第十四章 實驗動物與生物安全教材

第十四章實驗動物與生物安全

生物危害

對野生動物的濫捕濫殺造成生物多樣性的逐漸消失第十四章實驗動物與生物安全過分侵犯野生動物的領(lǐng)地和利用野生動物造成一些未知傳染病的發(fā)生和流行一些烈性傳染病病原體和生化材料也可能被恐怖分子利用制造生物武器，用于戰(zhàn)爭和破壞活動

引進(jìn)的外來物種一旦脫離人為控制，可能威脅生態(tài)平衡生命科學(xué)研究中使用的大量有機化學(xué)品、有毒試劑和供試品流入環(huán)境中造成環(huán)境污染，進(jìn)而影響生物界和人類自身依靠先進(jìn)的生物技術(shù)手段進(jìn)行生物體之間基因的轉(zhuǎn)換與重組，可能帶來潛在的、不可預(yù)見的危害和災(zāi)難第一節(jié)生物安全的基本概念一、生物安全的定義

所謂生物安全（biosafety）一般指針對現(xiàn)代生物技術(shù)開發(fā)和應(yīng)用的同時可能造成的對自然界生態(tài)環(huán)境、動物和人體健康產(chǎn)生的潛在危害所采取的一系列有效預(yù)防和控制措施。是國家安全問題的組成部分，是指與生物有關(guān)的各種因素對社會、經(jīng)濟(jì)、自然界生態(tài)環(huán)境及人類健康及所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險。第一節(jié)生物安全的基本概念一、生物安全的定義在各學(xué)科領(lǐng)域中針對現(xiàn)代生物技術(shù)的研究、開發(fā)、應(yīng)用可能對生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類健康產(chǎn)生潛在的不利影響所采取的一系列有效預(yù)防和控制措施。廣義狹義第一節(jié)生物安全的基本概念二、動物實驗中的生物安全問題實驗動物的一些烈性傳染病的流行和傳播可造成大批動物的死亡，危及動物的健康；實驗動物帶有的一些人獸共患病病原微生物可感染人，危害人的健康。此外，用來做實驗研究的野生動物也可能攜帶對人類產(chǎn)生嚴(yán)重威脅的人畜共患病病原體動物實驗過程中使用的一些有毒有害化學(xué)品、藥品、消毒劑、殺蟲劑、農(nóng)藥等，流入環(huán)境，造成環(huán)境污染，最終影響自然界和人類健康

實驗動物的皮毛及排泄物對某些過敏體質(zhì)的人是致敏原，可引起過敏性鼻炎、支氣管哮喘、皮疹等

由重組DNA技術(shù)發(fā)展形成的遺傳工程細(xì)菌和動物可能造成以目前科學(xué)水平和知識所無法預(yù)見的危害

第一節(jié)生物安全的基本概念三、生物安全的相關(guān)術(shù)語

1.實驗室生物安全（laboratorybiosafety）

是指從事生命科學(xué)研究和教學(xué)的實驗室為避免各種生物危害而采取包括建立規(guī)范的管理體系、配備必要的物理、生物防護(hù)設(shè)施和設(shè)備等綜合措施。第一節(jié)生物安全的基本概念三、生物安全的相關(guān)術(shù)語

2.生物安全實驗室（biosafetylaboratory,BSL）是指專門從事病原微生物的實驗室，為避免病原微生物對工作人員、公眾的危害以及對環(huán)境的污染，保證試驗研究的科學(xué)性或保護(hù)被試驗因子免受污染，通過防護(hù)屏障和管理措施，達(dá)到生物安全要求的生物實驗室。

四級生物安全水平

第一節(jié)生物安全的基本概念三、生物安全的相關(guān)術(shù)語一級生物安全水平二級生物安全水平三級生物安全水平

第一節(jié)生物安全的基本概念三、生物安全的相關(guān)術(shù)語

3．實驗動物生物安全實驗室（AnimalBiosafetyLaboratory,ABSL）

將不同級別的病原微生物感染動物，進(jìn)行動物試驗研究，用于動物傳染病或動物模型的臨床診斷、治療、預(yù)防，以及未知病原體的鑒定研究等工作，需要在相應(yīng)級別的ABSL中進(jìn)行，如一、二、三、四級病原微生物的動物實驗應(yīng)在ABSL-1、2、3、4中進(jìn)行。第一節(jié)生物安全的基本概念三、生物安全的相關(guān)術(shù)語ABSL-1ABSL-2ABSL-3ABSL-4第一節(jié)生物安全的基本概念四、國內(nèi)外生物安全的法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)

（一）國外實驗室生物安全的法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)《實驗室生物安全手冊》《微生物學(xué)及生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全準(zhǔn)則》

歐洲經(jīng)濟(jì)共同體委員會指令93/88第一節(jié)生物安全的基本概念

四、國內(nèi)外生物安全的法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)

（二）我國實驗室生物安全的法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)《突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例》《傳染性非典型肺炎人體樣品采集、保藏、運輸和使用規(guī)范》第一節(jié)生物安全的基本概念

病原微生物實驗室生物安全管理條例及配套文件

醫(yī)療廢物管理條例及配套文件《病原微生物實驗室生物安全管理條例》《動物病原微生物分類名錄》《致病性動物病原微生物菌（毒）種或者樣本運輸包裝規(guī)范》《高致病性動物病原微生物實驗室生物安全管理審批辦法》《醫(yī)療廢物管理條例》《醫(yī)療廢物分類目錄》《醫(yī)療廢物管理行政處罰辦法》《醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》四、國內(nèi)外生物安全的法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)

（二）我國實驗室生物安全的法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)第一節(jié)生物安全的基本概念

四、國內(nèi)外生物安全的法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)

（二）我國實驗室生物安全的法規(guī)及標(biāo)準(zhǔn)《實驗室生物安全通用要求》《生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范》《獸醫(yī)實驗室生物安全管理規(guī)范》

一、廢棄物廢棄墊料

醫(yī)療及實驗廢棄物廢液第二節(jié)實驗動物生物危害的種類及控制

第二節(jié)實驗動物生物危害的種類及控制

第二節(jié)實驗動物生物危害的種類及控制

二、動物糞便三、動物尸體

四、野生動物和昆蟲

五、動物致敏原六、有害氣體第三節(jié)動物飼養(yǎng)和實驗人員的安全防護(hù)

一、動物實驗前人員的安全教育

二、動物實驗中的個人安全防護(hù)

三、意外損傷的防護(hù)第四節(jié)重要的人獸共患病第十四章實驗動物與生物安全按照世界衛(wèi)生組織的定義，人畜共患病是指脊椎動物與人類之間自然傳播和感染疾病，即人類和脊椎動物由共同病原體引起，在流行病學(xué)上又有關(guān)聯(lián)的疾病。它是由病毒、細(xì)菌、衣原體、立克次體、支原體、螺旋體、真菌、原蟲和蠕蟲等病原體所引起的各種疾病的總稱?？袢《尽?/p>

1.狂犬病【病原體】第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病

患病動物如犬和貓是主要的傳染來源?；疾游锖胁《镜耐僖航?jīng)由咬傷、抓傷或其他傷口進(jìn)入人體內(nèi)。幾乎所有溫血動物都對狂犬病毒易感。

1.狂犬病【傳播途徑】第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾?。?）潛伏期（2）前驅(qū)期（3）興奮期（4）昏迷期

1.狂犬病【臨床表現(xiàn)】第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病

對可疑動物應(yīng)隔離，密切檢疫觀察2周以上。如2周內(nèi)死亡，應(yīng)取其腦組織送到地區(qū)疾病控制中心進(jìn)行病理檢查。動物尸體整體焚毀。人被動物咬傷后，傷口應(yīng)立即徹底清洗，不包扎，并立即（24小時內(nèi)）到防疫部門進(jìn)行預(yù)防注射。一般在做犬類實驗前，應(yīng)給所有犬注射狂犬疫苗。在購入犬做實驗時，注意從標(biāo)準(zhǔn)化犬場購入健康實驗犬做實驗，不買無健康保證的犬，以免對實驗人員造成危害和影響實驗結(jié)果。

1.狂犬病【防治措施】第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病淋巴細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎（

LCMV）病毒

2．淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎【病原體】第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病野小鼠是該病毒的天然宿主，可自然或?qū)嶒炇腋腥救巳丝赏ㄟ^接觸感染動物經(jīng)皮膚、結(jié)膜、吸入或經(jīng)口攝入病毒而感染。

2．淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎【傳播途徑】第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病人感染該病毒后可引起人的無菌性腦膜炎或流感樣癥狀，偶有嚴(yán)重的腦膜炎或腦膜腦脊髓炎，且大多預(yù)后良好，僅有極少數(shù)病例死亡。主要癥狀有發(fā)熱、頭痛、肌肉疼痛、動眼時疼痛、惡心、嘔吐，部分表現(xiàn)為咽喉痛、畏光、咳、腹瀉等。

2．淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎【臨床表現(xiàn)】第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病

嚴(yán)格控制和防止野鼠、感染動物或被污染的移植物等引入實驗室是防止發(fā)生本病的關(guān)鍵。及時做好動物群體的檢疫有利于防止本病的發(fā)生。

2．淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎【防治措施】第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病漢坦病毒

3．流行性出血熱【病原體】第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病野生褐家鼠是本病的傳染源和儲存宿主。野生褐家鼠竄入動物飼養(yǎng)室是實驗大鼠感染并在動物群內(nèi)傳播的重要原因。實驗大鼠感染后可通過糞尿污染飼料墊料經(jīng)消化道傳播，亦可通過呼吸道以氣溶膠形式傳播。

3．流行性出血熱【傳播途徑】第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病本病典型表現(xiàn)有：起病急，有發(fā)熱（38～40℃）、三痛（頭痛、腰痛、眼眶痛）以及惡心、嘔吐、胸悶、腹痛、腹瀉、全身關(guān)節(jié)痛等癥狀，皮膚粘膜三紅（臉、頸和上胸部發(fā)紅），眼結(jié)膜充血，重者似酒醉貌。口腔粘膜、胸背、腋下出現(xiàn)大小不等的出血點或瘀斑，或呈條索狀、抓痕樣的出血點。隨著病情的發(fā)展，病人退燒，但癥狀反而加重，繼而出現(xiàn)低血壓、休克、少尿、無尿及嚴(yán)重出血等癥狀。典型的出血熱一般有發(fā)熱、低血壓、少尿、多尿及恢復(fù)五期經(jīng)過。

3．流行性出血熱【臨床表現(xiàn)】第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病流行性出血熱是一種對實驗人員危害較大的人畜共患傳染病，在國內(nèi)外已發(fā)生多次實驗大鼠出血熱感染事件，應(yīng)引起高度重視。滅野鼠、防止野鼠進(jìn)入實驗室是防止本病感染實驗鼠的主要措施。應(yīng)從有實驗動物生產(chǎn)許可證的單位購買動物，定期血清學(xué)監(jiān)測對于預(yù)防病毒在實驗大鼠間傳播及由實驗大鼠傳播給人是必要的方法之一。一旦發(fā)現(xiàn)感染鼠應(yīng)及時撲殺，徹底消毒飼養(yǎng)室和籠具，清除被污染的血清和組織。實驗人員應(yīng)加強個人防護(hù)，避免傷口被動物排泄物污染。

3．流行性出血熱【防治措施】第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病猴皰疹病毒，又稱B病毒（Bvirus）

4．猴B病毒病【病原體】第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病

B病毒可自然感染獼猴、紅面猴、食蟹猴，感染B病毒呈無癥狀攜帶狀態(tài)，或呈良性經(jīng)過的皰疹樣口炎。人在接觸感染猴時被其咬傷、被污染的針頭或B病毒細(xì)胞培養(yǎng)瓶破碎而刺傷都容易感染該病毒

。

4．猴B病毒病第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病【傳播途徑】人感染后局部形成水皰與壞死灶，出現(xiàn)淋巴結(jié)炎和淋巴管炎病，病毒侵入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起腦脊髓炎，能引起死亡。

4．猴B病毒病第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病【臨床表現(xiàn)】

病猴要及時隔離，或?qū)⒉『锾幩馈Ｅc猴接觸的有關(guān)人員應(yīng)注意防止被猴咬傷，當(dāng)人被猴咬傷后應(yīng)立即用肥皂水清洗傷口，用碘酊消毒。

4．猴B病毒病第四節(jié)重要的人獸共患病一、病毒性疾病【防治措施】沙門氏菌屬(Salmonella)

1．沙門氏菌病【病原體】第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病鼠傷寒沙門氏菌腸炎沙門氏菌多種實驗動物對沙門氏菌易感，尤以小鼠和豚鼠最敏感。接觸傳播。

1．沙門氏菌病第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病【傳播途徑】

沙門氏菌中毒的癥狀主要由急性腸胃炎為主，潛伏期一般為4～48小時，短期是數(shù)小時，長期是2～3天，前期癥狀有惡心、頭疼，全身乏力和發(fā)冷等，主要癥狀有嘔吐、腹瀉、腹痛，糞便以黃綠色水樣便，有時帶膿血和黏液，一般發(fā)熱的溫度在38～40℃，重病人出現(xiàn)打寒戰(zhàn)、驚厥、抽搐和昏迷的癥狀。病程為3～7天，一般預(yù)后良好，但是老人、兒童和體弱者如不及時進(jìn)行急救處理也可導(dǎo)致死亡，多數(shù)沙門氏菌病患者不需服藥即可自愈，嬰兒、老人及那些已患有某些疾病的患者應(yīng)就醫(yī)治療。

1．沙門氏菌病第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病【臨床表現(xiàn)】由于多種實驗動物對本病易感，因此不宜在同一室內(nèi)飼養(yǎng)多種動物，以避免相互交叉感染。飼料要妥善保管，嚴(yán)防變質(zhì)，嚴(yán)防野鼠、蒼蠅和糞便污染。顆粒飼料中總蛋白含量不得低于國家標(biāo)準(zhǔn)，否則易引起營養(yǎng)不良，體質(zhì)下降，誘發(fā)本病；從預(yù)防著手，加強環(huán)境控制，堅持日常消毒滅菌工作，定期進(jìn)行微生物學(xué)檢測；發(fā)現(xiàn)患病動物和可疑動物要及時隔離，及早處理。沙門氏菌對化學(xué)消毒劑的抵抗力不強，一般常用消毒劑和消毒方法均能達(dá)到消毒目的。

1．沙門氏菌病第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病【防治措施】布魯氏桿菌（Brucella）

2．布魯氏菌病【病原體】第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病目前已知有60多種家畜、家禽，野生動物是布魯氏菌的宿主。與人類有關(guān)的傳染源主要是羊、牛及豬，其次是犬。染菌動物首先在同種動物間傳播，造成帶菌或發(fā)病。病畜的分泌物、排泄物、流產(chǎn)物及乳類含有大量病菌，是人類最危險的傳染源。主要通過接觸傳播，亦可通過呼吸道和消化道感染。

2．布魯氏菌病第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病【傳播途徑】人感染布魯氏菌后，可表現(xiàn)為發(fā)熱、頭痛、寒顫、出汗、虛弱、肌肉疼痛、惡心和體重減輕，伴有全身性淋巴結(jié)疼痛和脾腫大。有些病例還出現(xiàn)肺部、胃腸道、皮下組織、睪丸、附睪、卵巢、膽囊、腎及腦部感染，多發(fā)性、游走性全身肌肉和大關(guān)節(jié)痛，以后表現(xiàn)為骨骼受累，其中脊柱受累最常見。

2．布魯氏菌病第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病【臨床表現(xiàn)】不從布氏桿菌疫區(qū)購買實驗用家畜家禽，購入的非標(biāo)準(zhǔn)化實驗動物應(yīng)進(jìn)行隔離檢疫，觀察健康無疾病才可以用于實驗。一旦動物確診感染布氏桿菌，應(yīng)立即處死，焚化處理，消毒飼養(yǎng)環(huán)境。實驗人員應(yīng)注意個人防護(hù)。人感染布氏桿菌病，應(yīng)立即采取相應(yīng)的隔離措施，及時治療疾病。

2．布魯氏菌病第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病【防治措施】

結(jié)核分枝桿菌(M.tuberculosis)

3．結(jié)核病【病原體】第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病主要由呼吸道傳染感染，也可經(jīng)消化道，皮膚創(chuàng)傷等途徑感染。實驗動物中猴最為敏感。

3．結(jié)核病第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病【傳播途徑】

本病癥狀一般很少特征性。人感染本病初期癥狀比較輕微，不易引人注意。全身癥狀主要有低熱，常在午后或勞動后體溫升高；入睡后出汗（盜汗）；疲倦乏力，性情急躁；體重減輕、消瘦；月經(jīng)失調(diào)等。呼吸系統(tǒng)癥狀主要有咳嗽，部分患者有咳血或痰中帶血；胸部隱痛；病情很嚴(yán)重者可有呼吸困難等。

3．結(jié)核病第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病【臨床表現(xiàn)】定期進(jìn)行猴群的微生物監(jiān)測，一旦發(fā)現(xiàn)患病猴必須立即淘汰，并做好無害化處理及環(huán)境消毒工作。結(jié)核菌可通過多種途徑傳染給人，人患本病后，應(yīng)進(jìn)行抗結(jié)核治療。

3．結(jié)核病第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病【防治措施】志賀氏菌(Shigella

dysenteriae)

4．細(xì)菌性痢疾【病原體】第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病

由消化道感染，蒼蠅和蟑螂為主要傳染媒介。靈長類動物最為敏感。

4．細(xì)菌性痢疾【傳播途徑】第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病

人感染后癥狀表現(xiàn)為，急性菌?。杭毙愿篂a，伴有發(fā)冷、發(fā)熱、腹痛、里急后重、排粘液膿血便，全腹壓痛、左下腹壓痛明顯。急性中毒型菌痢（多見于兒童）：起病急驟，突然高熱，反復(fù)驚厥，嗜睡、昏迷，迅速發(fā)生循環(huán)衰竭和呼吸衰竭，腸道癥狀輕或缺如；慢性菌痢：有持續(xù)輕重不等的腹痛、腹瀉、里急后重，排粘液膿血便的痢疾癥狀，病程超過兩個月。

4．細(xì)菌性痢疾第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病【臨床表現(xiàn)】

定期進(jìn)行猴群的微生物監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)糞便志賀氏菌陽性的病猴或健康帶菌猴應(yīng)及時隔離治療，做好環(huán)境消毒工作。人患細(xì)菌性痢疾后，應(yīng)暫時脫離動物飼養(yǎng)/實驗崗位，進(jìn)行抗痢疾桿菌治療，必要時靜脈滴注，糾正水、電解質(zhì)紊亂和酸堿平衡。

4．細(xì)菌性痢疾第四節(jié)重要的人獸共患病二、細(xì)菌性疾病【防治措施】

溶組織內(nèi)阿米巴（Entamoeba

histolytica）

1．阿米巴病【病原體】第四節(jié)重要的人獸共患病三、寄生蟲病

多數(shù)家畜、靈長類、嚙齒類、兩棲爬行動物和野生動物都可大量感染溶組織內(nèi)阿米巴，作為其儲藏宿主。在實驗動物中主要是犬和猴。蟑螂可攜帶阿米巴包囊。接觸或消化道傳播。

1．阿米巴病第四節(jié)重要的人獸共患病三、寄生蟲病【傳播途徑】輕微的水瀉到急性爆發(fā)性血痢或粘液樣痢疾，伴有發(fā)熱或寒顫，在幾個月至幾年間交替出現(xiàn)或緩解或加重現(xiàn)象。

1．阿米巴病第四節(jié)重要的人獸共患病三、寄生蟲病【臨床表現(xiàn)】定期進(jìn)行寄生蟲監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)糞便阿米巴原蟲陽性或健康帶蟲動物應(yīng)及時隔離治療，做好環(huán)境消毒工作。動物飼養(yǎng)室周圍定期滅蟑螂。人患阿米巴痢疾后，應(yīng)暫時脫離動物飼養(yǎng)/實驗崗位，進(jìn)行抗阿米巴治療。

1．阿米巴病第四節(jié)重要的人獸共患病三、寄生蟲病【防治措施】弓形蟲（Toxoplasma

gondii）

2．弓形蟲病【病原體】第四節(jié)重要的人獸共患病三、寄生蟲病

貓及某些貓科動物為其終末宿主，中間宿主則非常廣泛，包括爬行類、魚類、昆蟲類、鳥類、哺乳類等動物和人。通過皮膚粘膜或消化道傳播。

2．弓形蟲病第四節(jié)重要的人獸共患病三、寄生蟲病【傳播途徑】老年人感染弓形蟲多表現(xiàn)為發(fā)熱、斑丘疹、肌肉疼痛、關(guān)節(jié)痛、頸后淋巴結(jié)炎癥、肺炎、心肌炎和腦膜炎。先天性感染可導(dǎo)致全身性疾病，常伴有嚴(yán)重的神經(jīng)病理學(xué)變化。出生的嬰兒感染表現(xiàn)為全身淋巴結(jié)炎，不經(jīng)治療可在幾周內(nèi)消退。

2．弓形蟲病第四節(jié)重要的人獸共患病三、寄生蟲病【臨床表現(xiàn)】引進(jìn)動物前要進(jìn)行弓形體檢查；定期進(jìn)行血清學(xué)檢查以預(yù)防本病的傳播。妊娠3個月內(nèi)孕婦應(yīng)避免接觸犬、貓等動物。確診弓形蟲感染應(yīng)進(jìn)行治療。

2．弓形蟲病第四節(jié)重要的人獸共患病三、寄生蟲病【防治措施】

真菌（Fungus）

1．真菌病【病原體】第四節(jié)重要的人獸共患病

四、其他病原微生物疾病

傳染源為患皮膚真菌感染的動物，通