真菌感染實驗室檢測

真菌感染的實驗室

診斷主要內(nèi)容侵襲性真菌感染現(xiàn)狀真菌感染檢測方法非培養(yǎng)方法診斷真菌感染真菌的藥敏試驗及臨床價值討論真菌

Fungi需氧、有真正細胞核、不含葉綠素寄生或腐生有性或無性繁殖真核生物生態(tài)系統(tǒng)的“禿鷲”據(jù)估計自然界中真菌約有150萬種約有300余種可導致人類疾病真菌酵母絲狀真菌念珠菌隱球菌球擬酵母菌微型絲狀真菌（霉菌）巨型絲狀真菌（如香菇）創(chuàng)傷、戰(zhàn)傷及燒傷抗生素的濫用糖尿病、AIDS病人群的增長免疫抑制劑的廣泛使用體內(nèi)人工植入物的推廣免疫缺陷、免疫力低下等易感人群不斷增多各種原因?qū)е轮匾畈空婢腥净颊咴黾优R床希望能鑒別念珠菌或絲狀真菌白色念珠菌或非白念曲霉菌或毛霉菌是否卡氏肺囊蟲不同病原用的藥物不同念珠菌或絲狀真菌:

白色念珠菌:氟康唑;

非白念:伏立康唑或卡泊芬凈;

絲狀真菌:對氟康唑天然耐藥曲霉菌或毛霉菌:

曲霉菌:伊曲康唑,伏立康唑,卡泊芬凈,兩性霉素-B等毛霉菌:目前只有兩性霉素-B卡氏肺囊蟲:

復方新諾明美國8124例尸檢結果IFI發(fā)病率P<0.01GroolA,etal.Trendsinthepostmorternepidemlologyofinvasivefungalinfectionsatauniversityhospital.[J].JInfect,1996,33(1):23．中國3347例尸檢結果IFI發(fā)病率北京協(xié)和醫(yī)院對1953-1993年共計3447例尸檢進行回顧性調(diào)查分析P<0.01人類最常見的深部真菌病念珠菌?。ūO(jiān)護中心、白血病、燒傷、腫瘤、AIDS、SARS）隱球菌病（AIDS、移植、SLE）曲霉?。ò籽　⒁浦?、AIDS、SARS）接合菌?。ò籽?、糖尿病、燒傷）馬內(nèi)菲青霉?。ㄗ匀灰咴矗?/p>

念珠菌病念珠菌分離鑒定無菌標本:

區(qū)別污染菌?非無菌標本:

區(qū)別定植菌?侵襲性念珠菌感染：流行病學

最常見的致病菌白念珠菌已發(fā)現(xiàn)的其他致病菌熱帶念珠菌光滑念珠菌（球擬酵母）近平滑念珠菌高里念珠菌克柔念珠菌葡萄牙念珠菌解脂念珠菌PfallerMA，DiekemaDJ．Epidemiologyofinvasivecandidiasis：apersistentpublichealthproblemE[J].ClinMicrobiolRev,2007,20(1):133-163.吳紹熙，廖萬清,等.1986年、1996年、2006年我國念珠菌屬變遷.中國感染與化療雜志,2009,9:6美國侵襲性念珠菌感染發(fā)病率DatafromtheNationalHospitalDischargeSurvey(NHDS),1996–2003(/nchs/).2012年度臨床分離細菌數(shù)量2012年臨床送檢培養(yǎng)標本39503份分離7101株細菌，其中：革蘭陽性菌2156株，占30%革蘭陰性菌4513株，占65%念珠菌313株,占5%絲狀真菌26株念珠菌分布

菌名

株數(shù)%白色念珠菌11944熱帶念珠菌5621光滑念珠菌4616近平滑念珠菌207葡萄牙念珠菌114其它念珠菌2282006~2012年念珠菌分布念珠菌藥敏試驗結果抗生素名稱R(%)I(%)S(%)5-氟胞嘧啶0.3198.6伏立康唑1.40.398.3氟康唑3.117.279.7兩性霉素B00100伊曲康唑2.820.376.9針對光滑念珠菌的檢測，建議將其對氟康唑和/或伊曲康唑敏感的結果改為中介，因為該菌對這兩個藥存在固有敏感性低的現(xiàn)象克柔念珠菌對氟康唑天然耐藥侵襲性念珠菌感染:易感因素持續(xù)性中性粒細胞減少器官移植白血病實體腫瘤燒傷糖尿病廣譜抗生素或激素或免疫抑制劑治療免疫缺陷癥體外抗真菌藥物敏感試驗應用疾病孤立的粘膜念珠菌病復發(fā)的粘膜念珠菌病高?；颊咧心钪榫ㄖ材钪榫Y及深部感染深部感染需延長治療時建議經(jīng)驗性治療不做藥敏菌種鑒定如果治療失敗菌種鑒定依據(jù)當?shù)啬退幈O(jiān)測鑒定應用唑類藥物時對所有菌株都做藥敏體外藥物敏感試驗液體稀釋法：致病性酵母菌產(chǎn)孢絲狀真菌瓊脂擴散法：氟康唑、伏立康唑、制霉菌素

EtestATBFungus3微量液基稀釋法-MIC判讀念珠菌體外藥敏折點（液基稀釋法）MIC（ug/ml）SSDDIR氟康唑＜＝816-32-＞＝64伊曲康唑*＜0.1250.25-0.5-＞1氟胞嘧啶＜＝4-8-16＞32伏立康唑*＜＝12-＞＝4侵襲性念珠菌病總結免疫受損患者最易受累的致命性真菌感染鏡檢、培養(yǎng)、組織病理學等傳統(tǒng)檢查方法仍是診斷的金標準，但也有其局限性，如血培養(yǎng)陽性率僅50%左右近來，Realtime-PCR等技術在侵襲性念珠菌病早期診斷方面很有發(fā)展?jié)摿Ψ颠颉⒖ú捶覂艏皟尚悦顾兀录爸委熐忠u性念珠菌病較有優(yōu)勢

曲霉病侵襲性曲霉病免疫功能低下患者易受累的致命性感染，死亡率最高可達90%伏立康唑被美國感染病學會2008年推薦作為絕大多數(shù)侵襲性曲霉病患者初始治療的首選藥物目前，迫切需要在侵襲性曲霉病的早期診斷、聯(lián)合抗真菌治療方案的評估及預防等方面取得更大突破曲霉感染：流行病學最常見致病菌煙曲霉黃曲霉黑曲霉其它土曲霉構巢曲霉聚多曲霉灰綠曲霉…..曲霉感染：流行病學2012年度26株絲狀真菌曲霉22例毛霉1例煙曲霉

曲霉侵襲性曲霉病的診斷實驗室真菌學檢查主要以形態(tài)學檢查方法為基礎，鏡檢、培養(yǎng)及組織病理學檢查等形態(tài)學檢查方法仍是金標準目前的診斷水平不能滿足臨床需求非培養(yǎng)診斷方法如GM試驗、G試驗及PCR技術的聯(lián)合使用可提高侵襲性曲霉病的早期診斷水平真菌性角膜炎鐮刀菌和曲霉常見實驗室檢查方法角膜刮片：涂片：染色、不染色培養(yǎng)隱球菌病

可見圓形厚壁孢子，外圍有一透光的厚莢膜，莢膜內(nèi)的菌體可出芽，孢內(nèi)有一較大的反光顆粒（脂質(zhì)顆粒，不是孢核），需與白細胞或淋巴細胞相鑒別

隱球菌墨汁染色鏡檢肺隱球菌病痰懸浮顆粒墨汁涂片實驗室檢查方法涂片墨汁染色分離培養(yǎng)膠乳凝集試驗毛霉菌病肺毛霉病患者，女，68歲因咳嗽，并咯血就診胸片見浸潤白細胞計數(shù)：7.2×109肺腫瘤標志物（-）GM（-）G試驗（-）氣管鏡刷片？支氣管刷片染色HE六胺銀革蘭馬爾尼菲青霉病地方性真菌病是東南亞地區(qū)的流行病，中間宿主為竹鼠。播散性常見于HIV患者。

馬爾尼菲青霉菌卡氏肺孢子菌

檢查方法：直接鏡檢六胺銀染色諾卡菌病吸入或有外傷進入體內(nèi)，可