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核酸的酸堿性知識(shí)點(diǎn)二八核酸化學(xué)1、堿基的解離2、核苷的解離3、核苷酸的解離1、堿基的解離胞嘧啶DNA嘧啶堿基的解離尿嘧啶胸腺嘧啶DNA嘌呤堿基的解離腺嘌呤鳥嘌呤的解離2、核苷的解離糖存在影響了堿基的解離——增強(qiáng)了堿基的酸性解離核糖中羥基也可以發(fā)生解離核酸的紫外吸收知識(shí)點(diǎn)三八核酸化學(xué)二、紫外吸收性質(zhì)核酸的變性知識(shí)點(diǎn)四八核酸化學(xué)
DNA的變性定義:在某些理化因素作用下,DNA雙鏈解開成兩條單鏈的過(guò)程。方法:過(guò)量酸,堿,加熱,變性試劑如尿素、酰胺以及某些有機(jī)溶劑如乙醇、丙酮等。變性后其它理化性質(zhì)變化:OD260增高 粘度下降比旋度下降 浮力密度升高酸堿滴定曲線改變 生物活性喪失DNA變性的本質(zhì)是雙鏈間氫鍵的斷裂例:變性引起紫外吸收值的改變DNA的紫外吸收光譜增色效應(yīng):DNA變性時(shí)其溶液OD260增高的現(xiàn)象。熱變性解鏈曲線:如果在連續(xù)加熱DNA的過(guò)程中以溫度對(duì)A260(absorbance,A,A260代表溶液在260nm處的吸光率)值作圖,所得的曲線稱為解鏈曲線。核酸的穩(wěn)定性知識(shí)點(diǎn)一八核酸化學(xué)(一)酸水解糖苷鍵比磷酸二酯鍵更易被酸水解嘌呤堿基的糖苷鍵比嘧啶堿基的糖苷鍵對(duì)酸更不穩(wěn)定水解(二)堿水解RNA的磷酸酯鍵易被堿水解,產(chǎn)生核苷酸。由于RNA的核糖上有2’-OH基,在堿作用下形成磷酸三酯。磷酸三酯極不穩(wěn)定,隨即水解產(chǎn)生,產(chǎn)生2’,3’-環(huán)磷酸酯,再水解成2’-核苷酸及3’-核苷酸相對(duì)而言DNA一般對(duì)堿穩(wěn)定。(三)酶水解非特異性——磷酸二酯酶5′
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p3′BBBBBBB牛脾磷酸二酯酶(5′端外切5得3)蛇毒磷酸二酯酶(
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