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文檔簡(jiǎn)介
第十一章糞便檢驗(yàn)
第一節(jié)標(biāo)本采集
本節(jié)考點(diǎn):
(1)概述
(2)標(biāo)本容器
(3)標(biāo)本采集
(-)概述
正常糞便中水分約占3/4,固體成分約占1/4,后者包括食物殘?jiān)?、消化道分泌物、腸道脫落的上皮細(xì)
胞、無機(jī)鹽及大量的細(xì)菌等。糞便檢驗(yàn)的主要目的為:了解消化道以及肝臟、膽道、胰腺等器官有無炎癥、
出血、潰瘍、腫瘤及寄生蟲感染等;根據(jù)糞便的性狀與組成,判斷肝、膽、胰腺等器官的功能;分析有無
腸道致病菌或腸道菌群失調(diào),以防治腸道傳染?。患S便隱血試驗(yàn)作為消化道惡性腫瘤的過篩試驗(yàn)。
(二)標(biāo)本容器
盛標(biāo)本的容器應(yīng)清潔、干燥、有蓋,無吸水和滲漏。細(xì)菌學(xué)檢查,糞便標(biāo)本應(yīng)采集于滅菌、有蓋的容
器內(nèi)。
(三)標(biāo)本采集
1.采集標(biāo)本的量:一般采集指頭大小(約3?5g)的新鮮糞便,盛于清潔、干燥、無吸水性的有蓋容器
內(nèi)。細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)時(shí)的糞便標(biāo)本應(yīng)收集于無菌容器內(nèi)。
2.送檢時(shí)間:標(biāo)本采集后一般應(yīng)于lh內(nèi)檢驗(yàn)完畢,否則可因pH改變及消化酶的作用等,使有形成分
分解破壞及病原菌死亡而導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。檢查阿米巴滋養(yǎng)體時(shí),應(yīng)于排便后立即檢驗(yàn),冬季還需對(duì)標(biāo)本
進(jìn)行保溫處理。
3.采集標(biāo)本的性質(zhì):應(yīng)盡可能挑取含有粘液、膿血等異常成分的糞便。外觀無明顯異常時(shí),應(yīng)于糞便
內(nèi)外多點(diǎn)取樣。
4.隱血試驗(yàn)標(biāo)本:隱血試驗(yàn)時(shí),應(yīng)囑咐患者素食3d后留取標(biāo)本,禁服VitC及鐵劑等藥品。
5.特殊情況的標(biāo)本:無糞便排出而又必須檢驗(yàn)時(shí),可采用肛門指診或采便管采集標(biāo)本。
6.寄生蟲檢驗(yàn)標(biāo)本:檢查燒蟲時(shí)需要用透明薄膜拭子或棉拭子于清晨排便前拭取肛門四周,并立即鏡
檢。
7.24h標(biāo)本檢查膽石、胰石、寄生蟲體及蟲卵計(jì)數(shù)時(shí),應(yīng)收集24h內(nèi)糞便送檢。
第二節(jié)理學(xué)檢查
本節(jié)考點(diǎn):
(1)量
(2)外觀
(3)寄生蟲與結(jié)石
(-)量
糞便量的多少與進(jìn)食量、食物的種類及消化器官的功能狀態(tài)有直接關(guān)系。進(jìn)食粗糙糧食及含纖維素較
多的食物,糞便量相對(duì)較多。反之,則相對(duì)較少。
(二)外觀
1.性狀
正常成人糞便為成形的、黃褐色軟便,嬰兒糞便多為黃色、金黃色糊狀便。
(1)粘液便:正常糞便中含有少量粘液,但因與糞便均勻混合而不易被發(fā)現(xiàn)。粘液增多提示腸道受刺
激或有炎癥,常見于各種腸炎、細(xì)菌性痢疾及阿米巴痢疾、急性血吸蟲病等。小腸炎癥時(shí),增多的粘液均
勻混合于糞便之中;而來自大腸病變的粘液則一般附著于糞便表面。
(2)鮮血便:提示下消化道有出血,常見于肛裂、痔瘡、直腸息肉及結(jié)腸癌等。
(3)膿便及膿血便:常見于細(xì)菌性痢疾、阿米巴痢疾、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸癌或直腸癌等。其中細(xì)菌
性痢疾以膿及粘液為主,膿中帶血;阿米巴痢疾以血為主,血中帶膿,呈暗紅色稀果醬樣。
(4)柏油樣便:上消化道出血時(shí)糞便呈黑色或褐色、質(zhì)軟且富有光澤,故稱柏油樣便。上消化道出血
量超過50ml時(shí),可見到柏油樣便。服用鐵劑、活性炭之后也可排出黑色便,但無光澤,隱血試驗(yàn)為陰性。
(5)臍狀便:呈粘陳狀、膜狀或紐帶狀物,多見于腸易激綜合征患者腹部絞痛之后。某些慢性細(xì)菌性
痢疾患者也可排出類似的糞便,痙攣性便秘時(shí)糞便表面亦可有少量的粘膝。
(6)稀糊狀或稀汁樣便:見于各種因素引起的腹瀉,尤其是急性胃腸炎,為腸蠕動(dòng)亢進(jìn)或分泌增多所
致。
(7)白陶土樣便:膽道梗阻時(shí),進(jìn)入腸道的膽汁減少或缺如,糞膽素生成減少甚至缺如,使糞便呈灰
白色。主要見于梗阻性黃疽等。領(lǐng)餐造影后也可使糞便呈現(xiàn)灰白色,但有明顯的節(jié)段性。
(8)米淚樣便:呈乳白色淘米水樣,多見于霍亂、副霍亂。
(9)球形硬便:糞便在腸道內(nèi)停留過久,水分過度吸收所致.常見于習(xí)慣性便秘患者,亦可見于老年
人排便無力時(shí)。
(10)乳凝塊狀便:嬰兒糞便中可見白色、黃色或綠色的乳凝塊,提示脂肪或酪蛋白消化不完全,常
見于嬰兒消化不良等。
2.顏色
正常人的糞便因含糞膽素而呈黃色或褐色。嬰兒的糞便因含膽綠素故呈黃綠色。糞便的顏色易受食物
及藥物因素的影響。在病理情況下,糞便也可呈現(xiàn)不同的顏色變化(表1—11一1)。
表1-11-1糞便顏色改變及可能的原因
顏色可能的原因
鮮紅色腸道下段出血,如痔瘡、肛裂、直腸癌等
喑紅色(果醬色)阿米巴痢疾
白色或灰白色膽道梗阻、鐵餐造影
綠色乳兒的糞便中因含膽綠素而呈現(xiàn)綠色
黑色或柏油色上消化道出血,服(食)用鐵劑、動(dòng)物血、活性炭及某些中藥
(三)寄生蟲與結(jié)石
糞便中的較大蟲體(如蛔蟲、燒蟲、絳蟲節(jié)片等)肉眼即可以發(fā)現(xiàn)。而將糞便過篩沖洗后可發(fā)現(xiàn)鉤蟲、
鞭蟲等細(xì)小蟲體。糞便中排出的結(jié)石,最重要的是膽結(jié)石。另外,還有胰石、腸石等。較大者肉眼可見,
較小者需用銅篩淘洗糞便后才能發(fā)現(xiàn)。
第三節(jié)化學(xué)檢驗(yàn)
本節(jié)考點(diǎn):
(1)隱血試驗(yàn)
(2)脂肪
(3)膽色素
(一)隱血試驗(yàn)
胃腸道少量出血時(shí),糞便外觀的顏色可無明顯變化,因紅細(xì)胞被溶解破壞,故顯微鏡也觀察不到紅細(xì)
胞,這種肉眼及顯微鏡均不能證明的出血稱為隱血。隱血可以通過隱血試驗(yàn)來證實(shí),用化學(xué)法或免疫法等
方法來證實(shí)隱血的試驗(yàn),稱為隱血試驗(yàn)。
1.檢測(cè)原理
(1)化學(xué)法:利用血紅蛋白中的含鐵血紅素有類似過氧化物酶的作用,其可催化分解過氧化氫,釋放
新生態(tài)氧,新生態(tài)氧因氧化能力較強(qiáng),可氧化色原物而使之呈色。目前,臨床應(yīng)用中有以四甲基聯(lián)苯胺和
愈創(chuàng)木酯為顯色基質(zhì)的隱血試帶,使用非常方便,患者可自行留取標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè),其可用于大規(guī)模胃腸道
腫瘤的普查。其化學(xué)法隱血試驗(yàn)的比較見表l-ll-2o
表1T1-2幾種化學(xué)法隱血試驗(yàn)的比較
方法靈敏度(Hb最小檢出量)檢出血量臨床應(yīng)用
鄰聯(lián)甲苯胺法高,0.2?lmg/L1?5nli易出現(xiàn)假陽(yáng)性
鄰甲苯胺法高,0.2~lmg/L1?5ml易出現(xiàn)假陽(yáng)性
還原酚獻(xiàn)法高,lmg/L試劑不夠穩(wěn)定,淘汰
聯(lián)苯胺法中,2mg/L5~10ml試劑有致癌性,淘汰
匹拉米洞法中,1?5mg/L5~10ml靈敏度適中,較適宜
無色孔雀綠法中,1?5mg/L,未加入異喳琳時(shí)為6?10mg/L5~10ml靈敏度適中,較適宜
愈創(chuàng)木酯法低,6?10mg/L20ml假陽(yáng)性極少,假陰性較高
(2)免疫法:為了避免諸多因素的影響,目前臨床上逐漸推廣了免疫學(xué)方法,如酶聯(lián)免疫吸附法、膠
體金法、免疫斑點(diǎn)法、膠乳凝聚法及反向間接血凝法等。免疫學(xué)方法具有很好的靈敏度,一般血紅蛋白為
0.2mg/L或0.03mg/g糞便可得到陽(yáng)性結(jié)果。
2.方法學(xué)評(píng)價(jià)
(1)化學(xué)法:操作簡(jiǎn)單易行,但缺乏特異性和準(zhǔn)確性。雖然檢測(cè)的基本原理相同,但實(shí)際應(yīng)用中受試
劑類型、糞便中血紅蛋白的多少、過氧化氫的濃度、觀察時(shí)間、血液在腸道中滯留時(shí)間、標(biāo)本量的多少以
及食物、藥物等眾多因素的影響,而使結(jié)果差異較大。①動(dòng)物性食品可使隱血試驗(yàn)出現(xiàn)假陽(yáng)性;大量生食
蔬菜也可使結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。②如服用大量VitC可出現(xiàn)假陰性。血液在腸道中停留過久,血紅蛋白被細(xì)
菌降解也會(huì)導(dǎo)致假陰性等。因此,采用此類方法檢驗(yàn)隱血前,要求患者素食3d,并且不要服用VitC等還原
性的藥物。
(2)免疫學(xué):具有快速、方便、特異、靈敏度和特異性高等眾多優(yōu)點(diǎn),但在臨床使用中也存在假陽(yáng)性
與假陰性。①假陽(yáng)性:因靈敏度過高而引起,一些胃腸道生理性失血?2ml/24h),或服用刺激胃腸道的
藥物引起的消化道出血(2~5ml/24h)可為陽(yáng)性。②假陰性:消化道出血后,血紅蛋白在胃腸道中被消化
酶及細(xì)菌作用后分解而使免疫原性減弱、消失或改變,而出現(xiàn)假陰性。故免疫學(xué)法主要用于下消化道出血
檢驗(yàn),而40%—50%上消化道出血不能檢出;大量出血時(shí)。血紅蛋白(抗原)濃度過高造成的與單克隆抗體
不匹配(即后帶現(xiàn)象),亦可出現(xiàn)假陰性。
3.參考值:陰性。
4.臨床意義
消化道疾病如消化道潰瘍,藥物(如阿司匹林、糖皮質(zhì)激素、叫|深美辛等)對(duì)胃黏膜的損傷、腸結(jié)核、
克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、鉤蟲病、結(jié)腸息肉以及消化道腫瘤(如胃癌、結(jié)腸癌等),糞便隱血試驗(yàn)常為
陽(yáng)性。消化道潰瘍經(jīng)治療后糞便顏色已趨正常,但隱血試驗(yàn)陽(yáng)性仍可持續(xù)5?7d,隱血試驗(yàn)轉(zhuǎn)為陰性可作為
判斷出血完全停止的可靠指標(biāo)。隱血試驗(yàn)可作為消化道惡性腫瘤普查的一個(gè)篩選指標(biāo),其連續(xù)檢測(cè)對(duì)早期
發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌、胃癌等惡性腫瘤有重要的價(jià)值。
(二)脂肪
糞便脂肪檢查常采用稱量法、滴定法,在普通膳食情況下,脂肪約占糞便干重的10%?20虬正常成人
24h糞便中的脂肪總量約為2?5g,如果超過6g,則稱為脂肪瀉。常見于梗阻性黃疸、慢性胰腺炎、胰腺癌、
胰腺纖維囊性病以及小腸病變等。
(三)膽色素
1.糞便膽紅素:正常人糞膽紅素陰性。嬰幼兒因正常腸道菌群尚未建立,糞便膽紅素常為陽(yáng)性,糞便
可呈金黃色。成年人可因大量應(yīng)用抗生素、嚴(yán)重腹瀉、腸蠕動(dòng)加速等使膽紅素也為陽(yáng)性。
2.糞膽原:正常人100g糞便中糞膽原含量為75?350mg。糞便中糞膽原含量在梗阻性黃疸時(shí)明顯減少,
并與梗阻程度密切相關(guān);而各種溶血性疾病,如陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥、珠蛋白生成障礙性貧血、自
身免疫性溶血性貧血、蠶豆病、血型不合的輸血反應(yīng)及瘧疾等可表現(xiàn)為強(qiáng)陽(yáng)性。
3.糞膽素:正常人膽汁中的膽紅素在腸道經(jīng)細(xì)菌作用后轉(zhuǎn)變成尿(糞)膽原。尿膽原除部分被腸道重
吸收進(jìn)入腸肝循環(huán)外,大部分在結(jié)腸被氧化為糞膽素,并隨糞便排出體外。膽道梗阻時(shí),糞便中無糞膽素
而呈白陶土色,氯化高汞試驗(yàn)為陰性反應(yīng)。
第四節(jié)顯微鏡檢查
本節(jié)要點(diǎn):
(1)操作方法
(2)細(xì)胞
(3)食物殘?jiān)?/p>
(4)結(jié)晶
(5)病原微生物
(6)糞便分析工作站
(-)操作方法
最常用的方法是糞便生理鹽水涂片檢驗(yàn)。滴加1?2滴生理鹽水在載玻片上,以竹簽挑取含有粘液或血
液等可疑部分的少量糞便,若外觀無異常則需糞便內(nèi)外多點(diǎn)取材,混懸于生理鹽水中制成涂片,厚度以通
過懸液能看清紙上的字跡為宜。加上蓋玻片,鏡檢時(shí)先用低倍鏡觀察全片,觀察有無寄生蟲卵、原蟲及其
包囊等,再用高倍鏡仔細(xì)尋找和觀察病理性成分的形態(tài)結(jié)構(gòu)。進(jìn)行顯微鏡檢驗(yàn)時(shí),原則上要觀察10個(gè)以上
的高倍視野,并按表IT卜3方式報(bào)告結(jié)果。
表1-11-3糞便中鏡檢細(xì)胞報(bào)告方式
10個(gè)以上高倍鏡視野所見情況報(bào)告方式(/HPF)
僅看到一個(gè)某種細(xì)胞偶見
有時(shí)不見,最多見到2?3個(gè)0?3
最少可見5個(gè),最多10個(gè)5-10
細(xì)胞數(shù)大多超過10個(gè)以上多數(shù)
細(xì)胞均勻布滿視野不能計(jì)數(shù)滿視野
(-)細(xì)胞
1.白細(xì)胞:正常糞便中偶可見到白細(xì)胞,主要是中性粒細(xì)胞。腸道炎癥時(shí)其數(shù)量增多,一般腸炎少于
15個(gè)/HPF,大量白細(xì)胞、成堆膿細(xì)胞或小吞噬細(xì)胞見于細(xì)菌性痢疾,嗜酸性粒細(xì)胞見于過敏性腸炎、寄生
蟲病和阿米巴痢疾。并且與炎癥輕重程度及部位相關(guān)。在腸道寄生蟲感染(尤其是鉤蟲病及阿米巴痢疾時(shí))
和過敏性腸炎時(shí),糞便中可見較多的嗜酸粒細(xì)胞。
2.紅細(xì)胞:正常糞便中無紅細(xì)胞,上消化道出血時(shí)紅細(xì)胞在胃及腸道中被消化液破壞,必須通過隱血
試驗(yàn)來證實(shí)。而下消化道的病變,如炎癥、痔瘡、直腸息肉、腫瘤及其他出血性疾病時(shí)可見到多少不等的
紅細(xì)胞。出現(xiàn)見于細(xì)菌性痢疾(RBC<WBC,多分散分布、形態(tài)正常)、阿米巴痢疾(RBOWBC>多成堆分
布、有殘碎現(xiàn)象)、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸癌等。
3.大吞噬細(xì)胞:在細(xì)菌性痢疾時(shí),??梢姷捷^多的吞噬細(xì)胞。因此,吞噬細(xì)胞可作為診斷急性細(xì)菌性
痢疾的依據(jù);吞噬細(xì)胞也可見于急性出血性腸炎或偶見于潰瘍性結(jié)腸炎。
4.上皮細(xì)胞:在生理?xiàng)l件下,少量脫落的腸道上皮細(xì)胞大多被破壞,故正常糞便中很難發(fā)現(xiàn)。在結(jié)腸
炎癥,如壞死性腸炎、霍亂、副霍亂、偽膜性腸炎等時(shí)上皮細(xì)胞數(shù)量增多。其中以偽膜性腸炎的腸黏膜柱
狀上皮細(xì)胞增多最明顯。
(三)食物殘?jiān)?/p>
L脂肪:糞便中有中性脂肪(脂肪小滴)、游離脂肪酸和結(jié)合脂肪酸3種形式。正常情況下,食入的
脂肪經(jīng)胰脂肪酶消化分解后大多被吸收,故糞便中很少見到。鏡檢脂肪小滴>60個(gè)/HPF,為脂肪排泄增多,
多見于腹瀉、梗阻性黃疸及胰腺外分泌功能減退等。糞便量多、泡沫狀、灰白色、有光澤、惡臭是慢性胰
腺炎的糞便特征,鏡檢時(shí)可見較多的脂肪小滴。
2.淀粉顆粒:正常糞便中較少見。碳水化合物消化不良及腹瀉患者的糞便中可大量出現(xiàn)。
3.肌肉纖維:正常人大量食肉后,糞便中可看到少量黃色、柱狀、兩端圓形、有不清楚橫紋的肌肉纖
維,但在一張標(biāo)準(zhǔn)蓋玻片(18mmXl8mm)范圍內(nèi)不應(yīng)多于10個(gè)。肌肉纖維增多時(shí)可見于腹瀉、腸蠕動(dòng)亢進(jìn)
或蛋白質(zhì)消化不良等。胰腺外分泌功能減退時(shí),肌肉纖維增多,且其橫紋易見,如果見到細(xì)胞核,則是胰
腺功能障礙的佐證。
4.結(jié)締組織:為無色或微黃色、成束且邊緣不清的線條狀物。于玻片上加入數(shù)滴5moi/L乙酸后,彈力
纖維可變得非常清晰;而膠原纖維變得膨大。在正常情況下結(jié)締組織少見,胃蛋白酶缺乏時(shí)可較多的出現(xiàn)。
5.植物纖維及植物細(xì)胞:形態(tài)多種多樣,植物細(xì)胞可呈多角形、圓形、長(zhǎng)圓形、雙層胞壁等,細(xì)胞內(nèi)
有時(shí)含有淀粉顆?;蛉~綠素小體。植物纖維導(dǎo)管常為螺線形,而植物毛則是一端呈尖形的管狀、細(xì)長(zhǎng)、有
強(qiáng)折光的條狀物。
(四)結(jié)晶
正常人糞便中可見到多種結(jié)晶,如草酸鈣、磷酸鈣、碳酸鈣等結(jié)晶,一般無臨床意義。病理性結(jié)晶有:
①夏科-雷登結(jié)晶:為菱形無色透明結(jié)晶,其兩端尖長(zhǎng)、大小不等、折光性強(qiáng),是嗜酸粒細(xì)胞破裂后嗜酸性
顆粒相互融合形成。多見于阿米巴痢疾及過敏性腸炎的糞便中。②血紅素結(jié)晶:斜方形結(jié)晶,棕黃色,不
溶于氫氧化鉀溶液,遇硝酸呈青色,見于胃腸道出血后的糞便內(nèi)。③脂肪酸結(jié)晶:脂肪酸吸收不良所致,
多見于梗阻性黃疸患者。
(五)病原微生物
1.細(xì)菌
細(xì)菌約占糞便干重的1/3。成人糞便中主要的菌群是大腸埃希菌、腸球菌和厭氧菌,約占80%。另外,
還有少量的產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌、芽胞菌及酵母菌等。健康嬰幼兒糞便中主要是雙歧桿菌、擬桿菌、腸桿
菌、腸球菌、葡萄球菌等。成人糞便中菌量與菌譜處于相對(duì)穩(wěn)定狀態(tài),保持著細(xì)菌與宿主之間的生態(tài)平衡。
糞便中球菌和桿菌的比例大約為1:10。長(zhǎng)期使用廣譜抗生素、免疫抑制劑及慢性消耗性疾病患者可發(fā)生腸
道菌群失調(diào),引起革蘭陰性桿菌數(shù)量嚴(yán)重減少甚至消失,而葡萄球菌或真菌等明顯增多,糞便中球菌/桿
菌比值變大。糞便涂片染色后油鏡觀察可初步判斷細(xì)菌的種類,但確證需通過細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定。采用糞便
懸滴檢驗(yàn)和涂片染色篩選霍亂弧菌。
2.寄生蟲卵
糞便涂片中可見到蛔蟲卵、鞭蟲卵、鉤蟲卵、蟒蟲卵、血吸蟲卵、肺吸蟲卵、肝吸蟲卵、姜片蟲卵等。
檢測(cè)時(shí)要注意蟲卵的大小、色澤、形狀、卵殼厚薄及內(nèi)部結(jié)構(gòu)等多方面特點(diǎn),認(rèn)真觀察后予以鑒別。臨床
上常采用飽和鹽水漂浮法、離心沉淀法、靜置沉淀集卵法等方法來提高陽(yáng)性檢出率。
左圖蟒蟲卵右圖豬帶絳蟲5P
日本血吸蟲蟲卵
3.腸道原蟲
①溶組織阿米巴:取新鮮糞便的膿血粘液部分進(jìn)行糞便鏡檢可見到滋養(yǎng)體,并可找到包囊。②藍(lán)賈第
鞭毛蟲:滋養(yǎng)體的形態(tài)如縱切的半個(gè)去核的梨,前端鈍圓,后端尖細(xì),背面隆起而腹面凹陷,兩側(cè)對(duì)稱形
似勺形,腹部前半部有吸盤,借此可吸附于腸黏膜上。③隱抱子蟲:除糞便常規(guī)檢驗(yàn)外,常用改良抗酸染
色法、金胺-酚-改良抗酸染色法等方法來提高陽(yáng)性檢出率。④人芽抱子蟲:人芽抱子蟲與白細(xì)胞及原蟲包
囊形態(tài)十分相似,這時(shí)可借破壞試驗(yàn)來進(jìn)行鑒別,即用水代替生理鹽水迅速做顯微鏡檢驗(yàn),人芽抱子蟲遇
水被破壞而消失,白細(xì)胞與原蟲則因不易破壞而仍可看見。
4.酵母菌
糞便中??梢姷浇湍妇瑸槁褕A形,其排列因芽生增殖呈出芽或短鏈狀。
5.真菌
正常糞便中少見,應(yīng)排除容器污染或糞便顯露室溫下過久污染所致。真菌抱子直徑約3?5um,橢圓形,
有較強(qiáng)的折光性,革蘭染色陽(yáng)性,大都有菌絲同時(shí)出現(xiàn)。一般見于應(yīng)用大量抗生素所致的腸道菌群紊亂,
引起真菌性二重感染。
(六)糞便分析工作站
糞便分析工作站是繼尿沉渣分析工作站應(yīng)用后的最新一代工作站系統(tǒng)。糞便分析工作站代替了傳統(tǒng)的
濕片顯微鏡法來檢驗(yàn)糞便中的有形成分。糞便工作站系統(tǒng)包括標(biāo)本濃縮收集管、自動(dòng)加樣裝置、流動(dòng)計(jì)數(shù)
室、顯微鏡(含明視野、偏振光和相差)系統(tǒng)和微電腦控制臺(tái)等。與傳統(tǒng)的鏡檢方法相比,該系統(tǒng)具有許
多優(yōu)點(diǎn)。目前,糞便分析工作站剛進(jìn)入臨床,所具有的優(yōu)點(diǎn)必將使其逐漸得到推廣與普及。糞便分析工作
站的優(yōu)點(diǎn)與評(píng)價(jià)見表
表1-11-4糞便分析工作站的優(yōu)點(diǎn)與評(píng)價(jià)
優(yōu)點(diǎn)評(píng)價(jià)
無需特操作簡(jiǎn)便、速度快捷;只需按提示按鈕,工作站將在數(shù)秒內(nèi)完成自動(dòng)吸樣、自動(dòng)染色、
殊的培定量標(biāo)本輸送進(jìn)行分析,自動(dòng)沖洗全過程,可以重復(fù)進(jìn)行測(cè)試。并與顯微鏡系統(tǒng)、電腦、
訓(xùn)打印機(jī)組合,可儲(chǔ)存和查詢檢驗(yàn)結(jié)果,并可打印報(bào)告單
陽(yáng)性率標(biāo)本濃縮收集管能對(duì)糞便進(jìn)行濃集和過濾處理。避免糞便粗渣對(duì)視察視野的影響,使鏡
提高下視野非常清晰,易于發(fā)現(xiàn)病理成分。
定量和
染色檢具有標(biāo)本染色和不染色雙通道流動(dòng)計(jì)數(shù)室,經(jīng)過雙重計(jì)數(shù),從而提高陽(yáng)性檢出率。
測(cè)
高安全標(biāo)本前處理是在糞便濃縮離心管內(nèi)經(jīng)過甲醛殺菌、乙酸乙酯乳化的無害化處理,達(dá)到無
性封閉臭無污染。處理后標(biāo)本分析全過程均在封閉系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行,避免糞便標(biāo)本對(duì)操作人員的危
系統(tǒng)害和環(huán)境污染。
成本低每次檢驗(yàn)完后會(huì)自動(dòng)清洗管道及雙流動(dòng)計(jì)數(shù)室,無須吸管、載玻片、蓋玻片等。
第五節(jié)糞便檢驗(yàn)的質(zhì)量控制
本節(jié)要點(diǎn):
(1)標(biāo)本采集與運(yùn)送
(2)糞便顯微鏡檢驗(yàn)的質(zhì)量控制
(3)隱血試驗(yàn)的質(zhì)量控制
(一)標(biāo)本的采集與運(yùn)送
1.容器:要求干凈、大小適宜,盛便后不漏不溢,無吸水性、不破壞糞便有形成分,且標(biāo)志明顯。最
好是使用一次性的有蓋塑料盒,細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)要采用無菌容器。
2.取材:應(yīng)盡可能采集含膿血、粘液等異常部分的新鮮糞便;外觀無異常糞便應(yīng)從淺、深處多處取材;
常規(guī)檢驗(yàn)應(yīng)取指頭大小(5?10g)或稀便2ml,濃集卵時(shí)至少要取雞蛋大小糞便,盡快處理。標(biāo)本應(yīng)無尿液、
藥物等的污染。
3.及時(shí)檢驗(yàn):標(biāo)本采集后應(yīng)在lh內(nèi)完成檢驗(yàn),否則可因pH及消化酶等影響導(dǎo)致有形成分被破壞。
4.特殊檢驗(yàn):如阿米巴標(biāo)本應(yīng)注意保溫等。
(二)糞便顯微鏡檢驗(yàn)的質(zhì)量控制
1.檢驗(yàn)人員:要掌握糞便中正常和異常成分的形態(tài)特點(diǎn)以及相似物的鑒別方法,提高專業(yè)水平和鏡檢
識(shí)別能力,并且要有責(zé)任心,能細(xì)致耐心地工作。
2.器材要求:玻片要用清潔的玻片,生理鹽水要定期更換,防止被真菌污染。
3.涂片:取材時(shí)要求挑取適量的異常部分標(biāo)本涂片,涂片要厚薄適宜。
4.顯微鏡檢驗(yàn):要按照操作規(guī)程,先用低倍鏡觀察全片,再用高倍鏡檢驗(yàn)。高倍鏡要觀察10個(gè)以上視
野,以防漏檢。
5.特殊檢驗(yàn):在溫度較低時(shí),檢驗(yàn)阿米巴原蟲要注意保溫。除標(biāo)本保溫外,可將生理鹽水及載玻片預(yù)
溫后涂片,并快速予以檢驗(yàn)。必要時(shí)可采用集卵法檢驗(yàn)寄生蟲及蟲卵,以提高檢出率。
(三)隱血試驗(yàn)的質(zhì)量控制
1.飲食控制:囑咐患者在試驗(yàn)前3d內(nèi)要禁食影響試驗(yàn)的食品和藥物,如動(dòng)物血、肉類、VitC等,否則
可能會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性。
2.器材及試劑的要求:試驗(yàn)前要鑒定IM)”最好新鮮配制。試驗(yàn)器具要干凈,標(biāo)本不能被血液或膿液污
染,否則可導(dǎo)致假陽(yáng)性。
3.規(guī)范化操作:要嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止出現(xiàn)結(jié)果的誤判。每天用陽(yáng)性和陰性質(zhì)控標(biāo)本進(jìn)行對(duì)照。
4.注意結(jié)果分析:免疫學(xué)法檢測(cè)時(shí)要注意后帶現(xiàn)象,必要時(shí)可將糞便稀釋后重做實(shí)驗(yàn)。膠體金法要注
意對(duì)照線的出現(xiàn)與否,無對(duì)照線要檢驗(yàn)試帶是否失效。
【習(xí)題1】艾滋病伴發(fā)腸道隱抱子蟲感染時(shí)糞便可呈
A.柏油樣便
氏白陶土樣便
C.鮮血便
D.稀汁樣便
E.凍狀便
。[答疑編號(hào)500731110201]
『正確答案JD
【習(xí)題2]糞便中找到何種細(xì)胞有助于細(xì)菌性痢疾的診斷
A.中性粒細(xì)胞
B.淋巴細(xì)胞
C.腸上皮細(xì)胞
D.吞噬細(xì)胞
E.紅細(xì)胞
■[答疑編號(hào)500731110202]
r正確答案JD
【習(xí)題3】糞便中最小的寄生蟲卵是
A.鉤蟲卵
B.蛔蟲卵
C.鞭蟲卵
D.肺吸蟲卵
E.華枝睪吸蟲卵
。[答疑編號(hào)500731110203]
[正確答案JE
鞭蟲而肺吸蟲即鉤蟲卵
華枝至吸蟲卵人蛔蟲卵塊則P
血吸蟲卵肺吸蟲卯帶姝蟲
【習(xí)題4】免疫學(xué)法的糞便隱血試驗(yàn)具有許多優(yōu)點(diǎn),但除外以下那項(xiàng)
A.快速方便
B.特異性強(qiáng)
C.不須飲食控制
D.不會(huì)出現(xiàn)免疫學(xué)反應(yīng)的帶現(xiàn)象
E.靈敏度高
2[答疑編號(hào)500731110204]
『正確答案」D
第十二章腦脊髓液檢查
腦脊液(CSF)是存在于腦室和蛛網(wǎng)膜下腔內(nèi)的一種無色透明的液體,70%來自腦室脈絡(luò)叢主動(dòng)分泌和
超濾所形成的液體,30%由大腦和脊髓細(xì)胞間隙所產(chǎn)生。生理情況下,正常成人腦脊液總量為120?180ml
(平均150ml)。腦脊液具有重要的生理作用:①緩沖、減輕或消除外力對(duì)腦組織和脊髓的損傷。②調(diào)節(jié)顱
內(nèi)壓。③供給中樞神經(jīng)系統(tǒng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并運(yùn)走代謝產(chǎn)物。④調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)堿貯量,維持腦脊液pH在7.31?
7.34。⑤轉(zhuǎn)運(yùn)生物胺類物質(zhì),參與神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)。
第一節(jié)標(biāo)本采集與處理
本節(jié)考點(diǎn):
(1)腦脊液檢驗(yàn)的適應(yīng)證和禁忌證
(2)標(biāo)本采集與處理
(-)腦脊液檢驗(yàn)的適應(yīng)證和禁忌證
腦脊液檢驗(yàn)需要進(jìn)行腰椎穿刺采集標(biāo)本,必要時(shí)行小腦延髓池和腦室穿刺。腦脊液穿刺的時(shí)機(jī)與疾病
有關(guān),化膿性腦膜炎于發(fā)病后1?2d、病毒性腦膜炎于發(fā)病后3?5d、結(jié)核性腦膜炎于發(fā)病后1?3周、皰
疹性腦膜炎于流行性感冒前驅(qū)癥狀期開始后5?7d穿刺采集標(biāo)本。由于腦脊液標(biāo)本采集有一定的創(chuàng)傷性,
因此,臨床應(yīng)用中必須要嚴(yán)格掌握其適應(yīng)證和禁忌證。腦脊液檢驗(yàn)的適應(yīng)證和禁忌證見表1-12-1。
表1T2T腦脊液檢查的適應(yīng)證和禁忌證
適應(yīng)證禁忌證
有腦膜刺激征者顱內(nèi)高壓者(易誘發(fā)腦疝)
可疑顱內(nèi)出血者、腦膜白血病和腫瘤顱內(nèi)轉(zhuǎn)移者顱后窩占位性病變者
原因不明的劇烈頭痛、昏迷、抽搐或癱瘓者處于休克、全身衰竭狀態(tài)者
脫髓鞘疾病者穿刺局部有化膿性感染者
中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病椎管內(nèi)給藥治療、麻醉和椎管造影者
(二)標(biāo)本采集與處理
腰椎穿刺成功后立即測(cè)定腦脊液壓力,然后留取腦脊液標(biāo)本于3個(gè)無菌試管中,每個(gè)試管1?2ml。第
一管做病原生物學(xué)檢驗(yàn),第二管做化學(xué)和免疫學(xué)檢驗(yàn),第三管做理學(xué)和細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)。標(biāo)本采集后應(yīng)立即送
檢,并于lh內(nèi)檢驗(yàn)完畢。因標(biāo)本放置過久,可造成細(xì)胞破壞、葡萄糖等物質(zhì)分解、細(xì)菌溶解等,影響檢驗(yàn)
結(jié)果。腦脊液標(biāo)本應(yīng)盡量避免凝固和混入血液。若混入血液應(yīng)注明,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)做校正。
第二節(jié)理學(xué)檢查
本節(jié)考點(diǎn):
(1)顏色
(2)透明度
(3)凝固性
(4)比密
(-)顏色
肉眼觀察腦脊液顏色變化,分別以無色、乳白色、紅色、棕色或黑色、綠色等描述。正常腦脊液無色
透明,新生兒膽紅素較多可呈黃色。當(dāng)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有炎癥、損傷、腫瘤或梗阻時(shí),破壞了血-腦脊液屏障,
使腦脊液成分發(fā)生改變,而導(dǎo)致其顏色發(fā)生變化。腦脊液的顏色變化及其常見的原因見表1-12-2;腦脊液
新鮮出血與陳舊性出血的鑒別見表1-12-3;腦脊液呈黃色稱為黃變癥,其原因及臨床意義見表1-12-4?
表1-12-2腦脊液常見的顏色變化及臨床意義
顏色原因臨床意義
無色正常腦脊液、病毒性腦炎、輕型結(jié)核性腦膜炎、脊髓灰質(zhì)炎、神經(jīng)梅毒
紅色出血穿刺損傷出血、蛛網(wǎng)膜下腔或腦室出血
黃色黃變癥陳舊出血、黃疸、淤滯和梗阻、黃色素、胡蘿卜素、黑色素、脂色素增高
白色白細(xì)胞增高腦膜炎雙球菌、肺炎球菌、溶血性鏈球菌引起的化膿性腦膜炎
綠色膿性分泌物增多銅綠假單胞菌性腦膜炎、急性肺炎雙球菌性腦膜炎
褐色色素增多腦膜黑色素肉瘤、黑色素瘤
表1-12-3腦脊液新鮮性出血與陳舊性出血的鑒別,
項(xiàng)目新鮮性出血陳舊性出血
外觀渾濁清晰、透明
易^疑性易凝不易凝
離心后上清液無色、透明紅色、黃褐色或檸檬色
紅細(xì)胞形態(tài)無變化皺縮
上清液0B試驗(yàn)多為陰性陽(yáng)性
白細(xì)胞不增高繼發(fā)性或反應(yīng)性增高
表1-12-4腦脊液黃變癥的原因及臨床意義
黃變
原因臨床意義
癥
出血
紅細(xì)胞破壞,膽紅素增加陳舊性蛛網(wǎng)膜下腔出血或腦出血
性
黃疸
膽紅素增高黃疸性肝炎、肝硬化、鉤端螺旋體病、膽管梗阻、新生兒溶血癥
性
淤滯
紅細(xì)胞滲出,膽紅素增高顱內(nèi)靜脈、腦脊液淤滯
性
梗阻
蛋白質(zhì)含量顯著增高髓外腫瘤等所致的椎管梗阻
性
(二)透明度
肉眼觀察腦脊液透明度變化,分別以“清晰透明”、“微渾”、“渾濁”等描述。正常腦脊液清晰透
明。腦脊液的透明度與其所含的細(xì)胞數(shù)量和細(xì)菌多少有關(guān),當(dāng)腦脊液白細(xì)胞超過300X106/L時(shí),可呈渾濁:
腦脊液中蛋白質(zhì)明顯增高或含有大量細(xì)菌、真菌時(shí),也可使腦脊液渾濁。結(jié)核性腦膜炎的腦脊液可呈毛玻
璃樣的渾濁,化膿性腦膜炎的腦脊液呈膿性或塊樣渾濁,穿刺損傷性腦脊液可呈輕微的紅色渾濁。
(三)凝固性
正常腦脊液放置12?24h后不會(huì)形成薄膜、凝塊或沉淀。腦脊液形成凝塊或薄膜與其所含的蛋白質(zhì),
特別是與纖維蛋白原的含量有關(guān),當(dāng)腦脊液蛋白質(zhì)含量超過10g/L時(shí),可出現(xiàn)薄膜、凝塊或沉淀?;撔?/p>
腦膜炎的腦脊液在1?2h內(nèi)呈塊狀凝固;結(jié)核性腦膜炎的腦脊液在12?24h內(nèi)呈薄膜或纖細(xì)的凝塊;神經(jīng)
梅毒的腦脊液可有小絮狀凝塊;蛛網(wǎng)膜下腔梗阻的腦脊液呈黃色膠樣凝固。腦脊液同時(shí)存在膠樣凝固、黃
變癥和蛋白質(zhì)-細(xì)胞分離(蛋白質(zhì)明顯增高,細(xì)胞正?;蜉p度增高),稱為Froin-Nonne綜合征,這是蛛網(wǎng)
膜下腔梗阻的腦脊液特點(diǎn)。
(四)比密
腦脊液比密為:①腰椎穿刺:L006?1.008。②腦室穿刺:1.002?1.004。③小腦延髓池穿刺:1.004?
1.008。凡是腦脊液中的細(xì)胞數(shù)量增加和蛋白質(zhì)含量增高的疾病,其比密均增高。常見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染、
神經(jīng)系統(tǒng)寄生蟲病、腦血管病、腦腫瘤、腦出血、腦退行性變和神經(jīng)梅毒等。
第三節(jié)顯微鏡檢查
本節(jié)考點(diǎn):
細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類計(jì)數(shù)
(-)細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類計(jì)數(shù)
1.檢測(cè)原理
①清亮或微渾的腦脊液標(biāo)本,可以直接計(jì)數(shù)細(xì)胞總數(shù),或稀釋后再直接計(jì)數(shù),將結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
②可采用直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)白細(xì)胞,或稀釋后再直接計(jì)數(shù),將結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
③白細(xì)胞直接計(jì)數(shù)后,在高倍鏡下根據(jù)白細(xì)胞形態(tài)特征進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。也可采用Wright染色后,油鏡
下分類計(jì)數(shù)。
2.方法學(xué)評(píng)價(jià)
細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)和分類計(jì)數(shù)常用顯微鏡計(jì)數(shù)法。白細(xì)胞直接分類法簡(jiǎn)單、快速,但準(zhǔn)確性差,尤其是陳
舊性標(biāo)本,細(xì)胞變形,分類困難,誤差較大。涂片染色分類法細(xì)胞分類詳細(xì),結(jié)果準(zhǔn)確可靠,尤其是可以
發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞如腫瘤細(xì)胞,故推薦使用此法。該法不足之處是操作較復(fù)雜,費(fèi)時(shí)。
腦脊液細(xì)胞收集有幾種方法,離心涂片法常影響細(xì)胞形態(tài)及分類。目前,玻片離心沉淀法和細(xì)胞室沉
淀法已用于腦脊液細(xì)胞的濃縮和收集,其優(yōu)點(diǎn)是收集的細(xì)胞形態(tài)完整(尤其是細(xì)胞室沉淀法),分類效果
好。另外,玻片離心沉淀法陽(yáng)性率高。
血細(xì)胞分析儀進(jìn)行腦脊液計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類,此法簡(jiǎn)單、快速,可以自動(dòng)化。但病理性、陳舊性標(biāo)本
中的組織、細(xì)胞的碎片和殘骸以及細(xì)胞變形等都可以影響細(xì)胞分類和計(jì)數(shù),故重復(fù)性、可靠性有待進(jìn)一步
探討。另外,蛋白質(zhì)含量高,尤其有凝塊的腦脊液標(biāo)本容易使儀器發(fā)生堵孔現(xiàn)象,故不推薦使用。
3.質(zhì)量控制
(1)細(xì)胞計(jì)數(shù):①標(biāo)本采集后應(yīng)在lh內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。標(biāo)本放置過久,細(xì)胞可能凝集成團(tuán)或被破壞,
影響計(jì)數(shù)結(jié)果。②標(biāo)本必須混勻后方可進(jìn)行檢查,否則會(huì)影響計(jì)數(shù)結(jié)果。
(2)校正與鑒別:①因穿刺損傷血管,引起血性腦脊液,白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果必須校正,以消除因出血帶
來的白細(xì)胞。②細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí),應(yīng)注意紅細(xì)胞、白細(xì)胞與新生隱球菌的鑒別。新生隱球菌不溶于乙酸,加優(yōu)
質(zhì)墨汁后可見未染色的莢膜;白細(xì)胞也不溶于乙酸,加酸后細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)更加明顯;紅細(xì)胞加酸后溶解。
(3)檢查方法:白細(xì)胞直接計(jì)數(shù)法的試管與吸管中的冰乙酸要盡量去盡,否則可使結(jié)果偏低。若標(biāo)本
陳舊、細(xì)胞變形時(shí),白細(xì)胞直接分類法誤差大,可采用涂片染色分類法分類計(jì)數(shù)。
(4)染色固定:涂片染色分類計(jì)數(shù)時(shí),離心速度不能太快,否則會(huì)影響細(xì)胞形態(tài),可采用玻片離心法、
沉淀室法收集細(xì)胞。涂片固定時(shí)間不能太長(zhǎng),更不能高溫固定,以免使細(xì)胞皺縮,影響檢驗(yàn)結(jié)果。
4.參考值
①無紅細(xì)胞。②白細(xì)胞極少,成人:(0-8)X106/L,兒童:(0~15)X106/L,主要為單個(gè)核細(xì)
胞,淋巴細(xì)胞與單核細(xì)胞之比為7:3。
5.臨床意義
腦脊液白細(xì)胞達(dá)(10?50)X106/L為輕度增高,(50?100)X106/L為中度增高,大于200X1()6
/L為顯著增高。腦脊液中血細(xì)胞增高的程度及臨床意義見表1-12-5。
表1T2-5腦脊液血細(xì)胞增高的臨床意義
增高程度細(xì)胞臨床意義
中性粒細(xì)胞化膿性腦膜炎
顯著
紅細(xì)胞蛛網(wǎng)膜下腔出血或腦出血、穿刺損傷
早期中性粒細(xì)胞、后期淋巴結(jié)核性腦膜炎,且有中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞同時(shí)
輕度或中
細(xì)胞存在的現(xiàn)象
度
嗜酸粒細(xì)胞寄生蟲感染
正常或輕
淋巴細(xì)胞漿液性腦膜炎、病毒性腦膜炎、腦水腫
度
(二)細(xì)胞學(xué)檢查
近年來,常采用玻片離心法、沉淀室法、微孔薄膜篩濾法、纖維蛋白網(wǎng)細(xì)胞捕獲法等收集細(xì)胞,并進(jìn)
行染色。常用的染色方法有May-Grunwald-Giemsa染色法、PAS染色法、過氧化酶染色法、脂類染色法、硝
基四氮口坐藍(lán)(NBT)染色法和口丫嚏橙熒光染色法等,重點(diǎn)檢查腦脊液腔壁細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞和污染細(xì)胞(表
1-12-6)。
表1-12-6腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查及臨床意義
細(xì)胞細(xì)胞類型臨床意義
脈絡(luò)叢室管膜細(xì)胞腦積水、腦室穿刺、氣腦、腦室造影或椎管內(nèi)給藥
腔壁細(xì)胞
蛛網(wǎng)膜細(xì)胞氣腦、腦室造影或腰椎穿刺后,多為蛛網(wǎng)膜機(jī)械性損傷所致
腫瘤細(xì)胞惡性細(xì)胞原發(fā)性腫瘤、轉(zhuǎn)移性腫瘤、白血病和淋巴瘤
骨髓細(xì)胞穿刺損傷將其帶入腦脊液中所致
污染細(xì)胞
紅細(xì)胞穿刺損傷脊膜血管所致
第四節(jié)化學(xué)與免疫學(xué)檢查
本節(jié)考點(diǎn):
(1)酸堿度
(2)蛋白質(zhì)
(3)葡萄糖
(4)氯化物
(5)酶學(xué)
(6)蛋白電泳
(7)免疫球蛋白
(8)其他檢查
(-)酸堿度
正常腦脊液pH為7.31?7.34,且相對(duì)穩(wěn)定。中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥時(shí),腦脊液pH低于正常;化膿性腦膜
炎時(shí)腦脊液的pH明顯減低,在測(cè)定腦脊液的pH的同時(shí)測(cè)定腦脊液中乳酸含量,對(duì)判斷病情變化更有參考
價(jià)值。
(二)蛋白質(zhì)
1.檢測(cè)原理:腦脊液蛋白質(zhì)的檢驗(yàn)有定性和定量?jī)煞N方法,并可根據(jù)需要計(jì)算蛋白商(球蛋白/清蛋
白)和腦脊液清蛋臼指數(shù)(R.)[腦脊液清蛋白(g/L)/血清清蛋白(g/L)]0
(1)定性法
1)Pandy試驗(yàn):腦脊液中的蛋白質(zhì)與苯酚結(jié)合形成不溶性蛋白鹽而出現(xiàn)白色渾濁或沉淀。
2)硫酸鏤試驗(yàn):包括Ross-Jone試驗(yàn)和Nonne-Apelt試驗(yàn)。飽和硫酸鏤能沉淀球蛋白,出現(xiàn)白色渾濁
或沉淀。若球蛋白增多則Ross-Jone試驗(yàn)陽(yáng)性;Nonne-Apelt試驗(yàn)可檢測(cè)球蛋白和清蛋白。
3)Lee-Vinson試驗(yàn):磺基水楊酸和氯化高汞均能沉淀腦脊液蛋白質(zhì),根據(jù)沉淀物的比例不同,可鑒別
化膿性和結(jié)核性腦膜炎。
(2)定量法:利用比濁法、染料結(jié)合比色法和免疫學(xué)方法檢測(cè)腦脊液蛋白質(zhì)含量。常用的方法為磺基
水楊酸-硫酸鈉比濁法。
2.方法學(xué)評(píng)價(jià):腦脊液蛋白質(zhì)檢驗(yàn)方法較多,不同的方法由于所選用的試劑、條件不同,其靈敏度和
特異性也不相同。其方法學(xué)評(píng)價(jià)見表『12-7。
表1-12-7腦脊液蛋白質(zhì)檢驗(yàn)的方法學(xué)評(píng)價(jià)
分類方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)
定性操作簡(jiǎn)便、標(biāo)本量少、易于觀察、靈敏度
Pandy試驗(yàn)假陽(yáng)性率高
法高
Poss-Jone檢測(cè)球蛋白,特異性高靈敏度低
Nonne-Apelt檢測(cè)球蛋白和清蛋白,特異性高操作繁瑣
Lce-Vinson操作繁瑣、特異性低
定量標(biāo)本用量大、重復(fù)性差、影響因
比濁法操作簡(jiǎn)便、快速,無需特殊儀器
法素多
染料結(jié)合比色操作快速、靈敏度高、標(biāo)本用量少、重復(fù)
要求高、線性范圍窄
法性好
免疫學(xué)方法標(biāo)本用量少對(duì)試劑要求高
3.質(zhì)量控制
(1)因穿刺出血,腦脊液可有血液蛋白質(zhì)混入,可出現(xiàn)假陽(yáng)性。
(2)試驗(yàn)中所用試管和滴管須十分潔凈,否則易出現(xiàn)假陽(yáng)性。
(3)苯酚不純可引起假陽(yáng)性;室溫低于10℃、苯酚飽和度減低也可引起假陰性。
(4)人工配制含球蛋白的溶液作陽(yáng)性對(duì)照,可在正常腦脊液或配制與正常腦脊液基本成分相似的基礎(chǔ)
液中加不同量的球蛋白。
4.參考值
定性:陰性(或弱陽(yáng)性)。定量:腰椎穿刺:0.20~0.40g/L;小腦延髓池穿刺:0.10~0.25g/L;
腦室穿刺:0.05~0.15g/L;蛋白商:0.4-0.8;清蛋白指數(shù):7X10\
5.臨床意義
腦脊液蛋白質(zhì)含量增高是血-腦脊液屏障功能障礙的標(biāo)志。由于腦脊液清蛋白只來自血清,因此,R.
更能反映血-腦脊液屏障完整性。腦脊液蛋白質(zhì)增高可見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的感染、梗阻和出血等多種疾病,
其常見的原因見表1-12-8。導(dǎo)致血-腦脊液屏障功能障礙的原因見表1-12-9,
表面1一12—8腦脊液蛋白質(zhì)增高常見的原因
原因臨床意義
感染以化膿性、結(jié)核性腦膜炎腦脊液蛋白質(zhì)增高最明顯,病毒性腦膜炎則輕度增高
神經(jīng)根病變常見于急性感染性多發(fā)性神經(jīng)根神經(jīng)炎,有蛋白質(zhì)一細(xì)胞分離的現(xiàn)象
梗阻脊髓腫瘤、肉芽腫、硬膜外膿腫造成的椎管部分或完全梗阻,可有腦脊液自凝現(xiàn)象
出血腦血管畸形、高血壓病、腦動(dòng)脈硬化癥以及全身出血性疾病等
其他肺炎、尿毒癥等出現(xiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀時(shí),腦脊液蛋白質(zhì)含量也可增高
表1—12-9導(dǎo)致血一腦脊液屏障功能障礙的原因
屏障障礙的程
可能的原因
度
多發(fā)性硬化、慢性HIV腦炎、帶狀皰疹神經(jīng)節(jié)炎、乙醇性多發(fā)神經(jīng)病、肌萎縮性
輕度
側(cè)索硬化
中度病毒性腦炎、機(jī)會(huì)致病菌性腦膜腦炎、糖尿病性多發(fā)神經(jīng)病、腦梗死、皮質(zhì)萎縮
重度Guillain-Barre綜合征、單純性皰疹腦炎、結(jié)核性腦膜炎、化膿性腦膜炎
蛋白商反映了腦脊液球蛋白與清蛋白的比例變化。①蛋白商增高:提示腦脊液球蛋白含量增高,見于
多發(fā)性硬化癥、神經(jīng)梅毒、腦脊髓膜炎、亞急性硬化性全腦炎等。②蛋白商減低:提示腦脊液清蛋白含量
增高,見于化膿性腦膜炎急性期、腦腫瘤、脊髓壓迫癥等。
(三)葡萄糖
1.檢測(cè)原理:腦脊液葡萄糖含量大約為血糖的50%?80%(平均60%),其高低與血糖濃度、血-腦脊液
屏障的通透性、葡萄糖的酵解程度有關(guān)。腦脊液葡萄糖檢驗(yàn)多采用葡萄糖氧化酶法和己糖激酶定量法。
2.參考值:①腰椎穿刺:2.5~4.4mmol/L。②小腦延髓池穿刺:2.8~4.2mmol/L?③腦室穿刺:3.0?
4.4mmol/L?
3.臨床意義
(1)葡萄糖減低:①細(xì)菌性腦膜炎和真菌性腦膜炎,以化膿性腦膜炎早期減低最明顯。②腦寄生蟲病
等。③腦腫瘤。④神經(jīng)梅毒。⑤低血糖昏迷、胰島素過量所致的低血糖狀態(tài)。
(2)葡萄糖增高:①新生兒及早產(chǎn)兒。②糖尿病或靜脈注射葡萄糖。③腦或蛛網(wǎng)膜下腔出血所致的血
性腦脊液。④病毒性腦膜炎或腦炎。⑤急性顱腦外傷、中毒、缺氧、腦出血等所致下丘腦損傷等。
(四)氯化物
1.檢測(cè)原理:由于腦脊液中蛋白質(zhì)含量較少,為了維持腦脊液和血漿滲透壓的平衡(Donnan平衡),
氯化物含量約為血漿1.2~1.3倍。氯化物定量檢驗(yàn)方法與血清氯化物檢驗(yàn)方法相同,測(cè)定方法有硝酸汞滴
定法、電量分析法、離子選擇性電極法和硫氟酸汞比色法。臨床常用電極法。
2.方法學(xué)評(píng)價(jià):幾種腦脊液氯化物檢測(cè)的方法學(xué)評(píng)價(jià)見表172-10。
表1-12-10腦脊液氯化物檢測(cè)的方法學(xué)評(píng)價(jià)
方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)
硝酸汞滴定操作簡(jiǎn)便、應(yīng)用廣泛、不需要特影響因素多、準(zhǔn)確度差、效率低,多被電極法和
法殊儀器電量法取代
硫氟酸汞比
準(zhǔn)確度、精密度良好不適合體液標(biāo)本檢測(cè)
色法
電量分析法精密度和準(zhǔn)確度高,為參考方法
準(zhǔn)確度和精密度良好,為常規(guī)方
電極法專用儀器
法
3.參考值:成人:120?130mmol/L。嬰兒:110?130mmol/L。
4.臨床意義
(1)氯化物減低:①細(xì)菌或真菌感染,特別是化膿性、結(jié)核性和隱球菌性腦膜炎的急性期、慢性感染
的急性發(fā)作期。②細(xì)菌性腦膜炎的后期,由于腦膜有明顯的炎癥浸潤(rùn)或粘連,局部有氯化物附著,使腦脊
液氯化物減低。③嘔吐、腎上腺皮質(zhì)功能減退時(shí),由于血氯減低,使腦脊液氯化物含量亦減低。
(2)氯化物增高:主要見于尿毒癥、腎炎、心力衰竭、病毒性腦膜炎或腦炎。
(五)酶學(xué)
腦脊液中含有多種酶,如乳酸脫氫酶(LD)、肌酸激酶(CK)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、腺昔脫
氨酶(ADA)、溶菌酶(Lys)等。正常情況下血清酶不能透過血腦屏障,因此腦脊液中各種酶的含量遠(yuǎn)低
于血清。血腦屏障通透性增高、各種原因引起的腦組織損傷、腦腫瘤、顱內(nèi)壓增高等均可導(dǎo)致腦脊液各種
酶含量增高。腦脊液酶學(xué)檢查及其增高的臨床意義見表l-12-lk
表1-12-11腦脊液酶學(xué)檢查及其增高的臨床意義
酶學(xué)指標(biāo)參考值臨床意義
(1)中樞神經(jīng)系統(tǒng)感,以化膿性腦膜炎最明顯。(2)腦出血、
CK(U/L)0.5-2.0
蛛網(wǎng)臘下腔出血。(3)進(jìn)行性腦積水、脫髓鞘病、繼發(fā)性癲癇
Lys(mg/1)無或含量甚微(1)細(xì)菌性腦膜炎,以結(jié)核性腦膜炎增高最明顯。(2)腦腫瘤
成人<40,新生兒
LD(U/L)〈70,LD/血清(1)腦組織損傷、感染。(2)細(xì)菌性腦膜炎
LD<0.1
AST(U/L)<20腦血管病、腦萎縮、中毒性腦病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移癌等
ADA(U/L)0-8結(jié)核性腦膜炎(可作為診斷和鑒別診斷結(jié)核性腦膜炎的指標(biāo))
(六)蛋白電泳
腦脊液中蛋白質(zhì)的特點(diǎn)為:①有較多的前清蛋白。②B球蛋白較多,且高于血清,而Y球蛋白僅為血
清的50%。③清蛋白主要來自血清。
1.方法學(xué)評(píng)價(jià):腦脊液蛋白質(zhì)電泳通常用醋酸纖維薄膜或瓊脂糖凝膠作為載體.標(biāo)準(zhǔn)電泳條件同血清蛋
白電泳。若采用等電聚焦電泳可提高電泳圖譜的分辨率。由于腦脊液中蛋白質(zhì)含量少,因此在電泳前須將
腦脊液標(biāo)本在高分子聚乙二爵或右旋糖背透析液中濃縮。近年來應(yīng)用高效毛細(xì)管電泳法進(jìn)行腦脊液蛋白質(zhì)
電泳分析可進(jìn)一步提高分辨率且腦脊液標(biāo)本無需濃縮。
2.參考值:前清蛋白2%?6%,清蛋白55%?65%,a1球蛋白3%?8%,a2球蛋白
4%?9%,B球蛋白10%?18%,丫球蛋白4%?13%。
3.臨床意義:腦脊液蛋白質(zhì)電泳的變化及臨床意義見表1-12-12,
表1-12-12腦脊液蛋白質(zhì)電泳的變化及臨床意義
指標(biāo)增
原因臨床意義
高
前清蛋
腦細(xì)胞退行性病變腦萎縮、腦積水和中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病等
白
腦組織供血不足或腦血管通透
清蛋白腦血管病變、椎管梗阻等
性增高
a球蛋急性化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎、腦膜腫瘤浸潤(rùn)、腦腫
炎癥損傷或占位性病變
白瘤轉(zhuǎn)移
B球蛋
脂肪代謝障礙或腦組織萎縮動(dòng)脈硬化、腦血栓、腦組織萎縮退行性變者
白
Y球蛋免疫、占位性病變或暫時(shí)性腦脫髓鞘?。ǘ喟l(fā)性硬化癥、視神經(jīng)脊髓炎)、中樞神經(jīng)系
白功能失調(diào)統(tǒng)的腫瘤和感染
(七)免疫球蛋白
免疫球蛋臼的測(cè)定方法有免疫擴(kuò)散法、免疫電泳法、免疫散射比濁法。經(jīng)典的凝膠沉淀試驗(yàn)操作繁瑣、
靈敏度低,耗時(shí)長(zhǎng)且不能自動(dòng)化操作。免疫比濁測(cè)定法具有靈敏、快速且能自動(dòng)化檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn)。腦脊液免
疫球蛋白為:IgG:10-40mg/L,IgM:0?0.22mg/L,IgA:
0?6mg/L。正常腦脊液免疫球蛋白含量極少,主要為IgG。免疫球蛋白變化的臨床意義見表1-12-13。
表1-12-13腦脊液免疫球蛋白變化的意義
免疫球
臨床意義
蛋白
多見于細(xì)菌性腦膜炎、亞急性硬化性全腦炎、多發(fā)性硬化癥、急性感染性多發(fā)性神經(jīng)根
IgG增高
神經(jīng)炎,且結(jié)核性腦膜炎IgG增高較化膿性明顯
IgG減低癲癇、放射線損傷和服用類固醇藥物等
多見于化膿性腦膜炎,也見于多發(fā)性硬化癥、腫瘤和血管通透性改變等.IgM明顯增高
IgM增高
可排除病毒性感染
IgA增高多見于化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎和病毒性腦膜炎
(八)其他檢查
1.淋巴細(xì)胞亞群:正常腦脊液細(xì)胞總數(shù)為(0?10)X10B/L,多為淋巴細(xì)胞。中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥時(shí)T
淋巴細(xì)胞數(shù)量減少提示細(xì)胞免疫功能減低;自身免疫性疾病如多發(fā)性硬化癥時(shí),輔助性T淋巴細(xì)胞及B淋
巴細(xì)胞的絕對(duì)值均增高。
2.抗結(jié)核抗體:酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)是目前檢查腦脊液中抗結(jié)核抗體最為簡(jiǎn)便、最為敏感的方
法。腦脊液中抗結(jié)核抗體水平高于患者自身血清,對(duì)結(jié)核性腦膜炎的診斷及鑒別診斷有參考價(jià)值。
3.髓鞘堿性蛋白:髓鞘堿性蛋白(MBP)是反映神經(jīng)細(xì)胞有無實(shí)質(zhì)性損傷的靈敏指標(biāo)。正常腦脊液MBP
<4ug/L。90%以上的多發(fā)性硬化癥的急性期表現(xiàn)為MBP明顯增高,50%的慢性活動(dòng)者M(jìn)BP增高,非活動(dòng)者
MBP不增高。因此,MBP是多發(fā)性硬化癥病情活動(dòng)的指標(biāo)。MBP增高也可見于神經(jīng)梅毒、腦血管病、顱腦外
傷等。
4.谷氨酰胺:腦脊液中谷氨酰胺含量可以反映腦組織中氨的含量,正常為0.4?0.96mmol/L,主要用
于肝性腦病的診斷。正常腦脊液中氨含量大約是動(dòng)脈血中氨含量的1/3,谷氨酰胺含量為0.4?0.96mmol/
L,晚期肝硬化患者腦脊液中谷氨酰胺含量明顯增高,肝昏迷患者可高達(dá)3.4mmol/L以上。
5.乳酸:正常腦脊液乳酸為1.0?2.9mmoI/L。增高可見于:腦組織缺血、缺氧;出血性腦病;化膿性
腦膜炎;過度換氣。
第五節(jié)病原生物學(xué)檢查
本節(jié)考點(diǎn):
(1)細(xì)菌學(xué)檢查
(2)寄生蟲檢查
(-)細(xì)菌學(xué)檢查
1.顯微鏡檢查:腦脊液涂片革蘭染色或堿性亞甲藍(lán)染色檢查致病菌。革蘭染色用于檢查肺炎鏈球菌、
流感嗜血桿菌、葡萄球菌、銅綠假單胞菌、鏈球菌、大腸埃希菌等;堿性亞甲藍(lán)染色用于檢查腦膜炎球菌。
顯微鏡檢查對(duì)化膿性腦膜炎診斷的陽(yáng)性率為60%?90%。如果懷疑為結(jié)核性腦膜炎,可采用抗酸染色,油鏡
下尋找抗酸桿菌。新生隱球菌檢查常采用印度墨汁染色法,若呈假陽(yáng)性,可采用苯胺墨染色法。
2.細(xì)菌培養(yǎng):主要適用于腦膜炎奈瑟菌、鏈
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