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一例豬流行性腹瀉的診斷與治療實(shí)例分析目錄TOC\o"1-2"\h\u28692一例豬流行性腹瀉的診斷與治療 155361、發(fā)病情況 2212392、臨床癥狀 3250063、病理變化 3121054、病毒分離鑒定 3121364.1??病料采集 3127114.2??病料處理 4109455.1??引物設(shè)計(jì) 4268515.2??病毒的RT-PCR 4305575.3??病毒的RT-PCR鑒定結(jié)果 4250216、防治措施 5204576.1加強(qiáng)飼養(yǎng)管理 5290406.2合理補(bǔ)料,控制仔豬腹瀉 5114976.3減少各種應(yīng)激 5117166.4治療措施 559067、討論與小結(jié) 618043參考文獻(xiàn) 810613致謝 9摘要:豬流行泄瀉病毒,是指一種由豬流行泄瀉病毒所致的急性上消化道感染。本病為生豬生產(chǎn)中常見的一種病癥,以健康母豬和肥育型母豬的產(chǎn)性能居多,其危害程度與傳染性胃腸炎類似。拉肚子、消瘦、拉肚子、食欲不振、脫水等是常見的癥狀,發(fā)病時(shí)間一般在1-2月份或12月份,病死率較高,隨著年齡的增長(zhǎng),癥狀逐漸加重。就算能治好,也會(huì)對(duì)它的生長(zhǎng)造成一定的影響。豬流行性腹瀉是一個(gè)十分危害的病癥,因此應(yīng)該采取有效的預(yù)防措施,以減少對(duì)農(nóng)民的經(jīng)濟(jì)損失。本文主要對(duì)豬流行性腹瀉的病原學(xué)特征、體征、診斷標(biāo)準(zhǔn)以及具體的防控對(duì)策等進(jìn)行了概括,希望對(duì)豬流行性腹瀉的防控、病豬的養(yǎng)殖管理等方面具有一定的參考意義。關(guān)鍵詞:豬流行性腹瀉;仔豬;實(shí)驗(yàn)室診斷;治療方法目錄TOC\o"1-2"\h\u31051、發(fā)病情況 142562、臨床癥狀 1239833、病理變化 1212024、病毒分離鑒定 2232054.1??病料采集 2227604.2??病料處理 2313895、病毒的RT-PCR鑒定 2263595.1??引物設(shè)計(jì) 2308945.2??病毒的RT-PCR 275935.3??病毒的RT-PCR鑒定結(jié)果 2176676、防治措施 3240666.1加強(qiáng)飼養(yǎng)管理 3123026.2合理補(bǔ)料,控制仔豬腹瀉 3174696.3減少各種應(yīng)激 311286.4治療措施 3150277、討論與小結(jié) 411421參考文獻(xiàn) 6豬流行性腹瀉(PED)是由冠狀病毒科冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒(PEDV)所致的豬劇烈、較高接觸性胃腸管感染,診斷表現(xiàn)一般有拉肚子、水樣泄瀉、重度脫水等,病理剖檢可見空腸和回腸部分的腸壁變薄,腸絨毛萎縮、脫落。此項(xiàng)研究成果以筆者工作實(shí)踐中出現(xiàn)的一種豬流行性腹瀉為例,通過對(duì)其檢查和處理,總結(jié)豬流行性腹瀉的預(yù)防要領(lǐng)。1、發(fā)病情況二零二二年四月,某市某規(guī)模養(yǎng)殖戶畜主送交檢疫一病死母豬,視診消瘦、皮下干枯、有脫水表現(xiàn),同時(shí)豬廠多數(shù)保育母豬和兩個(gè)半月齡育肥母豬群體患病。戶訴該次疫情從四月十二號(hào)開始,在疫情初期有二頭仔雞發(fā)生急性腹瀉,并伴有嚴(yán)重腹瀉,同時(shí)身體也發(fā)生了脫水。雖然戶主曾用腹瀉藥劑處理過,但療效并不太明顯,且整個(gè)豬們的感染及傳播狀況也并未有所好轉(zhuǎn),之后疫情又進(jìn)一步流行,且有部分仔雞已經(jīng)死去,也帶來了一定的經(jīng)濟(jì)損失。2、臨床癥狀本病的重要癥狀是水樣泄瀉,甚至在拉肚子時(shí)惡心。拉肚子多發(fā)生在進(jìn)食和吃奶后,病癥的輕重依豬年紀(jì)大小而有不同,年紀(jì)越小病癥越重;體溫略高或正常,精力、胃口較差。一周內(nèi),母豬發(fā)生大泄瀉后的2~4天脫水而致死。斷奶母豬、育肥豬的病癥則較輕度,為精力沉郁,食欲不佳,拉肚子,但拉肚子在連續(xù)4~7天后逐漸康復(fù)。而成熟母豬則僅發(fā)生厭食和拉肚子(圖1-3)。圖1小豬水樣腹瀉圖2腸道變薄透明圖3胃內(nèi)充滿凝固的奶水3、病理變化病變范圍僅限于胃消化道,自胃至直腸的以卡他性發(fā)炎為特點(diǎn)。胃內(nèi)具有內(nèi)容物,外觀上呈現(xiàn)多層特征的弛緩性,腸內(nèi)產(chǎn)生大量黃色液體;腸系膜有淚,腸系膜的淋巴腺血管水腫,而小腸絨毛的小腸壁則很薄、呈零點(diǎn)五透明狀態(tài)。在受損區(qū)絨毛長(zhǎng)短從中等到極度縮短,變短的茸毛成融合態(tài),具有生長(zhǎng)發(fā)育不好的刷狀緣。心臟、肺、腎臟等一般無明顯疾病。但尸體逐漸消瘦、脫水,體內(nèi)小腸飽脹擴(kuò)大,腸壁越來越薄成半透明狀態(tài),膨脹迅速,彈力逐漸減弱,充滿大量液體及內(nèi)含物質(zhì),成半透明狀態(tài)或?yàn)榈S色液體,腸系膜補(bǔ)液,腸系膜淋巴腺水腫,胃內(nèi)產(chǎn)生大量黃白色凝乳塊。4、病毒分離鑒定4.1??病料采集取死仔豬小腸黏膜、內(nèi)含物質(zhì)和水樣腹瀉大便作為分離病毒的樣本,將樣品冷藏保存。4.2??病料處理將收集的樣本用滅菌PBS磨碎,多次冰凍,以四℃條件下3000r/min離心30min為宜、抽取上清,將上清液用0.22μm一次濾器過篩除菌、分裝保
5、病毒的RT-PCR鑒定5.1??引物設(shè)計(jì)按照GenBankJN825712.1序列設(shè)計(jì),擴(kuò)增長(zhǎng)度661bp,用以識(shí)別豬流行性腹瀉病毒。引物順序分別為:上行引物:CGGTTCTATTCCCGTT,下行引物:GAAGCACTTTCTCACTATC5.2??病毒的RT-PCR提取病料的RNA,并同時(shí)提出與PEDV陰性腫瘤的對(duì)照(細(xì)胞培養(yǎng)液)和PEDV陽性球菌毒的RNA。病毒RNA用寶生物工程(大連)公司供應(yīng)的RNA萃取試劑盒萃取,一步法RTPCR的化學(xué)反應(yīng)成份和反應(yīng)程序如下。RT-PCR反應(yīng)體系為:10×Buffer?5μL,MgCl2(25?mmol/L)?10μL,dNTPs(10?mmol/L)?5μL,Rnase?Inhibitor(40?U/μL)?1μL,AMV?RTase?XL(5u/μL)?1μL,AMV-Optimized?Taq(5?U/μL)?1μL,上游引物P1(20μmol/L)1μL,下游引物P2(20μmol/L)1μL?,模板5μL,RNase?Free?ddH2O?up?to?50μL。RT-PCR反應(yīng)條件為:50℃反標(biāo)音1h;94℃5min;進(jìn)行PCR循環(huán)后,94℃45S,55℃1min,72℃1min,經(jīng)過三十五個(gè)循環(huán)后,以七十二℃延長(zhǎng)為10min。在反應(yīng)完成后,用百分之零點(diǎn)八的瓊脂糖凝膠電泳測(cè)定了擴(kuò)增結(jié)果。5.3??病毒的RT-PCR鑒定結(jié)果瓊脂多糖凝膠電泳測(cè)定結(jié)果表明,病毒的RT-PCR擴(kuò)增反應(yīng)產(chǎn)物大小約六百六十bp,與預(yù)測(cè)結(jié)論一致(如圖4所示)。回收的RTPCR產(chǎn)品,送往上海生物工程公司檢測(cè)。測(cè)序結(jié)果顯示,和在GenBank上報(bào)告的豬流行性腹瀉病毒序列同源性約在百分之九十六~百分之九十九左右。圖4??RT-PCR結(jié)果6、防治措施6.1加強(qiáng)飼養(yǎng)管理搞好飼料管理工作,搞好預(yù)防性注射,保護(hù)豬場(chǎng)和舍內(nèi)周圍環(huán)境健康,嚴(yán)密殺菌,定時(shí)驅(qū)蟲等,并針對(duì)該區(qū)域疾病的傳播狀況有選擇性的給母豬和仔豬實(shí)施免疫接種。凡妊娠仔豬在生產(chǎn)前二十一天以內(nèi)接種疫苗,仔豬則在分娩后十二小時(shí)內(nèi)以多價(jià)幼畜腹瀉為停。同時(shí)還可針對(duì)地方疫情的嚴(yán)重狀況,選擇性注入魏氏梭菌病、豬流行性腹瀉、感染性胃腸炎和輪狀病毒病等疾病的疫情,并認(rèn)真作好地方疫情管理工作。6.2合理補(bǔ)料,控制仔豬腹瀉從仔豬補(bǔ)料到斷奶后二星期的飼養(yǎng)應(yīng)該保持一致,后期逐步改變,并隨時(shí)提供清潔飲水。在剛斷奶后母豬的飼養(yǎng)中應(yīng)適當(dāng)補(bǔ)給礦物質(zhì)、維他命、有機(jī)酸、酶制劑、微生態(tài)制劑以及抗生素等,以防止或降低母豬腹瀉的發(fā)生。剛出生三天的小豬由于乳汁較稠,乳中的水份已無法適應(yīng)其繁殖需要,故應(yīng)該供給其充分的清潔水源,不然母豬極易因?yàn)閷ふ也坏角鍧嵥?而去飲污水以及尿液。6.3減少各種應(yīng)激母豬對(duì)周圍環(huán)境的適應(yīng)性一般很差,應(yīng)適當(dāng)防止或降低母豬在斷奶、換料和分群等流程中產(chǎn)生的應(yīng)激性影響。所以,在冬季時(shí)應(yīng)注重御寒保溫,在夏季注重抗暑減熱,而改變的飼養(yǎng)方式要循序漸進(jìn),慢慢進(jìn)行。飼養(yǎng)要按時(shí)定量,不得飼養(yǎng)發(fā)霉變質(zhì)的飼料和冷凍飼養(yǎng)。6.4治療措施哺乳仔豬和斷奶母豬的護(hù)理。服用抗菌藥劑,如氟哌酸、慶大霉素、磺胺二甲氧嘧啶、硫酸黃連素和高錳酸鉀等,能有效預(yù)防流感,緩解癥狀。腹瀉嚴(yán)重時(shí)可服用收斂特征藥劑,如鞣酸蛋白、次硝鏹水鉍以及矽碳銀等。對(duì)于脫水嚴(yán)重的仔雞可進(jìn)行補(bǔ)液,首先在靜脈注射中滴入百分之五碳酸氫鈉溶液防止酸中毒,而后靜注百分之五的葡萄糖生理鹽水,其間還可肌肉注射適當(dāng)?shù)牧蛩岚⑼衅啡芤??;蛟陲曫B(yǎng)中加入抗菌藥劑或抗病毒藥物,如硫酸新霉素結(jié)合黃芪多糖,或氟苯尼考結(jié)合黃芪多糖,并且自由飲用口服補(bǔ)液鹽水,并相互銜接約一星期。6.4.1小豬群體的治療措施先對(duì)七出生日齡以內(nèi)的小豬全面治療,收集病料后做為組織滅活疫苗,對(duì)7~15出生日齡的小豬和母豬進(jìn)行移動(dòng)產(chǎn)房,并對(duì)患病的產(chǎn)房清理、消毒和干燥。對(duì)患病期間新生的小豬1出生日齡服用仔豬病毒性流感腹瀉弱毒疫苗治療2頭份,在第三天時(shí)即可用不腹瀉帶仔的母豬所產(chǎn)性能奶水口服用上下午各一次,每個(gè)五mL,奶水通過用人的擠奶器直接吸入帶小豬的母豬乳腺中提取,可達(dá)到很好的防治效果。七出生日齡以上的泄瀉小豬采用補(bǔ)液防治措施。對(duì)十五出生日齡以上小豬則采用及早斷奶的措施,在斷奶后2~3天小豬即可停止泄瀉。6.4.2種豬群體的治療措施對(duì)母豬,用豬感染性胃腸炎和流行性腹瀉二聯(lián)滅活疫苗普免,后海穴四mL/頭和肌肉注射一頭份的腹瀉安徽三聯(lián)學(xué)院弱毒疫苗,每間隔三周用組織滅活疫苗普免一遍,然后在仔豬的生產(chǎn)性能2~3星期注射一次性急性泄瀉二聯(lián)滅活疫苗。公豬可免疫接種于二次急性腹瀉的二聯(lián)滅活疫苗,不免疫組織滅活疫苗。在飲食中增加復(fù)合維生素、葡萄糖刺激和酸化阿莫西林,在泄瀉停止后飼料中增加所有益菌。6.4.3育肥豬群體的治療措施育肥羊一般補(bǔ)給糖水、復(fù)合維生素和酸化阿莫西林,在腹瀉期終止后飼料中增加了健康菌和黏膜的促進(jìn)生長(zhǎng)劑。7、討論與小結(jié)在臨床應(yīng)用與預(yù)防實(shí)踐中,針對(duì)泄瀉問題進(jìn)行財(cái)務(wù)分析,搞懂主要的發(fā)病因子,分清了混雜感染與單一感染,以便制定針對(duì)性的防控對(duì)策,將傳染病所造成的損失降到極限。每天進(jìn)行清糞,注意通風(fēng),保證圈舍干旱,以降低病原細(xì)菌繁殖的機(jī)率。要進(jìn)行"春捂秋凍",注意對(duì)產(chǎn)房仔雞和保育豬的保溫措施,特別是腹腔的有效溫度。將該場(chǎng)內(nèi)部滅菌池中的火堿液,每2~3天置換一遍。對(duì)豬舍和豬群,建議采用1:500~1000的過氧醋酸熏蒸滅菌。由于仔豬腹瀉問題相對(duì)易于治療,所以如果發(fā)現(xiàn)有仔雞感染時(shí),應(yīng)立即找出原因,并對(duì)癥下藥處理。同時(shí)將其隔絕在潔凈、干旱、暖和的豬舍中,并做好看護(hù),適時(shí)清理糞便和廢水,以避免病原傳染。并對(duì)同窩母豬實(shí)施藥劑防治。但對(duì)患有頑固性拉肚子和有嚴(yán)重拉肚子表現(xiàn)的患者則要在全面分析的基礎(chǔ)上,采取綜合預(yù)防、對(duì)因處理與對(duì)癥治療相結(jié)合的辦法進(jìn)行治療。對(duì)于養(yǎng)殖區(qū)引起豬流行性腹瀉的,主要對(duì)策是減少感染時(shí)間,避免復(fù)發(fā),最大程度的降低風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)降低傳染源,增強(qiáng)豬群抵抗力,創(chuàng)造良好的發(fā)展條件。產(chǎn)房的小豬死亡高,流傳速度,發(fā)病周期較長(zhǎng)。要對(duì)在產(chǎn)房的七日齡內(nèi)感染小豬早處理,將其余小豬群遷移,對(duì)產(chǎn)房?jī)?nèi)早消毒處理,并做好全進(jìn)全出,以盡量減少傳染源的蔓延和重復(fù)感染,并盡量減少對(duì)仔豬流行腹瀉病毒通過糞口傳播和空氣氣溶膠傳播的直接傳播。而如何進(jìn)行感染后對(duì)仔豬的疫苗免疫,是預(yù)防仔豬流行腹瀉復(fù)發(fā)的重要舉措。針對(duì)內(nèi)分泌型IgA抗體保存持續(xù)時(shí)間較短的特性,豬場(chǎng)應(yīng)對(duì)新發(fā)病仔豬緊急執(zhí)行免疫力腹瀉安徽三聯(lián)學(xué)院弱毒疫苗和拉肚子二聯(lián)殺滅病毒疫苗,然后間斷三周再免疫接種腹瀉三聯(lián)弱毒和拉肚子二聯(lián)殺滅病毒疫苗,然后間斷3~4周再開始生產(chǎn)前的2~3周,隨胎免疫接種拉肚子二聯(lián)殺滅病毒疫苗,仔豬奶水中馬上有了很高水平的內(nèi)分泌型IgA抗體,給新生的小豬提供了母源抗體保障。如不實(shí)行跟胎免疫學(xué),則母豬產(chǎn)性能在奶水中釋放型IgA很低,故終止一次免疫必須要產(chǎn)前2~3周跟胎免疫學(xué)腹瀉二聯(lián)滅活病毒。對(duì)不是病發(fā)豬流行性腹瀉的,母豬廠內(nèi)必須要免疫腹瀉活病毒的回飼,起到啟動(dòng)內(nèi)分泌型IgA,而后期滅活疫苗免疫也可以促進(jìn)內(nèi)分泌型IgA的形成。針對(duì)全場(chǎng)母豬,發(fā)了流行性腹瀉也不能返喂。公豬同時(shí)也要免疫于商品化的腹瀉二聯(lián)滅活疫苗,避免與公豬透過精液的垂直方式傳染。對(duì)新生小豬要在一出生日齡服用二頭份的弱毒疫苗,出生日齡后服用不能腹瀉帶仔母豬正常生產(chǎn)性能的奶水。一日齡免疫性腹瀉弱毒疫苗也是很高效的,因?yàn)榇藭r(shí)胃液為偏中性,疫苗迅速抵達(dá)小腸,達(dá)到對(duì)局部黏膜免疫力,通過服用帶有抗體的母乳,就能夠中和由發(fā)病母豬乳汁所傳播的仔豬流行性腹瀉病毒。最后要做好環(huán)境衛(wèi)生,保證產(chǎn)房干燥,提高室溫,以創(chuàng)造對(duì)豬群最適宜的生產(chǎn)環(huán)境。參考文獻(xiàn)劉羅虎臣,陳清華.豬流行性腹瀉病原學(xué)特征及其診斷與防治[J].湖南飼料,2018(05):16-18.LEEC.Porcineepidemicdiarrheavirus:anemergingandre-emergingepizooticswinevirus[J].Virology,2015,12(1):193-208.平作軍.豬流行性腹瀉的典型癥狀和治療[J].中國(guó)動(dòng)物保健,2019,21(09):15-16.錢廣敏,陳傳蓮.豬流行性腹瀉的診斷與防控措施[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘,2013,29(04):135.吳元忠
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