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文檔簡介

血液學檢驗基礎(chǔ)

希森美康醫(yī)用電子(上海)公司學術(shù)應用課吳婉青血液學基礎(chǔ)一、基本概念血液學(Hematology)是研究造血組織及血細胞的發(fā)生、演化的病理和生理過程的科學。2.臨床血液學檢驗(ClinicHematology):研究血液系統(tǒng)病的病理改變和血液病實驗診斷的科學。血液學基礎(chǔ)血液的基本組成

紅細胞

血細胞

白細胞(45%)血小板血液

固體成分

血漿

(55%)水分血液學基礎(chǔ)4三系血液學基礎(chǔ)5

血細胞發(fā)育成熟形態(tài)變化規(guī)律胞體:大小:由大變小,只有巨核細胞相反,越成熟胞體越大,早幼粒細胞也可較原粒細胞大。外形:紅細胞系始終呈圓形;粒細胞及淋巴經(jīng)胞系始終保持圓形或橢圓形;單核細胞系由圓形或橢圓形變?yōu)椴灰?guī)則形;巨核細胞系由圓形變?yōu)槊黠@不規(guī)則形。血液學基礎(chǔ)6胞核大?。河纱笞冃 >藓思毎麆t由小變大;成熟紅細胞則無核。核形:一般由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形。紅系由圓形最后脫核消失;粒系由圓形到一側(cè)出現(xiàn)凹陷,最后為桿狀或分葉狀;淋巴及漿細胞系核形保持不變;單核細胞則由圓形變?yōu)椴灰?guī)則形;巨核細胞核逐漸增大并分葉,呈不規(guī)則堆疊。

血細胞發(fā)育成熟形態(tài)變化規(guī)律血液學基礎(chǔ)7染色質(zhì):由細致疏松變?yōu)榇植诿芗渲SDNA含量增加而藍變?yōu)闇\紅色;淋巴洗胞及單核細胞系保持淺藍或灰藍色不變;漿細胞系則由灰藍色變?yōu)樯钏{色。顆粒:從無到有,由非特異性到特異性。粒系統(tǒng)原始階段一般無顆粒,早幼階段出現(xiàn)非特異性嗜天青顆粒,中幼以后各階段為大量特異性顆粒;淋巴細胞顆粒較少,部分細胞可含少量非特異性顆粒;紅細胞系胞漿內(nèi)無顆粒。胞核與胞漿體積之比:一般由大到小。

血細胞發(fā)育成熟形態(tài)變化規(guī)律血液學基礎(chǔ)紅細胞檢查紅細胞計數(shù)及血紅蛋白測定紅細胞形態(tài)檢查紅細胞比容測定紅細胞平均指數(shù)計算網(wǎng)織紅細胞計數(shù)血液學基礎(chǔ)

紅細胞的起源、發(fā)育及衰亡

原紅早幼紅中幼紅晚幼紅網(wǎng)織紅RBC

衰亡72h48h120d衰亡的RBC珠蛋白鐵膽色素參與再造血參與膽紅素代謝血液學基礎(chǔ)血紅蛋白的結(jié)構(gòu)

原卟啉

血紅素(亞鐵)

鐵離子血紅蛋白

α鏈(2條)

珠蛋白

非α鏈(2條)血液學基礎(chǔ)11參考值:血紅蛋白(Hb)紅細胞(RBC)男:120~160g/L(4.0~5.5)×1012/L

女:110~150g/L(3.5~5.0)×1012/L新生兒:170~200g/L(6.0~7.0)×1012/L紅細胞和血紅蛋白的檢測血液學基礎(chǔ)12臨床意義:(一)紅細胞和血紅蛋白增多(1)相對性RBC增多:

連續(xù)嘔吐,反復腹瀉,大面積燒傷。(2)絕對性RBC增多:①繼發(fā)性:代償性增生:生理因素、精神因素、高山居民和登山運動員、重體力勞動者及長期多次獻血者、慢性肺心病、嚴重的肺氣腫、紫紺型、先天性心肺病發(fā)非代償性增生:某些腫瘤、腎病患者②原發(fā)性:真性RBC增多癥血液學基礎(chǔ)13

輕度:男:120g/L>Hb≥90g/L女:110g/L>Hb≥90g/L;中度:90g/L>Hb≥60g/L;重度:60g/L>Hb≥30g/L;

極重度:Hb<30g/L。(1)生理性:

(2)病理性:①妊娠中后期的孕婦①生成減少②6個月至2歲的嬰幼兒②破壞過多③老年人(造血功能減退)③失血(二)紅細胞和血紅蛋白減少——貧血血液學基礎(chǔ)※※※貧血發(fā)病機制和病因分類紅細胞生成減少性貧血造血干祖細胞異常造血調(diào)節(jié)異常造血原料不足利用障礙紅細胞破壞過多貧血失血性貧血溶血性貧血出凝血性疾病非出凝血性疾病血液學基礎(chǔ)15正常紅細胞血液學基礎(chǔ)16二.紅細胞的異常形態(tài)檢查(一)紅細胞大小改變:

1.小紅細胞:缺鐵性貧血、遺傳性球形紅細胞增多癥。2.大紅細胞:溶血性貧血及巨幼紅細胞性貧血。3.巨紅細胞和超巨紅細胞:巨幼細胞貧血。4.紅細胞大小不均:嚴重的增生性貧血。血液學基礎(chǔ)17紅細胞大小異常血液學基礎(chǔ)18紅細胞大小不均血液學基礎(chǔ)19(二)紅細胞形態(tài)改變:1.球形紅細胞:見于遺傳性球形紅細胞增多癥。2.橢圓形紅細胞:見于遺傳性橢圓紅細胞增多癥。3.口形紅細胞:遺傳性口形RBC增多癥、DIC、酒精中毒。

4.靶形紅細胞:缺鐵性貧血、地中海貧血5.鐮形紅細胞:存在異常Hb(HbS)。6.紅細胞形態(tài)不整:常見于巨幼細胞性貧血。7.棘細胞:見于β-脂蛋白缺乏的病人。8.裂片細胞:DIC、溶血性貧血、重型地中海貧血9.緡錢狀形成:原發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥血液學基礎(chǔ)20球形、橢圓形、口形、棘形RBC血液學基礎(chǔ)21裂片、淚滴、棘形、盔形、鐮形RBC血液學基礎(chǔ)22靶形、半島形、半月形、拖鞋形、環(huán)形

血液學基礎(chǔ)23

紅細胞聚集緡錢狀聚集血液學基礎(chǔ)24(三)紅細胞內(nèi)的異常結(jié)構(gòu):1、堿性點彩紅細胞:見于鉛中毒2、染色質(zhì)小體:巨幼貧、溶貧及脾切除后3、卡波氏環(huán):溶貧、巨幼貧、鉛中毒等4、有核紅細胞:溶貧及珠蛋白生成障礙性貧血血液學基礎(chǔ)25染色質(zhì)小體、卡波氏環(huán)、嗜堿點彩紅細胞血液學基礎(chǔ)26

有核紅細胞(NRBC):血液學基礎(chǔ)27EoBaMoNeLyNRBC修正的WBC修正后WBC#&NRBC扣除扣除修正WBC修正分類扣除血液學基礎(chǔ)28缺鐵性貧血血液學基礎(chǔ)29巨幼性貧血血液學基礎(chǔ)30溶血性貧血血液學基礎(chǔ)31再生障礙性貧血血液學基礎(chǔ)32網(wǎng)織紅細胞(Ret)的檢測:

成人:0.005~0.015(0.5%~1.5%)

絕對值:(24~84)×109/L新生兒:0.03~0.06(3%~6%)血液學基礎(chǔ)33(一)網(wǎng)織紅細胞測定:

1.反映骨髓紅細胞系統(tǒng)造血情況:

Ret增多:見于溶血性貧血、急性失血性貧血;

Ret降低:見于再生障礙性貧血。

2.貧血療效觀察:治療有效——網(wǎng)織紅細胞增多;

治療無效——網(wǎng)織紅細胞無增長。

3.結(jié)合紅細胞數(shù)量、血紅蛋白量以及紅細胞形態(tài),可初步作出貧血的形態(tài)學診斷。血液學基礎(chǔ)MFRHFRLFRPLT-ORBC-ORETWBCRET散點圖SFLFSC血液學基礎(chǔ)35(二)網(wǎng)織紅細胞的擴展參數(shù)血液學基礎(chǔ)網(wǎng)織紅細胞報告參數(shù)RET%:網(wǎng)織紅細胞百分比RET#:網(wǎng)織紅細胞計數(shù)IRF:未成熟網(wǎng)織紅細胞百分比LFR:低熒光強度網(wǎng)織紅細胞比率MFR:中熒光強度網(wǎng)織紅細胞比率HFR:高熒光強度網(wǎng)織紅細胞比率RET-He網(wǎng)織紅細胞血紅蛋白含量PLT-O光學血小板數(shù)RBC-O光學紅細胞數(shù)IPF幼稚血小板比率血液學基礎(chǔ)37紅細胞比容和有關(guān)參數(shù)的應用(一)HCT/PCV——紅細胞在血液中所占體積的百分比【參考值】

男:0.40~0.50(40%~50%)

女:0.37~0.47(37%~47%)【臨床意義】1.紅細胞比積增多:真紅、血液濃縮。2.紅細胞比積下降:各種貧血。3.臨床上常以紅細胞數(shù)、Hb量來計算幾種紅細胞的平均值,有助于貧血和鑒別診斷。血液學基礎(chǔ)38(二)三種紅細胞平均值的計算:1.紅細胞平均體積(MCV)

MCV=PCV÷RBC2.紅細胞平均血紅蛋白量(MCH)

MCH=Hb÷RBC3.紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)

MCHC=Hb÷PCV血液學基礎(chǔ)39【臨床意義】貧血的形態(tài)學分類類型RBCHGBHCTMCVMCHMCHC病因正C正色素↓↓↓NNNAA、急性失血、溶血、白血病等大C正色素↓↓↓N↑↑N巨幼細胞貧血小C正色素N/↑↓↓↓↓N慢性炎癥、尿毒癥、肝病、腎病小C低色素N/↑↓↓↓↓↓↓↓缺鐵貧、珠蛋白生成障礙性貧血等血液學基礎(chǔ)40(三)紅細胞體積分布寬度血液學基礎(chǔ)41血液學基礎(chǔ)42(二)臨床意義:用于貧血的鑒別診斷

1、小細胞貧血2、大細胞貧血3、正細胞性貧血血液學基礎(chǔ)43血液學基礎(chǔ)44血液學基礎(chǔ)45RBC/PLT通道雙鞘流浮動界標RDW-SD

假設(shè)峰值高度為100%,在20%頻率水平上的分布寬度即為RDW-SD。單位用fL表示。RDW-CV

點L1和L2在總分布區(qū)域中的出現(xiàn)頻率為68.26%,使用下列方程計算RDW-CV=(L2-L1)/(L2+L1)HCT由脈沖信號累積計算得出MCV/MCH/MCHC為計算參數(shù)血液學基礎(chǔ)46血細胞直方圖的臨床應用血液學基礎(chǔ)47(二)紅細胞體積分布直方圖顯示范圍:24~360fL(MCV:80~100fL)相關(guān)參數(shù):MCV、RDW幾種貧血的圖形變化:1、缺鐵性貧血:小C非均一性2、珠蛋白生成障礙性貧血:小C均一性3、鐵粒幼細胞性貧血、缺鐵貧治療后:雙峰4、巨幼貧:大C非均一性5、混合性營養(yǎng)性貧血:RDW明顯增高血液學基礎(chǔ)48(三)血小板直方圖分布范圍:2~20fL反映參數(shù):PLT、MPV、PDW、PCV高位干擾:小RBC、大血小板聚集低位干擾:電流、塵埃等血液學基礎(chǔ)49病例討論:

患者女性、31歲,在過去5年中反復發(fā)生貧血,曾間斷輸血。肌肉內(nèi)鐵劑注射治療前后,見血象如下圖。RBC3.05;HGB58;HCT0.199;MCV65.4;MCH19.0;MCHC291;PLT757.0RBC4.15;HGB93;HCT0.289;MCV69.6;MCH22.4;MCHC322;PLT248.0血液學基礎(chǔ)50WBC的檢測:

(一)白細胞計數(shù):成人:(4~10)×109/L

兒童:(5~12)×109/L

新生兒:(15~20)×109/L

中性桿狀核細胞:1—5%(0.04~0.5)×109/L中性分葉核細胞:50—70%(2.0~7.0)×109/L

淋巴細胞:20—40%(0.8~4.0)×109/L

單核細胞:3—8%(0.12~0.8)×109/L

嗜酸粒細胞:0.5—5%(0.05~0.5)×109/L

嗜堿粒細胞:0—1%(0~0.1)×109/L

血液學基礎(chǔ)51白細胞分類血液學基礎(chǔ)

骨髓(10-12d)

血液

組織10-12h1-3d組織衰亡中性粒細胞動力學原粒早幼粒中幼粒晚幼粒桿狀核分葉核循環(huán)池邊緣池成熟池分裂池貯備池生長成熟池干細胞池血液學基礎(chǔ)53(二)中性粒細胞:1.中性粒系統(tǒng)增多:反應性增多:①急性感染④中毒②嚴重的組織損傷⑤惡性腫瘤③急性大出血、溶血⑥器官移植等異常增生性增多:血液病生理性增多:分娩、運動后、溫度刺激血液學基礎(chǔ)542.

中性粒系統(tǒng)減少:①某些感染:G-桿菌、病毒感染②造血功能異常:AA③化學藥品及放射損害:④自身免疫性疾?。篠LE⑤單核-吞噬細胞系統(tǒng)功能亢進:脾亢血液學基礎(chǔ)553.中性粒系統(tǒng)的核象變化:①核左移---外周血中中性桿狀核粒細胞增多(>0.06),甚至出現(xiàn)晚幼粒,中幼粒、早幼粒、原粒等更幼稚的細胞。②核右移---正常人血中中性粒細胞以三葉核者為主,若五葉核以上者超過3%,或中性分葉過多,大部分以4-5葉或更多。血液學基礎(chǔ)56核左移血液學基礎(chǔ)57左移程度WBCNEU粒細胞形態(tài)診斷輕度輕度↑輕度↑桿狀C>6%感染較輕抵抗力強中度↑↑桿狀C>10%伴中、晚幼粒C感染嚴重重度↑↑或不↑↑↑桿狀C>25%感染更嚴重如類白血病易見于嬰幼兒血液學基礎(chǔ)58核右移

常伴白細胞總數(shù)下降,為骨髓造血功能衰退或缺乏造血物質(zhì)所致。常見于巨幼紅細胞貧血、惡性貧血、抗代謝藥物應用后。若在疾病進行期出現(xiàn)核右移,則提示預后不良。血液學基礎(chǔ)594.中性粒細胞形態(tài)異常:1、中毒性改變:

1)細胞大小不均:慢性炎癥

2)中毒顆粒3)空泡形成

4)杜勒小體5)核變性2、巨多分葉核中性粒細胞:巨幼貧、應用抗代謝藥物后3、棒狀小體:急性白血病4、其他:與遺傳相關(guān)的異常變化血液學基礎(chǔ)601、嗜酸粒細胞增多:①過敏性疾?、诩纳x?、燮つw?、苎翰、菽承盒阅[瘤⑥某些傳染?、咂渌耗I上腺皮質(zhì)功能減低2、嗜酸粒細胞減少:見于傷寒、副傷寒、嚴重燒傷、休克及應用腎上腺皮質(zhì)激素或促腎上腺皮質(zhì)激素后。(三)嗜酸粒細胞(EOS)血液學基礎(chǔ)61EOS計數(shù)可應用于以下方面:1、觀察急性傳染病的預后:急性感染:腎上腺皮質(zhì)激素增加,EOS減少;

感染恢復:腎上腺皮質(zhì)激素減少,EOS增加。2、觀察手術(shù)和燒傷病人的預后:術(shù)后(或燒傷)4小時后嗜酸粒細胞下降,甚至消失,48小時后上升。3、測定腎上腺皮質(zhì)功能。血液學基礎(chǔ)62(四)嗜堿性粒細胞(BASO)1、嗜堿性粒細胞增多:(1)過敏性疾?。?)血液?。?)惡性腫瘤(4)其他:DM、傳染病等2、嗜堿性粒細胞減少:無臨床意義血液學基礎(chǔ)63(五)淋巴細胞(LYM):1、LYM增多:①感染性疾?、谀[瘤性疾?、奂毙詡魅静』謴推冖芤浦才懦夥磻?、LYM減少:血液學基礎(chǔ)643、異形淋巴細胞:a.Ⅰ型泡沫型b.Ⅱ型不規(guī)則型c.Ⅲ型幼稚型血液學基礎(chǔ)65(六)單核細胞(MONO):1、MONO增多:①生理性:嬰幼兒②某些感染:③某些血液?。?、MONO減少:無臨床意義血液學基礎(chǔ)66類白血病與慢粒的鑒別類白血病反應慢粒明確病因有無臨床表現(xiàn)原發(fā)病癥狀明顯消瘦、乏力、低熱、脾大WBC計數(shù)及分類30~100*109/L、分葉、桿狀居多、原粒少見常>100*109/L、可見各階段細胞,與骨髓象相似BASO、EOS不增多常增多粒細胞中毒性改變常明顯不明顯RBC、PLT無明顯變化早期RBC↓PLT↑后期均↓骨髓象無明顯變化極度增生、粒系增生顯著中性粒堿性磷酸酶積分顯著增高積分顯著降低,甚至為0Ph`染色體無可見于90%以上病例血液學基礎(chǔ)67DIFF通道4DL

完全溶解紅細胞血小板在白細胞膜上打孔有大分子有機酸增強EOS染色4DS

對核酸染色縱坐標:側(cè)向熒光(SFL)反應核酸含量橫坐標:側(cè)向散射光(SSC)反應細胞內(nèi)容物復雜程度檢測參數(shù):WBC-D,N+B#,%,L#,%,MO#,%,EOL,#,%,血液學基礎(chǔ)68WBC/BASO通道STROMATOLYSER-FB

低滲、強酸溶血素完全溶解紅細胞除嗜堿細胞以外的白細胞溶解為裸核嗜堿細胞保持原狀檢測參數(shù):WBC-BBASO#,%縱坐標:前向散射光(FSC)反映細胞大小橫坐標:側(cè)向散射光(SSC)反映細胞內(nèi)容物復雜程度嗜堿其他WBC血液學基礎(chǔ)69原理IG可報告參數(shù)IG#/%——通過美國FDA批準IG:未成熟粒細胞——Promelocyte,Myelocyte,Metamyelocyte血液學基礎(chǔ)70ConventionalAlgorithmNewAlgorithmIG檢測區(qū)域固定的門可變的門IG檢測原理血液學基礎(chǔ)71HPC可報告參數(shù)HPC#HPC:HematopieticprogenitorcellFDAclearedIMI-ch血液學基礎(chǔ)

幼稚粒細胞表面脂質(zhì)含量比成熟粒細胞少成熟粒細胞更易被表面活性劑破壞幼稚粒細胞部分受損,含硫氨基酸進入細胞形成保護層成熟粒細胞幼稚粒細胞Lipid-Cholesterol-PhosphoLipid-GlycoLipidSuperSurfactantAminoAcidHPC檢測原理—IMI通道

(1)試劑原理血液學基礎(chǔ)RF(RadioFrequency)細胞內(nèi)密度

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