豬腸道螺旋體病的流行與診治

1、病原學(xué)使用多電位酶切電泳(MLEE)研究表明，毛腸短狀螺旋體是一個(gè)獨(dú)特的菌種，菌株表現(xiàn)出廣泛的多樣性，菌群是重組的。重組和基因重排可能一部分由GTA活性引起。毛腸短狀螺旋體6μm～10μm長(zhǎng)，0.25μm～0.30μm寬，特征是每個(gè)細(xì)胞兩端和尖端附著4根～7根周質(zhì)鞭毛。毛腸短狀螺旋體菌株95/1000有1個(gè)2.59Mbp大小的環(huán)狀染色體、GTA的基因、1個(gè)完整的噬菌體，但沒(méi)有質(zhì)粒。毛腸短狀螺旋體的外膜含有脂寡糖(LOS)，不同菌株具有血清異質(zhì)性。毛腸短狀螺旋體能在厭氧條件下培養(yǎng)。在胰酶大豆血瓊脂培養(yǎng)3d～5d后，毛腸短狀螺旋體能形成薄薄的霧狀擴(kuò)散表面，圍繞著弱β-溶血區(qū)。接種前切割瓊脂能提高毛腸短狀螺旋體的回收率，但通?？床坏皆鰪?qiáng)的溶血區(qū)。一旦分離，螺旋體在各種厭氧液體培養(yǎng)基中很快生長(zhǎng)。2、流行病學(xué)大多數(shù)養(yǎng)豬國(guó)家都有PIS/PCS報(bào)道。這一情況的增加源于診斷方法的改進(jìn)，常用的抗生素類(lèi)生長(zhǎng)促進(jìn)劑的禁用以及其它主要的腸道疾病在許多國(guó)家目前已得到較好的控制。經(jīng)常出現(xiàn)腹瀉的豬場(chǎng)感染毛腸短狀螺旋體的概率較高，而沒(méi)有腹瀉的豬場(chǎng)很少或者沒(méi)有感染的發(fā)生。多種動(dòng)物可能會(huì)自然感染毛腸短狀螺旋體。典型病變和癥狀在各種宿主動(dòng)物中都有記載。源自豬、狗和人的分離菌株遺傳學(xué)上較近。毛腸短狀螺旋體通過(guò)糞便-口腔途徑進(jìn)行傳播，感染可能由帶菌豬傳入未感染豬群。如果豬場(chǎng)做不到充分的清潔和消毒，疾病能在不同批次間再發(fā)生。野生動(dòng)物和鳥(niǎo)類(lèi)可能是傳染源。在一個(gè)豬場(chǎng)，毛腸短狀螺旋體曾從雞和污水池中的水檢測(cè)到，而污水池中有野鴨。從污水池中獲得的分離株與從豬體內(nèi)獲得的分離株屬于同一個(gè)基因型，這一結(jié)果與以往的研究觀察一致，表明野生水禽可能污染供水，因此，這表明了豬感染毛腸短狀螺旋體的一個(gè)潛在渠道。嚙齒動(dòng)物不能成為毛腸短狀螺旋體重要、長(zhǎng)期的儲(chǔ)存宿主。一項(xiàng)芬蘭的研究稱，大部分豬場(chǎng)有獨(dú)特的毛腸短狀螺旋體基因型，不同的豬場(chǎng)很難找到相同的基因型。豬場(chǎng)內(nèi)的基因型似乎相當(dāng)穩(wěn)定，因?yàn)樵?年后重新進(jìn)行檢測(cè)的3個(gè)豬場(chǎng)仍找到了相同的基因型。毛腸短狀螺旋體通過(guò)糞便排出，排毒可以是間歇性的，某些豬可能持續(xù)很多星期。它對(duì)環(huán)境有相對(duì)的抵抗力，在4℃的湖水中能存活66d，在10℃土壤中存活119d，在含10%豬糞的土壤以及糞便中可存活210d。毛腸短狀螺旋體對(duì)許多常用的消毒劑敏感，盡管某些消毒劑的效力因糞便這樣的有機(jī)物而降低。3、發(fā)病機(jī)制毛腸短狀螺旋體的細(xì)胞是活動(dòng)的，不同菌株吸引黏蛋白的能力不同。一旦進(jìn)入大腸，螺旋體能穿透覆蓋在結(jié)腸黏膜上的黏液。在感染的初級(jí)階段，毛腸短狀螺旋體細(xì)胞能大量附著在盲腸和結(jié)腸上皮細(xì)胞的腸腔表面。附著發(fā)生在隱窩單位之間的成熟的頂端腸上皮細(xì)胞，但不會(huì)發(fā)生在隱窩較深處的未成熟細(xì)胞。毛腸短狀螺旋體的定植和/或疾病表達(dá)會(huì)受到飼糧影響。對(duì)豬場(chǎng)風(fēng)險(xiǎn)因素的分析顯示，使用自家混合的和/或非顆粒飼糧能降低患病率。豬的試驗(yàn)性飼糧中添加羧甲基纖維素能增加腸道內(nèi)容物的黏度，加強(qiáng)毛腸短狀螺旋體的定植。含高水平可溶性非淀粉多糖(可溶性纖維)的谷物，如大麥和黑麥，也可以增加黏度，因此能增強(qiáng)毛腸短狀螺旋體的定植。與此相一致的是，飼喂豬的飼糧以煮熟的米飯為主，與飼喂常規(guī)飼糧相比，能減少毛腸短狀螺旋體的定植。飼喂顆粒飼料而非玉米粉會(huì)增加定植的風(fēng)險(xiǎn)，但發(fā)酵的液體飼料或乳酸對(duì)定植沒(méi)有影響。4、臨床癥狀PIS/PCS最常發(fā)生于斷奶后不久或剛混養(yǎng)在一起的生長(zhǎng)豬飼喂新的飼糧，但也可能發(fā)生于肥育豬，偶爾發(fā)生于妊娠母豬和近期剛引進(jìn)的種豬。PIS/PCS可能感染同一豬舍內(nèi)的豬或出現(xiàn)在不同日齡的豬中。同一豬場(chǎng)的斷奶豬、生長(zhǎng)豬和肥育豬能表現(xiàn)出各種癥狀，并非所有感染的豬都出現(xiàn)腹瀉。不過(guò)，亞臨床感染仍會(huì)抑制生長(zhǎng)速度。最初的臨床癥狀是肋腹空鼓，有松軟、黏稠的糞便通過(guò)，這可能是肥育豬唯一的癥狀，但斷奶豬和生長(zhǎng)豬通常形成綠色或褐色水樣或黏液樣腹瀉，偶爾包含厚稠黏液，有時(shí)有血斑。腹瀉通常是自限性的，持續(xù)2d～14d，不過(guò)有些豬可能會(huì)復(fù)發(fā)。感染豬出現(xiàn)發(fā)育不良，會(huì)陰沾有糞便，有時(shí)發(fā)燒，但通常會(huì)繼續(xù)采食。糞便稀松的豬出現(xiàn)顯著的體況損失，飼料轉(zhuǎn)化率降低，延遲達(dá)到上市體重。接種試驗(yàn)中，毛腸短狀螺旋體通過(guò)糞便排毒可達(dá)2d～7d，不過(guò)潛伏期可能會(huì)延長(zhǎng)至20d。試驗(yàn)感染條件下，17%～100%的豬只會(huì)感染，17%～67%的豬只會(huì)發(fā)生腹瀉，8%～100%的豬只有結(jié)腸炎?；加蠵IS/PCS的豬只會(huì)有并發(fā)的疾病加重疾病的發(fā)生，特別是腸道疾病。5、病變大體病變局限于盲腸和結(jié)腸，可能是微小的，尤其是在早期階段。臨床癥狀出現(xiàn)后不久，盲腸和結(jié)腸變得松弛，水腫的漿膜表面充滿液體，腸系膜和結(jié)腸淋巴結(jié)腫大。大腸內(nèi)容物通常呈大量的水樣綠色或黃色的泡沫狀，黏膜表面可能出現(xiàn)輕度充血，病灶出現(xiàn)糜爛和壞死。炎癥后期可導(dǎo)致多病灶糜爛、潰瘍或黏膜出血性結(jié)腸炎。黏膜增厚，表面可見(jiàn)局部瘀血或點(diǎn)狀出血。在慢性病例或消退性病變中，出血可能會(huì)被附著的小塊纖維蛋白所覆蓋，壞死性物質(zhì)和呈錐形鱗狀物附著在黏膜上的食糜。病變一般局限于黏膜和黏膜下層，也可延伸到肌層。黏膜通常增厚、水腫，偶見(jiàn)充血，以膨脹伸長(zhǎng)的隱窩充滿黏液、細(xì)胞碎片和退化的炎癥細(xì)胞為特征。毛腸短狀螺旋體存在于隱窩和固有層可能與嗜中性粒細(xì)胞的胞吐作用(隱窩膿腫)和固有層中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的混合浸潤(rùn)有關(guān)。慢性感染中，固有層通常受到大量單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤(rùn)。隱窩細(xì)胞有絲分裂的速度加快，隱窩單位之間的黏膜表層可能出現(xiàn)不成熟的立方形或鱗狀上皮細(xì)胞。結(jié)腸表面的柱狀上皮細(xì)胞由螺旋體的暗紋覆蓋，細(xì)胞的一端附著在螺旋體上，形成特征性的“假刷狀緣”。這種附著對(duì)于PIS/PCS具有診斷性，但不是每個(gè)病例都能觀察到這種現(xiàn)象。毛腸短狀螺旋體細(xì)胞可在膨脹的結(jié)腸隱窩內(nèi)觀察到，穿過(guò)結(jié)腸上皮細(xì)胞之間的緊密連接，在杯狀細(xì)胞和固有層內(nèi)發(fā)生浸潤(rùn)。毛腸短狀螺旋體可從有嚴(yán)重臨床疾病或免疫受損的人體血流中分離到。目前還沒(méi)有豬有全身擴(kuò)散或螺旋體血癥的記錄，但不能排除其發(fā)生。上皮細(xì)胞損傷后，隨后發(fā)生局部浸潤(rùn)和結(jié)腸炎，能引起盲腸和結(jié)腸內(nèi)容物中水含量增加，同時(shí)產(chǎn)生過(guò)多的黏液。上皮細(xì)胞糜爛導(dǎo)致被未成熟細(xì)胞替代，結(jié)腸表面對(duì)水、電解質(zhì)和揮發(fā)性脂肪酸的吸收減少，進(jìn)而導(dǎo)致飼料轉(zhuǎn)化率降低，增重減少。6、診斷受感染的豬應(yīng)進(jìn)行尸檢。同一個(gè)生產(chǎn)批次豬的體重可能并不均勻。通?？捎^察到局部區(qū)域發(fā)生輕度或偶發(fā)嚴(yán)重的結(jié)腸炎。使用特異性抗體進(jìn)行免疫組化染色，或使用特異性寡核苷酸探針的熒光原位雜交技術(shù)(Fluorescenceinsituhybridization，F(xiàn)ISH)能用于確認(rèn)毛腸短狀螺旋體以黏附在結(jié)腸腸細(xì)胞表面的形式存在于膨脹的腸道隱窩，偶爾出現(xiàn)在固有層。PIS/PCS的確診需要出現(xiàn)毛腸短狀螺旋體，但能從糞便中分離獲得并不總是與腹瀉或者附著在上皮有關(guān)，其重要性需在完整的診斷調(diào)查背景下給予解釋。從結(jié)腸壁獲得的拭子用于準(zhǔn)備相差顯微鏡的濕涂片，或?qū)⑺鼈児潭ê笫褂酶锾m氏染色觀察。CVS培養(yǎng)基用于分離毛腸短狀螺旋體較好，而B(niǎo)J培養(yǎng)基可能抑制毛腸短狀螺旋體的生長(zhǎng)。診斷通常使用特異性PCR檢測(cè)進(jìn)行，靶基因是16SrRNA、23SrRNA或nox基因。雙重和多重PCR有時(shí)還能同時(shí)檢測(cè)其它腸道病原體。將螺旋體定量化的實(shí)時(shí)PCR試驗(yàn)檢測(cè)螺旋體也已有報(bào)道。限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(restrictionfragmentlengthpolymor-Phism，RFLP)分析可用于鑒定毛腸短狀螺旋體分離株。使用針對(duì)毛腸短狀螺旋體特定外膜蛋白產(chǎn)生的單抗進(jìn)行的間接熒光抗體檢測(cè)，具有用于糞便診斷的潛力，但基于單抗從糞便中對(duì)毛腸短狀螺旋體進(jìn)行免疫磁珠分離，與培養(yǎng)后使用PCR檢測(cè)相比，并不能夠提高檢測(cè)的敏感性。迄今為止，還沒(méi)有常規(guī)的商業(yè)檢測(cè)可用來(lái)檢測(cè)毛腸短狀螺旋體菌種特異性血清抗體。7、防控抗生素治療可用于減少毛腸短狀螺旋體感染，維持豬的生產(chǎn)性能，同時(shí)提高豬的福利。此外，近期引進(jìn)未受感染的豬、改變飼糧或出現(xiàn)其它應(yīng)激因素，可能需要預(yù)防患病率的突然上升。受感染的豬應(yīng)通過(guò)飲水給藥或飼料投藥進(jìn)行治療。盡管有關(guān)毛腸短狀螺旋體體外抗菌素藥敏性的信息有限，很多對(duì)豬痢疾短螺旋體有效的抗菌素在進(jìn)行對(duì)毛腸短狀螺旋體分離株有效性的檢測(cè)時(shí)，已表現(xiàn)出低水平的最低抑菌濃度(minimuminhibitoryconcentration，MIC)，包括泰妙菌素、伐奈莫林、卡巴氧、地美硝唑，其次是林可霉素。幾乎沒(méi)有菌株被發(fā)現(xiàn)對(duì)泰樂(lè)菌素易感，對(duì)某些抗生素具有抗性已有記錄，包括泰妙菌素。奧喹多斯可能是一種有效的預(yù)防藥物，其對(duì)毛腸短狀螺旋體的MIC值，從飼料中添加100mg/