高中生物專題1基因工程1.2基因工程的基本操作程序市賽課公開課一等獎(jiǎng)省名師獲獎(jiǎng)?wù)n件

專題1基因工程1.2基因工程基本操作程序第1頁第2頁第3頁第4頁第5頁第6頁第7頁第8頁第9頁第10頁第11頁第12頁第13頁第14頁第15頁第16頁第17頁第18頁第19頁方法基因文庫構(gòu)建PCR技術(shù)擴(kuò)增人工合成基因組文庫部分基因文庫(如cDNA文庫)優(yōu)點(diǎn)操作簡單專一性可在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目標(biāo)基因?qū)Ｒ恍詮?qiáng)，可產(chǎn)生自然界中不存在新基因缺點(diǎn)工作量大、盲目性大、專一性差操作過程較煩瑣，技術(shù)要求過高需要嚴(yán)格控制溫度，技術(shù)要求高適用范圍小第20頁比較項(xiàng)DNA復(fù)制PCR技術(shù)區(qū)分解旋方式解旋酶催化DNA在高溫作用下變性解旋場所細(xì)胞內(nèi)(主要在細(xì)胞核內(nèi))細(xì)胞外(主要在PCR擴(kuò)增儀內(nèi))區(qū)分酶DNA解旋酶、普通DNA聚合酶等耐熱DNA聚合酶(Taq聚合酶)溫度條件細(xì)胞內(nèi)溫和條件需控制溫度，在較高溫度下進(jìn)行合成對(duì)象DNA分子DNA片段或基因第21頁聯(lián)絡(luò)①模板：均需要脫氧核苷酸鏈作為模板進(jìn)行物質(zhì)合成；②原料：均為四種脫氧核苷酸；③酶：均需要DNA聚合酶進(jìn)行催化；④引物：均需要引物，使DNA聚合酶從引物3′端開始連接脫氧核苷酸第22頁第23頁第24頁第25頁第26頁第27頁第28頁第29頁第30頁第31頁第32頁第33頁第34頁第35頁第36頁第37頁受體細(xì)胞方法植物細(xì)胞(體細(xì)胞)①農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：目標(biāo)基因插入Ti質(zhì)粒T-DNA→農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→穩(wěn)定維持和表示②基因槍法：是單子葉植物中慣用一個(gè)基因轉(zhuǎn)化方法，不過成本較高③花粉管通道法：這是我國科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)一個(gè)方法，是一個(gè)十分簡便經(jīng)濟(jì)方法第38頁動(dòng)物細(xì)胞(受精卵)顯微注射法：含有目標(biāo)基因表示載體提純→取卵(受精卵)→顯微注射→受精卵發(fā)育→取得含有新性狀動(dòng)物微生物細(xì)胞(原核細(xì)胞)Ca2＋處理細(xì)胞→感受態(tài)細(xì)胞→表示載體與感受態(tài)細(xì)胞混合→感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子→目標(biāo)基因隨受體細(xì)胞繁殖而復(fù)制第39頁第40頁第41頁第42頁第43頁第44頁第45頁第46頁第47頁第48頁第49頁第50頁第51頁第52頁第53頁第54頁第55頁比較起始(終止)密碼子開啟(終止)子本質(zhì)三個(gè)相鄰堿基DNA片段位置位于mRNA上位于DNA上作用開啟(終止)翻譯開啟(終止)轉(zhuǎn)錄第56頁第57頁第58頁第59頁第60頁第61頁第62頁第63頁