仿制藥質(zhì)量一致性評價人體生物等效性研究技術(shù)指導(dǎo)原則

附件3仿制藥質(zhì)量全都性評價人體生物等效性爭論技術(shù)指導(dǎo)原則一、概述液循環(huán)中的藥物濃度來獲得反映藥物體內(nèi)吸取程度和速度的主行為是全都并且可重現(xiàn)的?！睟ioavailability,BA〕是反映藥物活性成分吸有一樣活性成分的仿制產(chǎn)品要替代它的原研制劑進入臨床使用的血藥濃度-時間曲線意味著在作用部位能到達一樣的藥物濃〔Bioequivalence,BE〕。BA和BE將重點闡述BA和BEBA和BE爭論的設(shè)計、操作和評價等。本指導(dǎo)原則主要是針對化學(xué)藥品一般固體口服制劑質(zhì)量全都的原則。二、BA和BE根本概念及應(yīng)用循環(huán)的程度和速度。一般分為確定生物利用度和相對生物利用〔通常認為靜脈制劑生物利用度為100%〕為參比制劑獲得的藥物活性成分吸取進入體內(nèi)循環(huán)的〔如片劑和口服溶液為參比制劑獲得的藥物活性成分吸取進入體循環(huán)的相對量。BE爭論是指用BA效、藥效學(xué)指標(biāo)或體外試驗指標(biāo)等進展比較性爭論，但需充分證明所承受的方法具有科學(xué)性和可行性。BA和BE：原研藥〔InnovatorProduct〕：是指已經(jīng)過全面的藥學(xué)、藥理學(xué)和毒理學(xué)爭論以及臨床爭論數(shù)據(jù)證明其安全有效性并首(Pharmaceuticalequivalence性(Therapeuticequivalence)適的方法。假設(shè)藥物吸取速度與臨床療效無關(guān),吸取程度一樣但分只是活性成分化學(xué)形式不同〔或劑型不同〔如片劑和膠囊劑〕的藥物制劑也可能治療等效。根本相像藥物〔Essentiallysimilarproduct〕：假設(shè)兩劑型，并且經(jīng)過證明具有生物等效性,則兩個制劑可以認為是基替換原研藥使用的。BA和BE強調(diào)反映藥物活性給藥途徑和確定用藥方案(如給藥劑量和給藥間隔)的重要依據(jù)之一。BE則重點在于以預(yù)先確定的等效標(biāo)準(zhǔn)和限度進展的比較，是保證含同一藥物活性成分的不同制劑體內(nèi)行為全都性的依據(jù)，是推斷后研發(fā)產(chǎn)品是否可替換已上市藥品使用的依據(jù)。BA和BE爭論在藥品研發(fā)的不同階段有不同作用：理性，通過與原劑型比較的BA爭論來確定劑型的給藥劑量，也可通過BEBE爭論來驗證同一藥物的不同時期產(chǎn)品的前后全都性，如：早期和晚期的臨床試驗用藥品，臨床試驗用藥品〔尤其是用于確定劑量的試驗藥〕和擬上市藥品等。BE爭論來證明仿制產(chǎn)品與原研藥是否具有生物等效性，是否可與原研藥替換使用。藥品批準(zhǔn)上市后，如處方組成成分、比例以及工藝等消滅一行BEBA更前后生物利用度的變化。三、爭論方法BE爭論是在試驗制劑和參比制劑生物利用度比較根底上建立等效性。藥代動力學(xué)爭論點的生物樣本〔如全血、血漿、血清或尿液〕中藥物濃度，獲得藥物濃度-時間曲線〔Concentration-Timecurve,C-T〕來反映〔AUC〕、達峰濃度〔Cmax〕、達峰時間〔Tmax〕等，通過統(tǒng)計〔如無靈敏〕，可以考慮用明確的可分級定量的人體藥效學(xué)指標(biāo)通過效應(yīng)-時間曲線〔Effect-Timecurve〕與參比制劑比較來確定生物等效性。臨床比較試驗當(dāng)無適宜的藥物濃度檢測方法，也缺乏明確的藥效學(xué)指標(biāo)服以上局限。體外爭論來替代體內(nèi)爭論。四、BE以藥代動力學(xué)參數(shù)為終點指標(biāo)的爭論方法是目前普遍承受本分析、試驗設(shè)計、統(tǒng)計分析、結(jié)果評價四個方面內(nèi)容?！惨弧成飿颖痉治龇椒ǖ慕⒑痛_證生物樣品一般來自全血、血清、血漿、尿液或其他組織，具適宜的生物樣品定量分析方法，并對方法進展確證。常用分析方法目前常用的幾種分析方法有：〔1〕色譜法：氣相色譜法(GC)、高效液相色譜法(HPLC)、可用于大多數(shù)藥物的檢測；〔2〕免疫學(xué)方法：放射免疫分析法、測；〔3〕微生物學(xué)方法：可用于抗生素藥物的測定。生物樣本分析方法的選擇宜盡量選擇可行的靈敏度高的方法。方法學(xué)確證〔MethodValidation〕建立牢靠的和可重現(xiàn)的定量分析方法是進展生物等效性研證，一般應(yīng)進展以下幾方面的考察：特異性(Specificity)性的最正確檢測條件。對于色譜法至少要考察6個來自不同個體的〔注明濃度以軟電離質(zhì)譜為根底的檢測法〔LC－MSLC-MS-MS〕應(yīng)留意考察分析過程中的介質(zhì)效應(yīng)，如離子抑制等。標(biāo)準(zhǔn)曲線和定量范圍〔CalibrationCurve〕標(biāo)準(zhǔn)曲線反映了所測定物質(zhì)濃度與儀器響應(yīng)值之間的關(guān)系，〔如用加權(quán)最小二乘法所得的回歸方程來定結(jié)果應(yīng)到達試驗要求的周密度和準(zhǔn)確度。決于分析物可能的濃度范圍和分析物/響應(yīng)值關(guān)系的性質(zhì)。必需至少用6個濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，對于非線性相關(guān)可能需要更多濃曲線各濃度點的實測值與標(biāo)示值之間的偏差*在可承受的范圍之的偏差在±20%±15%點計算得比較準(zhǔn)確。〔注：*偏差=【〔實測值－標(biāo)示值〕/標(biāo)示值】X100%〕定量下限〔LowerLimitofquantitation，LLOQ〕定量下限是標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點，表示測定樣品中符合LLOQ應(yīng)能滿足測定3～5個準(zhǔn)差(RSD)應(yīng)小于20%。應(yīng)至少由5個標(biāo)準(zhǔn)樣品測試結(jié)果證明。周密度與準(zhǔn)確度(PrecisionandAccuracy)的一系列測量值的分散程度。通常用質(zhì)控樣品的批內(nèi)和批間RSD來考察方法的準(zhǔn)確度。一般RSD應(yīng)小于15％，在LLOQRSD應(yīng)小于20％。實濃度的接近程度(即質(zhì)控樣品的實測濃度與真實濃度的偏差115％范圍內(nèi)，在LLOQ四周應(yīng)在80％～120％范圍內(nèi)。一般要求選擇高、中、低3個濃度的質(zhì)控樣品同時進展方法的周密度和準(zhǔn)確度考察。低濃度選擇在LLOQ的3倍以內(nèi)，高濃度53(Analyticalrun/Analyticalbatch)，至少45個樣品。樣品穩(wěn)定性(Stability)分析物的穩(wěn)定性，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。提取回收率從生物樣本基質(zhì)中回收得到分析物質(zhì)的響應(yīng)值除以純標(biāo)準(zhǔn)物樣品中分析物提取出來供分析的比例。應(yīng)考察高、中、低3個濃度的提取回收率，其結(jié)果應(yīng)當(dāng)周密和可重現(xiàn)。微生物學(xué)和免疫學(xué)方法確證特別之處。微生物學(xué)或免疫學(xué)分析的標(biāo)準(zhǔn)曲線本質(zhì)上是非線性的，所以應(yīng)盡可能承受比化學(xué)分析更多的濃度點來建立標(biāo)準(zhǔn)曲則應(yīng)在方法確證和未知樣品測定中承受同樣的步驟。方法學(xué)質(zhì)控只有在生物樣本分析方法確證完成之后才能開頭測定未知同濃度的質(zhì)控樣品對分析方法進展考核。增加各濃度質(zhì)控樣品數(shù)，使質(zhì)控樣品數(shù)大于未知樣品總數(shù)的5%。質(zhì)控樣品測定結(jié)果的偏差一般應(yīng)小于15%，低濃度點偏差一般應(yīng)小于20%，最多允許1/3在同一濃度質(zhì)控樣品中。如質(zhì)控樣品測定結(jié)果不符合上述要求，則該分析批樣品測試結(jié)果作廢。CmaxCmax以后取樣的樣品應(yīng)以無法定量〔Notdetectable,ND〕計算，以減小零值對AUC計算的影響。分析數(shù)據(jù)的記錄與保存操作規(guī)程、保存完整的試驗記錄是分析方法有效性的根本要素。生物分析方法建立中產(chǎn)生的數(shù)據(jù)和質(zhì)控樣品測試結(jié)果應(yīng)全部記的數(shù)據(jù)。至少應(yīng)當(dāng)供給的數(shù)據(jù)包括：方法建立的數(shù)據(jù)品〔〕的純度和來源；描述測定特異性、準(zhǔn)確度、周密度、回收率、定量限、標(biāo)準(zhǔn)曲線的試驗并色譜圖或質(zhì)譜圖并加以說明。樣品分析的數(shù)據(jù)結(jié)果。供給100的標(biāo)準(zhǔn)曲線和質(zhì)控樣品的色譜圖復(fù)印件。據(jù)和選擇所報告的數(shù)據(jù)說明理由。其他相關(guān)信息行簡化的理由、以及相應(yīng)的工程打算編號、標(biāo)題等?！捕吃囼炘O(shè)計與操作穿插設(shè)計清洗期〔Wash-outPeriod〕。這樣，對每位受試者都連續(xù)承受差異對試驗結(jié)果的影響。依據(jù)試驗制劑數(shù)量不同一般承受2×2穿插、3×3穿插等設(shè)計。假設(shè)是兩種制劑比較，雙處理、雙周期，兩序列的穿插設(shè)計是較好的選擇。如試驗包括3個制劑〔受試制劑2個和參比制劑1個3制劑3周期二重3×3拉丁方試驗設(shè)計。各周期間也應(yīng)有足夠的清洗期。的處理影響到隨后一周期的處理中。清洗期一般不應(yīng)短于7個消退〔HighlyVariableDrug〕，依據(jù)具體狀況，除承受增加例數(shù)的方法外，在的個體內(nèi)差異進展測定。受試者的選擇擇患者作為受試者。年齡:一般18～40周歲，同一批受試者年齡不宜相差10歲以上。50kg。按體質(zhì)指數(shù)(BodyMassIndex,BMI)＝體重〔kg〕／身高2〔m2〕計算，一〔kg〕不宜懸殊過大，由于受試者服用的藥物劑量是一樣的。心電圖、呼吸狀況、肝、腎功能和血象無特別，避開藥物體內(nèi)過程受到疾病干擾。依據(jù)藥物類別和安全性狀況，還應(yīng)在試驗前、如有吸煙史，在爭論結(jié)果時應(yīng)考慮可能的影響。于慢代謝可能消滅的安全性等問題。受試者例數(shù)受試者例數(shù)應(yīng)當(dāng)符合統(tǒng)計學(xué)要求，對于目前的統(tǒng)計方法,18—24的藥物可能需要適當(dāng)增加例數(shù)。一個臨床試驗的例數(shù)多少是由三個根本因素打算的：〔1〕顯著性水平：即α值的大小，通常取或5%；〔2〕把握度：即1-β80%，其中β是犯第Ⅱ類錯誤的〔CV%〕〔θ〕：兩藥等效性檢驗中檢測指標(biāo)的變異性和差異越大所需例數(shù)越多。在試驗前并不知道θ和CV%，只能依據(jù)已有的參θ、CV%和把握度等參數(shù)來求N試驗所選擇例數(shù)進展比照，檢驗試驗所承受例數(shù)是否適宜。受試者分組必需承受隨機方法分組，各組間應(yīng)具有可比性。受試制劑和參比制劑(TestProductandReferenceProduct,TandR量差異不能超過5%。對于受試制劑，應(yīng)為符合現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的中試/生產(chǎn)規(guī)模的產(chǎn)品。應(yīng)供給當(dāng)制劑的體外溶出度、穩(wěn)定性、含量或效價測定、及光學(xué)異構(gòu)體的資料。條件、有效期。試驗完畢后受試制劑和參比制劑應(yīng)保存足夠長時間直到產(chǎn)品全都性評價以備查。給藥劑量利用度。一般狀況下一般制劑僅進展單劑量給藥爭論即可,但在某些狀況下可能需要考慮進展屢次給藥爭論，如：〔1〕受試藥單次測定血藥濃度時；〔2〕受試藥的生物利用度有較大個體差異；藥物吸取程度相差不大，但吸取速度有較大差異；〔4〕緩控釋制劑。進展屢次給藥爭論應(yīng)按臨床推舉的給藥方案給藥，至少連續(xù)3次測定谷濃度確定血藥濃度達穩(wěn)態(tài)后選擇一個給藥間隔取樣進展測定，并據(jù)此計算生物利用度。取樣取樣點的設(shè)計對保證試驗結(jié)果牢靠性及藥代動力學(xué)參數(shù)計法時，一般應(yīng)兼顧到吸取相、平衡相〔峰濃度〕和消退相。在藥物濃度—時間曲線各時相及估量達峰時間前后應(yīng)有足夠采樣點，2—3少需要33—5Cmax，代謝物3～5個半衰期時，或至血藥濃度為Cmax的1/10～1/20,AUC0-t/AUC0-∞通常應(yīng)當(dāng)大于80%。過程，由于末端消退項對該類制劑吸取過程的評價影響不大。物，則應(yīng)當(dāng)連續(xù)24小時取樣。當(dāng)受試藥不能用血藥濃度測定方法進展生物利用度檢測時，〔大于給藥劑量的70%〕，入量。試驗藥品和試驗方案應(yīng)當(dāng)符合生物利用度測定要求。尿樣的收集承受分段收集法,其采集頻度、間隔時間應(yīng)滿足估算受物吸取速度，誤差因素較多，一般不提倡承受。和生物等效性試驗。藥代動力學(xué)參數(shù)計算經(jīng)確證并應(yīng)在爭論報告中注明所用軟件。在生物等效性爭論中，其主要測量參數(shù)Cmax和TmaxAUC0→t以梯形法計算，故受數(shù)據(jù)處理程序影響不大。爭論過程標(biāo)準(zhǔn)化食、活動都應(yīng)掌握。試驗工作應(yīng)在I期臨床試驗觀看室進展。受試者應(yīng)得到醫(yī)護錄，必要時停頓試驗?！踩硵?shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析1.數(shù)據(jù)表達BA和BE爭論必需供給全部受試者各個時間點受試制劑和參比制劑的藥物濃度測定數(shù)據(jù)、每一時間點的平均濃度〔Mean〕及其標(biāo)準(zhǔn)差〔SD〕和相對標(biāo)準(zhǔn)差〔RSD〕，供給每個受試者的濃度—時間曲線〔C-T曲線〕和平均C-T曲線以及C-T曲線各個時間其他數(shù)據(jù)替代。2.藥代動力學(xué)參數(shù)單次給藥的BA和BE爭論，供給全部受試者服用受試制劑和參比制劑的AUC0→t，AUC0→∞、Cmax、Tmax、t1/2、CL、Vd、F等參數(shù)及其平均值和標(biāo)準(zhǔn)差。Cmax和Tmax均以實測值表示。AUC0→t以梯形法計算；AUC0→∞按公式計算：AUC0→∞＝AUC0→t＋Ct/λz〔t為最終一次可實測血藥濃度的采樣時間；Ct為末次可測定樣本藥物濃系對數(shù)濃度-時間曲線末端直線部份求得的末端消退速率常數(shù)，可用對數(shù)濃度-時間曲線末端直線局部的斜率求得；t1/2用公式t1/2＝／λz計算。以各個受試者受試制劑〔T〕和參比制劑〔R〕的AUC0→t按下式分別計算其相對生物利用度〔F〕值：當(dāng)受試制劑和參比制劑劑量一樣時：F＝AUCT／AUCR×100％受試制劑和參比制劑劑量不同時【AUCT×DR／AUCR×DT×100％〔AUCT、AUCR分別為T和R的AUC；DR、DT分別為T和R的劑量〕。對于屢次給藥的BA和BE爭論，供給受試制劑和參比制劑的〔Cmin〕，達穩(wěn)態(tài)后的AUCssCss-maxCss-min、Tss-max、t1/2、F、DF等參數(shù)。當(dāng)受試制劑與參比制劑劑量相等時，F(xiàn)值按下式計算：F＝AUCssT／AUCssR×100％〔式中AUCssT和AUCssR分穩(wěn)態(tài)條件下的AUC〕3.統(tǒng)計分析對數(shù)轉(zhuǎn)換評價BE的藥代動力學(xué)參數(shù)AUC0→t和Cmax在進展等效性檢驗前必需作對數(shù)轉(zhuǎn)換。當(dāng)數(shù)據(jù)有偏倚時經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換可校正其對稱換,可實現(xiàn)將均值之比置信區(qū)間轉(zhuǎn)換為對數(shù)形式的均值之差的計算。等效推斷標(biāo)準(zhǔn)當(dāng)前普遍承受主要藥代參數(shù)經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后以多因素方差分析〔ANOVA〕t檢驗和計算90％置信區(qū)間的統(tǒng)計分析方法來評價和推斷藥物間的生物等效性。P<等效；P>P>并不能認為兩者相等或相近。在生物利用度試驗中，承受多因素方差分析〔ANOVA〕雙單側(cè)t檢驗計算供給了誤差值〔MSE〕。雙單側(cè)t〔1－2α〕%置信區(qū)間法是目前生物等效檢驗的唯一標(biāo)準(zhǔn)。雙向單側(cè)t檢驗是等效性檢驗，設(shè)定的無效假設(shè)是P<時說明受試制劑沒有超過規(guī)定的參比制劑的高限和低限，拒絕無效假設(shè)，〔1－2α〕%置信區(qū)間是雙單側(cè)t檢驗另一種表達方式。其根本原理是在高、低2個方向?qū)κ茉囍苿┑膮?shù)均值與凹凸界值之間的差異分別作單側(cè)t沒有小于等于參比制劑均數(shù)的80％〔P＜〕，即在兩個方向的單側(cè)t檢驗，都能以95％的置信區(qū)間確認沒有超出規(guī)定范圍，則可認為受試制劑與參比制劑生物等效。等效推斷標(biāo)準(zhǔn)，一般規(guī)定，經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后的受試制劑的AUC0→t在參比制劑的80％—125Cmax在參比制劑的80％—125％范圍。依據(jù)雙單側(cè)檢驗的統(tǒng)計量，同時求得〔1－2α〕%置信區(qū)間，如在規(guī)定范圍內(nèi)，即可有1－2α的概率推斷兩藥生物等效。Tmax定受試制劑與參比制劑生物等效?！菜摹辰Y(jié)果評價生物等效性是指一種藥物的不同制劑在一樣的試驗條件下，賜予一樣劑量其吸取程度和吸取速度沒有明顯差異故對受試制劑與參比制劑的生物等效性評價應(yīng)從藥物吸取程度和吸取速度兩方面進展，評價反映這兩方面的 3個藥代動力學(xué)參數(shù)即AUC0→t、Cmax和Tmax是否符合前述等效標(biāo)準(zhǔn)。目前比較確定AUCCmaxTmax依靠取樣時間的安排，用它們衡量吸取速率有時是不夠準(zhǔn)確的，時，假設(shè)消滅某些不等效特別狀況，需具體問題加以具體分析。AUC，一般要求90％可信區(qū)間在80％—125％范圍內(nèi)。CmaxTmax，一般在釋放快慢與臨床療效和安全性親熱相關(guān)時需要統(tǒng)計評價，其等效范圍可依據(jù)臨床要求來確定。超生物利用，可以考慮兩種狀況：1〕參比制劑是否本身生物利用度低的產(chǎn)品，因而受試制劑表現(xiàn)誕生物利用度相對較高；2〕參比制劑質(zhì)量符合要求，受試制劑確實超生物利用度。分析獲得的相對生物利用度數(shù)值進一步指導(dǎo)確定劑型的臨床使用劑量?！参濉矪E爭論報告內(nèi)容建立和考察的數(shù)據(jù)，供給必要的圖譜；〔3〕具體的試驗設(shè)計和操作方法，包括全部受試者的資料、樣本例數(shù)、參比制劑、給藥劑量、服藥方法和采樣時間安排；〔4〕原始測定未知樣品濃度全部數(shù)據(jù)，每個受試者藥代參數(shù)和藥時曲線；〔5〕承受的數(shù)據(jù)處理程序和統(tǒng)計分析方法以及具體統(tǒng)計過程和結(jié)果；〔6〕服藥后的考文獻。正文前應(yīng)有簡短摘要；正文末，應(yīng)注明試驗單位、爭論負責(zé)人、參與試驗人員，并簽名蓋章，以示對爭論結(jié)果負責(zé)。五、復(fù)方制劑點。六、結(jié)語生物利用度和生物等效性爭論只是作為一個驗證制劑質(zhì)量是否能到達與原研制劑或其他已經(jīng)過臨床試驗證明白安全與有關(guān)文獻，以實現(xiàn)爭論目的。七、名詞解釋介質(zhì)效應(yīng):由于樣品中存在干擾物質(zhì),對響應(yīng)造成的直接或間接的影響。標(biāo)準(zhǔn)樣品(StandardSample)：在生物介質(zhì)中參加未知樣品中分析物濃度。質(zhì)控樣品〔QualityControlSample〕：質(zhì)控樣品系將方法的效能和評價每一分析批中未知樣品分析結(jié)果的完整性和正確性。一般配制高、中、低三個濃度的質(zhì)控樣品。分析批〔Analyticalrun/batch〕：包括待測樣品、適當(dāng)數(shù)以持續(xù)幾天完成，但連續(xù)測量不宜超過3天。高溶解度〔Highlysoluble〕：假設(shè)藥物的最大劑量能溶解在250ml或更少的的水溶液中，此藥物可被認為是高溶解度的藥250ml的量來源于標(biāo)準(zhǔn)的生物等效性爭論中受試者用于服藥的一杯水的量。高滲透性〔Highlypermeable〕：滲透性的分類標(biāo)準(zhǔn)以藥物在〔〕為能充分描述人體內(nèi)的吸取程度〔如體外上皮組織細胞培育法〕吸取程度到達90%時，此藥物可被認為是高滲透性的?？焖偃艹觥睷apidlydissolving〕:利用規(guī)定的第一法裝置100rpm(或二法裝置50rpm)，使用900ml或少于900ml的以下每種介質(zhì)測定溶出度：〔1〕LHCl或符合藥典規(guī)定的無酶人工胃液；pHpH在上述條件下，假設(shè)一個口服制劑在30分鐘內(nèi)其標(biāo)示量的85%以上完全溶出，則此藥物被認為是快速溶出的。高變異性藥物〔Highlyvariabledrug〕：當(dāng)某一藥物的個體內(nèi)變異系數(shù)〔以AUC或Cmax計算的個體內(nèi)變異系數(shù)〕大于或等于30%時，稱之為高變異藥物。這種變異的增加使得對樣本例數(shù)可能要求增加。八、參考文獻CFDA.化學(xué)藥品制劑人體生物利用度和生物等效性爭論指導(dǎo)原則〔試行〕，2023.中國藥典2023版二部附錄