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文檔簡介
ATP與dnTP是一回事嗎?黏性末端如何寫?分子運輸車—載體細胞膜上的載體的區(qū)別?思考探究上第3問
分子刀-DNA限制性內(nèi)切酶識別特定的核苷酸序列4~6個堿基對形成粘性末端或平端重組DNA的操作DNA合成儀:根本單位DNA雙鏈反向平行3’5’5’ATGCATGC3’3’5’5’3/5/G—AC—C5/3/G—G引物15/3/G—GT—C5/3/A—G引物23/5/G—AC—C5/3/G—GT—C所有的核酸聚合酶,無論是DNA聚合酶還是RNA聚合聚合酶都只從5`端向3`端移動,新鏈的合成方向與聚合酶移動方向一致,即只能是5`→3`;
多聚酶鏈?zhǔn)椒错憽睵CR〕多聚酶鏈?zhǔn)椒错懯窃谀0錎NA、引物和4種脫氧核苷酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的體外酶促合成反響。由高溫變性,低溫復(fù)性和適溫延伸三步反響組成一個循環(huán),通過屢次循環(huán)反響,使目的DNA得以迅速擴增1、變性〔94℃〕:使DNA雙螺旋的氫鍵斷裂,雙鏈解離成單鏈DNA2、復(fù)性〔55℃〕:引物和其互補的模板在局部形成雜交鏈3、延伸〔72℃〕:通過TaqDNA聚合酶使4種單核苷酸從引物的3`端開始摻入,沿模板從5`向3`端方向延伸,合成與模板DNA的互補鏈。二、實驗原理
二、實驗原理以上3步為一個循環(huán),每一循環(huán)的產(chǎn)物可作為下一個循環(huán)的模板,反復(fù)進行這一循環(huán),可使兩端引物限定范圍內(nèi)的DNA序列以指數(shù)形式擴增,在短時間內(nèi)大量擴增所需基因。雙鏈DNA分子雙鏈斷開
循環(huán)1模板與引物結(jié)合循環(huán)1TaqTaq循環(huán)1TaqTaq循環(huán)1循環(huán)1雙鏈斷開循環(huán)2模板與引物結(jié)合循環(huán)2TaqTaqTaqTaq循環(huán)294℃變性雙鏈斷開循環(huán)
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