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文檔簡介
動物細胞培養(yǎng)練習一、選擇題1.一般來說,在進行動物細胞體外培養(yǎng)時,需要滿足以下哪些條件()①無毒、無菌的環(huán)境②適宜的滲透壓③合成培養(yǎng)基需加血清等④溫度與動物體溫相近⑤需要O2,不需要CO2A.①②③④⑤B.①②③④C.①③④⑤D.①②④⑤2.在進行動物細胞培養(yǎng)的過程中,使用胰蛋白酶的目的是()A.使動物組織分散為單個細胞B.去掉細胞壁,使其成為原生質體C.去掉細胞膜,暴露出原生質體便于細胞融合D.促進蛋白質水解為多肽3.干細胞是一種尚未充分分化的未成熟細胞,醫(yī)學家們正在嘗試利用干細胞治療一些頑疾,下列說法錯誤的是()A.各種組織干細胞分化形成不同組織細胞是基因選擇性表達的結果B.利用干細胞治療某些頑疾,是因為干細胞具有再生各種組織、器官的潛能C.同一生物個體中,神經(jīng)細胞與干細胞所含有的遺傳物質不同D.干細胞可分為成體干細胞、胚胎干細胞等4.某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究,結果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長緩慢,其原因不可能的是()A.實驗材料取自小鼠胚胎的腦組織B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封C.血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性5.某年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予了在“細胞感知和適應氧氣供應”研究中做出貢獻的科學家。此項研究以能夠表達人類促紅細胞生成素的小鼠模型為材料,并借助動物細胞培養(yǎng)技術進行研究。下列相關敘述錯誤的是()A.培養(yǎng)過程中,應定期更換培養(yǎng)液,以便清除細胞代謝產(chǎn)物B.培養(yǎng)過程中,要在培養(yǎng)基中加入一定量的血清,以防止培養(yǎng)過程中的污染C.培養(yǎng)過程中,添加適量CO2的目的是維持培養(yǎng)液的pHD.通過該技術培養(yǎng)的動物細胞可以用于篩選抗癌藥物6.如圖為動物細胞培養(yǎng)過程中細胞增殖情況的變化曲線,圖中b、e兩點表示經(jīng)篩選、分裝后繼續(xù)培養(yǎng)。下列有關敘述正確的是()A.動物細胞培養(yǎng)選用的培養(yǎng)材料大多為動物的受精卵B.原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的分界點是曲線中b點C.細胞培養(yǎng)過程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細胞呼吸D.在動物細胞培養(yǎng)過程中,細胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細胞7.研究人員常用飼養(yǎng)層細胞(與胚胎干細胞共同培養(yǎng)的失去分裂能力的細胞,用于支持胚胎干細胞的生長)分離培養(yǎng)胚胎干細胞,研究表明,胚胎干細胞高度未分化,具有形成畸胎瘤的可能性。下列有關敘述錯誤的是()A.在體外培養(yǎng)的胚胎干細胞可以不斷增殖而不發(fā)生分化B.胚胎干細胞可由早期胚胎中分離得到,具有組織特異性C.飼養(yǎng)層細胞可為胚胎干細胞提供各種細胞因子與貼附面D.先將胚胎干細胞體外誘導分化為某特異組織,再用于治療,可防止形成畸胎瘤8.如圖為小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)培養(yǎng)的過程圖,下列敘述不正確的是()A.可以用膠原蛋白酶或胰蛋白酶來分散組織塊中的細胞B.MEF細胞可能產(chǎn)生某種物質抑制胚胎干細胞的分化C.加入培養(yǎng)液中的MEF細胞最好是來自傳代培養(yǎng)的細胞D.細胞培養(yǎng)過程中可能出現(xiàn)細胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象9.有研究表明漸凍癥是由于突變的基因導致神經(jīng)元合成了某種毒蛋白,從而阻礙了軸突內營養(yǎng)物質的流動。研究發(fā)現(xiàn),利用誘導多能干細胞(iPS細胞)制作前驅細胞,然后移植給漸凍癥實驗鼠,能延長其壽命。下列相關敘述不正確的是()A.誘導iPS細胞分化成的多種細胞中核酸相同,蛋白質卻不完全相同B.誘導iPS細胞分化的實質是基因的選擇性表達,細胞種類增多C.將控制合成破壞運動神經(jīng)元的毒蛋白基因替換,可能會起到一定的治療作用D.植入神經(jīng)干細胞,使受損的運動功能得到恢復,可以一定程度改善漸凍癥10.如圖所示是某動物細胞培養(yǎng)時,培養(yǎng)液中活細胞和死亡細胞的細胞密度統(tǒng)計結果,下列相關敘述錯誤的是()A.實驗中要控制胰蛋白酶溶液濃度和處理時間,以免損傷細胞B.培養(yǎng)液中應適當加入青霉素、鏈霉素,以避免雜菌污染C.曲線bc段變化的主要原因可能是培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質不足及有害代謝產(chǎn)物積累等D.培養(yǎng)至第6d時,新產(chǎn)生的細胞數(shù)等于死亡細胞數(shù)11.為了初步檢測藥物X和Y的抗癌活性,在細胞培養(yǎng)板的每個孔中加入相同數(shù)量的肝癌細胞,使其貼壁生長,實驗組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞礬(溶劑)的藥物X或Y,培養(yǎng)過程及結果如圖所示。下列有關敘述不正確的是()A.細胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清B.可用胰蛋白酶處理使肝癌細胞脫落下來并進行計數(shù)C.對照組中應加入等體積的無菌蒸餾水D.根據(jù)實驗結果,可以初步判斷藥物X的抗癌效果較好二、非選擇題12.如圖1是培養(yǎng)小鼠胚胎成纖維細胞(MEF細胞)的示意圖,圖2是在用MEF細胞制成的飼養(yǎng)層上培養(yǎng)胚胎干細胞(ES細胞)的示意圖。請據(jù)圖回答問題:(1)圖1所示制備細胞懸液時,常用______________酶來消化剪碎的組織塊。配制培養(yǎng)液時,通常需要在合成培養(yǎng)基的基礎上添加血清等一些天然成分,目的是__________________________________。(2)動物細胞培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細菌生長,但要注意選擇抗生素的________________,以保證對所培養(yǎng)的細胞無害。培養(yǎng)過程中每天更換培養(yǎng)液的目的是______________________________________________。(3)當MEF細胞分裂生長到____________________________時就停止分裂,這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。(4)ES細胞是由____________中分離出來的一類細胞,ES細胞在功能上具有發(fā)育的______________。13.科學家僅使用小分子化合物的組合對體細胞進行處理,成功地將已高度分化的小鼠成纖維上皮細胞誘導成多潛能干細胞,并將其命名為誘導多能干細胞(iPS細胞)。如圖是利用iPS細胞對鐮狀細胞貧血小鼠進行基因治療的技術流程:(1)從小鼠體內獲得成纖維上皮細胞后,對其進行的初次培養(yǎng)稱為________,培養(yǎng)的細胞在貼壁生長至貼滿瓶壁時停止分裂,這種現(xiàn)象稱為______________。(2)胚胎干細胞存在于__________________中,具有分化為成年動物體內的________________________的細胞,并進一步形成機體的__________________和________________甚至____________的潛能。(3)過程①的培養(yǎng)液中除合成培養(yǎng)基的成分外,還需添加______________等天然成分。(4)iPS的誘導成功具有重要的醫(yī)學價值,又因為誘導過程無須__________________,而且iPS細胞可以來源于人____________的體細胞,將它移植回病人體內后,理論上可以避免______________,所以科學家普遍認為iPS的應用前景優(yōu)于胚胎干細胞。14.下圖是“細胞培養(yǎng)肉”生物制造流程圖,請結合所學知識回答下列問題:(1)生物制造“細胞培養(yǎng)肉”的第一步,就是要獲取肌肉干細胞,所謂的干細胞是指動物和人體內仍保留著少數(shù)具有____________能力的細胞。(2)“細胞培養(yǎng)肉”生物制造的關鍵技術是動物細胞培養(yǎng)技術。①進行動物細胞培養(yǎng)時,需要用________________酶將從動物體內取出的組織塊分散成單個細胞。在適宜環(huán)境中培養(yǎng),細胞懸液中的細胞很快貼附在瓶壁上,這種現(xiàn)象稱為______________。②在適宜條件下,培養(yǎng)瓶中的細胞進行有絲分裂,數(shù)量不斷增多,當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時,細胞就會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細胞的____________。(3)“細胞培養(yǎng)肉”生物制造過程中,肌肉細胞培養(yǎng)需要利用合適的支架體系,請推測其原因:________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案:1.B動物細胞培養(yǎng)需要無菌、無毒環(huán)境,適宜的溫度、pH和滲透壓,溫度與動物體溫相近,①②④正確;用于動物細胞培養(yǎng)的合成培養(yǎng)基需加入糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等,還需加入血清等天然物質,③正確;動物細胞培養(yǎng)所需氣體環(huán)境為95%空氣和5%的CO2,⑤錯誤。2.A胰蛋白酶的作用是消化組織細胞間的物質,使組織分散成單個細胞,可以促進蛋白質水解為氨基酸;動物細胞沒有細胞壁和原生質體,A正確。3.C細胞分化是基因選擇性表達的結果,A正確;干細胞具有發(fā)育的全能性,可以分化為成年動物體內的各種組織、器官,故可利用干細胞治療某些頑疾,B正確;同一個體的神經(jīng)細胞和干細胞均是由受精卵通過細胞分裂和細胞分化形成的,故它們的遺傳物質相同,C錯誤;干細胞可分為成體干細胞、胚胎干細胞等,D正確。4.A小鼠胚胎腦組織中含有豐富的原代神經(jīng)元,細胞增殖能力強,不會造成生長緩慢,A符合題意;培養(yǎng)瓶瓶口密封會使培養(yǎng)液中缺氧,影響細胞有氧呼吸,造成供能不足,可能使細胞生長緩慢,B不符合題意;血清經(jīng)過高溫處理后,其中活性成分變性,失去原有功能,可能使細胞生長緩慢,C不符合題意;小鼠內環(huán)境為弱堿性,所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性,可能造成細胞生長緩慢,D不符合題意。5.B培養(yǎng)過程中,應定期更換培養(yǎng)液,以便清除細胞代謝產(chǎn)物,A正確;培養(yǎng)過程中,加入血清的目的是提供細胞所需的營養(yǎng)物質,B錯誤;培養(yǎng)過程中,添加適量CO2的目的是維持培養(yǎng)液的pH,C正確;通過該技術培養(yǎng)的動物細胞可以用于篩選抗癌藥物,D正確。6.B動物細胞培養(yǎng)選用材料多為早期胚胎組織或幼齡動物的組織器官,A錯誤;ab段細胞幾乎生長停滯,可能發(fā)生了接觸抑制,b點之后細胞繼續(xù)增殖,則原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的分界點是曲線中b點,B正確;細胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)液中通入5%的CO2是為了維持培養(yǎng)液的pH,C錯誤;在動物細胞培養(yǎng)過程中,會出現(xiàn)細胞接觸抑制,不會形成多層細胞,D錯誤。7.B在一定條件下,體外培養(yǎng)的胚胎干細胞可不斷增殖而不發(fā)生分化,A正確;胚胎干細胞來源于早期胚胎,可分化為各種類型的細胞,不具有組織特異性,B錯誤;胚胎干細胞培養(yǎng)時的飼養(yǎng)層細胞為胚胎干細胞提供營養(yǎng)與貼附面,C正確;胚胎干細胞在功能上具有發(fā)育的全能性,可分化為成年動物體內的任何一種組織細胞,因此先將胚胎干細胞體外誘導分化為某特異組織后再用于治療,可防止形成畸胎瘤,D正確。8.C將動物組織細胞分散成單個細胞,可以用膠原蛋白酶或胰蛋白酶處理,A正確。在胚胎干細胞培養(yǎng)液中加入MEF細胞后,不分化,但未加的一組,易分化,對比分析可以推出:MEF細胞可能產(chǎn)生某種物質抑制胚胎干細胞的分化,B正確。加入培養(yǎng)液中的MEF細胞最好是來自原代培養(yǎng)的細胞,C錯誤。在動物細胞培養(yǎng)過程中可能出現(xiàn)細胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象,D正確。9.A誘導多能干細胞分化成多種細胞是基因選擇性表達的結果,細胞核中遺傳物質DNA不變,但mRNA有所差異,使翻譯形成的蛋白質也不完全相同,A錯誤;誘導多能干細胞分化的實質是基因的選擇性表達,分化的結果是細胞種類增多,B正確;將控制合成破壞運動神經(jīng)元的毒蛋白基因替換,細胞內表達的毒蛋白減少,對漸凍癥可能會起到一定的治療作用,C正確;由題干信息“研究發(fā)現(xiàn),利用誘導多能干細胞(iPS細胞)制作前驅細胞,然后移植給漸凍癥實驗鼠,能延長其壽命”可知,植入神經(jīng)干細胞,能使受損的運動功能得到恢復,可以一定程度改善病癥,D正確。10.D動物細胞培養(yǎng)時,需要用胰蛋白酶處理動物組織,因此實驗中要控制胰蛋白酶溶液濃度和處理時間,以免損傷細胞,A正確;動物細胞培養(yǎng)需要無菌無毒的環(huán)境,因此培養(yǎng)液中應適當加入青霉素、鏈霉素等抗生素,以避免雜菌污染,B正確;曲線bc段表示活細胞密度減少而死細胞密度增加,產(chǎn)生的主要原因可能是培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質不足及有害代謝產(chǎn)物積累等,C正確;圖示第6d時,活細胞密度等于死細胞密度,但新產(chǎn)生的細胞數(shù)小于死亡細胞數(shù),D錯誤。11.C培養(yǎng)動物細胞時,細胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清,A正確;對于已經(jīng)貼壁生長的動物細胞,可用胰蛋白酶處理,使肝癌細胞分散并脫落下來,有利于計數(shù),B正確;實驗組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞礬(溶劑)的藥物X或Y,對照組中應加入等體積的二甲基亞礬(溶劑),C錯誤;由圖可知,添加藥物X的組別肝癌細胞數(shù)目最少,可以初步確定藥物X的抗癌效果較好,D正確。12.(1)胰蛋白補充細胞所需的未知的營養(yǎng)物質(2)種類和劑量補充營養(yǎng)物質和去除代謝廢物,有利于細胞增殖(3)細胞表面相互接觸(4)早期胚胎全能性13.(1)原代培養(yǎng)接觸抑制(2)早期胚胎任何一種類型所有組織器官個體(3)血清(4)破壞胚胎自身免疫排斥反應14.(1)分裂和分化(2)①胰蛋白酶或膠原蛋白細胞貼壁②接觸抑制(3)模擬體
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