傳染與免疫課件

傳染與免疫第一節(jié)傳染第二節(jié)非特異性免疫第三節(jié)特異性免疫第四節(jié)免疫學方法及其應用第五節(jié)生物制品及其應用編輯版ppt1一、傳染與傳染病二、決定傳染結局的三大因素三、傳染的三種可能結局第一節(jié)傳染編輯版ppt2傳染病凡是由病原微生物引起，具有一定的潛伏期和臨診表現(xiàn)，并具有傳染性的疾病，稱為傳染病。疾病生物體在一定條件下，由體內(nèi)或體外致病因素引起的一系列復雜且有特征性的病理狀態(tài)，即稱疾病(disease)。一、傳染與傳染病傳染病原微生物侵入機體后，在一定的部位生長繁殖，造成機體功能和組織結構一定程度的損害。病原微生物：能引起疾病的微生物。編輯版ppt3二、決定傳染結局的三大因素（一）病原菌(毒力、入侵數(shù)量、門徑)（二）宿主的免疫力（三）外界環(huán)境（自然、社會環(huán)境）編輯版ppt4(一)病原菌

③抗吞噬細胞因子（莢膜類物質(zhì)）莢膜、M蛋白（釀膿鏈球菌細胞表面的一層特殊蛋白質(zhì)）1、毒力（1）侵襲力病原微生物侵入機體，克服機體的防御機能，而獲得生長繁殖和損害機體的能力。決定侵襲力的因素：①粘附因素有些病原細胞具有菌毛，絲狀體等粘附因素，易與宿主細胞受體結合。②親器官性病原對其感染組織具有高度的選擇性④酶類本身不具毒性編輯版ppt5第八章傳染與免疫透明質(zhì)酸酶：溶解結締組織中的透明質(zhì)酸。膠原酶：水解肌肉中的膠原蛋白。血漿凝固酶：可促進血纖維蛋白凝固成塊，保護細菌不易被吞噬細胞吞噬。鏈激酶：促進纖維蛋白凝塊溶解，有利于病原菌在組織中擴散。脫氧核糖核酸酶：能水解組織細胞壞死時釋放的核蛋白和DNA，使粘稠的膿汁變稀，有利于病原菌擴散。編輯版ppt6（2）毒素：（化學成分和毒性特點）外毒素革蘭氏陽性菌在代謝過程中分泌到細胞外面的一種毒素，其化學組成是蛋白質(zhì)。

內(nèi)毒素存在于G-菌的細胞壁中，細菌溶解釋放出來，化學成分為磷脂-多糖-蛋白質(zhì)復合物（脂多糖）。特點：

A、抗原性很強；

B、對機體的組織器官具有選擇性；

C、毒性較強但不穩(wěn)定，容易破壞。故可脫毒制成類毒素用0.3—0.4%的甲醛處理，可使其毒性完全喪失，但仍保留其抗原性，這種經(jīng)處理的外毒素稱之。特點：對組織器官是沒有選擇性，毒性較低，抗原性較弱。編輯版ppt73、侵入門徑傳染源指某種傳染病的病原體在其中寄居，生長繁殖，并能排出體外的動物機體。2、入侵病原體的數(shù)量傳染媒介易感動物對某種傳染病沒有抵抗力或抵抗力弱的動物。傳播途徑病原體由傳染源排出后，經(jīng)一定的方式再侵入其他易感動物所經(jīng)的途徑稱為傳播途徑編輯版ppt8（二）宿主的免疫力變態(tài)反應：自身免疫?。喊┳儯嚎箓魅久庖撸鹤陨矸€(wěn)定功能：免疫監(jiān)視作用：免疫概念：傳統(tǒng)概念：機體抵抗病原微生物的能力，即抗傳染免疫現(xiàn)代概念：機體識別和排除抗原異物的一種保護性能力排除和消滅侵入的病原微生物。排除自身的廢物和無用細胞。處理自身的突變細胞。機體對進入的病原微生物等發(fā)生強烈反應。由于自身穩(wěn)定功能失調(diào)而引起。免疫監(jiān)視功能失調(diào)，可引起腫瘤的發(fā)生。編輯版ppt9（三）外界環(huán)境自然環(huán)境社會環(huán)境編輯版ppt10三、傳染的3種可能結局

病原菌侵入其宿主后，按病原菌、宿主與環(huán)境三方面力量的對比或影響的大小決定著傳染的結局。編輯版ppt111、隱性感染(inapparentinfection)

動物機體具有一定程度的免疫基礎，病原體的毒力較弱，侵入的數(shù)量較少，使機體的癥狀不明顯和根本不產(chǎn)生癥狀。編輯版ppt122、顯性感染（apparentinfection）顯性感染：若機體免疫力差，或入侵的病原體毒力強，數(shù)量多，機體難以克服其損害，表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀。按發(fā)病時間的長短可把顯性傳染分為急性傳染(acuteinfection)和慢性傳染(chronicinfection)兩種．按發(fā)病部位的不同，顯性感染又可分為局部感染(localinfection)和全身感染(systemicinfection)兩種.編輯版ppt133、帶菌狀態(tài)（carrierstate）帶菌狀態(tài)：如果病原菌與宿主雙方都有一定的優(yōu)勢，但病原體僅被限制于某一局部且無法大量繁殖，兩者長期處于相持的狀態(tài)。編輯版ppt14第二節(jié)非特異性免疫非特異性免疫(Non-specific/innate/naturalimmunity):凡在生物長期進化過程中形成，屬于先天即有、相對穩(wěn)定、無特殊針對性的對付病原體的天然抵抗能力.Non-specificimmunity主要由宿主的屏障結構、吞噬細胞的吞噬功能、正常組織與體液中的抗菌物質(zhì)和炎癥反應。編輯版ppt15一、機體的自然屏障作用1、皮膚和粘膜屏障（1）機械屏障作用（2）分泌物和排泄物中所含的化學物質(zhì)有局部抗菌作用。（3）其上棲息正常菌落與病原菌的拮抗作用2、屏障結構（1）血腦屏障

（2）血胎屏障由母體子宮內(nèi)膜的底蛻膜和胎兒的絨毛膜共同組成。

一種可阻擋病原體及具有毒產(chǎn)物或某些藥物從血流透入腦組織或腦脊液的非專有解剖構造，具有保護中樞神經(jīng)系統(tǒng)的功能，主要由軟腦膜、脈絡叢、腦血管及星狀膠質(zhì)細胞組成。編輯版ppt16二、吞噬細胞及其吞噬作用吞噬細胞：分布于血液、體液或組織中，可進行變形蟲運動，能吞噬、殺死和消化病原微生物等異?？乖陌准毎?，主要有中性粒細胞、巨噬細胞和樹突細胞。

編輯版ppt17(一)多形核白細胞(polymorphonuclearleukocyte，PMN)PMN即粒細胞（嗜中性粒細胞、嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞），在骨髓中形成，半衰期6－7h，分布于血流和骨髓。PMN可以穿越血管壁，大量出現(xiàn)在急性感染部位，發(fā)揮吞噬功能。具分節(jié)狀細胞核，細胞質(zhì)內(nèi)含大量溶酶體，在其溶酶體中含有殺菌物質(zhì)和酶類（溶菌酶、蛋白酶、過氧化氫酶和脂肪酶等）。編輯版ppt18編輯版ppt19(二)巨噬細胞(macrophage,Mφ)存在于血液、淋巴和多種組織中的大型單核細胞，壽命長，具有吞噬和胞飲功能。在體外培養(yǎng)時，具有粘附于玻璃、塑料表面和吸收錐蟲藍等特性。編輯版ppt20(1)吞噬和殺菌作用(2)抗原遞呈作用(antigen-presentation)(3)免疫調(diào)節(jié)作用(4)抗癌作用主要功能：編輯版ppt21(1)吞噬和殺菌作用可通過多種胞內(nèi)酶和胞外酶，殺滅、消化被吞入的病原體和異物，包括清除體內(nèi)衰老、損傷或死亡的細胞。編輯版ppt22(2)抗原遞呈作用(antigen-presentation)

巨噬細胞可通過吞噬、處理及傳遞3個步驟，加工對外來抗原，以適應激活淋巴細胞的需要，這過程稱為抗原遞呈作用。編輯版ppt23抗原處理（antigenprocessing）編輯版ppt24編輯版ppt25(3)免疫調(diào)節(jié)作用在外來抗原刺激下，巨噬細胞可分泌多種可溶性生物活性物質(zhì)（IL/TNF/IFN），激活淋巴細胞、殺傷癌細胞、促進炎癥反應或加強吞噬細胞的吞噬、消化作用等，調(diào)節(jié)免疫功能。編輯版ppt26(4)抗癌作用激活后的巨噬細胞可通過非吞噬性的細胞毒作用，非特異性地抑制或殺傷癌細胞，也可協(xié)同特異性抗體或致敏T細胞產(chǎn)生的特異性細胞因子抑制或殺傷癌細胞。編輯版ppt27三、炎癥反應炎癥是機體對病原體的侵入或其他損傷的一種保護性反應，在相應部位出現(xiàn)紅、腫、熱、痛和功能障礙，是炎癥的五大特征。（1）可動員大量吞噬細胞聚集在炎癥部位；（2）血流的加速使血液中抗菌因子和抗體發(fā)生局部濃縮；（3）死亡的宿主細胞堆集可釋放一部分抗菌物質(zhì)；（4）炎癥中心部位氧濃度的下降和乳酸濃度的提高，可抑制多種病原體的生長；（5）炎癥部位體溫的升高可降低某些病原體的繁殖速度。炎癥既是一種病理過程，又是一種防御病原體入侵的積極的免疫反應，原因是：編輯版ppt28四、正常體液或組織中的抗菌物質(zhì)(一)補體(complement)（1）補體：是人和動物血清中的正常成分，由9種血清蛋白組成，在抗原抗體反應中，有補充抗體作用的能力。（2）補體的功能：抗體的功能是辨別侵入的異體細胞（異物）和激活補體（抗原抗體復合物）；被激活的補體具有攻擊侵入的細胞的作用。（3）補體激活途徑（C1激活途徑、C3旁路途徑）編輯版ppt29IgM/IgG-Ag復合物C1q:r:sC4C4b+C2C4aC2aC4b2bC3C3bC3aCa++Mg++Ca++（C3轉(zhuǎn)化酶）C4b2b3b（C5轉(zhuǎn)化酶）識別活化C5C5b-C6,7,8,9C5a細胞溶解攻擊補體活化的經(jīng)典途徑經(jīng)典途徑的識別階段和活化階段經(jīng)典途徑的膜攻擊階段編輯版ppt32(二)干擾素(interferon，IFN)病毒干擾現(xiàn)象：先感染動物細胞的一種病毒，會對后感染該細胞的另一種病毒產(chǎn)生抑制的現(xiàn)象。干擾素：由干擾素誘導劑作用于活細胞后，由細胞產(chǎn)生的一種理化性質(zhì)比較穩(wěn)定的蛋白質(zhì)，由一種誘導劑所刺激產(chǎn)生的干擾素可抑制很多種病毒的復制，是一種廣譜抗病毒物質(zhì)。產(chǎn)生干擾素的動物和被保護動物之間卻有種屬特特異性。

編輯版ppt33編輯版ppt34第三節(jié)特異性免疫特異性免疫（specifc/acquired/adaptiveimmunity）：指機體針對某一種或某一類微生物及其產(chǎn)物所產(chǎn)生的特異性抵抗力，它是個體在生活過程中獲得，故又稱后天獲得性免疫。體液免疫細胞免疫免疫的物質(zhì)基礎免疫淋巴器官免疫細胞特異性免疫編輯版ppt35一、免疫器官（淋巴器官）1、中樞淋巴器官：淋巴細胞分化成熟的場所。（1）胸腺：T淋巴細胞在其中分化成熟（2）骨髓（法氏囊）：B淋巴細胞分化成熟的場所2、外周淋巴器官（脾臟和淋巴結）來自中樞淋巴器官的淋巴細胞在外周淋巴器官內(nèi)定居，遇抗原后增殖并一步分化成效應B細胞和T細胞，執(zhí)行免疫功能，是免疫應答的場所。

編輯版ppt36二、免疫細胞免疫細胞：來源于骨髓的干細胞,指參與免疫的細胞，包括各類淋巴細胞，巨噬細胞，單核細胞和粒細胞等。免疫活性細胞：指在免疫過程中，受抗原刺激后能進行分化，增殖并發(fā)生特異性免疫應答的T、B淋巴細胞。編輯版ppt37（一）T細胞1、T細胞的主要亞群與功能（1）調(diào)節(jié)性T細胞

1)輔助性T細胞(Thelper，TH)

在體液免疫中發(fā)揮作用，主要功能是輔助B細胞，促使其活化和產(chǎn)生抗體。

2)抑制性T細胞(Tsuppressor，TS)

可抑制TH、TC和B細胞的功能，由它控制淋巴細胞的增殖。編輯版ppt38（2）效應性T細胞1)遲發(fā)型超敏T細胞（TDTH）

TDTH在抗原的刺激下，可被活化、增殖并釋放多種細胞因子，引起機體局部以單核細胞浸潤為主的炎癥（遲發(fā)性超敏反應）。

作用：1）消除由結核分枝桿菌、布魯氏菌和破傷風梭菌等病原菌所引起的慢性感染或胞內(nèi)感染;2）在腫瘤免疫、移植細胞排斥反應和自身免疫病中也有重要作用。編輯版ppt392)細胞毒T細胞(cytotoxicTcell，TC)Tc能特異地溶解帶Tc抗原的靶細胞。編輯版ppt402、細胞因子(100種以上)（1）細胞化學因子（chemokine）（2）白細胞介素（interleukine）（3）細胞毒因子（cytotoxicfactor）（4）集落刺激因子（CSF）（5）促生長因子（growthfactor）（6）干擾素（interferon）編輯版ppt41（二）B細胞B細胞為一種在細胞膜表面帶有自己合成的免疫球蛋白(膜抗體)、產(chǎn)生免疫球蛋白和向T細胞遞呈抗原的淋巴細胞。編輯版ppt42編輯版ppt43免疫分子膜表面免疫分子體液免疫分子MHC白細胞分化抗原抗原抗體補體膜表面抗原受體黏附因子細胞因子三、免疫分子及其在體液免疫中的作用編輯版ppt44(一)抗原（antigen）1、定義：一類能刺激機體產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細胞，并能與這些物質(zhì)在體內(nèi)或體外發(fā)生特異性反應的物質(zhì)。半抗原：不具備抗原性而具反應性的物質(zhì)。完全抗原：編輯版ppt45具有兩種性能：（2）反應原性：它能與相應的抗體或致敏淋巴細胞發(fā)生特異性反應（結合）。（1）抗原性：亦稱免疫原性，能刺激機體形成特異抗體或致敏淋巴細胞等免疫應答能力。編輯版ppt462、抗原的性質(zhì)（1）異物性：進入機體內(nèi)的抗原物質(zhì)必須是與機體不同的物質(zhì)。①異種間的物質(zhì)：馬血清引起家兔產(chǎn)生抗體②同種異體間的物質(zhì):移植排斥反應③自身身體內(nèi)隔絕的物質(zhì)：眼睛水晶體蛋白質(zhì)④正常自身成分:異常（2）有一定組成結構的大分子（3）特異性：能刺激機體產(chǎn)生特定的抗體或致敏淋巴細胞并與之反應。編輯版ppt473、抗原決定簇（AntigenicDeterminants）

指位于抗原表面可決定抗原特異性的特定化學基團，也稱為抗原表位(Epitopes)。一般由5～７個氨基酸、單糖或核苷酸殘基組成。一個抗原分子可有多個抗原表位（抗原結合價）。甲狀腺球蛋白為40，牛血清白蛋白為18編輯版ppt48AntigenicDeterminants(Epitopes)半抗原決定簇構象決定簇線性決定簇編輯版ppt49(二)抗體(antibody，Ab)1．概念高等動物體在抗原物質(zhì)的刺激下，由漿細胞產(chǎn)生的一類能與相應抗原在體內(nèi)外發(fā)生特異結合的免疫球蛋白。抗體的5個特點是：(1)僅由魚類以上脊椎動物的漿細胞所產(chǎn)生；(2)必須有相應抗原物質(zhì)刺激免疫細胞后才能產(chǎn)生；(3)能與相應的抗原發(fā)生特異性、非共價和可逆的結合；(4)其化學本質(zhì)是一類具有體液免疫功能的球蛋白；(5)因抗體是蛋白質(zhì)，故既具抗體功能也可作抗原去刺激異種生物產(chǎn)生相應的抗體，這就是抗抗體.編輯版ppt502、Ig的化學結構(四鏈式)在Ig的v區(qū)端是肽鏈的氨基末端，稱N端，而相反的一端即為肽鏈的羧基端，稱C端。重鏈上還有結合糖(CHO)的部位.

典型的Ig分子是由一長一短的兩對多肽鏈對稱排列而成的一個Y形分子.

近對稱軸的一對較長的肽鏈，稱為重鏈或H鏈，外側(cè)一對較短的肽鏈，稱為輕鏈或L鏈。

占重鏈1／4或輕鏈1／2長度的一段區(qū)域，稱可變區(qū)或V區(qū)；占重鏈3／4或輕鏈1／2長度的一段區(qū)域，則稱恒定區(qū)或c區(qū)(c區(qū)氨基酸序列是恒定的)輕、重鏈間和重、重鏈間分別由二硫鍵(一S—S一0)相連接。

在重鏈的居中處約有30個氨基酸殘基組成了一個能使Ig分子自由曲折的區(qū)段，稱作鉸鏈區(qū)。(1)Ig的種類魚類一般具有IgM

兩棲類具有IgM和IgG

鳥類中一般有IgM、IgG和IgA

家兔中僅有IgM、IgG和IgA

其余多數(shù)種類已具有IgＧ、IgA、IgM和IgE4類人和鼠類則同時具有5類完整的Ig(2)Ig肽鏈的氨基酸數(shù)不同的Ig及其亞類所含的氨基酸殘基數(shù)是有差別的。一般輕鏈的氨基酸殘基數(shù)在220個左右，重鏈則是輕鏈的加倍，約440個。編輯版ppt51(3)Ig的體：有單體、雙體和五體等。IgDmonomerIgAdimerSCJchainJchain

IgMpentamer編輯版ppt52(4)IgG的酶解和化學分解片段FcpFcF(ab′)2Fabpapainpepsin胃蛋白酶編輯版ppt53Ig抗原結合價指每個Ig分子上能與抗原決定簇相結合部位的數(shù)目。由一條輕鏈的v區(qū)和一條重鏈的v區(qū)合在一起可組成一個抗原結合價。(5)Ig的抗原結合價編輯版ppt543、產(chǎn)抗體細胞的激活和抗體的形成編輯版ppt553種細胞的參與與效應：（1）抗原遞呈細胞(APCs)

主要是巨噬細胞、樹突細胞等，其無特異識別抗原的功能，卻能有效地攝取、處理、遞呈抗原和激活T細胞；由此可知，抗體的產(chǎn)生不僅是抗原與免疫細胞間相互識別的過程，而且還與免疫細胞間的相互識別和它們的活化、增殖和分化有關。（3）B細胞是產(chǎn)生抗體的效應細胞，也有特異識別抗原的功能。（2）T細胞在抗體形成過程中能特異地識別抗原，輔助B細胞，促使B細胞活化和進一步分化成漿細胞以產(chǎn)生抗體；胸腺依賴型抗體(TDantibody)的產(chǎn)生編輯版ppt564、抗體形成的一般規(guī)律（1）初次反應與再次反應抗原初次進入機體，抗體產(chǎn)生速度慢，效率低，保持時間短。一般需2周左右，抗體水平才達到最高峰，以后迅速下降（機體的這種初次接觸抗原的反應叫做初次反應）。若間隔一定時間以后，再受同一抗原刺激，抗體數(shù)量達到最高水平，可達初次注射水平的數(shù)倍至10倍，且維持時間也是較長（此即再次反應）。（2）回憶反應當初次注射后所產(chǎn)生的抗體在體內(nèi)完全消失時，如再接觸抗原時，又可使該抗體效價突然上升，此即回憶反應。編輯版ppt57編輯版ppt584、抗體形成的機制（1）在能產(chǎn)生抗體的高等動物體內(nèi)，天生存在著大量具有不同抗原受體的免疫細胞克隆。（2）某一特定抗原一旦進入機體，就可與相應淋巴細胞表面上唯一的一個與其相應的特異性受體發(fā)生結合，由此就從無數(shù)克隆中選擇出一個與之相對應的克隆?？寺∵x擇學說(clonalselectiontheory)是于1957年由澳大利亞學者F.M.Burnet提出的，其要點為：編輯版ppt59（3）當生物處于胚胎期時，某一淋巴細胞克隆若接觸相應抗原(不論外來抗原或自身抗原)，則它就被消除或受抑制（免疫系統(tǒng)的發(fā)育還不完善）。如屬后者，就形成一個禁忌克隆(forbiddenclone)，它們對機體自身抗原物質(zhì)不發(fā)生免疫應答，即處于自然耐受狀態(tài)，這就稱免疫耐受性的原因。（4）禁忌克隆可復活或發(fā)生突變，從而又可成為能與自身抗原成分起免疫應答的克隆。編輯版ppt60第四節(jié)免疫學方法及其應用

傳統(tǒng)的免疫學方法僅局限于用體液免疫產(chǎn)生的抗體與各種抗原在體外進行反應，因所用抗體均采自免疫后的血清，故稱作血清學反應(serologicalreaction)。編輯版ppt61一、抗原、抗體反應的一般規(guī)律(1)特異性(2)可逆性(3)定比性(5)條件依賴性最佳條件一般為pH：6-8，溫度為37-45℃，適當振蕩，以及用生理鹽水作電解質(zhì)等。(4)階段性第一階段的特點是時間短(一般僅數(shù)秒)，不可見；第二階段的時間長(從數(shù)分鐘至數(shù)小時或數(shù)天)，可見。編輯版ppt62編輯版ppt63二、抗原、抗體間的主要反應(一)凝集反應(agglutination)

顆粒性抗原(完整的細菌細胞或血細胞等)與相應的抗體在合適的條件下反應并出現(xiàn)肉眼可見的凝集團現(xiàn)象，稱凝集反應或直接凝集反應。凝集原/凝集素具體方法很多：①直接法；②間接法YYY+

YYY+

編輯版ppt64(二)沉淀反應（precipitation）

可溶性抗原與其相應的抗體在合適條件下反應，并出現(xiàn)肉眼可見的沉淀物現(xiàn)象，稱為沉淀反應。沉淀原/沉淀素。

編輯版ppt65環(huán)狀沉淀反應（Ringprecipitation）加入已知抗血清加待測抗原于抗血清層上面置室溫15分鐘陽性結果：白色沉淀環(huán)定性試驗編輯版ppt66

雙向瓊脂擴散（doubleagardiffusion）

Ag、Ab分別加于小孔內(nèi)

Ag、Ab均在瓊脂凝膠中擴散合適之處形成白色沉淀線5mm3mm編輯版ppt67（三）補體結合試驗1、含抗體血清用于檢測抗原2、加入標準量的補體3、加入與抗體結合的紅細胞4、檢測紅細胞裂解量AgYYPatient’sserum

YYYYYYYYAgNoAgAg編輯版ppt68三、免疫標記技術

免疫標記技術就是將抗原或抗體用小分子的標記劑如熒光素、酶、放射性同位素等加以標記，借以提高其靈敏度和便于檢出的一類新技術。優(yōu)點：特異性強，靈敏度高，應用范圍廣，反應速度快，容易觀察；既可用于定性、定量分析，也用于分子定位等工作。編輯版ppt69(一)免疫熒光技術(immunofluorescenstechnique)免疫熒光技術是一種將結合有熒光素的熒光抗體與抗原進行反應，借以提高免疫反應靈敏度和適合顯微鏡觀察的免疫標記技術。常用的熒光素:

異硫氰酸熒光素、羅丹明等，它們可與Ig中賴氨酸的氨基結合，在藍紫光的激發(fā)下，可分別發(fā)出鮮明的黃綠色和玫瑰紅色光線。編輯版ppt70免疫熒光工作原理FITC1、固定抗原2、加入一抗3、加熒光標記二抗4、熒光顯微鏡鏡檢編輯版ppt71(二)免疫酶技術(immunoenzymatictechnique)

免疫酶技術又稱酶免疫測定法，為一種利用酶作標記的抗體或抗抗體以進行抗原、抗體反應的高靈敏度的免疫標記技術。原理與免疫熒光技術相似，所不同的只是用酶代替熒光素作標記，以及用酶的特殊底物處理標本來顯示酶標記的抗體。由于酶的催化作用，使原來無色的底物通過水解、氧化或還原反應而顯示出顏色。

此法可用于組織切片、細胞培養(yǎng)標本等組織或細胞抗原的定性、定位，也可用于可溶性抗原或抗體的測定。

最常用的是辣根過氧化物酶(HRP)，底物為二苯基聯(lián)苯胺(DAB)。DAB經(jīng)水解后可產(chǎn)棕褐色沉淀物，故可用目測或比色法測定。編輯版ppt72免疫酶技術常用的酶及其底物編輯版ppt73此法優(yōu)點（1）由于是產(chǎn)色反應，故可用普通顯微鏡觀察結果；（2）標本經(jīng)酶標記的抗體染色后，還可用其他染料復染，以顯示細胞的形態(tài)構造；（3）標本可長久保存、隨時查看；（4）特異性強；（5）靈敏度高。編輯版ppt741、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)(1)雙抗體夾心法這是一種測定待測標本中是否含抗原的方法①加已知抗體②加待測抗原③加入酶聯(lián)抗體(二抗)④加底物EE底物+酶肉眼可見的顏色變化編輯版ppt75(2)間接免疫吸附測定法(indirectELISA)一種檢測血清中是否含特定抗體的方法：編輯版ppt76第五節(jié)生物制品及其應用

生物制品：

凡是人工免疫用的抗原和抗體制品以及診斷用的抗原和抗體制品統(tǒng)稱為生物制品。

人工免疫有人工自動免疫和人工被動免疫兩類編輯版ppt77一、

人自動免疫類生物制品（一）常規(guī)疫苗1、疫苗：用于預防傳染病的抗原制劑。（1）活疫苗：指用人工的方法使病原體減毒或從自然界篩選某病原體的無毒株或弱毒株所制成的活微生物制劑。又稱為減毒活苗。（2）死疫苗：用理化因子殺死病原體，但仍保留原有免疫原性的疫苗。2、類毒素類毒素系細菌的外毒素經(jīng)甲醛脫毒后仍保留原有免疫原性的預防用生物制品。3、自身疫苗(autovaeclne，autogenousvaccine)

又稱自體疫苗，指用從病人自身病灶中分離出來的病原體所制成的死疫苗。編輯版ppt78(二)新型疫苗1、亞單位疫苗(subunitvaccine)

一種保留病原體中有效免疫原成分，而去除其無效或有害成分的化學純品疫苗。3、多肽疫苗(polypeptidevaccine)

又稱化學合成疫苗，指用人工合成的高免疫原性多肽片段制成的疫苗，稱多肽疫苗。2、化學疫苗(chemicalvaccine)

用化學方法提取病原體中有效免疫成分制成的化學純品疫苗，其成分一般比亞單位疫苗更為簡單。5、DNA疫苗(DNAvaccine)

又稱核酸疫苗或基因疫苗，指一種用編碼抗原的基因制成的疫苗。將一段編碼抗原的基因直接注射給病人，利用病人自身細胞作“疫苗工廠”，不斷制造抗原，并進一步刺激機體發(fā)生相應保護性免疫應答。4、基因工程疫苗又稱DNA重組疫苗。一種利用基因工程構建重組基因序列，并用它表達的免疫原性較強、無毒性的多肽制成的疫苗。編輯版ppt79DNA疫苗的優(yōu)點：（1）制備容易，只須克隆DNA即可；（2）穩(wěn)定性強，可長期保存(干粉)；（3）DNA提純?nèi)菀?；?）同一質(zhì)粒上可插入多個疫苗基因片段，故一次注射可獲得對多種疾病的免疫力；（5）免疫期長；（6）安全、穩(wěn)定；（7）為治療痛癥和其他疑難疾病提供了新的可能。缺點：必須注入較大劑量的DNA才可克服免疫效率較低的困難。編輯版ppt806、抗獨特型抗體疫苗

位于抗體分子可變區(qū)中高變區(qū)的抗原決定簇，稱為獨特型決定簇或簡稱獨特型(idiotype)，它代表一個抗體分子獨特的遺傳型。用這種抗獨特型抗體作疫苗代替最初抗原，具有以下點：①克服抗原物質(zhì)難以獲得的困難；②解決目標分子或病原物自身免疫原性較弱的不利條件；③避免使用有害或危險的病原體抗原；④取代蛋白質(zhì)以外的抗原。

抗體分子的成分是糖蛋白，故又可作良好的抗原，由它刺激機體產(chǎn)生的抗體就是抗抗體或抗獨特型抗體。編輯版ppt81二、人工被動免疫類生物制品1、抗毒素

用類毒素多次注射馬等大型動物，待其產(chǎn)生大量特異性抗體后，經(jīng)采血、分離血清并經(jīng)濃縮、純化后制成的生物制品。2、抗病毒血清一類用病毒作抗原去免疫動物后，取其含抗體的血清制成的精制治療用生物制品。3、抗菌血清編輯版ppt82編輯版ppt83編輯版ppt84編輯版ppt8586antibodyNewmethodsAnti-idiotypevaccineepitopeAntibodywithepitopebindingsiteVirus編輯版ppt87antibodyAnti-idiotypevaccinecontMakeantibodyagainstantibodyidiotypeAnti-

idiotype

antibodyAnti-idiotypeantibodymimicstheepitope編輯版ppt88Anti-anti-idiotype

antibodyAnti-idiotypeantibodycont2Useanti-idiotypeantibodyasinjectablevaccineAntibodytoanti-idiotype

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antibodyUseasvaccine編輯版ppt編輯版ppt8990Vaccines1796Jenner:wildtypeanimal-adaptedvirus1800’sPasteur:Attenuatedvirus

1996DNAvaccinesThethirdvaccinerevolution編輯版ppt91DNAVaccinesplasmidMusclecellGeneforantigenMusclecellexpressesprotein-antibodymadeCTLresponse編輯版ppt92DNAVaccinesPlasmidsareeasilymanufacturedinlargeamountsDNAisverystableDNAresiststemperatureextremessostorageandtransportarestraightforward