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文檔簡(jiǎn)介
關(guān)于血涂片染色及白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)1.瑞氏染色1.1試劑成分:伊紅——酸性——嗜堿性染料亞甲藍(lán)(美藍(lán))——堿性——嗜酸性染料甲醇——固定溶劑磷酸緩沖液(pH:6.4-6.8)第2頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月1.2著色原理:化學(xué)親和作用+物理的吸附作用伊紅+細(xì)胞中的堿性物質(zhì)——紅色亞甲藍(lán)+酸性物質(zhì)——藍(lán)色中性物質(zhì)+伊紅和亞甲藍(lán)——淡紫色第3頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月1.3pH對(duì)細(xì)胞染色影響pH過(guò)低
<PI
正電荷增多——易與伊紅結(jié)合——偏紅pH過(guò)高>PI
負(fù)電荷增多——易與亞甲藍(lán)結(jié)合——偏藍(lán)最適環(huán)境:弱酸(pH6.4-6.8)第4頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月
血涂片:淡紫紅色鏡下:成熟紅細(xì)胞——粉紅色
白細(xì)胞——胞質(zhì)呈現(xiàn)其特有的色彩細(xì)胞核紫紅色染色質(zhì)結(jié)構(gòu)清楚判別方法第5頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月染色偏酸:
紅細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞顆粒偏紅白細(xì)胞核淡紫紅色或不著色染色偏堿:紅細(xì)胞灰藍(lán)色中性粒細(xì)胞顆粒深暗、偏粗,紫黑色嗜酸性粒細(xì)胞暗褐色或紫黑色、藍(lán)色第6頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月第7頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月1.4器材載玻片、推玻片、洗耳球1.5試劑
瑞氏染液(商品)
I液:瑞特染料、純甲醇、甘油
I液:磷酸鹽緩沖液(KH2PO4Na2HPO4)
第8頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月1.6操作制備血涂片(待完全晾干)
加I液數(shù)滴覆蓋整個(gè)血膜0.5-1min
滴加等量或稍多的II液(洗耳球混勻)5-10min
沖洗(注意)
干燥第9頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月注意事項(xiàng)1.血涂片干后方可染色2.加染液不能過(guò)少3.沖洗時(shí)應(yīng)以流水沖洗4.染色過(guò)淡可復(fù)染,先加緩沖液再加染液5.染色過(guò)深可用水沖洗或浸泡一定時(shí)間,也可用甲醇脫色6.染色時(shí)間與染液濃度、室溫及細(xì)胞多少有關(guān)。應(yīng)在具體實(shí)踐中摸索合適的時(shí)間。
第10頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月2.WBC分類計(jì)數(shù)2.1原理2.2器材:顯微鏡、香柏油、拭鏡紙、清潔劑2.3操作步驟
1.采末梢血——染色
2.低倍鏡下選擇細(xì)胞分布均勻、著色良好的域,滴香柏油一滴
3.油鏡下分類,分類時(shí)要有秩序的連續(xù)進(jìn)行(“幾”字形),避免主觀選擇視野。通常分類100個(gè)白細(xì)胞,計(jì)數(shù)并報(bào)告各種白細(xì)胞所占百分比。
4.計(jì)算
5.報(bào)告方式:XX細(xì)胞:XX%第11頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月2.4外周血正常白細(xì)胞形態(tài)特征:中性粒細(xì)胞:桿+分10-15
μm圓形胞質(zhì)粉紅胞質(zhì)內(nèi)顆粒量多、細(xì)小、均勻、紫紅色核彎曲呈桿、帶狀染色質(zhì)粗糙,紫紅色分葉核:核分2-5葉第12頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月13-15
μm圓形胞質(zhì)著色不清胞質(zhì)內(nèi)顆粒粗大、整齊、均勻、充滿胞質(zhì)、桔紅色核多分2葉染色質(zhì)粗糙,紫紅色嗜酸性粒細(xì)胞+淋巴細(xì)胞第13頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月10-12
μm圓形胞質(zhì)著色不清胞質(zhì)內(nèi)顆粒量少、大小不勻、排列零亂、紫黑色,可蓋核上核形不清染色質(zhì)粗糙,紫紅色嗜堿性粒細(xì)胞第14頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月6-15
μm圓形/橢圓形胞質(zhì)透明、淡藍(lán)色胞質(zhì)內(nèi)多無(wú)顆粒核形圓/橢圓/腎形染色質(zhì)粗緊成塊,深紫紅色,核外緣光滑淋巴細(xì)胞第15頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月12-15
μm圓/橢圓/不規(guī)則胞質(zhì)半透明、灰藍(lán)色或灰紅色胞質(zhì)內(nèi)有細(xì)小、塵土樣紫紅色顆粒核形不規(guī)則/山字/腎/馬碲形,扭曲折疊染色質(zhì)疏松網(wǎng)狀,淡紫紅色,有膨脹感和立體起伏感第16頁(yè),共18頁(yè),星期六,2024年,5月2.5注意事項(xiàng):1.分類最佳區(qū)域?yàn)轶w、尾交界處2.分類時(shí)要有秩序地連續(xù)進(jìn)行3.白細(xì)胞總數(shù)與分類個(gè)數(shù)4.分類中如見(jiàn)幼紅細(xì)胞,不計(jì)入100個(gè)細(xì)胞內(nèi),以分類100個(gè)白細(xì)胞過(guò)程中見(jiàn)到幼紅細(xì)胞多少個(gè)來(lái)報(bào)告,并應(yīng)注明其所屬階段。5.分類中應(yīng)注意觀察成
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