加啟動子。（3）體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞時，培養(yǎng)的細(xì)胞會出現(xiàn)貼壁生長、接觸抑制的現(xiàn)象，為解決接觸抑制的問題，可用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理制成單細(xì)胞懸液，然后繼續(xù)分瓶培養(yǎng)。（4）要獲得含水母熒光蛋白基因的轉(zhuǎn)基因豬，現(xiàn)在已經(jīng)獲得了轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞，接下來需要將轉(zhuǎn)基因成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核導(dǎo)入去核卵母細(xì)胞（處于減數(shù)第二次分裂中期），并設(shè)法促進(jìn)重組細(xì)胞的核質(zhì)融合，并進(jìn)行體外培養(yǎng)獲得早期胚胎，然后通過胚胎移植將早期胚胎轉(zhuǎn)入同期發(fā)情的受體豬的子宮內(nèi)完成轉(zhuǎn)基因豬的培育過程?！军c睛】熟知PCR技術(shù)的原理和應(yīng)用是解答本題的關(guān)鍵！掌握核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植的操作程序是解答本題的另一關(guān)鍵，動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中呈現(xiàn)的特征以及培養(yǎng)過程也是解答本題的必備知識。9、核苷酸序列使DNA解鏈，然后使引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上3重組質(zhì)粒啟動子放射性同位素、生物素或熒光染料等標(biāo)記的干擾素（目的）基因mRNA【解析】

1.基因工程的基本操作程序：第一步：目的基因的獲??；第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建；第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；第四步：目的基因的檢測和表達(dá)。2.PCR的過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。3.題圖分析：Ⅰ是利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，Ⅱ是構(gòu)建基因表達(dá)載體，Ⅲ是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到酵母菌細(xì)胞中?！驹斀狻浚?）PCR的前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一對引物，因此進(jìn)行過程Ⅰ的前提是要根據(jù)干擾素基因的核苷酸序列設(shè)計引物。（2）PCR過程中需加熱至90?95℃，然后冷卻至55?60℃，如此操作的目的是使DNA解旋，然后使引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈上。根據(jù)PCR復(fù)制的特點，結(jié)合圖示可知，圖示中干擾素基因的兩條鏈應(yīng)是第二次復(fù)制才能形成的子鏈，所以至少需要復(fù)制三次才能形成圖中的干擾素基因。（3）圖中A是干擾素基因和質(zhì)粒連接形成的重組質(zhì)粒（基因表達(dá)載體），A上與RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位稱為啟動子。（4）基因轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物為mRNA，由于轉(zhuǎn)錄過程中遵循堿基互補(bǔ)配對原則，所以為檢測干擾素基因在酵母菌細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)錄，可用放射性同位素、生物素或熒光染料等標(biāo)記的干擾素（目的）基因作探針，與從細(xì)胞中提取的mRNA進(jìn)行分子雜交?！军c睛】本題結(jié)合利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)干擾素的簡化流程，考查基因工程的技術(shù)及原理、應(yīng)用，要求考生識記基因工程的原理及技術(shù)，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，能運用所學(xué)的知識結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷各題。10、氮源酒精燈火焰既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染稀釋涂布平板法防止污染環(huán)境或感染其他生物161低當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落【解析】

測定培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目，可采用顯微鏡直接計數(shù)(或血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù))法對培養(yǎng)液中的微生物直接計數(shù)，也可用稀釋涂布平板法將微生物接種于滅菌后的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，通過計數(shù)菌落數(shù)目計算培養(yǎng)液中微生物的數(shù)目。由于采用第一種方法計數(shù)時不能剔除死菌，采用第二種方法計數(shù)時，當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以第一種方法統(tǒng)計的數(shù)目比實際活菌數(shù)目高，第二種方法統(tǒng)計的數(shù)目比實際活菌數(shù)目低?！驹斀狻浚?）培養(yǎng)基中必須含有滿足微生物生長、繁殖所需營養(yǎng)物質(zhì)，包括四類的水、無機(jī)鹽、碳源和氮源等成分；在倒平板時，需待培養(yǎng)基冷卻至51℃左右時，酒精燈火焰旁是無菌區(qū)，所以，倒平板操作通常在在酒精燈火焰附近進(jìn)行，待平板冷卻后，需將平板倒置，這樣既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。（2）根據(jù)圖中菌落的分布情況可知，接種時采取的是稀釋涂布平板法，實驗結(jié)束后，為防止污染環(huán)境或感染其他生物，所用的培養(yǎng)基必須經(jīng)過滅菌處理后才能倒掉。（3）用稀釋涂布平板法進(jìn)行計數(shù)時，首先統(tǒng)計平板中的菌落數(shù)，然后求均值，再計算，（38+41+42）/3=41，41/1.1=411個/mL，則手機(jī)屏幕的細(xì)菌數(shù)為411×11/25=161個/cm2。該方法計數(shù)的結(jié)果往往比實際結(jié)果偏低，因為在稀釋涂布時，可能會出現(xiàn)兩個或多個細(xì)胞連在一起的情況，此時平板上觀察