血細(xì)胞直方圖

關(guān)于血細(xì)胞直方圖課件血細(xì)胞計(jì)數(shù)原理一、電阻抗法庫(kù)爾特原理(亦稱：電阻法、電脈沖法與電感應(yīng)區(qū)技術(shù))：懸浮在電解液中的顆粒隨電解液通過(guò)小孔管時(shí)，取代相同體積的電解液，在恒電流設(shè)計(jì)的電路中導(dǎo)致小孔管內(nèi)外兩電極間電阻發(fā)生瞬時(shí)變化，產(chǎn)生電位脈沖。脈沖信號(hào)的大小和次數(shù)與顆粒的大小和數(shù)目成正比。與等滲電解質(zhì)溶液相比，血細(xì)胞為不良導(dǎo)體，血細(xì)胞電阻值>稀釋液的電阻值血細(xì)胞通過(guò)檢測(cè)器小孔管微孔的孔徑感受器區(qū)時(shí)，檢測(cè)器內(nèi)外電極之間的恒流源電路上電阻值瞬間增大，產(chǎn)生一個(gè)電壓脈沖信號(hào)。脈沖信號(hào)數(shù)=細(xì)胞數(shù)第2頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月小孔管：電阻抗法細(xì)胞計(jì)數(shù)的一個(gè)重要組成部分。當(dāng)電流接通，位于小孔兩側(cè)的電極產(chǎn)生恒定電流。若供給的阻抗是穩(wěn)定的，則小孔的電壓不變。當(dāng)有一個(gè)細(xì)胞通過(guò)小孔時(shí)，電阻會(huì)增加，瞬間引起電壓變化，即“通過(guò)脈沖”細(xì)胞體積越大，脈沖振幅越高；細(xì)胞數(shù)量越多，脈沖數(shù)量越多

各種大小不同細(xì)胞產(chǎn)生的脈沖信號(hào)分別送入儀器內(nèi)電腦的各個(gè)通道，運(yùn)算出各種細(xì)胞參數(shù)。細(xì)胞群體大小分布情況的圖形，就成為“細(xì)胞體積直方圖”第3頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月脈沖信號(hào)經(jīng)過(guò)以下步驟，得出細(xì)胞計(jì)數(shù)：信號(hào)發(fā)生：各種微粒通過(guò)檢測(cè)小孔時(shí)，“信號(hào)發(fā)生器”產(chǎn)生脈沖信號(hào)放大：將血細(xì)胞產(chǎn)生的微弱脈沖信號(hào)，通過(guò)“放大器”放大閾值調(diào)節(jié)：“閾值調(diào)節(jié)器”在一定范圍內(nèi)調(diào)節(jié)參考電平的大小，能區(qū)分不同群細(xì)胞合適的信號(hào)電平，使計(jì)數(shù)結(jié)果盡可能符合實(shí)際甄別：利用“甄別器”，根據(jù)閾值調(diào)節(jié)器提供的參考電平，將低于參考電平的假信號(hào)（細(xì)胞碎片、雜質(zhì)微粒）去掉整形：通過(guò)“整形器”，將脈沖信號(hào)波形修整成一致標(biāo)準(zhǔn)的平頂波，顯示為不同類群的細(xì)胞數(shù)計(jì)數(shù)：經(jīng)過(guò)以上步驟偶，進(jìn)入“計(jì)數(shù)系統(tǒng)”，得出結(jié)果電阻抗法可精確測(cè)出細(xì)胞（或類似顆粒）大小，是三分類的主要應(yīng)用原理，也與光學(xué)檢測(cè)原理，共同應(yīng)用于五分類血細(xì)胞分析儀中。第4頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月儀器將每個(gè)細(xì)胞的脈沖根據(jù)其體積大小分配并儲(chǔ)存在相應(yīng)體積通道中，每個(gè)通道收集的數(shù)據(jù)被統(tǒng)計(jì)出：相對(duì)數(shù)，表示在Y軸上；體積，表示在X軸上。白細(xì)胞體積從30-450fl分為256個(gè)通道，每個(gè)通道1.64fl，依據(jù)體積大小分別放在不同通道中，得出直方圖。第一群：小細(xì)胞群，主要為淋巴，體積35-90fl第二群：中間細(xì)胞群，主要為單核，體積90-160fl第三群：大細(xì)胞群，主要為中性粒，體積可>160fl第5頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月Plat和RBC共用一個(gè)孔管。正常人RBC體積和Plat體積有明顯的界限，因此Plat計(jì)數(shù)準(zhǔn)確容易。當(dāng)血細(xì)胞懸液中含有異常血細(xì)胞(如小RBC）時(shí)，則劃分界限不清。為使Plat計(jì)數(shù)有較高的準(zhǔn)確性，計(jì)算機(jī)對(duì)Plat和RBC分布圖進(jìn)行判斷，將Plat計(jì)數(shù)的上限閾值判定線放在RBC和Plat分布圖交叉部分的最低處計(jì)數(shù)。第6頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月白細(xì)胞直方圖第7頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月三分類血球儀一般以電阻抗原理進(jìn)行WBC分類。依據(jù)大多數(shù)正常形態(tài)的WBC在溶血素作用后的大小排列，人為設(shè)置4個(gè)鑒別線，將直方圖分為三個(gè)區(qū)域。

計(jì)數(shù)WBC時(shí)，加入溶血素，使RBC破壞，而WBC膜受到破壞后胞漿流失，WBC體積大小發(fā)生變化。因此，WBC直方圖上細(xì)胞排列順序不是細(xì)胞的原始大小，而是經(jīng)溶血液修飾后的細(xì)胞大小。電阻抗原理：血細(xì)胞非導(dǎo)電性質(zhì)，懸浮在電解質(zhì)溶液中的血細(xì)胞顆粒，通過(guò)檢測(cè)小孔時(shí)，引起電阻的變化，從而對(duì)血細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類加入溶血素前的細(xì)胞大小加入溶血素后的細(xì)胞大小第8頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月一、設(shè)置鑒別線：低鑒別線(LD)：自動(dòng)尋找30-60fl之間最適位置高鑒別線(UD)：定在300fl，用作粒度分布異常監(jiān)視鑒別線1(T1):自動(dòng)尋找從LD~UD之間WBC分布曲線的波谷，第一波谷值設(shè)為“TROUGH”T1

鑒別線2(T2):自動(dòng)尋找從LD~UD之間WBC分布曲線的波谷，第二波谷值設(shè)為“TROUGH”T2儀器是如何分類WBC?第9頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月

報(bào)警信息列表WL：LD的相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值，可能——存在Plat聚集？較多巨大Plat?WU：UD的相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值，可能——溶血不充分？較多異常細(xì)胞？T1：當(dāng)?shù)谝还戎挡荒軟Q定時(shí)T2：當(dāng)?shù)诙戎挡荒軟Q定時(shí)F1：小WBC分布異常。T1的相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值F2：中WBC分布異常。T1或T2的相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值F3：小WBC分布異常。T2的相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值2、監(jiān)視WBC粒度分布的情況，提供異常分布信息分布正常時(shí)，直方圖為三峰性分布，在LD、UD之間有兩個(gè)谷值T1和T2當(dāng)各值鑒別線不能設(shè)定，或在設(shè)定的鑒別線位置的度數(shù)比規(guī)定值高時(shí)，將標(biāo)有WBC粒度分布的異常報(bào)警。二、鑒別線作用：1、對(duì)正常形態(tài)的WBC進(jìn)行粒度分類

LD~T1：為W-SCR%，相當(dāng)于LYM%T1~T2：為W-MCR%，相當(dāng)于MEX%(M、E、B）

T2~UD：為W-LCR%，相當(dāng)于NEUT%第10頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月1.3.LD度數(shù)高，無(wú)T1、T2：

WBC有結(jié)果，但標(biāo)有報(bào)警“WL”。其余結(jié)果無(wú)，報(bào)警“WL”。1.1.LD度數(shù)高：

所有結(jié)果都有，但標(biāo)報(bào)警“WL”。常見(jiàn)于：存在RBC溶血不全？有核RBC？大Plat增多？Plat聚集?纖維蛋白析出？…1.2.LD度數(shù)高、無(wú)T2：

WBC、L%、L#有結(jié)果，但標(biāo)有報(bào)警“WL”。其余結(jié)果無(wú)，報(bào)警“WL”。無(wú)T2：不能設(shè)定中間細(xì)胞與中性粒細(xì)胞之間的波谷鑒別線常見(jiàn)于：幼稚粒細(xì)胞？RBC溶血不全？標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)？…WLLD的相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值第11頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月1.4.黃疸病人的特征性改變：黃疸病人RBC膜上脂質(zhì)含量增多，蛋白質(zhì)含量減少，對(duì)溶血素的拮抗作用增加，RBC難于破碎WL：LD的相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值2.無(wú)T1、無(wú)T2：

WBC數(shù)無(wú)報(bào)警，但WBC分類結(jié)果無(wú),且報(bào)警“T1”

常見(jiàn)于：幼稚粒細(xì)胞？RBC溶血不全？…T1

T1相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值,第一谷值不能決定第12頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月

WBC數(shù)無(wú)報(bào)警，L%、L#結(jié)果報(bào)警“F1”，其余結(jié)果無(wú)，且報(bào)警“T2”

常見(jiàn)于：幼稚粒細(xì)胞？M增多？E增多？B增多？RBC溶血不全？標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)？…

T2

T2相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值第二谷值不能決定F1

T1相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值小WBC群分布異常3.1.T1高、無(wú)T2：

WBC數(shù)、L%、L#無(wú)報(bào)警，其余結(jié)果無(wú)，報(bào)警“T2”第13頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月3.2.僅T1高：

WBC數(shù)、N%、N#有結(jié)果，無(wú)報(bào)警；

L%、L#結(jié)果報(bào)警“F1”，M%、M#結(jié)果報(bào)警“F2”3.3.僅T2高：

WBC數(shù)、L%、L#有結(jié)果，無(wú)報(bào)警；M%、M#結(jié)果報(bào)警“F2”、N%、N#結(jié)果報(bào)警“F3”3.4.T1、T2都高：WBC數(shù)報(bào)警“WU”；L%、L#結(jié)果報(bào)警“F1”，M%、M#結(jié)果報(bào)警“F2”；N%、N#報(bào)警“F3”常見(jiàn)于：原始細(xì)胞？幼稚粒細(xì)胞？M增多？E增多？B增多？RBC溶血不全？標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)？…

F1

T1相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值小WBC群分布異常F2T1或T2相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值中WBC分布異常F3T2的相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值大WBC分布異常第14頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月4.LD高、UD高：

LD高：Plat值標(biāo)有報(bào)警“AG”

UD高：WBC報(bào)警“WU”,其余結(jié)果無(wú)報(bào)警常見(jiàn)：溶血不充分?Plat聚集？異常細(xì)胞？…WUUD的相對(duì)度數(shù)>規(guī)定值第15頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月第16頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月第17頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月小結(jié)一、“結(jié)果不輸出”原因分析：

T1負(fù)責(zé)監(jiān)視淋巴區(qū)域和中間細(xì)胞區(qū)域

T2負(fù)責(zé)監(jiān)視中間區(qū)域和中性粒區(qū)域當(dāng)WBC粒度分布曲線異常，儀器找不到谷底T1和/或T2時(shí)，T1、T2負(fù)責(zé)監(jiān)視的細(xì)胞群結(jié)果就不輸出。二、“WBC直方圖異常”原因分析1、病理因素：直方圖的變化，可反映血液中WBC群體的變化，但無(wú)特異性。引起血液學(xué)變化的病因很多，但其直方圖變化是相近的。因此，出現(xiàn)提示報(bào)警，就是給檢驗(yàn)師命令，要求我們進(jìn)行鏡檢復(fù)核。2、非病理因素：

1）儀器因素：凡影響細(xì)胞脈沖信號(hào)的因素，都可以使直方圖發(fā)生變化——血細(xì)胞自身體積、儀器的閾值、孔電壓、脈沖的增益…

2）試劑因素：試劑性能好壞直接影響直方圖，因此，應(yīng)使用配套試劑稀釋液的電導(dǎo)率、滲透壓、離子強(qiáng)度溶血?jiǎng)┑姆N類、濃度、用量、溶血時(shí)間：

抗凝劑的種類、濃度：EDTAK21.5-2.2mg抗凝1ml全血

3）樣本放置時(shí)間：一般認(rèn)為樣本采集后20分鐘~2h內(nèi)檢測(cè)。過(guò)短，可能存在Plat未完全解離，抗凝劑未完全溶解等；過(guò)長(zhǎng)，則細(xì)胞變形，特別是免疫功能亢進(jìn)的病人，其淋巴細(xì)胞容易變成異型淋巴，從而影響直方圖變形。第18頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月紅細(xì)胞直方圖第19頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月紅細(xì)胞直方圖分析范圍：36-360fl正常RBC主要分布在50-200fl直方圖上可見(jiàn)兩個(gè)細(xì)胞群：

50-150fl幾乎兩側(cè)對(duì)稱、較狹窄、正態(tài)分布;125-200fl大RBC和Ret分類規(guī)則（按體積）：在RL～RU之間分析RBC

RL——Plat和RBC的分界線?？煞从吵鲂BC、大Plat、血小板簇

RU——可反映出RBC聚集第20頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月RL與直方圖交點(diǎn)高：

電子噪聲干擾、破碎RBC、大Plat增多、Plat聚集…MCV高

MCHC低

RDW高第21頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月RU與直方圖交點(diǎn)高DW：相對(duì)度數(shù)20%處的鑒別線與直方圖曲線交點(diǎn)增高

RU：電子噪聲干擾、冷凝集素干擾、WBC極度增高…DW:RBC明顯大小不均MCV高

MCHC低

RDW無(wú)法得出第22頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月RBC曲線跨度大：

小RBC干擾?曲線不光滑：抬尾

RDW:明顯增高Plat:報(bào)警PLPDW:報(bào)警DWMPV:報(bào)警PL無(wú)法測(cè)出RBC大小不均RBC大小不均第23頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月主峰位于65fl:小RBC

MCV:

低

MCH:低

MCHC：低

RDW：輕度增高抬尾、不與橫坐標(biāo)重合、浮動(dòng)界標(biāo)PU在20fl定位：小RBC出現(xiàn)

缺鐵性貧血RBC外觀無(wú)異常第24頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月雙峰：

接受貧血治療、輸血，出現(xiàn)多種大小的RBC群MCHC：低

RDW:高報(bào)警MP第25頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月第26頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月治療2w后（輸血、鐵劑）：雙峰

MCV:

低

MCH:低

MCHC：低

RDW：高報(bào)警MP治療4w后：雙峰，但以正常RBC為主

MCV:

低

MCH:低

MCHC：低

RDW：高報(bào)警MP缺鐵性貧血治療后第27頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月無(wú)T2：

出現(xiàn)連續(xù)體積大小的細(xì)胞RBC:低

Hb:低

HCT：低

MCV：高WBC：高

M:無(wú)法得出報(bào)警T2

N:無(wú)法得出報(bào)警T2曲線右移——大細(xì)胞性貧血：

大細(xì)胞性貧血（CML）第28頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月第29頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月血小板直方圖第30頁(yè),共36頁(yè)，星期六，2024年，5月分析范圍：2-30fl正常Plat直方圖：左偏態(tài)，主要分布在2-15fl3條鑒別線：

2條固定鑒別線：PL：2-6fl;PU:12-30fl1條浮動(dòng)鑒別線：12flRBC分析范圍：36-360fl

對(duì)于和Plat大小相似的細(xì)胞大小，成為“非Plat顆粒”，包括小RBC、RBC碎片、WBC碎片、細(xì)