血液系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型的制備

血液系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型的制備血栓形成的動(dòng)物模型貧血的動(dòng)物模型DIC的動(dòng)物模型血液系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型制備及應(yīng)用第2頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天一.血栓形成的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型在活體心血管系統(tǒng)內(nèi)血液成分形成固體質(zhì)塊的過程稱為血栓形成

(thrombosis)。第3頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天血管的止血功能血液凝固反應(yīng)血小板的作用3．機(jī)體的止、凝血功能血小板纖維蛋白第4頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天血管壁的損傷：內(nèi)皮損傷，內(nèi)皮下基質(zhì)(ECM)裸露血流狀態(tài)的改變：血流緩慢或渦流形成血液性質(zhì)的改變：高凝狀態(tài)血栓形成的機(jī)理：第5頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天血管內(nèi)皮損傷

損傷的因素：感染、免疫因素、機(jī)械性損傷、化學(xué)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物的作用促血栓形成機(jī)制：內(nèi)皮屏障缺失:暴露內(nèi)皮下粘附分子，促血小板聚集內(nèi)皮下的膠原纖維暴露，從而激活Ⅻ因子，內(nèi)源性凝血系統(tǒng)被激活。內(nèi)皮促凝作用增強(qiáng)：表達(dá)組織因子,激活外凝系統(tǒng)抗凝作用減弱：TFPI、AT-III、TM減少纖溶作用減弱：t-PA和PAI-1比例失調(diào)，t-PA減少血管收縮和痙攣：ET、PAF增多，PGI2和NO減少血流變慢，有利于血栓形成第6頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天圖9-1凝血瀑布反應(yīng)過程：TF：組織因子；PL：磷脂；Fbg：纖維蛋白原；SFM：可溶性纖維蛋白單體；Fibrin：交聯(lián)的纖維蛋白；“a”的表示活化因子凝血酶原激活物的形成凝血酶的形成纖維蛋白的形成4萬倍凝血系統(tǒng)

第7頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天血小板的粘附與活化形成纖維蛋白纖維蛋白原聚合血管性血友病因子粘附釋放因子I,纖維蛋白原、因子II,凝血酶原、因子III,組織因子第8頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天第9頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天第10頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天抑制II,X活化促t-PA,u-PA釋放抗凝血系統(tǒng)體液抗凝系統(tǒng)(續(xù))第11頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天

纖溶酶原纖溶酶抑制物外激活途經(jīng)：t-PA,u-PA,內(nèi)激活途徑：

IIa,

Ⅻf,KFbgFDPFbn(A,B,C,X,Y,D,E)1、纖溶酶原的激活2、纖維蛋白的降解纖溶系統(tǒng)第12頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天1.兔體外血栓形成模型造模原理：血流緩慢或有渦流,血小板進(jìn)入邊流,增加黏附于管壁的可能性凝血因子易于在局部堆積和活化，啟動(dòng)凝血過程血液接觸異物能使凝血系統(tǒng)和血小板激活第13頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天造模方法：Rabbitsanesthetizedwithintramuscularinjectionsof5mg/kgxylazine(甲苯噻嗪)and30mg/kgketaminehydrochloride,maintaineddilutedketamine(2mg/ml,IV)atarateof1.53mg/kg/hrMechanicalventilationviaatracheotomyBodytemperaturemonitoredwitharectalprobeandmaintainedat37°Cusingawater-jacketedheatingblanket.Extracorporealcirculation(ECC,4hrs)bycannulatingtheleftcarotidarteryforECCinflowandleftfemoralvein（orrightexternaljugularvein）forECCoutflow通過肌內(nèi)注射5mg/kg賽拉嗪（甲苯噻嗪）和30mg/kg氯胺酮鹽酸鹽麻醉的兔子以1.53mg/kg/hr的速率維持稀釋的氯胺酮（2mg/ml，IV）通過機(jī)械通氣行氣管切開術(shù)用直腸探針監(jiān)測(cè)體溫，并使用水套加熱毯維持在37℃。體外循環(huán)（ECC，4小時(shí)），通過插管用于ECC流入的左頸動(dòng)脈和用于ECC流出的左股靜脈（或右外頸靜脈）第14頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天15cm，1/4inchpolyurethane

catheter

15cm，1/4inch亞安酯catheter

頸總動(dòng)脈股靜脈造模方法聚氨酯導(dǎo)管第15頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天PlateletaggregationusingaChrono-Logopticalaggregometer.Obtain

PRPandPPPbycentrifugation,100%lighttransmissionsetbyPPPand0%byPRP模型評(píng)估和應(yīng)用第16頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天Flowcytometrydetection:PlateletactivationP-selectin(CD62P)expression,ActivatedGPIIb/IIIa(fibrinogenreceptor)LeukocyteactivationMonocyteMAC-1(CD11b/CD18)andCD14expressionNutrophilMAC-1andCD14expressionPlatelet-leukocyteadhesionPlateletmarker(CD61,CD42)andleukocytemarker(CD11b),doublestained流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)：

血小板活化

P-選擇素（CD62P）表達(dá)，

活化GPIIb/IIIa（纖維蛋白原受體）

白細(xì)胞活化

單核細(xì)胞MAC-1（CD11b/CD18）和CD14

表達(dá)NutrophilMAC-1和CD14表達(dá)

血小板-白細(xì)胞粘附

血小板標(biāo)志物（CD61，CD42）和白細(xì)胞標(biāo)志物

（CD11b），雙染模型評(píng)估和應(yīng)用第17頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天Thrombusquantitation:Circuitsremovedafter4hrsonECCRinsedwithnormalsalineResidualthrombusinthelargertubingofECCphotographedImagequantitatedusingImageJimagingsoftware血栓定量：

在ECC上4小時(shí)后，移除電路

用生理鹽水沖洗

拍攝在ECC的較大管中的殘余血栓

使用ImageJ成像軟件進(jìn)行圖像定量模型評(píng)估和應(yīng)用第18頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天Biomaterials.2010Apr;31(10):2736.

模型評(píng)估和應(yīng)用第19頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天造模原理：血小板接觸粗糙面發(fā)生粘附激活血小板因粘附而激活，因激活而聚集，形成白色血栓2.大鼠血栓形成模型第20頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天造模方法：

麻醉后行氣管插管

分離一側(cè)頸總動(dòng)脈和另側(cè)頸外靜脈（股靜脈）

頸總動(dòng)脈和股靜脈之間接三段相連的聚乙烯管,

管中充滿肝素生理鹽水,中段內(nèi)放一段絲線

經(jīng)一定時(shí)間后取出沿絲線形成的血栓第21頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天頸總動(dòng)脈股靜脈造模方法第22頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天模型評(píng)估和應(yīng)用：剝離沿絲線形成的血栓，直接稱量血栓,

濕重和干重方法簡(jiǎn)便可靠，應(yīng)用于檢測(cè)處理因素（如

藥物）對(duì)血小板粘附和聚集功能的影響第23頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.冠狀動(dòng)脈血栓形成模型造模原理:直流電（1.5mA）刺激頸動(dòng)脈壁可使血管損傷,血管內(nèi)膜變得粗糙不平,引起血小板黏附、聚集和釋放反應(yīng),促進(jìn)凝血活性；同時(shí)，受損內(nèi)膜暴露膠原纖維激活內(nèi)源性凝血系統(tǒng),還可通過釋放組織因子激活外源性凝血系統(tǒng),導(dǎo)致動(dòng)脈管腔內(nèi)逐漸形成肉眼可見的混合血栓。第24頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天造模方法

犬經(jīng)麻醉、人工呼吸、開胸剪開心包膜,左房插管備注射

藥物用。

分離冠狀動(dòng)脈左旋支,用1.5mA直流電刺激左旋支6小時(shí)以

破壞血管壁,促進(jìn)血栓形成。

同時(shí)記錄冠脈血流量、動(dòng)脈血壓、心外膜電圖。6小時(shí)后處死動(dòng)物并從左心房插管注射20%活性藍(lán)

(1ml/5kg)以測(cè)定左室心肌梗塞的大小。

觀察血栓形成的百分率，并稱量血栓重量第25頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天模型評(píng)估和應(yīng)用該模型所形成的血栓組成和形態(tài)近似人冠狀動(dòng)脈，適用于冠狀動(dòng)脈急性血栓形成的機(jī)制、防治研究。第26頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天4.家兔耳緣靜脈血栓形成模型

血流速度變慢，促進(jìn)血液凝固

凝血酶使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白單體

凝血酶使XIII激活，后者使纖維蛋白單體轉(zhuǎn)變

成纖維蛋白多聚體，導(dǎo)致血液凝固

凝血酶激活蛋白C導(dǎo)致tPA釋放，后者使纖溶酶

原激活

凝血酶同時(shí)能直接激活纖溶酶，使纖維蛋白多

聚體降解導(dǎo)致血栓溶解造模原理:第27頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天

家兔耳緣靜脈分離出2cm長(zhǎng)的靜脈段,用絲線同時(shí)結(jié)扎遠(yuǎn)心端和近心端,并用血管夾夾住兩側(cè)分枝以阻止血流流入用針頭抽去該段血液,注入凝血酶(20NIH凝血酶單位/毫升)

松開血管夾使血液流入,再夾住分枝使靜脈段內(nèi)形成血塊撤去血管夾,放開結(jié)扎線,用透射光觀察血栓消失及血流恢

復(fù)時(shí)間造模方法：第28頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天模型評(píng)估和應(yīng)用本模型形成的血栓為紅色血栓方法簡(jiǎn)便主要用于溶栓藥物溶栓作用的觀察。第29頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天二.DIC的動(dòng)物模型第30頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天第31頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天

彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)是一種由不同原因引起的以全身性血管內(nèi)凝血系統(tǒng)激活為特征的獲得性綜合征，表現(xiàn)為先發(fā)生廣泛性微血栓形成，繼而因大量凝血因子和血小板被消耗（有時(shí)伴有纖溶亢進(jìn)），導(dǎo)致多部位出血、休克、器官功能障礙及微血管病性溶血性貧血。第32頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天DIC

高凝期:血小板的激活

1)血小板激活物：凝血酶,ADP,TXA2,PAF,膠 原,FN,vWF等,2)血小板的作用：

*為凝血因子提供表面反應(yīng)場(chǎng)所*變形、粘附、聚集、收縮*釋放ADP,5-HT,PAF,TXA2第33頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天DIC的發(fā)病機(jī)制示意圖DIC的發(fā)生發(fā)展機(jī)制第34頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天

發(fā)生機(jī)制主要表現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室檢查高凝期凝血系統(tǒng)與Pt激活→IIa↑→微血栓形成血液處于高凝狀態(tài)凝血時(shí)間縮短粘附性↑消耗性低凝期凝血因子和血小板因消耗而減少血液處于低凝狀態(tài)有出血表現(xiàn)血小板計(jì)數(shù)↓凝血酶原時(shí)間↑纖維蛋白原含量↓出血時(shí)間↑凝血時(shí)間↑繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)期產(chǎn)生大量纖溶酶；纖維蛋（原）降解產(chǎn)物形成明顯出血FDP↑凝血酶時(shí)間↑3P試驗(yàn)（+）血小板纖溶系統(tǒng)激活高凝狀態(tài)微血栓低凝狀態(tài)DIC的發(fā)生發(fā)展機(jī)制多發(fā)性出血第35頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天實(shí)驗(yàn)對(duì)象：成年家兔，雌雄隨機(jī)1.家兔DIC模型的復(fù)制第36頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天

造模原理正常體內(nèi)循環(huán)血液中不含組織因子，當(dāng)組織損傷或內(nèi)皮細(xì)胞和白細(xì)胞激活時(shí)，組織因子能釋放或暴露于循環(huán)血液?jiǎn)?dòng)外源性凝血過程。兔腦粉含有組織因子，靜脈注射兔腦粉后通過激活外源性凝血途徑引起DIC.第37頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天兔腦粉浸液的制備：健康成年家兔安樂處死后,即刻開顱摘取兔腦，除去血管、腦膜和其它結(jié)締組織，用PBS洗凈后，置于研缽中伴丙酮研磨成粥狀懸液，靜置數(shù)分鐘后棄上清液，再加入丙酮研磨重復(fù)前述步驟多次，直至腦組織完全脫水成白色粉末，置4oC保存待用。造模方法：第38頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天稱重后，用20%烏拉坦4ml/kg耳緣靜脈注射麻醉

動(dòng)物用生理鹽水配制4％兔腦粉溶液，按2ml／kg體重計(jì)算兔腦粉溶液，加生理鹽水稀釋至20m1后，由耳緣靜脈緩慢注入（10min）。分別于注入兔腦粉溶液前15min、注入后15min和45min，記錄家兔的血壓和呼吸，并取血置于有肝素的注射器中，以測(cè)定3P試驗(yàn)、PT、纖維蛋白原、血小板計(jì)數(shù)。造模方法復(fù)制DIC模型：第39頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天凝血酶原時(shí)間(PT)測(cè)定①P試液配制：取兔腦粉0.2g，加入5mlNS充分混勻，置C37oC恒溫水浴箱內(nèi)孵育1hr，孵育期間用玻璃棒攪拌3至4次，孵育后混勻、離心(1000rpmx5min）,取上清液與等量氯化鈣（0.025mol／L）溶液混勻。取被檢血漿0.1ml，置于小試管內(nèi)放于37℃水浴中。②取待測(cè)血漿0.1ml加入P試液0.2ml，輕輕地側(cè)動(dòng)，直至液體停止流動(dòng)或出現(xiàn)粗顆粒，即為凝血酶原時(shí)間.③重復(fù)3次，取平均值,家兔正常值為6～8sec。造模方法檢查急性DIC的幾種血液學(xué)常規(guī)方法：第40頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天血小板計(jì)數(shù)吸取20μl全血加入到0.38ml血小板稀釋液中混勻，用滴管將上述混懸液一小滴滴入血球計(jì)數(shù)板內(nèi)，靜置15min后，用高倍鏡計(jì)數(shù)。數(shù)5個(gè)方格內(nèi)之血小板數(shù)，乘以1000，即得每立方毫米血小板數(shù)。造模方法第41頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天魚精蛋白副凝實(shí)驗(yàn)(3P實(shí)驗(yàn))①取全血置于EP管中，離心（5000rpmx3min）后，取上清液即血漿。②取血漿0.4ml置于試管中，加入0.1ml1%硫酸魚精蛋白液混勻。③室溫下靜置30min后搖動(dòng)試管，出現(xiàn)白色纖維或凝塊者為陽(yáng)性，均勻渾濁而沒有出現(xiàn)白色纖維者為陰性。造模方法第42頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天魚精蛋白游離單體(FM)多聚體凝塊(Fbn)FbgFMFbnⅡa

XⅢa

FDPPLnPLn

FM—X(可溶性復(fù)合物)(A,B,C

X,Y)3P試驗(yàn):

血漿魚精蛋白副凝試驗(yàn)（plasmaprotaminparacoagulationtest）第43頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天血清纖維蛋白(原)含量測(cè)定(飽和鹽水法)①取血漿0.5m1置于12X100mm的試管中，加入飽和氯化鈉溶液4.5m1，充分混勻，置于37℃水浴中孵育3min，取血后再次混勻，用721型分光光度計(jì)比色，測(cè)定光密度.②以生理鹽水代替飽和氯化鈉溶液，進(jìn)行同樣操作作為對(duì)照。③對(duì)照管調(diào)零點(diǎn)，測(cè)出光密度(波長(zhǎng)520mm)后，按下式計(jì)算纖維蛋白原含量：測(cè)定管光密度

×1000=mg%0.5造模方法第44頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天動(dòng)物死后觀察各臟器的變化造模方法尸檢第45頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天三.貧血的動(dòng)物模型貧血是指人體外周血紅細(xì)胞容量減少，低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。第46頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天1、缺鐵性貧血?jiǎng)游锬Ｐ驮炷Ｔ恚喝辫F性貧血（irondeficiencyanemia，IDA）是指各種原因引起的缺鐵導(dǎo)致紅細(xì)胞生成減少而導(dǎo)致的貧血。通過低鐵飼料喂養(yǎng)動(dòng)物使鐵攝入減少，外加多次少量放血使鐵丟失，造成體內(nèi)鐵的缺乏。第47頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天造模方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：選用4周齡SD大鼠，雌雄不拘，體重65g左右，HGB≥130g/L。建模方法：采用EDTA浸泡處理以去除飼料中的鐵（低鐵飼料）后喂養(yǎng)動(dòng)物。采用去離子水作為動(dòng)物飲水，以排除飲水中鐵離子的影響。在低鐵飼料飼喂2周后進(jìn)行，常用尾靜脈放血法，1～1.5ml/次，2次/周。第48頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天飼料中的含鐵量是誘導(dǎo)IDA模型的關(guān)鍵：（1）飼喂含鐵量<15.63mg/Kg的飼料35天，SD大鼠出現(xiàn)典型IDA表現(xiàn)；（2）飼喂含鐵40.30mg/Kg的飼料SD大鼠出現(xiàn)缺鐵，但并不表現(xiàn)貧血癥狀。模型指標(biāo)：（1）HGB≤100g/L；（2）血象：紅細(xì)胞體積較正常紅細(xì)胞偏小，大小不一，中心淡染區(qū)擴(kuò)大，MCV減小、MCHC降低；（3）血清鐵降低，<10μmol/L，血清總鐵結(jié)合力增高，>60μmol/L。用于缺鐵性貧血藥物作用和缺鐵性貧血機(jī)制的研究，但不適用于鐵吸收不良相關(guān)的防治研究。模型評(píng)估和應(yīng)用第49頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天2、溶血性貧血?jiǎng)游锬Ｐ?/p>

溶血性貧血(hemolyticanemia,)是一種常見的貧血類型，是指由于某種原因使紅細(xì)胞存活期縮短(15-20天），破壞增加，超過了骨髓代償能力（6-8倍）所引起的一類貧血，是常見的造血系統(tǒng)疾病。第50頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天

造模原理：動(dòng)物注射一定量的乙酰苯肼(acetylphenylhydrazine,APH)，APH是一種強(qiáng)氧化劑，能特異性地對(duì)紅細(xì)胞起緩慢而進(jìn)行性地氧化損傷作用，尤其是干擾紅細(xì)胞內(nèi)的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶，促進(jìn)血紅蛋白變性而形成海氏小體，也可直接破壞紅細(xì)胞的膜蛋白和脂類，使膜溶解破裂，紅細(xì)胞崩解，造成溶血性貧血。第51頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天造模方法：

小鼠第1、4、7天皮下注射APH生

理

鹽水溶液0.2g/kg、0.1g/kg、0.2g/kg，第9天造模成功，其

他給藥方法也可以造成此模型。

大鼠

第1、4天

皮

下

注射APH生理鹽水溶液0.16g/kg、0.08g/kg，第8天造模成功；或兩次劑

量均為0.2g/kg，第10天造模成功。

家兔以2％APH生理鹽水溶液給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物皮下或

肌內(nèi)注

射2～3次，劑量為0.1g/kg，即可建立溶

血性貧血模型。第52頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天外周血血紅蛋白和紅細(xì)胞進(jìn)行性下降；網(wǎng)織紅細(xì)胞、海氏小體和白細(xì)胞總數(shù)則顯著增多。本方法建模周期短，操作簡(jiǎn)便，模型動(dòng)物癥狀和外周血象、血細(xì)胞的生化學(xué)變化與人類溶血性貧血基本相似，為研究實(shí)驗(yàn)性溶血性貧血提供了一種簡(jiǎn)易模型。模型評(píng)估和應(yīng)用第53頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天3.失血性貧血?jiǎng)游锬Ｐ驮炷Ｔ恚杭毙允а筘氀?posthemorrhagicanemia)是快速大量出血引起的貧血；慢性失血后貧血是由于長(zhǎng)期中度出血所致的小細(xì)胞性貧血。通過人為放血導(dǎo)致動(dòng)物血容量和血細(xì)胞的減少，從而導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)短期的貧血特征，以此制作失血性貧血模型。第54頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天造模方法：

小鼠:

眼眶后靜脈叢放血6～8滴(約0.5ml)，隔日

放血1次，連續(xù)5次可形成慢性失血性貧血模型。

每天剪尾放血0.5ml，連續(xù)7天，也可造成貧血。

大鼠:

大鼠剪尾放血1.5～2ml，隔日1次，連續(xù)5

次，可形成慢性失血性貧血。

家兔或犬:

從動(dòng)物靜脈或者動(dòng)脈采集全血容量的1/3，每天1次，反復(fù)幾次，即可造成失血性貧血

動(dòng)物模型。第55頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天模型評(píng)估和應(yīng)用：通過較短時(shí)間內(nèi)向體外大量放血，造成急性失血性貧血。也可通過反復(fù)多次放血，造成慢性失血性貧血。該方法操作簡(jiǎn)單，指標(biāo)明確，但樣本間失血量較難控制完全一致。該模型用于一般失血性貧血的發(fā)病機(jī)制及其新藥藥效學(xué)篩選研究。第56頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天4、再生障礙性貧血?jiǎng)游锬Ｐ驮偕系K性貧血（aplasticanemia），簡(jiǎn)稱再障，系多種病因引起的造血系統(tǒng)退行性變，紅骨髓總?cè)萘坎粩鄿p少，黃骨髓不斷增加，造血衰竭，以全血細(xì)胞減少為主要表現(xiàn)的一組綜合征。建模方法包括化學(xué)建模、物理建模及免疫介導(dǎo)等。再障的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明。第57頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天

化學(xué)方法建模：造模原理：化學(xué)藥物的毒副作用抑制骨髓造血功能，誘導(dǎo)再生障礙性貧血。腺嘌呤可導(dǎo)致腎臟病變，使促紅細(xì)胞生成素（EPO）分泌不足，進(jìn)而導(dǎo)致紅系和巨核系造血障礙。白消安可選擇性抑制骨髓。苯類化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后，在骨髓富集（可達(dá)血清濃度的20倍），對(duì)骨髓有較強(qiáng)的抑制作用，可導(dǎo)致再障。第58頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天腺嘌呤致大鼠腎性貧血模型：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SD大鼠，雌雄不拘。利用飼喂含腺嘌呤0.75%，投飼量300mg/kg/d，連續(xù)喂養(yǎng)6-7周，獲得腎衰竭貧血模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物紅細(xì)胞、血紅蛋白及紅細(xì)胞壓積等主要紅系指標(biāo)均、血小板均顯著下降。第59頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天白消安致骨髓抑制的再障模型：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠、SD大鼠、家兔，雌雄不拘。建模方法：白消安（馬利蘭）（1）口服給藥，15mg/kg/周或30mg/kg/周，總給藥劑量達(dá)到120-150mg/kg時(shí)，可致家兔的再障，出現(xiàn)全血細(xì)胞減少、淋巴細(xì)胞比值增加、骨髓黃化和骨髓纖維化。（2）一次性給藥，20-35mg/kg腹腔注射，可致大鼠再障。（3）小鼠每天腹腔注射15mg/kg，持續(xù)8-9天，停藥60天后，可使骨髓造血功能抑制。出現(xiàn)血細(xì)胞減少和骨髓有核細(xì)胞降低，建模穩(wěn)定、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物存活率高。第60頁(yè),共66頁(yè)，2024年2月25日，星期天苯致骨髓抑制的再障模型：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：CD1小鼠、家兔。建模方法：苯類化學(xué)物質(zhì)進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)后，在骨髓富集（可達(dá)血清濃度的20倍），對(duì)骨髓有較強(qiáng)的抑制作用，可導(dǎo)致再障。（1）皮下注射給