試驗室檢測及數(shù)據(jù)分析應用

關(guān)于試驗室檢測及數(shù)據(jù)分析應用Serology血清學Whatisserology?什么是血清學？Whatisitfor?

血清學的意義Howtogetthebestserologicalresults?

怎樣獲得最佳的血清結(jié)果？Howtointerpretserology?broilersLayersandbreeders怎樣分析血清學結(jié)果？－肉雞－蛋雞和種雞Samplesandserumbanks

采樣和血清保存第2頁,共73頁，星期六，2024年，5月Whatisserology?

什么是血清學？Detectionofantibodies

抗體的檢測第3頁,共73頁，星期六，2024年，5月Typesofantibodies

抗體的類型IgAIgMIgEIgG第4頁,共73頁，星期六，2024年，5月QualitativeTests定性試驗Answerisyesorno

回答“是”或者“不是”Resultsare“positive”or“negativo”

結(jié)果為“陽性”或“陰性”RapidPlateAgglutinationtest

快速平板凝集試驗AgarGelPrecipitationtest

瓊脂凝膠沉淀試驗第5頁,共73頁，星期六，2024年，5月Semi–Quantitativetests

半定量試驗Resultsexpressedintitres

結(jié)果用滴度表達Basedonserialdilution

基于連續(xù)稀釋Resultsexpressed

in2x,10x(2log,10log)

結(jié)果表達為2x,10x(2log,10log)HI,Serumneutralization

HI,血清中和試驗第6頁,共73頁，星期六，2024年，5月Quantitativetests定量試驗Resultsinabsolutenumbers

結(jié)果用絕對數(shù)表示Resultisthecolorimetricreactionofthesubstrateproportionaltothequantitiyofantibodies

結(jié)果是與抗體數(shù)量成比例的物質(zhì)的比色反應ELISA

酶聯(lián)免疫吸附試驗第7頁,共73頁，星期六，2024年，5月Sensibility敏感性Abilitytodetermineminimalquantitiesofantibodies

敏感性是指能檢測到的最小抗體的數(shù)量Avoidfalsenegatives

避免假陰性Falsepositives假陽性Diseasecontrolanderradication

用于疾病控制和凈化Example:SPA

舉例：SPA第8頁,共73頁，星期六，2024年，5月Specificity特異性Antibodiesdevelopedagainstaspecificagent

由特異性抗原產(chǎn)生的抗體Avoidfalsepositives

避免假陽性Falsenegatives

假陰性Example:Imnmunofluorescence

舉例：免疫熒光試驗第9頁,共73頁，星期六，2024年，5月Ideal理想狀況第10頁,共73頁，星期六，2024年，5月Calculations計算Sensibility:敏感性RealPositives/(TotalnumberInfected)x100真正的陽性/(合計感染數(shù))x100Sensibility=[98/(98+2)]x100=98%第11頁,共73頁，星期六，2024年，5月Calculations計算Especificity:特異性RealNegatives/TotalnumberInfectedx100真正的陰性/合計感染數(shù)x100specificity=[80/(80+20)]x100=80%第12頁,共73頁，星期六，2024年，5月Calculations計算

Sensibility=98%specificity=80%敏感性＝98％特異性＝80％第13頁,共73頁，星期六，2024年，5月Aplicationinthefield現(xiàn)場運用Farmwith10.000birds某場10000羽雞100%checked100％進行檢測500positives出現(xiàn)500陽性490truepositives10falsepositives490真陽性10假陽性第14頁,共73頁，星期六，2024年，5月specifictest特異性試驗第15頁,共73頁，星期六，2024年，5月Calculations2計算2Sensibility=80/(100)x100=80%

敏感性＝80/(100)x100=80%specificity=100/(100)x100=100%

特異性＝100/(100)x100=100%第16頁,共73頁，星期六，2024年，5月specificityandSensibility

特異性和敏感性Typeofmethod

方法的類型Antigenused使用的抗原Conditionsofthetechnique

技術(shù)條件第17頁,共73頁，星期六，2024年，5月Testcommonlyusedinpoultry

家禽常用的檢測方法RPA-- Mycoplasma,Salmonella

AGP-- IBV,IBD,Marek,Reo

HI-- ND,IBV,EDS,Mycoplasma,Coryza

第18頁,共73頁，星期六，2024年，5月Testcommonlyusedinpoultry

家禽常用的檢測方法SN-- IBV,IBD,allforresearchpurposes

ELISA–nearlyallagents

第19頁,共73頁，星期六，2024年，5月Serology血清學Diagnostics

診斷Monitoring

監(jiān)測INTERPRETATION

分析第20頁,共73頁，星期六，2024年，5月Criteriaforinterpretation

分析的標準WhatdiseasedoIwanttoverify?

我要驗證什么??？Forwhatpurpose?DiagnosticsorMonitoring?

分析的目的是什么？診斷或監(jiān)測？WhattypeofexploitationdoIhave?

我該采取什么方法？HowshouldIinterprettheresults

我該怎樣分析結(jié)果？第21頁,共73頁，星期六，2024年，5月DogmaoParadigma?USUALLYTHEHIGHERTHETITRE,THEBETTERTHEPROTECTION通常滴度越高，保護力越高第22頁,共73頁，星期六，2024年，5月Basisfortheinterpretation

分析的基礎(chǔ)PresenceofantibodiesInfectionDevelopmentoftheimmunity

存在抗體－感染－免疫力的產(chǎn)生AbsenceofantibodiesThereisnoinfectionTheInfectionwasveryrecentTheimmunityisinanearlystageofdevelopment沒有抗體：－沒有感染－最近剛感染－免疫力正在產(chǎn)生早期階段第23頁,共73頁，星期六，2024年，5月Interpretation:qualitativetests

分析：定性試驗Negative陰性PositivoSample樣品Noinfection

未感染Acutephase

急性期Lowlevelof

antibodies

抗體水平太低Re-test2weekslater

2周后重新檢測Useamoresensitivetest使用更敏感的試驗Vaccine疫苗live–nochallenge活苗－未攻毒killed–vaccinationfailure滅活苗－免疫失敗Challengetest--verifyprotection

攻毒試驗－驗證保護力Takesamplesatalatermoment過一段時間再次采樣第24頁,共73頁，星期六，2024年，5月Interpretation:(semi-)quantitativetests分析：半定量試驗Negativeorlowtitre陰性或低滴度PositivoSample樣品Noinfection

未感染Acutephase

急性期Lowlevelof

antibodies

抗體水平太低Re-test2weekslater

2周后重新檢測Useamoresensitivetest使用更敏感的試驗Vaccine疫苗live–nochallenge活苗－未攻毒killed–vaccinationfailure滅活苗－免疫失敗Challengetest--verifyprotection

攻毒試驗－驗證保護力Takesamplesatalatermoment過一段時間再次采樣第25頁,共73頁，星期六，2024年，5月Interpretation:qualitativetests

分析：定性試驗NegativoPositive陽性Sample陽性Infection感染Sero-responsetotheantigen

對抗原血清學反應Confirmation確診Useatestwithahigherspecificity

使用敏感性更高的試驗Isolationoftheagent病原分離Vaccine疫苗live–fieldchallengeorvaccineresponse活毒－野毒感染或疫苗反應killed–vaccineresponse滅活苗－疫苗反應第26頁,共73頁，星期六，2024年，5月Interpretation:quantitativetests

分析：定量試驗NegativoHightitre高滴度Sample樣品Vaccine疫苗live–fieldchallengeorvaccineresponse活毒－野毒感染或疫苗反應killed–vaccineresponse滅活苗－疫苗反應Confirmation確診Useatestwithahigherspecificity

使用敏感性更高的試驗Isolationoftheagent病原分離Infection感染Sero-responsetotheantigen

對抗原血清學反應第27頁,共73頁，星期六，2024年，5月Vaccine疫苗GoodresponsetothevaccinationGoodvaccinecoverage接種后的良好反應Interpretation:(semi-)quantitativetests

分析：半定量試驗LowCV低CVNarrowdistributionoftitres

狹窄的滴度分布Noinfection沒有感染ChronicInfectioninthepopulation雞群內(nèi)慢性感染Samples第28頁,共73頁，星期六，2024年，5月Vaccine疫苗poorresponsetothevaccination.接種免疫反應差，免疫覆蓋差PoorvaccinationcoverageInterpretation:(semi-)quantitativetests

分析：半定量試驗WideCVCV值大Averywiderangeoftitres滴度分布范圍非常寬AcuteInfection急性感染Achronicinfectioninsomeindivduals某些個體慢性感染samplesCheckthebatch檢查批號Comparewithfieldresults與臨床結(jié)果比較第29頁,共73頁，星期六，2024年，5月Interpretationinbroilers

對肉雞群的分析LevelsofMaternallyDerivedAntibodies

母源抗體的水平KnowledgeaboutthesanitarystatusOutbreaks.Infectionsorchallenge

關(guān)于衛(wèi)生狀況的知識－疾病爆發(fā)、感染、攻毒CheckthevaccinationprogrammesFixeddates檢查免疫程序固定日期第30頁,共73頁，星期六，2024年，5月NormalCurve

正態(tài)曲線第31頁,共73頁，星期六，2024年，5月Comparingcurves

曲線比較第32頁,共73頁，星期六，2024年，5月Interpretation–chickensorlivevaccines

分析－雛雞或活苗血清學結(jié)果外表性能分析措施第33頁,共73頁，星期六，2024年，5月Lowtitre+CVgood+goodperformance

低滴度＋良好的CV＋良好的性能=continuewiththecontrolprogramme繼續(xù)控制程序

第34頁,共73頁，星期六，2024年，5月HighTitre+goodperformance

高滴度＋良好的性能=continuethecontrolprogrammeandKeepaneyeonthebiosecurity!繼續(xù)控制程序，注意生物安全！Watchout!注意Vaccinatedflock免疫過的雞群=Infectionwithprotection

具保護力的感染=Vaccinationwithahotstrain

用強毒接種Non-vaccinatedflock未免疫的雞群=pastinfection

過去感染過=Infectionwithamildstrain

弱毒株感染過第35頁,共73頁，星期六，2024年，5月Hightitre+narrowCV

高滴度＋窄CVOldinfectionGoodvaccinecoveragewiththeuseofastrongvaccinestrain使用了強的疫苗毒株，具有良好的疫苗覆蓋性第36頁,共73頁，星期六，2024年，5月Hightitre+wideCV

高滴度＋寬CVAcuteinfection急性感染Poorvaccinecoverageusingahotvaccinestrain

使用了強毒疫苗，疫苗覆蓋性差。第37頁,共73頁，星期六，2024年，5月Hightitre+poorperformance

高滴度＋差性能Isolateandidentifytheagent.分離鑒定病毒Improvethecontrolprogramme.改進控制程序Improvethebiosecurity改進生物安全。

=fieldinfection

Challengeanddisease野毒感染和疾病第38頁,共73頁，星期六，2024年，5月Lowtitre+poorperformance

低滴度＋差性能acuteinfection–noantibodiesyet

急性感染－還未產(chǎn)生抗體otherproblems其它問題Retest1weeklater

1周后重新檢測Lookforotherpossiblecause

尋找其它可能的問題第39頁,共73頁，星期六，2024年，5月InterpretationbyAgent

按病原分析第40頁,共73頁，星期六，2024年，5月Interpretationinbreedersorlayers

種雞和蛋雞的分析KnowledgeofthesanitarystatusOutbreaks,infectionorchallenge?衛(wèi)生狀況的知識－爆發(fā)、感染、攻毒CheckvaccinationprogrammesPre-fixeddates－檢查免疫程序Comparisonwithproductioncurves

比較生產(chǎn)曲線第41頁,共73頁，星期六，2024年，5月Highandlowtitres-howmuch?第42頁,共73頁，星期六，2024年，5月Itisallisamatterofperspective第43頁,共73頁，星期六，2024年，5月Highorlowtitres-howhigh?Howlow?抗體滴度高和低的認識Baselines基準線第44頁,共73頁，星期六，2024年，5月Highorlowtitres-cuanto?滴度高或低－多少？Basededatos數(shù)據(jù)的基準線第45頁,共73頁，星期六，2024年，5月Curves-IBD(Real)

IBD的抗體滴度曲線第46頁,共73頁，星期六，2024年，5月Serologyoftheindividual

個體血清學Serologyofpopulations(flocks)群體血清學Samples采樣數(shù)量Baseline-minimum23,ideal28

基準線－最低23份，理想28份

Monitoring-minimum15

監(jiān)測－最低15份Diagnostics-between28and146

診斷－（28～146）份第47頁,共73頁，星期六，2024年，5月Serum“banks”血清保存Research研究PruebascomprobatoriasImportantfordiagnostics診斷的重要性Security安全性Adequatestorageoftheserum–avoidevaporation

正確存儲血清，避免蒸發(fā)第48頁,共73頁，星期六，2024年，5月Collectingsamples采集樣品Monitoring監(jiān)測Consistence

時間安排VaccinationProgrammes

免疫程序Mineral-oilvaccines

礦物油疫苗Feed飼料Diagnostics診斷Pairedsamples雙份采樣SerotecaConditionsunderwhichthesamplesaretaken-

falsepositives

樣品采集的環(huán)境條件（可能造成假陽性）Conditionsunderwhichthesampleshavebeentakenandthestorage第49頁,共73頁，星期六，2024年，5月ELISAtitres

ELISA滴度Alotofvariationdependsontheauthorandthekit

根據(jù)不同的操作人員和試劑盒，ELISA滴度會有差異第50頁,共73頁，星期六，2024年，5月ELISA-IDEXX第51頁,共73頁，星期六，2024年，5月ELISA-KPL第52頁,共73頁，星期六，2024年，5月ELISA-IDEXX第53頁,共73頁，星期六，2024年，5月ELISA-KPL第54頁,共73頁，星期六，2024年，5