高考生物復(fù)習(xí) 選修三專題資料3

選修三專題推送資料1．OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四個基因分別編碼四種不同的酶，研究人員將這些基因分別與葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)肽（引導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)進(jìn)入葉綠體）基因連接，構(gòu)建多基因表達(dá)載體（載體中部分序列如下圖所示），利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化水稻，在水稻葉綠體內(nèi)構(gòu)建了一條新代謝途徑，提高了水稻的產(chǎn)量。下列敘述正確的是（）A．可用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測四種酶在轉(zhuǎn)基因水稻中的表達(dá)量B．四個基因轉(zhuǎn)錄時都以DNA的同一條單鏈為模板C．應(yīng)選用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的水稻細(xì)胞D．四個基因都在水稻葉綠體內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄翻譯【答案】A2．豬瘟病毒（CSFV）蛋白質(zhì)外殼上的E2蛋白，對于病毒入侵細(xì)胞至關(guān)重要。研究人員利用E2蛋白來制備抗CSFV的單克隆抗體，過程如圖所示。下列敘述不正確的是（）A．細(xì)胞①可從注射E2蛋白的小鼠脾臟中獲得B．過程②可使用PEG或滅活的病毒C．細(xì)胞③均為既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞D．此過程生產(chǎn)的單克隆抗體可用于CSFV的檢測【答案】C3.治療性克隆的一般流程是把患者（供體）體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中形成重構(gòu)胚，再把重構(gòu)胚體外培養(yǎng)到囊胚，然后從中分離出ES細(xì)胞，并誘導(dǎo)ES細(xì)胞定向分化為所需的特定細(xì)胞類型用于移植。下列說法錯誤的是（）A.供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞后還需誘導(dǎo)融合B.ES細(xì)胞在核遺傳上和供體細(xì)胞相同C.治療性克隆是治療遺傳病的根本措施D.治療性克隆可解決器官移植時的免疫排斥問題【答案】C4.小干擾RNA（siRNA）能誘導(dǎo)特定基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA降解，導(dǎo)致基因沉默。目前制備siRNA的方法中，最常見的是以質(zhì)粒為載體，依賴一個啟動子控制一段反向重復(fù)序列R轉(zhuǎn)錄，在細(xì)胞內(nèi)生成短發(fā)夾RNA（shRNA），隨后shRNA被特異核酸酶剪切成siRNA（如圖1），該載體被稱為shRNA表達(dá)載體?？蒲腥藛T對實(shí)驗(yàn)室常用的普通載體進(jìn)行改造，構(gòu)建了含有雙啟動子（U6）的shRNA表達(dá)載體（pdPRO），如圖2所示，其中相關(guān)限制酶的識別序列及切點(diǎn)如下表。限制酶識別序列及切點(diǎn)BamHⅠG↓GATCCEcoRⅠG↓AATTCBglⅡA↓GATCTHindⅢA↓AGCTT（1）siRNA阻斷了___________過程而關(guān)閉了相關(guān)基因，shRNA被特異核酸酶剪切成siRNA過程中被破壞的化學(xué)鍵是_________________。（2）為方便構(gòu)建表達(dá)載體，研究人員進(jìn)行PCR過程時應(yīng)在每個___________上設(shè)計(jì)限制酶識別序列。據(jù)圖可知，插入每個U6啟動子時，研究人員都使用了兩種限制酶，目的是為了保證_________________。（3）不同DNA分別經(jīng)BglⅡ與BamHⅠ切割形成的片段___________填“能”或“不能”）連接為雜交分子，理由是________________________。（4）在科研中，pdPRO相比于單啟動子shRNA表達(dá)載體的優(yōu)勢是__________________?！敬鸢浮浚?）翻譯磷酸二酯鍵（2）引物U6啟動子與質(zhì)粒正確連接（3）能兩種限制酶切割DNA后形成的黏性末端相同（4）可以同時抑制雙基因的表達(dá)，用來研究兩個基因的協(xié)同阻斷效應(yīng)5．腦心肌炎病毒（EMCV，RNA病毒）是引起人、豬腦炎和心肌炎的病原體。為研制疫苗，科研人員按下圖流程培育轉(zhuǎn)基因酵母菌，來生產(chǎn)BMCV的衣殼蛋白VP1。其中，受體酵母菌是組氨酸合成缺陷型，HIS4基因表達(dá)的酶催化組氨酸的合成，C418是一種抗生素。請回答下列問題：（1）過程①是通過RT-PCR（即逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)）獲得目的基因，下列3種引物中，過程①應(yīng)選擇的是____________。a．5'-GGAATTCGCCACCATCCGAGTCAAACGCTGAA-3'b．5'-TCGTCGACCATCGATAGCCACTCGCCTAACGCC-3'c．5'-ATTTGCGGCCGCTCACTCTAGCATCAAGACT-3'（2）過程③將質(zhì)粒2導(dǎo)入大腸桿菌的目的是_____________。（3）過程⑤將質(zhì)粒2線性化時使用的是_____________（限制酶），過程⑥線性DNA需整合到酵母細(xì)胞的染色體DNA中目的基因才能______________。（4）線性DNA整合到酵母細(xì)胞染色體DNA時，可能是單拷貝整合，也可能是多拷貝整合。過程⑦先將酵母菌培養(yǎng)在缺乏_____________的培養(yǎng)基中，篩選獲得導(dǎo)入目的基因的酵母菌；后將篩選出的酵母菌接種于含2mg·L-1G418的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，選擇生長良好的酵母菌再轉(zhuǎn)接到含4mgLG418的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，其目的是_____________。（6）研究人員用兔抗EMCV血清與酵母細(xì)胞生產(chǎn)的VP1蛋白進(jìn)行抗原—抗體免疫反應(yīng)試驗(yàn)，其目的是_______________________________________?！敬鸢浮浚?）a、c（2）讓其在大腸桿菌中復(fù)制（3）限制酶salⅠ

穩(wěn)定遺傳并表達(dá)（4）組氨酸

篩選出目的基因多拷貝整合的酵母菌（6）檢測酵母細(xì)胞生產(chǎn)的VP1與EMCV的VP1的抗原性（結(jié)構(gòu)）是否一致。6．科研人員以菊花（Dendranthemamorifolium）的花蕾為外植體，探究不同時間的微波處理對愈傷組織和再生苗的影響，結(jié)果見下表。下列敘述錯誤的是微波處理(S)接種外植體個數(shù)(個)存活數(shù)(個)存活率(%)出苗率(%)愈傷組織再生頻率(%)0503570351005502550156010755573.35090.915755066.7408020502550156025500000A．菊花外植體消毒可用體積分?jǐn)?shù)70%的酒精配合使用一定濃度的次氯酸鈉溶液B．微波處理5s的實(shí)驗(yàn)組中，可能有部分外植體和愈傷組織在培養(yǎng)過程中受到污染C．根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，從誘變育種角度考慮，微波處理10s是最理想的處理時間D．愈傷組織細(xì)胞具有旺盛的分裂能力，是進(jìn)行誘變育種的良好的實(shí)驗(yàn)材料【答案】C7．RT-PCR是將RNA逆轉(zhuǎn)錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增反應(yīng)相結(jié)合的技術(shù)，具體過程如下圖所示，有關(guān)敘述正確的是A．過程I需要加入脫氧核苷酸、RNA、RNA聚合酶和特異性引物等B．過程Ⅱ?qū)捂渃DNA進(jìn)行4次擴(kuò)增，理論上需要15個引物BC．該技術(shù)可用于獲取并大量擴(kuò)增目的基因，所得基因含啟動子D．該技術(shù)用于對某些微量RNA病毒的檢測，可提高檢測的靈敏度【答案】D8．中國科學(xué)院動物研究所首席科學(xué)家、動物克隆與受精生物學(xué)學(xué)科帶頭人陳大元，曾主持科研攻關(guān)項(xiàng)目——“攀登”，進(jìn)行大熊貓的異種克隆。他們將大熊貓的體細(xì)胞核放入兔子的去核卵母細(xì)胞之中，并使其成功發(fā)育成囊胚，標(biāo)志著異種核質(zhì)相容的問題得到解決，異種克隆大熊貓邁過了第一道“坎”；然后至關(guān)重要的是選擇一種合適的“代孕母體”。下圖是該研究的理論流程圖。下列說法正確的是A．步驟甲、乙分別是指大熊貓?bào)w細(xì)胞核移植、胚胎收集B．誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細(xì)胞C．重組細(xì)胞發(fā)育成早期胚胎所需營養(yǎng)主要來源于營養(yǎng)液D．步驟甲和步驟乙中的供體和受體需要同期發(fā)情處理【答案】B9．科學(xué)界對單克隆抗體防治新型冠狀病毒感染的作用寄予厚望。研究人員發(fā)現(xiàn)新型冠狀病毒核衣殼N蛋白具有抗原特異性，這為治療新型冠狀病毒藥物的研發(fā)提供了有效的靶標(biāo)。請回答下列問題：（1）制備單克隆抗體過程中，研究人員將________注射到小鼠體內(nèi)以獲得產(chǎn)生新型冠狀病毒核衣殼N蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞。所獲得B淋巴細(xì)胞不適合直接用于大量生產(chǎn)單克隆抗體的原因是________。（2）將B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合后可獲得多種融合細(xì)胞，還需用特定的________進(jìn)行篩選，才能得到雜交瘤細(xì)胞。在將雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)之前，還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和________。（3）通過動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)體外培養(yǎng)小鼠骨髓瘤細(xì)胞，若采用無血清培養(yǎng)基，則在基本培養(yǎng)基中需添加一些________的物質(zhì)；培養(yǎng)過程中需要定期更換培養(yǎng)液，原因是________。（4）請分析比較注射新型冠狀病毒核衣殼N蛋白的單克隆抗體、新型冠狀病毒疫苗在預(yù)防新型冠狀病毒大流行中的作用：________?！敬鸢浮浚?）新型冠狀病毒核衣殼N蛋白B淋巴細(xì)胞不能大量增殖（2）選擇性培養(yǎng)基抗體檢測（3）（已知的）促進(jìn)細(xì)胞生長和增殖防止代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害（4）注射疫苗可刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫力，以起到預(yù)防作用；注射單克隆抗體可使機(jī)體立即獲得免疫力,一般用于治療（合理即可）10．人乳鐵蛋白是一種重要的藥用保健蛋白。下圖表示利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人乳鐵蛋白的部分過程。圖中Tetr表示四環(huán)素抗性基因，Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，四種限制酶的識別序列及切割位點(diǎn)如表所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）一般從cDNA文庫中獲取人乳鐵蛋白基因，該文庫的建立方法是________。（2）為構(gòu)建重組載體，應(yīng)選擇________酶對目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割。將上述酶切后得到DNA末端連接起來，連接部位的6個堿基對序列為________。（3）以大腸桿菌為受體細(xì)胞，將酶切后的連接產(chǎn)物導(dǎo)入受體細(xì)胞。為篩選出導(dǎo)入目的基因的受體菌，首先需要將得到的上述大腸桿菌接種到含________培養(yǎng)基（A）上，一段時間后，將A上生長的菌落拓印到含________培養(yǎng)基（B）上，在B上能生長的________（填“是”或“不是”）成功導(dǎo)入重組質(zhì)的受體菌。經(jīng)檢測，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因不能表達(dá)，其最可能的原因是________?！敬鸢浮浚?）人體發(fā)育某個時期的mRNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生DNA片段，與載體連接后導(dǎo)入受體菌群體儲存（2）BclⅠ酶和BamHⅠ酶（3）氨芐青霉素四環(huán)素不是用BamHⅠ酶和BclⅠ酶切形成的黏性末端相同，部分目的基因與質(zhì)粒反向連接11．CRISPR/Cas13d技術(shù)是一項(xiàng)以向?qū)NA（gRNA）引導(dǎo)Cas13d蛋白定向作用于靶向RNA的新興技術(shù)。研究人員設(shè)計(jì)了若干個gRNA，分別靶向新冠病毒RNA基因組的不同肽編碼區(qū)，但不影響人體細(xì)胞的RNA，作用機(jī)理如圖所示。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）:A．gRNA通過與靶向RNA堿基互補(bǔ)配對將Cas13d引導(dǎo)至特定位點(diǎn)B．Cas13d能定向切開相鄰兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵C．與限制性核酸內(nèi)切酶相比，Cas13d不具有特異性識別能力D．該技術(shù)有望成為一種能定向、靈活治療RNA病毒感染的新方法【答案】B12．人體感染新冠病毒后，機(jī)體會產(chǎn)生多種特異性抗體。我國科學(xué)家從康復(fù)者的漿細(xì)胞中克隆出針對病毒表面抗原的抗體基因相關(guān)序列，構(gòu)建表達(dá)載體并在相應(yīng)系統(tǒng)中表達(dá)，可制備出全人源單克隆抗體。以下表述錯誤的是（）A.該單抗可直接用于新冠病毒的核酸檢測 B.在該單抗制備過程中利用了基因工程技術(shù)C.該單抗可與新冠病毒相應(yīng)蛋白特異性結(jié)合 D.可用抗原-抗體反應(yīng)檢測抗體基因表達(dá)產(chǎn)物【答案】A13.為了對重金屬污染的土壤進(jìn)行生物修復(fù)，研究者將從楊樹中克隆的重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（HMA3）基因與外源高效啟動子連接，導(dǎo)入楊樹基因組中（如圖）。為檢測獲得的轉(zhuǎn)基因楊樹苗中是否含有導(dǎo)入的HMA3基因，同時避免內(nèi)源HMA3基因的干擾，在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時，應(yīng)選擇的引物組合是（）A.①+③ B.①+② C.③+② D.③+④【答案】B14．經(jīng)遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞注入囊胚，通過胚胎工程的相關(guān)技術(shù)可以獲得具有不同遺傳特性的實(shí)驗(yàn)小鼠。下列說法錯誤的是（）A．用促性腺激素處理雌鼠可以獲得更多的卵子B．體外受精前要對小鼠的精子進(jìn)行獲能處理C．胚胎移植前要檢查胚胎質(zhì)量并在囊胚或原腸胚階段移植D．遺傳改造的小鼠胚胎干細(xì)胞可以通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)獲得【答案】C15.VNN1基因(1542bp)與炎癥相關(guān)性疾病有關(guān)，GFP基因(4735bp)控制綠色熒光蛋白的合成，該蛋白可在相應(yīng)波長的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。某研究小組進(jìn)行鼠源GFP－VNN1重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其功能研究，回答下列問題：(1)為構(gòu)建重組質(zhì)粒，研究小組從數(shù)據(jù)庫查找到VNN1的DNA序列，并設(shè)計(jì)引物。上游引物：5'－AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC－3'(下劃線為HindIII酶切位點(diǎn))，下游引物：5'－GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA－3'(下劃線為BamHI酶切位點(diǎn))，之后進(jìn)行PCR擴(kuò)增，PCR的原理是。擴(kuò)增后的VNN1基因要與含GFP基因的載體連接，需用(填具體酶)切割VNN1基因和含GFP基因的載體，再用酶處理，構(gòu)建重組質(zhì)粒。(2)GFP基因在重組質(zhì)粒中可作為，其作用是。用之前相同的限制酶對GFP－VNN1重組質(zhì)粒切割后，進(jìn)行電泳鑒定時得到如圖1所示的部分條帶，結(jié)果表明。(3)IL－6為體內(nèi)重要的炎癥因子，能與相應(yīng)的受體結(jié)合，激活炎癥反應(yīng)。圖2為GFP－VNN1重組質(zhì)粒對細(xì)胞分泌IL－6的影響，由此說明；同時發(fā)現(xiàn)與正常組比較，空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL－6的表達(dá)有輕微升高，造成這種現(xiàn)象的可能原因是。【答案】（1）DNA雙鏈復(fù)制

HindⅢ酶和BamHⅠ酶

DNA連接酶

（2）標(biāo)記基因

鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含目的基因的細(xì)胞篩選出來

VNN1基因已經(jīng)插入到含GFP基因的載體中

（3）VNN1基因表達(dá)產(chǎn)物能促進(jìn)細(xì)胞分泌炎癥因子IL-6

操作過程中對細(xì)胞的損傷（或用到化學(xué)試劑對細(xì)胞具有一定的毒性作用），可以激活相應(yīng)細(xì)胞分泌炎癥因子IL-616.研究者以擬南芥根段作為組織培養(yǎng)材料，探討了激素誘導(dǎo)愈傷組織分化生芽的機(jī)制。（1）離體的擬南芥根段在適宜條件下可以培育出完整的植株，說明植物細(xì)胞具有。在組織培養(yǎng)過程中，根段細(xì)胞經(jīng)過形成愈傷組織，此后調(diào)整培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素（CK）與生長素的比例可誘導(dǎo)愈傷組織分化。（2）在愈傷組織生芽過程中，CK通過ARRs（A）基因和WUS（W）基因起作用。為探討A基因與W基因的關(guān)系，將A基因功能缺失突變體（突變體a）和野生型的愈傷組織分別置于CK與生長素比例高的（高CK）培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生芽，在此過程中測定W基因的表達(dá)量。圖1中，野生型的W基因表達(dá)量與高CK誘導(dǎo)時間的關(guān)系是。分析圖1結(jié)果可得出的結(jié)論是：在高CK誘導(dǎo)下A基因促進(jìn)W基因表達(dá)。得出結(jié)論的依據(jù)為：與野生型相比，。（3）用轉(zhuǎn)基因方法在上述突變體a中過量表達(dá)W基因，獲得材料甲。將材料甲、突變體a和野生型三組愈傷組織在高CK培養(yǎng)基中培養(yǎng)，三組愈傷組織分化生芽的比例如圖2，由此能得出的結(jié)論包括__________。A．A基因在愈傷組織分化生芽的過程中起作用B．w基因的表達(dá)產(chǎn)物調(diào)控A基因的表達(dá)C．缺失A基因時W基因表達(dá)不能促進(jìn)生芽D．過量表達(dá)W基因可使生芽時間提前【答案】（1）全能性脫分化（2）隨著高CK誘導(dǎo)時間的延長，野生型的W基因表達(dá)量顯著升高隨著高CK誘導(dǎo)時間的延長，突變體的W基因表達(dá)量低于野生型（3）ACD17．OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四個基因分別編碼四種不同的酶，研究人員將這些基因分別與葉綠體轉(zhuǎn)運(yùn)肽（引導(dǎo)合成的蛋白質(zhì)進(jìn)入葉綠體）基因連接，構(gòu)建多基因表達(dá)載體（載體中部分序列如下圖所示），利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)化水稻，在水稻葉綠體內(nèi)構(gòu)建了一條新代謝途徑，提高了水稻的產(chǎn)量。下列敘述正確的是（

）A．可用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測四種酶在轉(zhuǎn)基因水稻中的表達(dá)量B．四個基因轉(zhuǎn)錄時都以DNA的同一條單鏈為模板C．應(yīng)選用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選被農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化的水稻細(xì)胞D．四個基因都在水稻葉綠體內(nèi)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄翻譯【答案】A18．酸性土壤是pH小于7的土壤總稱。下圖表示利用耐酸植物甲（4n）和高產(chǎn)植物乙（2n）培育高產(chǎn)耐酸雜種植物的過程（圖中序號表示過程或處理手段），下列相關(guān)敘述錯誤的是（

）A．圖示過程中依據(jù)的原理主要有細(xì)胞膜的流動性、植物細(xì)胞的全能性等B．過程①可將甲、乙植物細(xì)胞置于含纖維素酶和果膠酶的等滲溶液中處理C．過程②可以用PEG誘導(dǎo)，過程③得到的雜種細(xì)胞中含有3個染色體組D．過程④⑤使用的培養(yǎng)基需加入生長素和細(xì)胞分裂素，但加入的比例不同【答案】C19．豬瘟病毒（CSFV）蛋白質(zhì)外殼上的E2蛋白，對于病毒入侵細(xì)胞至關(guān)重要。研究人員利用E2蛋白來制備抗CSFV的單克隆抗體，過程如圖所示。下列敘述不正確的是（

）A．細(xì)胞①可從注射E2蛋白的小鼠脾臟中獲得B．過程②可使用PEG或滅活的病毒C．細(xì)胞③均為既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞D．此過程生產(chǎn)的單克隆抗體可用于CSFV的檢測【答案】C20.微藻細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中含有大量蛋白質(zhì)水解酶，葉綠體中不含蛋白質(zhì)水解酶，科研人員將綠色熒光蛋白基因（gfp基因）導(dǎo)入微藻的葉綠體基因組中，培育出了發(fā)綠色熒光的微藻。請回答下列問題：（1）用PCR技術(shù)可對gfp基因進(jìn)行擴(kuò)增，PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的原理是_____________，PCR擴(kuò)增時首先要加熱到90～95℃，目的是__________________。構(gòu)建基因表達(dá)載體時，gfp基因首尾兩端要插入到_____________之間。（2）將gfp基因?qū)肴~綠體基因組中，而不導(dǎo)入細(xì)胞核的原因是_____________，導(dǎo)入葉綠體基因組的gfp基因在遺傳過程中_____________（填“遵循”或“不遵循”）孟德爾的遺傳規(guī)律。（3）成功導(dǎo)入gfp基因后可通過_____________技術(shù)檢測目的基因是否成功轉(zhuǎn)錄；檢測時需要用到DNA探針，DNA探針是指____________________________________________________?！敬鸢浮浚?）DNA（雙鏈）復(fù)制使DNA受熱變性后解鏈為單鏈啟動子和終止子（2）葉綠體中不含蛋白質(zhì)水解酶，可以有效避免外源蛋白被水解（或防止基因逃逸，造成污染，答案合理即可給分）不遵循（3）分子雜交用放射性同位素等標(biāo)記的含有目的基因的DNA片段21.神經(jīng)纖毛蛋白-1(NRP-1)是一種多功能糖蛋白，在多種腫瘤組織中呈高表達(dá)，可與血管內(nèi)皮生長因子結(jié)合促進(jìn)腫瘤血管的形成,使腫瘤體積增大?？蒲腥藛T通過制備NRP-1單克隆抗體，開展對小鼠的乳腺癌腫塊進(jìn)行靶向治療的研究。請分析回答:(1)制備單克隆抗體涉及的動物細(xì)胞工程常用技術(shù)手段有_______________________________________(寫出兩項(xiàng))。(2)制備時，首先給小鼠注射___________________________________，分離得到B細(xì)胞。將B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合后得到雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)系列處理選出_____________________細(xì)胞注射到小鼠腹腔中，從腹水中提取到大量的NRP-1單克隆抗體。(3)為了論證制取的單克隆抗體的治療效果，研究者選擇生長狀況一致的小鼠，分別注射等量的乳腺癌細(xì)胞懸液，經(jīng)飼養(yǎng)后，各小鼠均形成了體積基本相同的腫瘤。將上述小鼠隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對照組，實(shí)驗(yàn)組和對照組應(yīng)分別注射_____________________，________________________，且每隔3天重復(fù)進(jìn)行相同的注射操作，一段時間后測算發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組小鼠的腫瘤體積都小于對照組，原因可能是_____________________________發(fā)生特異性結(jié)合，從而阻斷了___________________________________________的結(jié)合，從而抑制了腫瘤內(nèi)血管生成,導(dǎo)致腫瘤體積減小。上述實(shí)驗(yàn)小鼠應(yīng)選用沒有_______________(器官)的動物模型鼠，由于這種鼠存在免疫缺陷，實(shí)驗(yàn)時可以避免小鼠的免疫系統(tǒng)對NRP-1單克隆抗體和乳腺癌腫塊進(jìn)行攻擊，從而保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可靠?！敬鸢浮浚?）動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞融合神經(jīng)纖毛蛋白-1(NRP-1)能產(chǎn)生NRP-1抗體的雜交瘤①NRP-1單克隆抗體生理鹽水NRP-1抗體與NRP-1NRP-1與血管內(nèi)皮生長因子②胸腺22．下表是幾種限制酶識別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，其中切割位點(diǎn)相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請回答下列問題：限制酶BamHⅠBclⅠSau3AⅠHindⅢ識別序列及切割位點(diǎn)(1)用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用________兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過________酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒，需將其轉(zhuǎn)入處于________態(tài)的大腸桿菌。(2)為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌，應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加________，平板上長出的菌落，常用PCR鑒定，所用的引物組成為圖2中______________。(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接，連接部位的6個堿基對序列為_______，對于該部位，這兩種酶________(填“都能”“都不能”或“只有一種能”)切開。(4)若用Sau3AⅠ對圖1質(zhì)粒進(jìn)行酶切最多可能獲得________種大小不同的DNA片段。【答案】（1）BclI和HindⅢ連接感受（2）四環(huán)素

引物甲和引物丙（3）都不能（4）723．CRISPR/Cas13d技術(shù)是一項(xiàng)以向?qū)NA（gRNA）引導(dǎo)Cas13d蛋白定向作用于靶向RNA的新興技術(shù)。研究人員設(shè)計(jì)了若干個gRNA，分別靶向新冠病毒RNA基因組的不同肽編碼區(qū)，但不影響人體細(xì)胞的RNA，作用機(jī)理如下圖所示。下列說法錯誤的是（

）A．gRNA通過與靶向RNA堿基互補(bǔ)配對將Cas13d引導(dǎo)至特定位點(diǎn)B．Cas13d能定向切開相鄰兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵C．與限制酶相比，Cas13d不具有特異性識別能力D．該技術(shù)有望成為一種能定向、靈活治療RNA病毒感染的新方法【答案】B24．花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。為培育抗黑腐病雜植株，研究者設(shè)計(jì)如下流程。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．過程①需要使用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶來處理兩種細(xì)胞B．過程②后，顯微鏡下觀察到有葉綠體的細(xì)胞即為融合細(xì)胞C．過程③的培養(yǎng)基中需加入植物激素來誘導(dǎo)脫分化和再分化D．可借助PCR技術(shù)、黑腐病菌接種實(shí)驗(yàn)對雜種植株進(jìn)行鑒定【答案】D25．動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，如圖所示，a、b、c表示現(xiàn)代工程技術(shù)，①、②、③表示其對應(yīng)的結(jié)果，下列說法正確的是（

）A．若a是核移植技術(shù)，①反映了動物細(xì)胞也具有全能性B．若c是胚胎分割技術(shù)，③中個體的基因型和表現(xiàn)型一定相同C．①②③中作為受體的動物品種是珍稀的或存量少的雌性動物D．若b是體外受精技術(shù)，則②為良種家畜快速大量繁殖提供了可能【答案】D26．人感染乳頭瘤病毒（HPV）可誘發(fā)宮頸癌等惡性腫瘤，疫苗是預(yù)防宮頸癌的主要手段，科研人員針對HPV疫苗的研發(fā)做了如下研究。(1)為構(gòu)建重組疫苗，如圖1所示，科研人員將HPV病毒衣殼蛋白L1基因用_________酶和_________酶酶切后，構(gòu)建重組質(zhì)粒，導(dǎo)入大腸桿菌。用添加_________的培養(yǎng)基篩選，對長出的單菌落提取質(zhì)粒，利用_________技術(shù)鑒定重組質(zhì)粒是否含有L1基因。(2)大腸桿菌表達(dá)產(chǎn)物衣殼蛋白L1經(jīng)純化，加佐劑SA04吸附后，二者共同被免疫系統(tǒng)識別加工，發(fā)揮免疫作用，吸附后制成疫苗用于預(yù)防HPV，與傳統(tǒng)滅活疫苗相比，這樣的重組疫苗更安全又有效，其主要原因是___________________________。(3)為評價SA04疫苗佐劑能否提高疫苗的免疫效果，科研人員將L1及L1經(jīng)SA04佐劑吸附后分別注射于小鼠體內(nèi)，然后在第7、14、21、28天測定相應(yīng)抗體的相對含量，結(jié)果如圖2所示。①實(shí)驗(yàn)結(jié)果