人感染h7n9防控樣本采集檢測與運(yùn)送要求市cdc劉愛平課件

人感染H7N9禽流感防控

樣本采集、檢測與運(yùn)送要求楊曉恒2024/8/61采集對象人感染H7N9禽流感疑似病例經(jīng)醫(yī)院專家會診，不能排除人感染H7N9禽流感的肺炎病例,應(yīng)同時具備以下4條:1、發(fā)熱(腋下體溫≥38℃)；2、具有肺炎的影像學(xué)特征；3、發(fā)病早期白細(xì)胞總數(shù)降低或正常,或淋巴細(xì)胞分類計數(shù)減少；4、不能從臨床或?qū)嶒炇医嵌仍\斷為常見病原所致的肺炎。出現(xiàn)發(fā)熱及咳嗽等急性呼吸道感染病癥的人感染H7N9禽流感確診病例的密切接觸者。2024/8/62標(biāo)本采集的種類抗病毒治療之前必須采集：鼻咽分泌物口腔含漱液呼吸道分泌物氣管深部咳痰氣管吸取物肺深部吸取物/灌洗液雙份血清優(yōu)先采集下呼吸道標(biāo)本2024/8/63病毒采樣液〔4ml〕MEM或DMEM液Hanks液商品化采樣管聚丙乙烯纖維頭拭子〔2根〕常規(guī)采血管全血5ml血清2ml2024/8/64采樣用具2024/8/65Hanks液的配制①NaCl8g、KCl0.4g、MgSO47H2O0.1g、MgCl·6H2O0.1g溶于800ml超純水中②CaCl2(無水)0.14g溶于100ml超純水中③葡萄糖1.0mg、NaHPO40.154g、KH2PO40.06g、0.4%酚紅液5ml溶于100ml超純水中④將上述3種溶液混和，8磅30分鐘滅活菌，或用玻璃濾器過濾。保存在5℃?zhèn)溆茫们耙?%NaCO3調(diào)。2024/8/66標(biāo)本采集的方法咽拭子：用2根拭子同時擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將拭子頭浸入含4ml采樣液的管中，尾部折斷棄去。2024/8/67鼻拭子：將1根拭子輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出；取另1根以同樣的方法采集另一側(cè)鼻孔；將上述2根拭子浸入同一含4ml采樣液的管中，尾部折斷棄去。2024/8/681插入鼻腔2放置數(shù)秒鼻拭子采集4放入

VTM3旋轉(zhuǎn)

2-3Ts5折斷多余局部6蓋緊蓋子鼻咽抽取物或呼吸道抽取物：用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液或從氣管抽取呼吸道分泌物。先將收集器頭部插入鼻腔或氣管，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出；收集抽取的粘液，并用采樣液4ml涮洗收集器1次。呼吸道灌洗液：將收集器頭部從鼻孔或氣管插口處插入氣管〔約30cm深處〕，注入5ml生理鹽水，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出；收集抽取的粘液，并用采樣液涮洗收集器1次〔可用小孩導(dǎo)尿管接在50ml注射器上來代替收集〕。2024/8/610咽漱液：用10ml生理鹽水漱喉。漱時讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢〞聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動，然后，用50ml的無菌螺口塑料管收集洗液。痰液：醫(yī)護(hù)人員采取拍背的方式幫助患者深咳，將咳出的痰液收集到50ml的無菌螺口塑料管中。最好是醫(yī)護(hù)人員采取吸痰的方法收集深部痰液，注入至15ml無菌螺口塑料管中。環(huán)境污水：選擇禽類飲水槽、清洗禽類的盆或桶、禽類活動或籠具旁的水溝或水池，用一次性玻璃棒或吸管充分?jǐn)噭蚝蟛杉?-10ml污水于無菌的外螺旋蓋的管內(nèi)，旋緊管蓋。禽類糞便：選擇禽舍或環(huán)境中的新鮮禽類糞便，用無菌拭子夾或挑取糞便3-5g置于含5ml采樣液的管中，棄去尾部，旋緊管蓋?；\具涂抹拭子：用蘸有采樣液的拭子擦拭籠具外表禽類最常接觸的3-5個不同部位〔包括籠具底部〕，然后將擦拭過的拭子放入含5ml采樣液的采樣管中，棄去尾部，旋緊管蓋。也可以用多個拭子充分擦拭籠具外表后放到一個采樣管中。禽流感外環(huán)境標(biāo)本采集環(huán)境標(biāo)本應(yīng)急監(jiān)測各縣市區(qū)疾控中心每月2次采集活禽批發(fā)市場、中心農(nóng)貿(mào)市場的環(huán)境標(biāo)本，每地點不少于3份標(biāo)本/次，采集的標(biāo)本以禽類飲水和市場污水為重點。2024/8/613本卷須知1、出去采樣時一定要帶夠大冰袋，用泡沫箱運(yùn)輸采集后的樣本，48h內(nèi)低溫運(yùn)輸至實驗室2、采集糞便時一定要采集新鮮的〔一般較濕潤〕糞便，太陳舊〔枯燥〕的糞便對我們的檢測意義不大。尤其在緩沖區(qū)養(yǎng)殖戶家中采集糞便標(biāo)本時，由于多雞鴨混養(yǎng)難以分辨鴨糞和雞糞，最好能找到鴨子剛排泄的新鮮糞便。標(biāo)本的運(yùn)送H7N9禽流感病毒實驗室活動和樣本運(yùn)輸按照?人間傳染的病原微生物名錄?中高致病性禽流感病毒進(jìn)行管理。標(biāo)本采集、包裝、運(yùn)送等應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照?可感染人類的高致病性病原微生物菌〔毒〕種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定?〔衛(wèi)生部第45號令〕等生物平安相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。病例的臨床標(biāo)本采集后，縣級疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)和病例收治的醫(yī)療機(jī)構(gòu)要密切配合，按照B類感染性物質(zhì)進(jìn)行包裝運(yùn)輸，在低溫條件下，24小時內(nèi)送到當(dāng)?shù)亓鞲斜O(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實驗室進(jìn)行檢測。B類感染性物質(zhì)包裝2024/8/6172024/8/6182024/8/619實驗室檢測檢測流程常規(guī)監(jiān)測流感樣病例實驗室收到標(biāo)本后1周內(nèi)完成甲、乙型流感病毒通用引物檢測。甲型陽性的開展H1、H3、H7、H5亞型檢測，乙型陽性的開展BY、BV亞型檢測。H5、H7亞型陽性立即網(wǎng)絡(luò)報告，標(biāo)本上送省、國家CDC復(fù)核和進(jìn)一步檢測。季節(jié)性流感病毒核酸檢測陽性的標(biāo)本繼續(xù)進(jìn)行流感病毒別離，毒株上送省、國家CDC復(fù)核。甲型通用引物陽性而不能區(qū)分型別或亞型的毒株和陽性標(biāo)本要求在48小時內(nèi)送至國家流感中心〔24小時內(nèi)送至省CDC〕。H7N9排查病例實驗室收到標(biāo)本后24小時內(nèi)完成甲、乙型流感病毒通用引物和H5、H7亞型的檢測。H5、H7亞型陽性立即網(wǎng)絡(luò)報告，標(biāo)本上送省、國家CDC復(fù)核和進(jìn)一步檢測。甲型陽性H5、H7亞型陰性的標(biāo)本繼續(xù)開展季節(jié)性流感病毒核酸檢測和流感病毒別離，毒株上送省CDC復(fù)核。甲型通用引物陽性而不能區(qū)分型別或亞型的毒株和陽性標(biāo)本要求在48小時內(nèi)送至國家流感中心〔24小時內(nèi)送至省CDC〕。沒有條件開展核酸檢測的醫(yī)療機(jī)構(gòu)請盡快開展快速抗原檢測初篩試驗。核酸檢測儀器及試劑RealtimePCR儀：ABI7300/7500抽提試劑：invitrogenViralRNA/DNAminikit檢測試劑：invitrogenone-stepqRT-PCRkit引物探針：自合成〔見附表〕2024