常規(guī)體外受精中國專家共識(shí)（2024年）

前言輔助生殖技術(shù)(assistedreproductivetechnology,ART)中被廣泛內(nèi)膜異位癥、排卵異常及宮頸因素等)、部分男性因素(如輕、中弱畸形精子癥)及不明原因不孕不育(卵巢功能評(píng)估、前言受精率低下(lowfertilizationrate,LFR,<25%)及5%~15%的取前言植入前遺傳學(xué)檢測(preimplantationgenetictesting,PGT)與無創(chuàng)六版)提出的正常男性精液質(zhì)量下限參考標(biāo)準(zhǔn)(第五百分位值):精子總量為39×106、精子濃度為16×106/mL、前向運(yùn)動(dòng)精子率為30%、正常形態(tài)精子率·對(duì)于少、弱精子癥患者(精子濃度<20×106/mL和/或精子活動(dòng)率<40%,WHO手冊(cè)第四版)授精方式選擇的一項(xiàng)隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)研究中，將106個(gè)取卵周期的1518枚卵母細(xì)胞進(jìn)行隨機(jī)分配，行c-IVF(669枚)或ICSI(849枚),·另一項(xiàng)隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)研究分別對(duì)少精子癥組[精子濃度(5~20)×106/mL,WHO手冊(cè)第四版]與少弱精子癥組[精子濃度(5~20)×106/mL且前向運(yùn)動(dòng)精子10%~32%,WHO手冊(cè)第四版]的卵母細(xì)胞行motilespermcellcount,TPMC)<1.1×106時(shí)發(fā)生TFF的風(fēng)險(xiǎn)>25%?！そ诘囊豁?xiàng)回顧性研究對(duì)畸形精子癥做了進(jìn)一步區(qū)分，結(jié)果表明，當(dāng)96%<精子畸(humanchorionicgonadotropin,hCG)陽性率、臨床妊娠率和活產(chǎn)率差異均推薦授精方式精子濃度前向運(yùn)動(dòng)精子率(%)短時(shí)/過夜受精短時(shí)受精結(jié)合早期脫顆粒部分ICSI或ICSI·多項(xiàng)研究表明，DGC法較SU法具有更高的精子回收率(分別為>20%前尚無統(tǒng)一的要求或規(guī)范。常用受精皿包括：圓形皿(微滴法)、中央孔皿(雙井皿)、四孔板等。不同受精皿對(duì)應(yīng)的受精液體積也有所不同，中央孔皿或四孔②本共識(shí)建議授精濃度為30~50μL的液滴內(nèi)加前向運(yùn)動(dòng)精子5000~10000條，或1mL的培養(yǎng)液內(nèi)加前向運(yùn)動(dòng)精子10萬~30萬條。加累積妊娠率),而胚胎發(fā)育及妊娠結(jié)局卻無明顯差異。因此該研究認(rèn)為，體表2授精前卵母細(xì)胞最佳孵育時(shí)間的相關(guān)研究作者(發(fā)表年份)有利的孵育時(shí)間不利的孵育時(shí)間TrounsonA0,etal.(HarrisonKL,etal.(19RienziL,etal.(1998)CarvalhoM,etal.(2VandenbergheL,etal.(20c-IVF3~16h<2h或>20h臨床妊娠率c-IVF/ICSI2.5~5.5h<2.5h或>5.5h(c-IVF)、<受精率(c-IVF)、成熟卵母(c-IVF)2.5h(ICSI)細(xì)胞1~12.5h隨著孵育時(shí)間延長，hCG陽性率和臨床妊娠率逐漸下降注：c-IVF示常規(guī)體外受精；ICSI示卵胞質(zhì)內(nèi)單精子注射；hCG示人絨毛膜促性腺激素；“I胞胞質(zhì)的進(jìn)一步成熟(體內(nèi)成熟),從而改善臨床結(jié)局，因此授精時(shí)機(jī)或TFF高風(fēng)險(xiǎn)病例(如精液參數(shù)處于臨界值、不明原因不孕、不孕年限較長、多次人工授精失敗等),可選擇脫顆粒后進(jìn)行早期受<30%~50%時(shí)(分母為成熟卵母細(xì)胞),應(yīng)延遲至授精后6h再行觀察，若含有第二極體的卵母細(xì)胞比例仍<50%,可行補(bǔ)救ICSI;鑒于臨床結(jié)局與補(bǔ)救推遲的時(shí)間呈負(fù)·C-IVF的原核觀察時(shí)間點(diǎn)通常為授精后(17±1)h,即出現(xiàn)2個(gè)原·這歸因于部分?jǐn)U增技術(shù)(如MALBAC、PicoPLEX)合第二代測序(next-generationsequencing,NGS)技非整倍性檢測(preimplantationgenetictestingforaneuploidies,PGT-A)周期也可考慮選擇c-IVF作為授精方式，c-IVF的質(zhì)量控制及胚胎實(shí)驗(yàn)室新員工培訓(xùn)與考核c-質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)正常受精率=授精后16~18h出現(xiàn)≥60%≥75%2PN及2PB的卵母細(xì)胞數(shù)/行授精(最低標(biāo)準(zhǔn))(理想標(biāo)準(zhǔn))多PN率=大于2PN卵母細(xì)胞數(shù)/行授1PN率=1PN卵母細(xì)胞數(shù)/行授精的c-IVF的質(zhì)量控制及胚胎實(shí)驗(yàn)室新員工培訓(xùn)與考核理、撿卵、顆粒細(xì)胞去除以及早期受精的判斷(短時(shí)受精)等方c-IVF的質(zhì)量控制及胚胎實(shí)驗(yàn)室新員工培訓(xùn)與考核率與帶教老師差異小于10%后(n=10),方可開始嘗試進(jìn)行臨床操作。老師指導(dǎo)下對(duì)1~2枚卵母細(xì)胞(應(yīng)選擇獲卵數(shù)>15枚的病例)進(jìn)行脫顆粒與帶教老師差異小于10%后(n=100),方可開始嘗試進(jìn)行臨床操作。①在15mL離心管中制備非連續(xù)密度梯度離心液，分別取40%~45%上層梯度液和等體積的80%~90%下層梯度液1.0~2.0mL;(300~500)×g離心15~20min;(200~300)×g離心5~10min,此步驟可進(jìn)行1~2次。最后棄去上清液，依據(jù)沉①首先將精液(≤2mL)置于圓底試管中(建議使用容量較大的試管),隨后將③將孵育后的上清液(中上層呈云霧狀液體部分)轉(zhuǎn)移至新的無菌離心管，培養(yǎng)基中，(200~300)×g離心5~10min。最后棄去上清液，依據(jù)沉淀量將精子重懸于0.5~1.0mL培養(yǎng)基(受精液)中備用。(4)其他新方法：除了上述經(jīng)典方法外，胚胎實(shí)驗(yàn)室宜結(jié)合自身?xiàng)l件與特點(diǎn)進(jìn)行具體方法改良，也可以參照其他相關(guān)新方法進(jìn)行嘗試(如微流控技術(shù)),經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控穩(wěn)定后形成標(biāo)準(zhǔn)操作程序。(5)特殊情況處理：等體積的培養(yǎng)液反復(fù)吹打(盡量避免產(chǎn)生大量氣泡),促其液化后再離