骨質(zhì)疏松癥治療藥物的研究及應(yīng)用

關(guān)于骨質(zhì)疏松癥治療藥物的研究及應(yīng)用前言骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis，簡稱OP)是以低骨量及骨組織微結(jié)構(gòu)退變?yōu)樘卣鞯囊环N全身性骨骼疾病，伴有骨脆性增加、易于發(fā)生骨折。第2頁,共89頁，星期六，2024年，5月骨質(zhì)疏松癥在世界常見病多發(fā)病中居第七位全世界骨質(zhì)疏松癥患者超過2億1/3

60-70歲的女性，

2/380歲以上的女性患有骨質(zhì)疏松癥

在歐洲和美國,髖部骨折人數(shù)每年達65萬

死亡率以每年10-20%遞增美國骨質(zhì)疏松癥已超過2500萬，每年治療費用高達100億美元（2001年）2010年我國60歲人口占總?cè)丝?3.26%，預(yù)計2050年將超過2億。2001年根據(jù)我國骨質(zhì)疏松診斷標(biāo)準(zhǔn)預(yù)測我國骨質(zhì)疏松癥患者8400萬，占總?cè)丝?.6%，到2050年將占總?cè)丝?3.2%。第3頁,共89頁，星期六，2024年，5月社會經(jīng)濟影響骨質(zhì)疏松癥的高發(fā)病率巨額的治療費用給個人、社會和國家造成嚴(yán)重的負(fù)擔(dān)第4頁,共89頁，星期六，2024年，5月分類原發(fā)性骨質(zhì)疏松絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松老年性骨質(zhì)疏松特發(fā)性骨質(zhì)疏松幼年性骨質(zhì)疏松成年性骨質(zhì)疏松繼發(fā)性骨質(zhì)疏松先天性成骨發(fā)育不全性腺發(fā)育不全染色體病第5頁,共89頁，星期六，2024年，5月獲得性內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)疾?。ㄆべ|(zhì)醇增多癥、甲亢、甲旁亢、肢端肥大癥、性功能低下、卵巢切除、垂體功能低下、侏儒癥、糖尿病等）消化系統(tǒng)疾?。愿文懠膊?，吸收不良綜合征、胃腸切除、慢性胰腺炎、腹瀉、進食障礙）腎臟系統(tǒng)疾?。阅I功能衰竭）營養(yǎng)性不良（維生素D、維生素C、鈣攝入不足，蛋白質(zhì)缺乏或過多）廢用所致（制動、長期臥床、失重、外傷性骨萎縮、癱瘓、肩-手綜合征）腫瘤所致（多發(fā)性骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、惡性腫瘤、轉(zhuǎn)移瘤等）藥物所致（糖皮質(zhì)激素、肝素、咖啡因和抗癲癇藥等）其它因素（類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、氟骨癥、缺氧、吸煙、酒精中毒、妊娠等）第6頁,共89頁，星期六，2024年，5月研究現(xiàn)狀第7頁,共89頁，星期六，2024年，5月一、骨與骨組織骨由皮質(zhì)骨（密質(zhì)骨）和小梁骨（松質(zhì)骨）構(gòu)成皮質(zhì)骨由骨單位構(gòu)成（哈弗系統(tǒng)：哈弗管，同心骨板、間骨板、環(huán)形骨板）松質(zhì)骨由大量針狀或片狀骨小梁相互連接而成骨組織是堅硬的結(jié)締組織，由細(xì)胞和鈣化的細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成第8頁,共89頁，星期六，2024年，5月（一）骨基質(zhì)無機成份（65%）：骨鹽，主要存在形式為羥基磷灰石結(jié)晶有機成份（35%）：骨膠原（90~95%）、無定形基質(zhì)（10%）膠原纖維基質(zhì)鈣鹽骨細(xì)胞第9頁,共89頁，星期六，2024年，5月1、無機成份鈣鈣的分布成人1200g，約99%（1180g）存在于骨組織，軟骨、牙齒各含7g，細(xì)胞外液約1g鈣含量在20~25歲達到峰值，平均每天增加130~160mg鈣的生理作用鈣的腸吸收及影響因素游離鈣被吸收，主動轉(zhuǎn)運為主，依賴于維生素D及其活性代謝產(chǎn)物。腸內(nèi)鈣濃度高時存在被動轉(zhuǎn)運。吸收能力依次為十二指腸、空腸、回腸維生素D、年齡、激素、陽離子、食物成分、藥物、H+濃度、妊娠與哺乳第10頁,共89頁，星期六，2024年，5月腎鈣轉(zhuǎn)運和尿鈣腎小球濾液的鈣濃度為血鈣的60%，約一半在近曲小管被吸收（被動轉(zhuǎn)運），遠曲小管和集合管為主動轉(zhuǎn)運，有最大重吸收，受多種激素和因素影響，是腎鈣調(diào)節(jié)的重要部位骨鈣的沉積和釋放攝入鈣增加時，一部分鈣就儲存在骨組織中，但有一定限度機體缺鈣時，一部分骨鈣動員出來以維持正常血鈣血鈣及其調(diào)節(jié)系統(tǒng)離子鈣、與蛋白結(jié)合的鈣、與小分子陰離子結(jié)合的鈣8.3~10.5mg/100ml甲狀旁腺激素、降鈣素、維生素D第11頁,共89頁，星期六，2024年，5月磷成人含600g，85%分布于骨骼牙齒，含磷骨無機質(zhì)主要是磷酸鈣，占骨無機質(zhì)的84%影響磷代謝的因素甲狀旁腺激素、維生素D及其代謝產(chǎn)物，其它（降鈣素，生長素、甲狀腺激素、糖皮質(zhì)激素等）鎂成人含21~28g，60%分布于骨骼微量元素鋅、銅、錳、氟、鍶、硅、鋁第12頁,共89頁，星期六，2024年，5月2、有機成份膠原（90~95%）無定形基質(zhì)（10%）骨基質(zhì)非膠原蛋白、葡萄糖蛋白3、骨基質(zhì)的礦化成骨細(xì)胞合成并分泌骨的有機成分后，在一定條件下無機鹽有秩序地沉積于內(nèi)，基質(zhì)中涉及很多細(xì)胞內(nèi)外的生化過程，使鈣和磷形成羥基磷灰石，再與有機質(zhì)形成螯合物，變?yōu)檎９琴|(zhì)。第13頁,共89頁，星期六，2024年，5月影響及調(diào)節(jié)機制整體因素種族、地理、性別、運動激素對骨礦化的調(diào)節(jié)活性維生素D、雄激素、雌激素、生長素、甲狀腺激素、甲狀旁腺素、降鈣素等病理因素對骨礦化的影響早產(chǎn)兒、類風(fēng)濕、鉛中毒、鋁中毒、甲狀旁腺功能亢進、慢性腎功衰第14頁,共89頁，星期六，2024年，5月（二）骨的構(gòu)成細(xì)胞骨的構(gòu)成細(xì)胞：成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞調(diào)節(jié)及分泌無機質(zhì)成分，協(xié)調(diào)維持血清鈣濃度進行骨重建，使骨對因負(fù)重和鍛煉引起的力學(xué)改變作出反應(yīng)，維持骨骼內(nèi)在平衡第15頁,共89頁，星期六，2024年，5月（三）骨重建骨重建是維持骨組織代謝和力學(xué)功能的重要機制。是骨組織自我更新和自我調(diào)整的生理過程。皮質(zhì)骨中是新的哈弗系統(tǒng)形成松質(zhì)骨是新骨小梁的形成是一個有序的活動，最先是激活，隨之出現(xiàn)破骨細(xì)胞骨吸收，形成吸收陷窩，隨后成骨細(xì)胞到達吸收陷窩，新的骨基質(zhì)形成并進行礦化，完成骨形成。第16頁,共89頁，星期六，2024年，5月（四）骨的老化骨的無機質(zhì)逐漸減少，鈣的含量降低有機質(zhì)中的蛋白多糖明顯減少，膠原蛋白增多，膠原纖維增粗且排列不規(guī)則結(jié)構(gòu)疏松，骨密度降低第17頁,共89頁，星期六，2024年，5月（五）骨代謝的調(diào)節(jié)1、維生素D及其代謝產(chǎn)物生理作用對腸的作用促進鈣磷吸收對腎臟的作用與PTH協(xié)同促進腎小管對鈣的重吸收對骨骼的作用與PTH協(xié)同促進破骨細(xì)胞的溶骨作用直接刺激成骨細(xì)胞，加速成骨作用對甲狀旁腺的作用升高血鈣，間接抑制PTH釋放第18頁,共89頁，星期六，2024年，5月2、甲狀旁腺激素甲狀旁腺激素的分泌與調(diào)節(jié)血漿鈣離子濃度反饋調(diào)節(jié)鎂、鋰、鉀離子促進分泌降鈣素直接、間接促進分泌維生素D年齡、性別、季節(jié)因素可影響其分泌生理功能對骨的作用：促進骨吸收，超生理劑量可抑制膠原及基質(zhì)合成對腎臟的作用：增加磷排泄，增加鈣重吸收，促進維生素D活化對腸道的作用第19頁,共89頁，星期六，2024年，5月3、降鈣素降鈣素的分泌與調(diào)節(jié)及影響因素血漿鈣離子濃度升高促進分泌鎂離子促進分泌甲狀旁腺激素直接、間接促進分泌年齡、性別可影響其分泌生理功能對骨的作用：直接抑制骨吸收，抑制破骨細(xì)胞的數(shù)量和活性，促進骨生成過程第20頁,共89頁，星期六，2024年，5月4、雌激素對骨吸收的作用：抑制抑制IL-1介導(dǎo)的破骨細(xì)胞形成通過維生素D間接抑制PTH介導(dǎo)的破骨細(xì)胞形成抑制IL-6介導(dǎo)的破骨細(xì)胞形成對骨形成的作用：有實驗證明有一定的刺激骨形成作用促進活性維生素D在腎內(nèi)的合成第21頁,共89頁，星期六，2024年，5月5、維生素維生素C與骨代謝參與膠原蛋白的合成，增加腸鈣吸收維生素A與骨代謝促使骨細(xì)胞功能增強，缺乏可引起維生素A缺乏性佝僂病維生素K與骨代謝影響骨組織的膠原形成與礦化第22頁,共89頁，星期六，2024年，5月6、細(xì)胞因子骨形態(tài)發(fā)生蛋白（BMP）位于骨陷窩壁上，促進骨基質(zhì)的形成和鈣化胰島素樣生長因子（IGFs）促進成骨細(xì)胞活性，生成新骨成纖維細(xì)胞生長因子（FGF）促進骨細(xì)胞形成，防止凋亡白細(xì)胞介素（IL）骨吸收刺激因子，抑制骨形成腫瘤壞死因子（TNF）骨吸收刺激因子，抑制骨形成前列腺素（PG）增強骨吸收單核細(xì)胞集落刺激因子（M-CSF）刺激破骨細(xì)胞前體的增殖分化轉(zhuǎn)化生長因子β（TGF-β）對骨吸收具有刺激和抑制雙向調(diào)節(jié)作用一氧化氮（NO）第23頁,共89頁，星期六，2024年，5月二、原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病機制（一）骨重建失衡原發(fā)性骨質(zhì)疏松的發(fā)生可能是由于骨重建過程中，激素的系統(tǒng)調(diào)節(jié)和各種細(xì)胞因子的局部調(diào)節(jié)發(fā)生變化，導(dǎo)致激活頻率增加或骨吸收和骨形成的偶聯(lián)機制障礙，使骨再建失衡所致。絕經(jīng)期后骨吸收增加20％，骨形成增加15％，每日負(fù)鈣平衡可達40mg腸鈣吸收減少，尿鈣排泄增加老年性骨質(zhì)疏松主要與骨形成減少有關(guān)。由此可見，無論哪種類型的骨質(zhì)疏松都是骨吸收大于骨形成，從而發(fā)生骨量丟失。第24頁,共89頁，星期六，2024年，5月（二）骨強度降低骨量小梁骨較多的股骨和椎骨骨量丟失出現(xiàn)最早，且下降幅度大，而其它的皮質(zhì)骨部位骨量降低出現(xiàn)晚且降低幅度較小。骨量水平取決于峰骨量和骨丟失速率。前者主要由性別、遺傳和種族等因素決定，后者主要與生理變化（如增齡和絕經(jīng)等）有關(guān)，而營養(yǎng)、環(huán)境、運動和生活習(xí)慣等對兩者均有影響。骨質(zhì)量是指除骨量之外的其它影響骨強度的因素，主要包括骨結(jié)構(gòu)、骨礦化、骨有機基質(zhì)和骨損傷等4個方面．骨質(zhì)量的增加可能對BMD影響很小，卻能明顯提高骨強度第25頁,共89頁，星期六，2024年，5月（三）相關(guān)因素激素因素營養(yǎng)因素免疫因素物理因素遺傳因素第26頁,共89頁，星期六，2024年，5月1、激素因素雌激素不足降鈣素水平低甲狀旁腺激素水平升高年齡增高、雌激素水平低甲狀腺激素增多甲亢可干擾維生素D的生成、蛋白質(zhì)分解亢進引起鈣磷代謝紊亂，減少降鈣素分泌活性維生素D水平低與雌激素、甲狀旁腺激素的功能密切相關(guān)第27頁,共89頁，星期六，2024年，5月雄激素缺乏骨吸收大于骨形成維生素D合成減少生長激素分泌不足骨發(fā)育不良鈣腸吸收減少皮質(zhì)類固醇激素增多成骨細(xì)胞減少，骨形成受抑制膠原形成不利，蛋白異化作用亢進，骨基質(zhì)減少直接影響維生素D活性，血鈣降低腎小管對鈣重吸收減少，血鈣降低第28頁,共89頁，星期六，2024年，5月2、營養(yǎng)因素鈣缺乏鈣攝入量不足攝入鈣吸收不良磷代謝異常磷酸鹽缺乏導(dǎo)致骨吸收磷攝入過多可影響鈣吸收蛋白質(zhì)的影響低蛋白攝入影響骨基質(zhì)形成蛋白質(zhì)攝入過多影響鈣的代謝鎂缺乏影響骨代謝氟的作用過多干擾鈣磷代謝，血鈣降低，PTH分泌亢進第29頁,共89頁，星期六，2024年，5月3、免疫因素免疫功能老化，導(dǎo)致機體結(jié)合組織如構(gòu)成骨的支架和包膜的膠原纖維、彈性蛋白等老化免疫異?？舍尫糯碳て乒羌?xì)胞的活動因子，促進骨吸收4、物理因素是否經(jīng)常運動:運動能增加血中睪酮和雌二醇的濃度，有助于保持正常的性腺功能日光照射情況重力負(fù)荷:長期臥床病人有明顯的骨質(zhì)疏松傾向第30頁,共89頁，星期六，2024年，5月5、遺傳因素維生素D受體基因（VDRG）VDRG多態(tài)性與腰椎骨密度的相關(guān)性最強，可預(yù)測骨質(zhì)疏松癥的危險度，存在種族差異雌激素受體基因（ERG）其他基因PTH基因、膠原基因、轉(zhuǎn)移因子β基因等第31頁,共89頁，星期六，2024年，5月（四）影響因素

1.年齡性激素降低胃腸功能減退所致營養(yǎng)缺乏和鈣攝入減少腎臟功能減退，1α-羥化酶活性下降血鈣降低繼發(fā)PTH增加成骨細(xì)胞功能減退鈣調(diào)節(jié)激素和細(xì)胞因子水平改變且反應(yīng)性下降第32頁,共89頁，星期六，2024年，5月2.性別與男性相比，女性平均峰骨量低于男性，而骨丟失速率高于男性。女性骨量還與絕經(jīng)前月經(jīng)狀況有關(guān)。絕經(jīng)前月經(jīng)規(guī)則而黃體期過短或無排卵周期的婦女骨丟失增加。除雌激素不足外，黃體期過短所致孕酮和睪酮分泌減少也與骨丟失過多有關(guān)。3.種族不同種族人群的骨量有明顯差異白人女性明顯低于黑人女性居住夏威夷的日本移民骨量低于當(dāng)?shù)赝林用竦墓橇康?3頁,共89頁，星期六，2024年，5月4.體型身高和體重產(chǎn)生的外在機械壓力負(fù)荷可以促進承重骨的骨再建，使骨量增加體型瘦小的女性好發(fā)骨質(zhì)疏松。因為腎上腺皮質(zhì)中的雄烯二酮在脂肪組織中轉(zhuǎn)變?yōu)榇贫?，所以脂肪組織對絕經(jīng)后骨量的穩(wěn)定起保護作用5.生活習(xí)慣BMD與每日吸煙和飲酒量呈負(fù)相關(guān)。使骨折危險性明顯增加。酒精誘導(dǎo)肝臟酶系統(tǒng)，促進肝臟酶對雌激素和維生素D分解，使成骨細(xì)胞活性受到抑制，骨形成減少。飲用咖啡或含咖啡因類飲料嗜好的人有骨量降低的傾向第34頁,共89頁，星期六，2024年，5月三、骨質(zhì)疏松癥的臨床表現(xiàn)疼痛身長縮短骨折呼吸系統(tǒng)障礙第35頁,共89頁，星期六，2024年，5月四、骨質(zhì)疏松癥的診斷原則以骨密度減少為基本依據(jù)，結(jié)合病史和有無骨折進行綜合考慮，在鑒別原發(fā)性和繼發(fā)性骨質(zhì)疏松時，需進行相關(guān)的血液生化檢查。第36頁,共89頁，星期六，2024年，5月五、骨質(zhì)疏松癥的診斷方法物理診斷X線、單光子和單能X線吸收法、雙能X線吸收法、定量CT，定量B超等。生化診斷檢測血液、尿液中反映骨吸收和骨形成的礦物質(zhì)、激素、細(xì)胞因子等，如空腹尿鈣，血抗酒石酸鹽酸性磷酸酶，羥脯氨酸，羥脯氨酸糖苷，尿吡啶啉、降鈣素、性激素、維生素D等其他方法基因診斷法檢測一些與骨質(zhì)疏松癥相關(guān)基因的多態(tài)性第37頁,共89頁，星期六，2024年，5月六、骨質(zhì)疏松癥的藥物治療（一）治療原則防治結(jié)合，預(yù)防為主病因治療對癥治療預(yù)防骨折的發(fā)生第38頁,共89頁，星期六，2024年，5月（二）治療藥物分類抗骨吸收藥促進骨形成藥鈣制劑與維生素D活性代謝產(chǎn)物中醫(yī)中藥第39頁,共89頁，星期六，2024年，5月1、雌激素治療作用常用制劑倍美力、倍美安、倍美盈、尼爾雌醇、炔雌醇、替勃龍（利維愛）2、雙磷酸鹽類藥理作用抑制骨吸收不良反應(yīng)及禁忌癥常用制劑依替膦酸二鈉鹽、氯膦酸二鈉、阿侖膦酸鈉第40頁,共89頁，星期六，2024年，5月3、雄激素治療作用不良反應(yīng)及禁忌癥常用制劑丙酸睪酮、甲睪酮、苯丙酸諾龍第41頁,共89頁，星期六，2024年，5月4、孕激素治療作用對抗雌激素對子宮內(nèi)膜的增生作用，減少子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生減少骨吸收，增加骨形成，調(diào)節(jié)降鈣素的分泌對抗糖皮質(zhì)激素引起的骨質(zhì)疏松癥常用制劑黃體酮（孕酮）、醋酸甲羥孕酮（甲孕酮、安宮黃體酮）、醋酸甲地孕酮（醋酸去氫甲孕酮、美可治、婦寧片）、氯地孕酮、炔諾酮、炔諾孕酮第42頁,共89頁，星期六，2024年，5月5、氟化物類作用機制刺激骨形成不良反應(yīng)常用制劑特樂定（氟鈣定）

6、甲狀旁腺激素治療作用模仿人體PTH分泌的脈沖方式，人為地在人體內(nèi)造成PTH分泌的高度穩(wěn)定和規(guī)律性，從而達到治療目的不良反應(yīng)第43頁,共89頁，星期六，2024年，5月7、降鈣素治療作用常用制劑密鈣息、益鈣寧8、依普黃酮藥理作用協(xié)同雌激素促進降鈣素的分泌抑制骨吸收：抑制鈣從骨中溶出，抑制骨量減少刺激骨形成：促進骨基質(zhì)的形成和礦化適應(yīng)癥絕經(jīng)后和老年性骨質(zhì)疏松癥第44頁,共89頁，星期六，2024年，5月9、鈣劑補鈣對骨量的影響鈣的生物利用度與劑型散劑、膠囊、片劑人體對各種鈣鹽的吸收率基本相同，不會超過40%碳酸鈣39%，乳酸鈣32%，草酸鈣30%，葡萄糖酸鈣27%鈣劑的合理選擇鈣劑不良反應(yīng)第45頁,共89頁，星期六，2024年，5月10、維生素D類治療作用毒性作用與預(yù)防常用制劑：阿法骨化醇、骨化三醇、維生素D3、膽維丁乳（英康利）11、中醫(yī)中藥補肝脾腎，活血化瘀療效及作用機理方面還需不斷提高第46頁,共89頁，星期六，2024年，5月中醫(yī)藥研究第47頁,共89頁，星期六，2024年，5月一、中藥治療藥物的研究思路中藥治療本病不同于常用的抑制骨吸收藥，也不同于促進骨形成藥，而著重于整體調(diào)節(jié)，調(diào)動內(nèi)因，作用于多個環(huán)節(jié)，最終達到糾正機體激素失衡和負(fù)鈣平衡的功效。第48頁,共89頁，星期六，2024年，5月（一）對內(nèi)分泌及免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用腎虛是骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病關(guān)鍵腎虛時，下丘腦-垂體性腺（甲狀腺、腎上腺）軸功能紊亂腎虛時免疫功能下降，細(xì)胞免疫、體液免疫、補體系統(tǒng)、單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬功能均有不同程度的降低，而影響骨代謝的局部調(diào)節(jié)因子多與此有關(guān)。補腎方藥可以促進下丘腦-垂體-性腺軸系統(tǒng)的功能活動，糾正免疫系統(tǒng)的功能低下。這可能與補腎中藥提高性腺上E2受體敏感性或E2受體數(shù)量有關(guān)。第49頁,共89頁，星期六，2024年，5月（二）調(diào)節(jié)微量元素平衡腎虛患者體內(nèi)鋅含量明顯低于正常人，缺鋅會影響垂體促性腺激素的分泌，使垂體組織及血漿內(nèi)促生長激素的含量減少，表現(xiàn)為性腺功能減退、發(fā)育不良補腎方藥可調(diào)節(jié)體內(nèi)微量元素的平衡，促進礦物質(zhì)在骨中的沉積，進而發(fā)揮抗骨質(zhì)疏松的作用第50頁,共89頁，星期六，2024年，5月（三）對骨形成及骨吸收的影響1.增強成骨細(xì)胞活性，使骨生成增強2.抑制骨吸收作用第51頁,共89頁，星期六，2024年，5月二、中藥治療藥物的研究方法（一）實驗動物的選擇原則骨質(zhì)疏松在組織學(xué)表現(xiàn)上與人類一致；遺傳穩(wěn)定性；遺傳背景明確，資料完整便于交流動物經(jīng)濟、易飼養(yǎng)、操作簡便符合倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)第52頁,共89頁，星期六，2024年，5月

1、嚙齒目動物：大鼠骨代謝與人有許多相似之處：隨年齡增長骨量丟失，相似的骨松質(zhì)分布及重建功能，卵巢切除后高的骨轉(zhuǎn)化率，腸鈣吸收下降及對性激素相似的反應(yīng)性等，再加上大鼠經(jīng)濟、易飼養(yǎng)等優(yōu)點使其成為建立骨質(zhì)疏松模型最廣泛的動物。小鼠和豚鼠在遺傳背景、飼養(yǎng)、壽命等方面與大鼠有一樣的優(yōu)勢，但其骨代謝及骨組織對性激素的反應(yīng)性與人類不盡一致，應(yīng)用較少。第53頁,共89頁，星期六，2024年，5月兔：以其經(jīng)濟、明顯的哈氏重建能力、6個月左右骨骼即發(fā)育成熟等優(yōu)點，在骨質(zhì)疏松模型研究中被廣泛應(yīng)用，可以用來作藥物對松質(zhì)骨及哈氏重建作用的研究，還可以作為糖皮質(zhì)激索誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松模型。第54頁,共89頁，星期六，2024年，5月2、成年犬：優(yōu)點：在骨代謝和組織結(jié)構(gòu)方面與人類相似，皮質(zhì)骨有豐富的哈氏系統(tǒng)，與松質(zhì)骨比例適當(dāng)，適于評價藥物對哈氏系統(tǒng)重建的影響，另外還可用于研究廢用性骨質(zhì)疏松缺點：犬卵巢切除術(shù)后6個月在組織形態(tài)學(xué)、骨量等方面無明顯改變，對雌激素缺乏的反應(yīng)差，不適合作研究松質(zhì)骨的骨質(zhì)疏松模型。第55頁,共89頁，星期六，2024年，5月3、靈長類：靈長類的內(nèi)分泌代謝、生殖周期、骨生物力學(xué)特性及骨組織變化與人類極為相似，最適于作骨質(zhì)疏松模型動物，但費用昂貴、實驗操作難度高、實驗周期長等因素限制了研究應(yīng)用。第56頁,共89頁，星期六，2024年，5月4、豬豬的峰值骨量出現(xiàn)在2-3歲，具有與人相當(dāng)?shù)钠べ|(zhì)骨及松質(zhì)骨丟失與沉積的發(fā)生率，且有板層結(jié)構(gòu)，曾被成功地用于氟化物的研究和骨骼實驗，但作為雌激素缺失性骨質(zhì)疏松模型，目前尚不成熟。另外，羊，鳥類，馬，牛等動物目前作為骨質(zhì)疏松癥的模型動物應(yīng)用極少第57頁,共89頁，星期六，2024年，5月

（二）動物模型1、去卵巢致骨質(zhì)疏松模型原理：對大鼠實施卵巢切除術(shù)，使之雌激素減少，造成骨質(zhì)疏松，與人類絕經(jīng)后的骨量丟失，松質(zhì)骨變化，骨高轉(zhuǎn)化率等均相似方法：wistar、SD雌性大鼠，鼠齡3-12月，摘除兩側(cè)卵巢。術(shù)后常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水和攝食，3-4個月后，可造成骨質(zhì)疏松模型。第58頁,共89頁，星期六，2024年，5月2、糖皮質(zhì)激素致大鼠骨質(zhì)疏松原理：糖皮質(zhì)激索長期使用或雖間斷使用但用量過大，都可引起骨質(zhì)疏松。其特征為易發(fā)生自發(fā)性骨折。方法：取3月齡雄性大鼠，以醋酸潑尼松龍注射液進行肌注，每次劑量為5mg/掩，每周兩次，對照組肌注生理鹽水，連續(xù)3個月可形成骨質(zhì)疏松。第59頁,共89頁，星期六，2024年，5月3、維甲酸致骨質(zhì)疏松模型原理：維甲酸是維生素A的一類衍生物，用于治療白血病和銀屑病等，對骨質(zhì)有明顯影響，具有致骨質(zhì)疏松的副作用。用于實驗動物，可造成骨質(zhì)疏松模型。方法：取3月齡SD大鼠，維甲酸75mg/kg（以1％纖維素溶液配制）灌胃，每日1次,2周后停用，對服組則以1％纖維素溶液灌胃．給藥停止后，動物在標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料和自由飲水條件下飼養(yǎng)，可誘發(fā)形成骨質(zhì)疏松。第60頁,共89頁，星期六，2024年，5月4、廢用性骨質(zhì)疏松模型原理：用人工方法使動物部分肢體處于不荷重狀態(tài)而建立的活體骨質(zhì)疏松模型，此時，機體骨礦化水平降低，鈣磷代謝負(fù)平衡，最后導(dǎo)致骨質(zhì)丟失。方法機械固定法系利用石膏、繃帶等物品將動物肢體固定于特殊的不荷重位置。懸吊法是將動物尾部懸吊，雙后肢懸空，讓動物靠兩前肢載重并在一定范圍內(nèi)活動。手術(shù)切除動物一側(cè)坐骨神經(jīng)或一側(cè)膝腱甚至跟腱5、營養(yǎng)性骨質(zhì)疏松模型通過給動物喂飼缺乏鈣、磷、維生素D等的飲食，可使骨密度下降，血鈣磷濃度上升，尿鈣增加，符合骨質(zhì)疏松的表現(xiàn)第61頁,共89頁，星期六，2024年，5月（三）客觀指標(biāo)1、骨密度測量雙能X射線吸收測量法(DEXA)單光子吸收測量法(SPA)雙光子吸收測量法(DPA)定量計算機斷層掃描法（QCT)超聲法(UltraSonic)2、骨組織計量學(xué)觀察骨組織形態(tài)學(xué)分析，包括骨標(biāo)本的骨片靜態(tài)和動態(tài)分析測量，具體指標(biāo)有骨小梁面積、骨小梁周長、骨小梁厚度、骨礦化沉積率、礦化延遲時間等第62頁,共89頁，星期六，2024年，5月3、骨代謝的生化指標(biāo)1）與骨形成有關(guān)的生化指標(biāo)：血清總堿性磷酸酶(ALP)和骨特異性堿性磷酸酶(B-ALP)：評價骨形成和骨轉(zhuǎn)換的指標(biāo)骨鈣素（BGP）由成骨細(xì)胞分泌，其數(shù)值大小可反映成骨細(xì)胞活性唾液酸蛋白(BSP)：BSP大量存在于活性成骨細(xì)胞，由成骨細(xì)胞分泌骨橋蛋白：人骨橋蛋白(OPN)發(fā)現(xiàn)存在于中樞、骨與細(xì)胞外，在骨礦化前由活性成骨細(xì)胞生成，由破骨細(xì)胞吸收第63頁,共89頁，星期六，2024年，5月

2）與骨吸收有關(guān)的生化指標(biāo)血漿或血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)：由破骨細(xì)胞釋放，血漿TRAP水平反映破骨細(xì)胞活性和骨吸收狀態(tài)破骨細(xì)胞生成抑制因子(OCIF)/骨保護素(OPG)：OCIF/OPG是一種破骨細(xì)胞負(fù)性調(diào)節(jié)因子，抑制破骨細(xì)胞生成、活化尿吡啶/肌酐：尿吡啶/肌酐值可以反映破骨細(xì)胞的骨吸收功能第64頁,共89頁，星期六，2024年，5月4、生物力學(xué)指標(biāo)長骨的三點彎曲試驗來評價骨的生物力學(xué)性質(zhì)骨結(jié)構(gòu)力學(xué)指標(biāo)：最大載荷、斷裂撓度、彈性載荷、彈性撓度及彎曲能量，反映骨結(jié)構(gòu)力學(xué)的變化，其變化主要受骨尺寸大小和幾何形態(tài)的影響；骨材料力學(xué)指標(biāo)：最大彎曲應(yīng)力和彈性模量等。反映骨的內(nèi)在質(zhì)量，不受骨尺寸的影響。5、骨礦成分的測定骨灰化后用原子吸收儀測定或用離子選擇電極法及鉬藍比色法測出骨灰中鈣、磷等元素含量。第65頁,共89頁，星期六，2024年，5月新工藝仙靈骨葆制劑

抗實驗性骨質(zhì)疏松癥的研究“十一五”國家科技支撐計劃項目實例第66頁,共89頁，星期六，2024年，5月第一部分新工藝仙靈骨葆制劑抗去卵巢

致大鼠骨質(zhì)疏松癥的研究12第二部分新工藝仙靈骨葆制劑抗維甲酸

致大鼠骨質(zhì)疏松癥的研究第67頁,共89頁，星期六，2024年，5月關(guān)于仙靈骨葆淫羊藿續(xù)斷補骨脂地黃丹參知母苗族民間驗方+臨床驗證篩選諸藥合用起滋補肝腎、活血通絡(luò)、強筋壯骨之功效第68頁,共89頁，星期六，2024年，5月第一部分

新工藝仙靈骨葆制劑抗去卵巢

致大鼠骨質(zhì)疏松癥的研究新工藝仙靈骨葆制劑抗實驗性骨質(zhì)疏松癥的研究第69頁,共89頁，星期六，2024年，5月模型的選擇卵巢切除致雌性大鼠骨質(zhì)疏松癥模型研究絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的經(jīng)典動物模型第70頁,共89頁，星期六，2024年，5月受試藥物新工藝仙靈骨葆浸膏原工藝仙靈骨葆膠囊制粒粉受試藥物：倍美力臨床常用雌激素處方藥雌激素替代療法治療絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥第71頁,共89頁，星期六，2024年，5月骨密度測定采用小動物模式，LunarDPX

型雙能

X線骨密度儀測定大鼠右側(cè)股骨遠端、腰椎骨密度第72頁,共89頁，星期六，2024年，5月骨組織形態(tài)計量學(xué)測定制作脛骨近端不脫鈣骨切片(5μm)甲苯胺藍染色切片未染色切片光鏡下熒光下骨小梁體積百分比(TBV%)

骨小梁吸收表面百分比(TRS%)

骨小梁形成表面百分比(TFS%)

骨皮質(zhì)上類骨質(zhì)平均寬度(OSW)

骨小梁礦化率(MAR)骨皮質(zhì)礦化率(mAR)Leica-QwinPro圖象分析系統(tǒng)第73頁,共89頁，星期六，2024年，5月骨生物力學(xué)測定股骨三點彎曲試驗

wd-1型電子萬能試驗機

位移-加載力曲線圖最大載荷斷裂撓度第74頁,共89頁，星期六，2024年，5月股骨頸壓力試驗垂直“站立姿勢”的力學(xué)模擬測試位移-加載力曲線圖斷裂撓度最大載荷第75頁,共89頁，星期六，2024年，5月血生化指標(biāo)的測定OlympusAU400型全自動生化分析儀

血清鈣血清磷血清鎂血清堿性磷酸酶（AKP）血清酒石酸酸性磷酸酶（StrACP）第76頁,共89頁，星期六，2024年，5月血生化指標(biāo)的測定MultiskanMK3型酶標(biāo)儀Axsym全自動免疫發(fā)光分析儀酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定Ⅰ型膠原氨基交聯(lián)末端肽(NTX)

微粒子酶免疫分析法(MEIA)

測定血清雌二醇(E2)含量第77頁,共89頁，星期六，2024年，5月子宮指數(shù)及灰重系數(shù)子宮指數(shù)=子宮重量(mg)/體重(g)×100%灰重系數(shù)

=骨灰重(g)/骨干重(g)左側(cè)股骨60℃過夜烘