洗滌用品中26種香料的測定 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

洗滌用品中26種香料的測定氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法本標準規(guī)定了洗滌用品中戊基肉桂醛、苯甲醇、肉桂醇、檸檬醛、丁香酚、羥基香茅醛、異丁香酚、戊基肉桂醇、水楊酸芐酯、肉桂醛、香豆素、香葉醇、羥異己基3-環(huán)己烯基甲醛、茴香醇、肉桂酸芐酯、金合歡醇、丁苯基甲基丙醛、芳樟醇、苯甲酸芐酯、香茅醇、己基肉桂醛、檸烯、2-辛炔酸甲酯、α-異甲基紫羅蘭酮等二十四種香料的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法以及橡苔提取物和樹苔提取物（以β-苔黑酚酸甲酯計）的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。本標準適用于洗滌用品中戊基肉桂醛、苯甲醇、肉桂醇、檸檬醛、丁香酚、羥基香茅醛、異丁香酚、戊基肉桂醇、水楊酸芐酯、肉桂醛、香豆素、香葉醇、羥異己基3-環(huán)己烯基甲醛、茴香醇、肉桂酸芐酯、金合歡醇、丁苯基甲基丙醛、芳樟醇、苯甲酸芐酯、香茅醇、己基肉桂醛、檸烯、2-辛炔酸甲酯、α-異甲基紫羅蘭酮以及橡苔提取物和樹苔提取物（以β-苔黑酚酸甲酯計）含量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法324種香料的測定（氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法）3.1原理用乙酸乙酯-正己烷混合液（2+8，體積比）超聲提取試樣中的二十四種香料，經(jīng)高速離心，上清液經(jīng)干燥脫水后以微孔濾膜過濾，濾液用氣相色譜串聯(lián)四級桿質(zhì)譜進行分析，內(nèi)標法定量。3.2試劑除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純，實驗用水均為GB/T6682中規(guī)定的一級水。3.2.1乙酸乙酯：色譜純。3.2.2正己烷：色譜純。3.2.3氯化鈉。3.2.4無水硫酸鈉。3.2.5提取液：乙酸乙酯-正己烷混合液（2+8，體積比）3.2.6戊基肉桂醛、苯甲醇、肉桂醇、檸檬醛、丁香酚、羥基香茅醛、異丁香酚、戊基肉桂醇、水楊酸芐酯、肉桂醛、香豆素、香葉醇、羥異己基3-環(huán)己烯基甲醛、茴香醇、肉桂酸芐酯、金合歡醇、丁苯基甲基丙醛、芳樟醇、苯甲酸芐酯、香茅醇、己基肉桂醛、檸烯、2-辛炔酸甲酯、α-異甲基紫羅蘭酮，標準品或化學試劑。3.2.7二十四種香料混合標準溶液：準確稱取戊基肉桂醛、苯甲醇、肉桂醇、檸檬醛、丁香酚、羥基香茅醛、異丁香酚、戊基肉桂醇、水楊酸芐酯、肉桂醛、香豆素、香葉醇、羥異己基3-環(huán)己烯基甲醛、茴香醇、肉桂酸芐酯、金合歡醇、丁苯基甲基丙醛、芳樟醇、苯甲酸芐酯、香茅醇、己基肉桂醛、檸烯、2-辛炔酸甲酯、α-異甲基紫羅蘭酮各0.1g（精確至0.1mg）置于100mL容量瓶中，用提取溶劑（3.2.5）溶解并定容至刻度，搖勻，配制成二十四種香料濃度均為1000mg/L的混合標準儲備液，于4℃避光保存。3.2.8內(nèi)標溶液：異佛爾酮，用提取溶劑（3.2.5）配置成1000mg/L的溶液。3.2.9氦氣：純度不小于99.999%。3.3儀器和設備3.3.1氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜（GC-MS/MS）儀：配有電子轟擊電離源。3.3.2分析天平：感量為0.1mg。3.3.3離心機：轉速不低于12000r/min。3.3.4具塞比色管：10mL。3.3.5渦旋混合器。3.3.6超聲波水浴。3.3.7微孔濾膜：0.45μm，有機相。3.4分析步驟3.4.1樣品處理a）普通型洗滌用品稱取0.2g（精確到0.001g）試樣至10mL的具塞比色管中，加入0.1mL內(nèi)標溶液（3.2.8）和1mL飽和氯化鈉水溶液，渦旋分散樣品，加入10mL提取液（3.2.5），超聲30min。取1.5mL溶液轉移至的2mL具塞塑料離心管中，加入0.5g無水硫酸鈉（3.2.4），以不低于12000r/min離心15min，上清液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，濾液作為待測樣液。b）濃縮型洗滌用品稱取0.2g（精確到0.001g）試樣至10mL的具塞比色管中，加入2mL飽和氯化鈉水溶液后渦旋分散樣品，用飽和氯化鈉水溶液定容，渦旋1min，靜置5min，準確移取1mL樣液至新的10mL的具塞比色管中，加入0.1mL內(nèi)標溶液（3.2.8），加入10mL提取液（3.2.5），超聲30min。取1.5mL溶液轉移至的2mL具塞塑料離心管中，加入0.5g無水硫酸鈉（3.2.4以不低于12000r/min離心15min，上清液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，濾液作為待測樣液。3.4.2測定3.4.2.1氣相色譜參考條件a)色譜柱：HP-INNOWAX石英毛細管柱，30m×0.25mm（內(nèi)徑）×0.25μm，或相當者。c)進樣口溫度：250℃。d)傳輸線溫度：250℃。e)離子源溫度：280℃。f)載氣：氦氣，純度≥99.999%，流量：1.0mL/min。g)進樣量：1μL。h)進樣方式：不分流進樣，0.5min后開閥；3.4.2.2串聯(lián)質(zhì)譜參考條件i)電離方式：EI；j)質(zhì)量掃描范圍：50amu~1000amu；k)電離能量：70eV；l)阱電流：200μAm)溶劑延遲：3minn)監(jiān)測方式：多反應監(jiān)測（MRM），定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量見表1。3.4.2.3標準曲線的繪制采用逐級稀釋的方法，分別加入0.1mL內(nèi)標溶液，用提取液（3.2.5）稀釋混合標準儲備溶液成適用濃度的混合標準工作溶液，按6.2的測定條件濃度由低到高進樣測定，分別以目標物濃度為橫坐標，以對應目標物峰面積與內(nèi)標峰面積之比為縱坐標，分別繪制標準曲線。3.4.2.4定量測試按3.4.2.1和3.4.2.2的測定條件對待測樣液進行測定，用內(nèi)標法定量。待測樣液中24種香料的響應值應在標準曲線的線性范圍內(nèi)，超過線性范圍則應稀釋后再進樣分析。3.4.3定性判定以標準樣品的保留時間和監(jiān)測離子定性，待測樣品中監(jiān)測離子的豐度比與標準品的相同離子豐度比相差不大于20%。3.4.4空白試驗除不稱取樣品外，均按上述測定條件和步驟進行。3.5結果計算結果按式（1）計算，計算結果保留兩位小數(shù)，計算結果需扣除空白值。式中：負ci——c0——V——f——m——ic0Vf.........................................................................(1)樣品中被測香料的含量，mg/kg；依據(jù)標準曲線獲得待測樣液中被測香料的濃度，mg/L；空白試樣中樣品中目標物的質(zhì)量濃度，mg/L；樣品稀釋后總體積，mL；稀釋倍數(shù)，不稀釋時為1；樣品質(zhì)量，g。3.6檢出限和定量限普通型洗滌用品中二十四種香料的檢出限均為5mg/kg，定量限均為15mg/kg；濃縮型洗滌用品中二十四種香料的檢出限均為50mg/kg，定量限均為150mg/kg。3.7精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算數(shù)平均值的10%。4β-苔黑酚酸甲酯的測定（液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法）4.1原理樣品經(jīng)甲醇提取，弱陰離子固相萃取柱凈化，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定，以多反應離子監(jiān)測模式進行監(jiān)測，采用特征離子豐度比進行定性，峰面積定量，以標準曲線法計算含量。4.2試劑除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純，實驗用水均為GB/T6682中規(guī)定的一級水。4.2.1β-苔黑酚酸甲酯對照品：（CAS號：4707-47-5），純度≥98%。4.2.2乙腈：色譜純。4.2.3甲醇：色譜純。4.2.4β-苔黑酚酸甲酯標準儲備溶液（1000mg/L準確稱取β-苔黑酚酸甲酯（4.2.1）對照品0.01g（精確至0.1mg）于10mL棕色容量瓶中，用甲醇（4.2.3）定容至刻度，混勻。4.2.5β-苔黑酚酸甲酯標準中間液1（10mg/L）：準確移取1mL稱取β-苔黑酚酸甲酯標準儲備溶液（4.5）于100mL棕色容量瓶中，用甲醇（4.2.3）定容至刻度，混勻。4.2.6β-苔黑酚酸甲酯標準中間液2（100μg/L）：準確移取1mL稱取β-苔黑酚酸甲酯標準中間液1（4.6）于100mL棕色容量瓶中，用甲醇（4.2.3）定容至刻度，混勻。4.2.7β-苔黑酚酸甲酯標準工作溶液：準確吸取適量β-苔黑酚酸甲酯標準中間液2（4.2.6），用甲醇（4.2.3）稀釋成含0，1.5，3.0，5.0，10.0，20.0，50.0μg/L的標準工作溶液，使用前配制。4.3儀器和設備4.3.1液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀：電噴霧離子源。4.3.2分析天平：感量為0.1mg。4.3.3渦旋振蕩器。4.3.4超聲波清洗器。4.4分析步驟4.4.1試液的制備稱取0.1g樣品于10mL比色管中，用甲醇（4.2.3）定容到刻度，渦旋混勻，25℃下超聲萃取10min，取出后再次渦旋混勻，冷卻。取上清液用甲醇（4.2.3）稀釋20倍后，溶液過0.22μm濾膜后上機測試。4.4.2測定4.4.2.1液相色譜參考條件a)色譜柱：C18柱，（100mm×2.1mm，1.8μm），或等效色譜柱；b)流動相：A：乙腈，B：水；c)柱溫：30℃d)流量：0.25mL/min；e)進樣量：5μL。f)梯度洗脫程序見表1。表1梯度洗脫程序時間/min流動相A體積分數(shù)/%流動相B體積分數(shù)/%0202208909020204.4.2.2串聯(lián)質(zhì)譜參考條件g)離子源：電噴霧離子源（ESI源）；h)監(jiān)測模式：負離子模式，監(jiān)測離子對(m/z)：195->163，碰撞能10V（定量離子對195->119，碰撞能20V（定性離子對）；循環(huán)時間0.8sec；i)噴霧電壓：1500V；j)鞘氣：40Arb；k)輔助氣：5Arb；l)離子源溫度：300℃;m)傳輸管溫度325℃;n)0-6.5min：不進入質(zhì)譜儀分析，6.5-10min：進入質(zhì)譜儀分析。4.4.2.3標準曲線的繪制將混合標準工作溶液依次注入液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀按照4.4.2.1和4.4.2.2測試條件進行測定。以標準工作溶液中β-苔黑酚酸甲酯濃度為橫坐標，以對應的峰面積為縱坐標，繪制標準工作曲線。4.4.2.4試樣溶液的測定將試樣溶液注入液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀中按照4.4.2.1和4.4.2.2測試條件進行測定，得到β-苔黑酚酸甲酯的峰面積，根據(jù)標準曲線得到待測液中β-苔黑酚酸甲酯的濃度。4.4.3空白試驗除不加試樣外，均按上述步驟操作。4.4.4定性判定用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對樣品進行定性判定，在相同試驗條件下，樣品中應呈現(xiàn)定量離子對和定性離子對的色譜峰，被測組分的質(zhì)量色譜峰保留時間與標準溶液中對應組分的質(zhì)量色譜峰保留時間一致；樣品色譜圖中所選擇的監(jiān)測離子對的相對豐度比與相當濃度標準溶液的離子對的相對豐度比的偏差不超過表2規(guī)定范圍，則可以判斷樣品中存在對應的被測組分。表2定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差相對離子豐度（k）k>50%50%≥k>20%20%≥k>10%k≤10%允許的最大偏差±20%±25%±30%±50%4.5分析結果的表述試樣中β-苔黑酚酸甲酯的含量按式（1）計算：f (2)式中：ω——試樣中β-苔黑酚酸甲酯的含量，mg/kg；c——試樣中β-苔黑酚酸甲酯峰面積對應的質(zhì)量濃度，μg/L；c0——空白試樣中β-苔黑酚酸甲酯的質(zhì)量濃度，μg/L；V——試樣定容體積，mL；K——稀釋倍數(shù)；m——試樣質(zhì)量，g。4.6檢出限和定量限β-苔黑酚酸甲酯的檢出限為1mg/kg，定量限為3mg/kg。4.7精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算數(shù)平均值的10%。（資料性附錄）二十四種香料的參考保留時間和離子對參數(shù)表A.1二十四種化合物的參考保留時間和離子對參數(shù)TableA.1Theretentiontimeandmrmparametersofthetwenty-fourcompounds序號化合物保留時間CASNo定量離子對（m/z）碰撞能定性離子對（m/z）碰撞能1檸烯6.65989-27-5136.0/121.05136.0/107.052芳樟醇78-70-6136.0/121.05136.0/107.0532-辛炔酸甲酯139.0/107.0139.0/79.04檸檬醛5392-40-5152.0/137.05137.0/43.0205香茅醇106-22-9156.0/81.0156.0/95.056香葉醇106-24-1139.0/95.05139.0/121.027α-異甲基紫羅蘭酮127-51-5206.0/191.02206.0/109.0358苯甲醇100-51-6108.0/79.0108.0/107.059羥基香茅醛107-75-5139.0/121.02139.0/93.0丁苯基甲基丙醛80-54-6204.0/189.05204.0/147.05肉桂醛104-55-2131.0/77.025131.0/10