牛病毒性腹瀉病毒磁微?；瘜W(xué)發(fā)光檢測方法

1牛病毒性腹瀉病毒磁微?；瘜W(xué)發(fā)光檢測方法本文件規(guī)定了牛病毒性腹瀉病毒磁微?；瘜W(xué)發(fā)光檢測方法的試劑與耗材、器材與設(shè)備、樣本采集及處理、操作步驟、試驗成立條件和結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)等內(nèi)下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成文件的必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅注日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運輸技術(shù)規(guī)范4縮略語PBS：磷酸鹽緩沖液（phosphatebuffersalinEDC：1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺（1-(3-Dimethylaminop2標(biāo)記的牛病毒性腹瀉單抗5E9結(jié)合物混合；溫育一段時間洗滌后，加酯分子的發(fā)射光強(qiáng)度達(dá)到最大，通過測量的發(fā)光值結(jié)果和既定的判定方法判定待測樣本的陰陽性。樣6.1耳部切口組織浸泡緩沖液，制備方法7.62℃~8℃冰箱，-20℃冰箱。8.1.1用無菌注射器直接采集血液至滅菌離心管或采用一次性采血管采集血液，分離血清，編號備3μL～250μL耳部切口組織浸泡緩沖液，確保液體完全浸沒樣本。在18℃~26℃條件下耳部切口組織在緩沖液中浸泡12h～24h，浸泡過程中采樣管要密封。樣品處理過程應(yīng)防止樣品污染，注意個人生9操作步驟9.1將樣本、陰性對照、陽性對照分別各加509.5化學(xué)發(fā)光免疫分析儀自動測定各反應(yīng)杯發(fā)光值。4mL，經(jīng)0.22μm過濾，置2℃~8℃保存。XX/TXXXXX—XXXX5B.1取0.3mg牛病毒性腹瀉單抗2G5，裝入透析袋中，置PBS中室溫（15℃~25℃)透析4h。B.2磁珠洗滌取10mg羧基磁珠到離心管中，固定到磁力架上進(jìn)行磁分離（或10000g離心5液，搖勻后固定在混勻器上室溫（15℃~25℃)反應(yīng)30min。反應(yīng)結(jié)束后，磁分離，移除上清，用體積1mL，搖勻后固定在混勻器上室溫（15℃~25℃)反應(yīng)4h。反應(yīng)結(jié)束后，磁分離，移除上清，2℃~8℃保存?zhèn)溆谩?結(jié)合物取400μL牛病毒性腹瀉單抗5E9（濃度3mg/mL），裝入透析袋中，置于PBS中透析，室溫（15℃~25℃)透析4h。將標(biāo)記的抗體溶液，裝入透析袋內(nèi)，置于PBS（0.05moL/L，pH值7.4）中透析，室溫（15℃~25℃)透析過夜，中間換液2次～3次。0.02%Proclin-300混勻后經(jīng)0.22μm濾器過濾，無菌分裝，于2℃~8℃保存。XX/TXXXXX—XXXX7對1頭未感染牛病毒性腹瀉的健康動物進(jìn)行頸部靜脈大量采血，經(jīng)牛病毒性腹瀉熒光定量RT-室溫（15℃~25℃)待血液凝固后，37℃靜置2h，然后2℃~8℃靜置1h，將析出的血清轉(zhuǎn)稀釋到陰性對照血清中，混合均勻后，0.22μm濾膜過濾除菌。無菌定量分裝，1mL/瓶，冷凍真8相關(guān)試劑勻加純化水定容至1000mL。定量分裝，2℃~8℃保存。X-1002.5mL，攪拌均勻加純化水定容至1000mL。定量分裝，2℃~8℃保存。水?dāng)嚢枞芙?，再加純化水定容?000mL，經(jīng)0.22μm過濾，置2℃~8℃保存。0.22μm過濾，置2℃~8℃保存。），），攪拌均勻，PBS定容至1000mL，經(jīng)0