醫(yī)學(xué)微生物學(xué)備課筆記

緒論

今天同學(xué)們要接觸到一門新的學(xué)科，醫(yī)學(xué)微生物學(xué)。在學(xué)習(xí)生物的過程中，了解了動(dòng)物、

植物都是生物界的組成部分，然而，自然界的組成是豐富多彩的。除了這些我們?nèi)庋劭梢钥?/p>

見的的還有一大群我們?nèi)庋劭床灰姷纳?，而這類生物并不因?yàn)槲覀兛床灰姸淮嬖冢蔷?/p>

是微生物。

微生物的存在遠(yuǎn)遠(yuǎn)造于人類，但是人們對(duì)它的了解卻始于300多年前。第一位看見微生

物的人是荷蘭人列文虎克，他是一名布商，在買布的間歇對(duì)隔壁的眼睛店的透鏡的制作發(fā)生

了興趣，他用自制的顯微鏡觀察布的紋理，牛的眼睛，甚至于土壤、水滴。在觀察過程中發(fā)

現(xiàn)了很多可以游動(dòng)的不明物，后來證實(shí)為微生物。此后一二百年里，出現(xiàn)了一位重要的科學(xué)

家，巴斯德。他首先實(shí)驗(yàn)證明有機(jī)物發(fā)酵和腐敗是山微生物引起，而酒類變質(zhì)是因污染了雜

菌所致。他當(dāng)時(shí)是法國的工業(yè)部長，但是釀酒業(yè)很發(fā)達(dá)，但是遇到了問題，就是很多酒商的

葡萄酒都變算了，于是他在自己的實(shí)驗(yàn)室用顯微鏡在變算的酒里發(fā)現(xiàn)了不同于酵母菌的微生

物一細(xì)菌。成功研制雞霍亂、炭疽和狂犬病疫苗。到這個(gè)時(shí)候，人們對(duì)微生物已經(jīng)有了了解,

但是對(duì)微生物與人類疾病的關(guān)系的研究始于德國科學(xué)家郭霍，創(chuàng)用固體培養(yǎng)基，使有可能將

細(xì)菌從環(huán)境或病人排泄物等標(biāo)本中分離成為純培養(yǎng)，利于對(duì)各種細(xì)菌的特性分別研究。他還

創(chuàng)用了染色方法和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染，為發(fā)現(xiàn)多種傳染病的病原菌提供實(shí)驗(yàn)手段。英國醫(yī)生琴納

首創(chuàng)用牛痘預(yù)防天花，為預(yù)防醫(yī)學(xué)開辟了廣闊途徑。另外值得一提的是俄國學(xué)者伊萬諾夫斯

基第一個(gè)發(fā)現(xiàn)了煙草花葉病毒。到了1929年的時(shí)候，另外一個(gè)重大的發(fā)明產(chǎn)生了，那就是

青霉素的發(fā)現(xiàn)，弗來明在培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，意外的將一個(gè)平板落在了解箱外，發(fā)現(xiàn)平板上真菌周

圍的細(xì)菌不生長，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)是青霉菌產(chǎn)生的青霉素抑制了細(xì)菌的生長，于是青霉素問

世了。

以上講述的是微生物發(fā)展的早期階段，那究竟什么是微生物呢，是存在于自然界的一

大群體形微小、結(jié)構(gòu)簡單、肉眼直接看不見，必須借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大數(shù)百倍、

數(shù)千倍，甚至數(shù)萬倍才能觀察到的微小生物。

微生物分三型八大類

真核細(xì)胞型微生物(eukaryote)——細(xì)胞核分化程度高，有核膜和核仁，細(xì)胞器完整。如真

菌。

原核細(xì)胞型微生物(prokaryote)——細(xì)胞核的分化較低，僅有原始核，無核膜、核仁。細(xì)胞器

很不完善。DNA和RNA同時(shí)存在。這類微生物眾多，有細(xì)菌、放線菌、支原體、衣原體、

立克次體、螺旋體。

非細(xì)胞型微生物(nonecell)——是最小的一類微生物。無典型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，只有核心和蛋白

衣殼，核酸類型為DNA或RNA。只能在活細(xì)胞內(nèi)生長繁殖。病毒屬之。

微生物在自然界是普遍存在的，和人類的關(guān)系密切，大多數(shù)微生物是對(duì)人類有意的，只

有少數(shù)的微生物多人有害。能引起人類及動(dòng)物、植物疾病的微生物稱為病原微生物。這部分

是醫(yī)學(xué)微生物學(xué)講述的部分。

第一章細(xì)菌的形態(tài)和結(jié)構(gòu)

第一節(jié)細(xì)菌的大小和形態(tài)

細(xì)菌(bacterium)

廣義——所有原核細(xì)胞型微生物(細(xì)菌、支原體衣原體、立克次體、螺旋體、放線菌)

共性：有細(xì)胞壁、原始核質(zhì)、二分裂、對(duì)抗生素敏感

狹義——專指其中的細(xì)菌

觀察細(xì)菌常用光學(xué)顯微鏡，其大小用測微尺在顯微鏡下進(jìn)行測量，以微米(um)為單位。不

同種類的細(xì)菌大小不一，同一種細(xì)菌也因菌齡和環(huán)境因素的影響而有差異。

細(xì)菌按其外形，主要有球菌(coccus)、桿菌(bacillus)、螺形菌(spiralbacterium),

球菌根據(jù)細(xì)菌分裂的平面和菌體之間的排列方式分雙球菌、鏈球菌和葡萄球菌等。

不同桿菌的大小、長短、粗細(xì)很不一致

桿菌不同桿菌的大小、長短、粗細(xì)很不一致

螺形菌根據(jù)菌體的彎曲分為弧菌和螺菌

第二節(jié)細(xì)菌的結(jié)構(gòu)

一、細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)

包括：細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)、核質(zhì)

細(xì)胞壁是位于細(xì)菌細(xì)胞最外層，包繞在細(xì)胞膜周圍，無色透明、堅(jiān)韌而富有彈性的膜狀

結(jié)構(gòu)。平均厚度為12——30nm,組成較復(fù)雜，并隨不同菌種而異。主要成分是肽聚糖。

不同細(xì)菌細(xì)胞壁的組成不同，根據(jù)革蘭染色法將細(xì)菌分為兩大類：革蘭陽性菌和革蘭陰

性菌。

革蘭陽性菌：肽聚糖(peptidoglycan)—聚糖骨架、四肽側(cè)鏈、五肽交聯(lián)橋(三維立體結(jié)

構(gòu))。聚糖骨架是由N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸經(jīng)B-1,4糖昔鍵連接，在N-乙酰胞壁

酸分子上連接四肽側(cè)鏈，四肽側(cè)鏈再山五肽交聯(lián)橋組成。革蘭陽性菌細(xì)胞壁肽聚糖經(jīng)這樣的

三級(jí)鏈接，構(gòu)成了交叉的、機(jī)械強(qiáng)度相當(dāng)大的空間框架結(jié)構(gòu)，交聯(lián)率為75%,堅(jiān)固而致密。

這種三維立體結(jié)構(gòu)的肽聚糖在革蘭陽性菌中高達(dá)50層，為其細(xì)胞壁主要成分。

溶菌酶能切斷B-1,4糖背鍵，引起細(xì)菌裂解。青霉素能干擾四肽側(cè)鏈和五肽交聯(lián)橋的

連接，使細(xì)菌不能合成完成的細(xì)胞壁，可導(dǎo)致細(xì)菌死亡。

革蘭陰性菌：肽聚糖(p叩tidoglycan)—聚糖骨架、四肽側(cè)鏈(二維平面結(jié)構(gòu))。聚糖骨架

組成與陽性菌相同，也是由N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸經(jīng)6-1,4糖背鍵連接，但是

缺乏交聯(lián)橋，只能形成二維平面結(jié)構(gòu)，而且交聯(lián)率低，只有25%,故多數(shù)側(cè)鏈呈游離狀。

這種二維平面的肽聚糖在革蘭陰性菌中只有1——2層，只作為其細(xì)胞壁的組成成分之一。

革蘭陽性菌細(xì)胞壁特殊組分——磷壁酸(teichoicacid)磷壁酸為革蘭陽性菌特有成

分，按結(jié)合部位不同分為壁磷壁酸和膜磷壁酸兩種。壁磷壁酸結(jié)合在細(xì)胞壁的肽聚糖的胞壁

酸上，另一端游離于細(xì)胞外；膜磷壁酸結(jié)合在細(xì)胞膜上。另一端游離。

革蘭陰性菌細(xì)胞壁特殊組分——外膜(outermembrane)外膜位于肽聚糖外側(cè)，山內(nèi)

向外由脂蛋白、脂質(zhì)雙層和脂多糖三部分組成。

革蘭陰性菌與革蘭陽性菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)比較

細(xì)胞壁革蘭陽性菌革蘭陰性菌

強(qiáng)度較堅(jiān)韌較疏松

厚度20-80nm10-15nm

肽聚糖層數(shù)可多達(dá)50層1-2層

肽聚糖含量占細(xì)胞壁干重50%-80%占細(xì)胞壁干重5%-20%

磷壁酸+-

脂質(zhì)雙層—+

脂蛋白一+

脂多糖一+

細(xì)胞壁的功能

維持菌體固有的形態(tài)：細(xì)菌一旦失去細(xì)胞壁，就變得多形。

保護(hù)細(xì)菌抵抗低滲環(huán)境：菌體內(nèi)的大氣壓是外界的5~25倍，沒有細(xì)胞壁，必將漲破。

參與菌體內(nèi)外的物質(zhì)交換：與細(xì)胞膜一起參與物質(zhì)交換，細(xì)胞壁上有很多小孔，容許小

分子物質(zhì)通過

菌體表面帶有多種抗原分子，可誘發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答。

細(xì)菌細(xì)胞壁缺陷型或L型(bacterialLform)：細(xì)胞壁的肽聚糖結(jié)構(gòu)受到理化或生物因素

的直接破壞或合成被抑制，受損后的細(xì)菌在高滲環(huán)境下仍可存活的細(xì)菌。

某些L型仍有一定的致病力，通常引起慢性感染。

細(xì)菌L型呈高度多形性，大小不一。著色不勻，無論其原為革蘭陽性或陰性菌，形成L

型大多染成革蘭陰性。細(xì)菌L型生長緩慢，營養(yǎng)要求高，對(duì)滲透壓敏感，普通營養(yǎng)基上不

能生長，培養(yǎng)時(shí)必須用高滲的含血清的培養(yǎng)基。

細(xì)菌L型在高滲的含血清的培養(yǎng)基卜一生長后形成三種類型的菌落

細(xì)胞膜

細(xì)菌細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)與真核細(xì)胞者基本相同，由磷脂和多種蛋白質(zhì)組成，但不含膽固醇。

細(xì)菌細(xì)胞膜的功能與真核細(xì)胞者類似，主要有物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、生物合成、分泌和呼吸等作用。

細(xì)菌細(xì)胞膜可形成種特有的結(jié)構(gòu)，稱為中介體。中介體：是部分細(xì)胞膜內(nèi)陷、折疊、

卷曲形成的囊狀物，多見于革蘭陽性菌。其功能類似于真核細(xì)胞的線粒體，故亦稱為擬線粒

體。

細(xì)胞質(zhì)

核糖體(ribosome)：細(xì)菌合成蛋白質(zhì)的場所，游離存在于蛋白質(zhì)中。

質(zhì)粒(plasmid)：染色體外的遺傳物質(zhì)，存在于細(xì)胞質(zhì)中。為閉合環(huán)狀的雙鏈DNA,控

制細(xì)菌某些特定的遺傳特性。

細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中含有多種顆粒，大多為貯藏的營養(yǎng)物質(zhì)。其中有一種主要成分是RNA

和多偏磷酸鹽的顆粒，其嗜堿性強(qiáng)，用亞甲藍(lán)染色時(shí)著色較深呈紫色，稱為異染顆粒

(metachromaticgranule)?常見于白喉棒狀桿菌，位于菌體兩端，故又稱極體(polarbody),有

助于鑒定。

核質(zhì)

核質(zhì)由單一密閉環(huán)狀DNA分子反復(fù)回旋卷曲盤繞組成松散網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。細(xì)菌是原核細(xì)胞，

不具有成形的核。細(xì)菌的遺傳物質(zhì)稱為核質(zhì)或擬核，無核膜、核仁和有絲分裂器。功能與真

核細(xì)胞的染色體相似——決定細(xì)菌各種遺傳性狀。

二、特殊結(jié)構(gòu)

莢膜：某些細(xì)菌在其細(xì)胞壁外包繞一層粘液性物質(zhì)，當(dāng)其厚度＞=0.2「m,邊界明顯，光

鏡下可見時(shí)，稱為莢膜。厚度者稱為微莢膜。其成分為疏水性多糖或蛋白質(zhì)的多聚

體，用理化方法去除后并不影響細(xì)胞的生命活動(dòng)。

莢膜的功能一與細(xì)菌的致病性有關(guān)，抗吞噬作用；；粘附作用；抗有害物質(zhì)的損傷作用。

鞭毛：許多細(xì)菌在菌體上附有細(xì)長并呈波狀彎曲的絲狀物，稱為鞭毛，是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官。

鞭毛需用電子顯微鏡觀察，或經(jīng)特殊染色法使鞭毛增粗后才能在光鏡下看到。

菌毛：許多革蘭陰性菌和少數(shù)革蘭陽性菌菌體表面存在著一種比鞭毛更細(xì)、更短而直硬的絲

狀物，與細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)無關(guān)。根據(jù)功能不同，菌毛可分為普通菌毛和性菌毛兩類。普通菌毛是

細(xì)菌的黏附結(jié)構(gòu)，性菌毛參與F質(zhì)粒的接合傳遞。菌毛在普通光學(xué)顯微鏡下看不到，必須

用電子顯微鏡觀察。

芽胞：某些細(xì)菌在一定的環(huán)境條件下，能在菌體內(nèi)部形成一個(gè)圓形或卵圓形小體，是細(xì)菌的

休眠形式。芽胞形成后細(xì)菌即失去繁殖能力，不能再進(jìn)行二分裂繁殖。產(chǎn)生芽胞的都是革蘭

陽性菌。芽胞折光性強(qiáng)、壁厚、不易著色，經(jīng)特殊染色光鏡下可見。芽胞的大小、形狀、位

置等隨菌種而異，有重要的鑒別意義。芽胞的抵抗力強(qiáng)，可在自然界中存在多年，是重要的

傳染源。但芽胞并不直接引起疾病，只有發(fā)芽成為繁殖體后，才能迅速大量繁殖而致病。芽

胞抵抗力強(qiáng)，故應(yīng)以殺滅芽胞作為可靠的滅菌指標(biāo)。高壓蒸汽滅菌法是殺滅芽胞最有效的方

法。

第二章細(xì)菌的生理

第一節(jié)細(xì)菌的理化性狀

細(xì)菌的物理性狀

光學(xué)性質(zhì)——細(xì)菌為半透明體。

表面積---細(xì)菌體積微小，相對(duì)表面積大。

帶電現(xiàn)象——均帶負(fù)電。

半透性——細(xì)菌的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜都有半透性。

滲透壓——菌體內(nèi)為高滲透壓。

細(xì)菌的化學(xué)組成：水、無機(jī)鹽、蛋白質(zhì)、糖類、脂質(zhì)和核酸等。

第二節(jié)細(xì)菌的營養(yǎng)與生長繁殖

一、細(xì)菌的營養(yǎng)類型

根據(jù)細(xì)菌所需要的營養(yǎng)物質(zhì)不同，將細(xì)菌分為兩大營養(yǎng)類型——自養(yǎng)菌和異養(yǎng)菌。

?自養(yǎng)菌(autotroph)：以簡單的無機(jī)物為原料，合成菌體成分。

?異養(yǎng)菌(heterotroph)：以多種有機(jī)物為原料，合成菌體成分并獲得能量。異養(yǎng)菌包括

腐生菌(s叩rophyte)和寄生菌(parasite)。所有的病原菌都是異養(yǎng)菌，大部分屬寄生菌。

二、細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì)

營養(yǎng)物質(zhì)：水、碳源、氮源、無機(jī)鹽及生長因子為細(xì)菌的代謝及生長繁殖提供必需的原料和

充足的能量。

三、細(xì)菌攝取營養(yǎng)物質(zhì)的機(jī)制

被動(dòng)擴(kuò)散：順濃度梯度，不需能量

主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)：逆濃度梯度，需要能量

四、影響細(xì)菌生長的環(huán)境因素

營養(yǎng)物質(zhì)：水、碳源、氮源、無機(jī)鹽及生長因子為細(xì)菌的代謝及生長繁殖提供必需的原料和

充足的能量

酸堿度(pH)：多數(shù)病原菌最適PH為72—7.6

溫度：病原菌最適溫度為37度

氣體：

02：根據(jù)細(xì)菌代謝時(shí)對(duì)氧氣的需要與否分四類：

專性需氧菌:具有完善的呼吸酶系統(tǒng)，需要分子氧作為受氧體以完成需氧呼吸，僅

能在有氧環(huán)境下生長。

微需氧菌:在低氧壓(5%-6%)生長最好。

兼性厭氧菌:兼有有氧呼吸和無氧發(fā)酵兩種功能，在有氧、無氧環(huán)境中均能生長，

但以有氧時(shí)生長較好。大多數(shù)病原菌屬于此。

專性厭氧菌?,缺乏完善的呼吸酶系統(tǒng)，只能進(jìn)行無氧發(fā)酵，必須在無氧環(huán)境中生長。

CO2:對(duì)細(xì)菌生長也很重要，大部分細(xì)菌在代謝中產(chǎn)生的CO2可滿足需要，個(gè)別細(xì)菌

初次分離時(shí)需人工供給5-10%C02

滲透壓

五、細(xì)菌的生長繁殖

1、細(xì)菌個(gè)體的生長繁殖

繁殖方式--細(xì)菌以簡單的二分裂方式進(jìn)行繁殖。

繁殖速度--繁殖一代所需時(shí)間(代時(shí))約20-30min。

但少數(shù)細(xì)菌代時(shí)較長，如結(jié)核分枝桿菌代時(shí)為18小時(shí)。

2、細(xì)菌群體的生長繁殖

繁殖規(guī)律----生長曲線(growthcurve)

遲緩期(lagphase),對(duì)數(shù)期(logarithmicphase)

穩(wěn)定期(stationaryphase),衰退期(declinephase)

遲緩期：細(xì)菌被接種培養(yǎng)基的最初一段時(shí)間，主要是適應(yīng)新環(huán)境，同時(shí)為分裂繁殖作物質(zhì)準(zhǔn)

備，此時(shí)細(xì)菌體積比較大，含有豐富的酶和中間代謝產(chǎn)物。

對(duì)數(shù)期：細(xì)菌分裂繁殖最快的時(shí)期，菌數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增長，研究細(xì)菌的最佳時(shí)期

穩(wěn)定期：由于營養(yǎng)物質(zhì)的消耗，代謝產(chǎn)物的堆積，繁殖數(shù)與死亡數(shù)兒乎相等?；罹鷶?shù)保持穩(wěn)

定。

衰退期：繁殖變慢，死菌數(shù)超過活菌數(shù)。細(xì)菌形態(tài)發(fā)生改變，生理活動(dòng)趨于停滯。

第三節(jié)細(xì)菌的新陳代謝和能量轉(zhuǎn)換

一、細(xì)菌的能量代謝

?發(fā)酵：無氧時(shí)，以有機(jī)物(lactate,ethanol)為受氫體。lGlucose02ethanol+2co2+2ATP

?呼吸：以無機(jī)物為受氫體。

?有氧呼吸：以氧為受氫體。lGlucose+60206CO2+6H2O+38ATP

厭氧呼吸：無氧吐以其它無機(jī)物(CO2,SO42-,NO3-)為受氫體。1Glucose02ATP

二、細(xì)菌的代謝產(chǎn)物

(-)分解代謝產(chǎn)物和細(xì)菌的生化反應(yīng)

細(xì)菌種類不同——細(xì)菌酶不同——分解物質(zhì)能力不同——代謝產(chǎn)物不同——鑒別作

用.

1、糖發(fā)酵試驗(yàn)：

Styphi發(fā)酵葡萄糖

細(xì)菌EcoH發(fā)酵葡萄糖

2、VP試驗(yàn):

丙酮酸

乙酰甲KOH_____紅色

產(chǎn)氣桿菌______?二乙酰+胭基

基甲醉\VP陽性)

脫竣

3、甲基紅試驗(yàn):

丙酮酸

甲基紅紅色

大腸桿菌prl^4.34.（陽性）

不脫竣

丙酮酸甲基紅

乙酰甲橘黃色

產(chǎn)氣桿菌pH>5.4------

基甲醇（陰性）

脫竣

4、枸檬酸鹽利用（citrateutilization）試驗(yàn)

枸檬酸鹽，鐵鹽

深蘭色

產(chǎn)氣桿菌1

—?碳酸鹽+氨一（陽性）

分解

5、呵咪試驗(yàn)

色氨酸醉

對(duì)二甲基氨基

色氨酸口引噪玫瑰|＞引味

（無色）苯甲醛（紅色陽性）

（黃色）

呵蛛⑴，甲基紅（M）,VP（V）,枸檬酸鹽利用（C）試驗(yàn)，常用于鑒定腸道桿菌，合稱IMViC

試驗(yàn)。

大腸桿菌的結(jié)果是：++--

產(chǎn)氣桿菌的結(jié)果是：--++

6、H2s試驗(yàn)

含SM基酸

FeSl

細(xì)菌HSt+FeSO

24（黑色陽性）

分解

7、尿素酶試驗(yàn)

尿素

酚紅

紅色

細(xì)菌》產(chǎn)氨------------?

（陽性）

分解

（二）細(xì)菌的合成代謝產(chǎn)物

＞熱原質(zhì)（pyrogen）：或稱致熱原。是細(xì)菌合成的一種注入人體或動(dòng)物體內(nèi)能引起發(fā)熱

反應(yīng)物質(zhì)。產(chǎn)生熱原質(zhì)的細(xì)菌大多是革蘭陰性菌，熱原質(zhì)即其細(xì)胞壁的脂多糖。

＞毒素與侵襲性酶：細(xì)菌產(chǎn)生外毒素和內(nèi)毒素兩類毒素。外毒素（exotoxin）是多數(shù)革蘭

陽性菌和少數(shù)革蘭陰性菌在生長繁殖過程中釋放到菌體外的蛋白質(zhì)；內(nèi)毒素

（endoloxin）是革蘭陰性菌的脂多糖。

色素：細(xì)菌的色素有兩類——水溶性色素，能彌散到培養(yǎng)基或周圍組織。脂溶性色

素，不溶于水，只存在于菌體，使菌落顯色而培養(yǎng)基顏色不變。

抗生素：某些微生物代謝過程中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死某些其他微生物或腫瘤細(xì)

胞的物質(zhì)。

細(xì)菌素：某些菌株產(chǎn)生的一類具有抗菌作用的蛋白質(zhì)。

維生素：細(xì)菌能合成某些維生素除供自身需要外，還能分泌至周圍環(huán)境中。

第四節(jié)細(xì)菌的人工培養(yǎng)

第三章消毒滅菌與病原實(shí)驗(yàn)室生物安全

第一節(jié)消毒滅菌的常用術(shù)語

＞消毒(disinfection)：殺死物體上病原微生物的方法，并不一定能殺死含芽胞的細(xì)菌或

非病原微生物。用以消毒的藥品稱為消毒劑(disinfectant)。

＞滅菌(sterilization)：殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細(xì)

菌芽胞在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。

＞抑菌(bacteriostasis)：抑制體內(nèi)或體外細(xì)菌的生長繁殖。常用的抑菌劑為各種抗生素。

＞防腐(antisepsis)：防止或抑制體外細(xì)菌生長繁殖的方法。細(xì)菌一般不死亡。

＞無菌(asepsis)：不存在活菌，多是滅菌的結(jié)果。

＞無菌操作(antiseptictechnique)防止微生物進(jìn)入人體或物體的操作技術(shù)。

第二節(jié)消毒滅菌的方法

一、物理消毒滅菌法

(一)熱力滅菌法

1、干熱滅菌法

?焚燒：廢棄物、尸體

?灼燒：接種環(huán)、試管口

?干烤：(160~170℃,2h)玻璃器皿

?紅外線(0.7~1000um波長的電磁波)：醫(yī)療器械

2、濕熱滅菌法

—巴氏消毒法:61.1-62.8℃30min或71.7℃15-30s,主要用于牛乳消毒。

—煮沸法(100°C,5min)食具、注射器等消毒

—流動(dòng)蒸汽消毒法(100℃15-30min)

—間歇蒸汽滅菌法(100℃5-30min,37℃24hX3天)

—高壓蒸汽滅菌法

■壓力一103.4KPa(1.05Kg/cm2)

■溫度一121.3℃

■時(shí)間一15-20min

.效果一殺滅包括芽抱在內(nèi)所有微生物

-應(yīng)用一所有耐高溫、高壓、耐濕的物品

濕熱滅菌法與干熱滅菌法效果比較

結(jié)論一同樣溫度下，濕熱比干熱滅菌效果好

原因：

一蛋白含水量多時(shí)易凝固變性

-濕熱穿透力比干熱大

—濕熱的蒸汽具有潛熱

(-)輻射殺菌法

1、紫外線

/原理：波長200-300nm的紫外線具有殺菌作用。其中260~266nm波長UV與DNA

吸收光譜一致。其主要作用于DNA,使一條DNA鏈上相鄰的兩個(gè)胸腺喀嚏共價(jià)結(jié)

合形成二聚體，干擾DNA復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)菌變異和死亡，并可殺滅病毒。

/特點(diǎn)：穿透力較弱

/應(yīng)用：物體表面及空氣消毒

2、電離輻射

高速電子、X射線、丫射線

3、微波

（三）濾過除菌法

——用物理阻留的方法除去液體或空氣中的細(xì)菌，真菌。

?常用濾器：薄膜濾器、玻璃濾器、石棉濾器（Seitz）

*特點(diǎn)：只能除去細(xì)菌，真菌，不能除去病毒、支原體、L型細(xì)菌。

?應(yīng)用：用于一些不耐高溫滅菌的血清、毒素、抗生素，以及空氣的除菌。

（四）干燥低溫抑菌法

＞干燥法

A低溫法：低溫可使細(xì)菌的新陳代謝減慢，常用作保冷凍真空干燥法是目前保存菌

種最好的方法目前保存菌種的最好方法。

二、化學(xué)消毒滅菌法

＞消毒機(jī)制：

引起菌體蛋白凝固變性

“干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)

損傷細(xì)菌的細(xì)胞膜

＞消毒劑的種類：酚類、醇類、重金屬鹽類、氧化劑、表面活性劑、烷化劑。

＞消毒劑的特點(diǎn)：作用無選擇性對(duì)人體細(xì)胞有損傷故只能外用不能內(nèi)服

＞消毒劑的應(yīng)用：病人排泄物與分泌物、皮膚、粘膜、飲水、廁所、空氣、手、器械、

＞環(huán)境。

第三節(jié)消毒滅菌的應(yīng)用

一、醫(yī)療器械物品的消毒滅菌

■高危器械物品:用時(shí)需進(jìn)入無菌組織的物品。所有這些物品都應(yīng)該滅菌。（腹腔鏡、關(guān)

節(jié)鏡、宮腔鏡等）。

■中危器械物品:用時(shí)不進(jìn)入無菌組織但接觸黏膜的器械。采用消毒即可。（氣管鏡、胃

鏡、腸鏡等）

■低危器械物品:只接觸未損傷皮膚，但不進(jìn)入無菌組織和不接觸黏膜的物品。一般用后

清洗、消毒即可（食品器皿等）。

■快速周轉(zhuǎn)的醫(yī)療器械：

?手機(jī)機(jī)頭，車針要求高壓蒸汽滅菌，

防止肝炎病毒，艾滋病毒等的傳染.

?消毒劑:2%戊二醛，浸泡10小時(shí)達(dá)到滅菌.

第四節(jié)影響消毒滅菌效果的因素

?微生物的種類：敏感性由高到低依次為：真菌、細(xì)菌繁殖體、有包膜病毒、無包膜病

毒、分枝桿菌、細(xì)菌芽胞。

?微生物的物理狀態(tài)：營養(yǎng)差，抵抗力強(qiáng)；細(xì)菌自穩(wěn)定期開始，抵抗力差.

?微生物的數(shù)量：

?消毒劑的性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間（70%乙醇）

溫度：

?酸堿度：

有機(jī)物：膿汁、痰

第五節(jié)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全

一、病原微生物的分類

根據(jù)傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或者群體的危害程度，病原微生物分為四類：

第一類是指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣

布消滅的微生物。天花病毒，新疆出血熱病毒，埃博拉病毒等.

第二類是指能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、

動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。艾滋病毒，霍亂弧菌,結(jié)核桿菌等.

第三類是指能夠引起人或動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳

播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。肝

炎病毒，流感病毒，金黃色葡萄球菌，傷寒沙門菌等.

第四類是指在通常情況下不會(huì)引起人或動(dòng)物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。

第一類、第二類統(tǒng)稱為高致病性病原微生物

二、病原微生物實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)

一、二級(jí)實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室從事高致病性病

原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。

從事高致病性病原微生物相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)應(yīng)當(dāng)有2名以上的工作人員共同進(jìn)行。在同一個(gè)實(shí)

驗(yàn)室的同一個(gè)獨(dú)立安全區(qū)域內(nèi)，只能同時(shí)從事一種高致病性病原微生物的相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。應(yīng)

有健全安全保衛(wèi)制度。

第四章噬菌體

★噬菌體是感染細(xì)菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒；

★個(gè)體微小，可以通過細(xì)菌濾器；

★無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，主要由衣殼(蛋白質(zhì))和核酸組成；

★只能在活的微生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖，是一種專性胞內(nèi)寄生的微生物。

★噬菌體分布極廣。

第一節(jié)噬菌體的生物學(xué)性狀

1、形態(tài)與結(jié)構(gòu)

噬菌體很小，在光鏡下看不見，需用電鏡觀察。不同的噬菌體在電鏡下有三種形態(tài)：蝌蚪形、

微球形和絲形。大多數(shù)噬菌體呈蝌蚪形，由頭部和尾部兩部分組成。

結(jié)構(gòu)及化學(xué)組成：

-核心：核酸(DNA!或RNA),多位DNAa狀雙鏈

頭部1

蛋白衣殼：蛋白質(zhì)呈20面體

噬菌體

\

尾部：蛋白質(zhì)與細(xì)菌(受體)接觸的部位

抗原性：噬菌體具有抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體。

抵抗力：噬菌體對(duì)理化因素及多數(shù)化學(xué)消毒劑的抵抗力比一般細(xì)菌的繁殖體強(qiáng)，75℃30min

滅活。噬菌體能耐受低溫和冰凍，但對(duì)紫外線和X射線敏感。

第二節(jié)毒性噬菌體

噬菌體感染細(xì)菌有兩種結(jié)果：

毒性噬菌體能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖，產(chǎn)生許多

(virulentphage)：子代噬菌體，并最終裂解細(xì)菌，建立溶菌周期。

溫和噬菌體(temperatephage)：噬菌體基因與宿主染色體整合，成為前噬菌體，

細(xì)菌變成溶原性菌，不產(chǎn)生子代噬菌體，但噬菌體DNA能隨細(xì)菌DNA復(fù)制，并隨細(xì)菌的

分裂而傳代，建立溶原狀態(tài)。

毒性噬菌體

毒性噬菌體在敏感菌內(nèi)以復(fù)制方式進(jìn)行增殖，增殖過程包括：吸附、穿入、生物合

成、成熟和釋放。

液體培養(yǎng)基噬菌現(xiàn)象可使渾濁菌液變得澄清。

固體培養(yǎng)基若用適量的噬菌體和宿主菌液混合后接種培養(yǎng)，培養(yǎng)基表面可有透亮的溶

菌空斑出現(xiàn)。一個(gè)空斑系由?個(gè)噬菌體復(fù)制增殖并裂解細(xì)菌后形成，稱為噬斑(plaque),不同

噬菌體噬斑的形態(tài)與大小不盡相同。

若將噬菌體按一定倍數(shù)稀釋，通過噬斑計(jì)數(shù)，可測定一定體積內(nèi)的噬斑形成單位(pl叫ue

formingunits,pfu)數(shù)目，即噬菌體的數(shù)目。

第三節(jié)溫和噬菌體

溫和噬菌體的基因組能與宿主菌基因組整合，并隨細(xì)菌分裂傳至子代細(xì)菌的基因組中，不引

起細(xì)菌裂解。整合在細(xì)菌基因組中的噬菌體基因組稱為前噬菌體(prophage)。帶有前噬菌體

基因組的細(xì)菌稱為溶原性細(xì)菌。

溶原性轉(zhuǎn)換(lysogenicconversion)：某些前噬菌體可導(dǎo)致細(xì)菌基因型和性狀發(fā)生改變。例

如白喉棒狀桿菌產(chǎn)生白喉毒素的機(jī)理。

第五章細(xì)菌的遺傳與變異

■遺傳(heredity)：使微生物的性狀保持相對(duì)穩(wěn)定，子代與親代生物學(xué)的性狀基本

相同，且代代相傳。

■變異(variation)：在一定條件下，子代與親代之間以及子代與子代之間的生物

學(xué)性狀出現(xiàn)的差異，有利于物種的進(jìn)化。

?基因型(genotype):細(xì)菌的遺傳物質(zhì).

■表型(phenotype):基因表現(xiàn)出的各種性狀.

遺傳性變異：是細(xì)菌的基因結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變，故又稱基因型變異。常發(fā)生于個(gè)別的細(xì)

菌，不受環(huán)境因素的影響，變異發(fā)生后是不可逆的，產(chǎn)生的新性狀可穩(wěn)定地遺傳給后代。

非遺傳性變異：細(xì)菌在一定的環(huán)境條件影響下產(chǎn)生的變異，其基因結(jié)構(gòu)未改變，稱為表

型變異。易受到環(huán)境因素的影響，凡在此環(huán)境因素作用下的所有細(xì)菌都出現(xiàn)變異，而且當(dāng)環(huán)

境中的影響因素去除后，變異的性狀又可復(fù)原，表型變異不能遺傳。

第一節(jié)細(xì)菌的遺傳物質(zhì)

■DNA的結(jié)構(gòu)與功能

0結(jié)構(gòu)——兩條互相平行而方向相反的多核甘酸鏈

0功能——儲(chǔ)存、復(fù)制和傳遞遺傳信息

0復(fù)制——半保留復(fù)制

0特點(diǎn)——復(fù)制中易發(fā)生錯(cuò)誤一基因突變

0蛋白合成——分子生物學(xué)中心法則(DNA-RNA-蛋白質(zhì))

-基因與基因的轉(zhuǎn)錄

結(jié)構(gòu)基因——編碼結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)

0基因結(jié)構(gòu)

非結(jié)構(gòu)基因——編碼功能蛋白質(zhì)

0基因轉(zhuǎn)錄

■遺傳信息的翻譯

第二節(jié)細(xì)菌的遺傳與變異

一、染色體(chromosome)

■一條環(huán)狀雙螺旋DNA長鏈，按一定構(gòu)型反復(fù)回旋形成松散的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)；

■缺乏組蛋白，無核膜包裹；

■約含有5000個(gè)基因；

二、質(zhì)粒

是細(xì)菌染色體以外的遺傳物質(zhì)，是閉合環(huán)狀的雙鏈DNA。

質(zhì)粒的特征；

?質(zhì)粒具有自我復(fù)制的能力。

質(zhì)粒DNA所編碼的基因產(chǎn)物賦予細(xì)菌某些性狀特征。

質(zhì)粒可自行丟失與消除。

質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移性。

?質(zhì)?？煞譃橄嗳菪耘c不相容性兩種

質(zhì)粒的分類

■根據(jù)質(zhì)粒能否通過細(xì)菌的接合作用進(jìn)行傳遞

1接合性質(zhì)粒

2非接合性質(zhì)粒

■根據(jù)質(zhì)粒在細(xì)菌內(nèi)拷貝數(shù)多少

1嚴(yán)緊型質(zhì)粒

2松弛型質(zhì)粒

■根據(jù)相容性

1相容性——兒種質(zhì)粒同時(shí)共存于同一菌體內(nèi)

2不相容性——不能同時(shí)共存

可借此對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行分組、分群

■根據(jù)所編碼的生物學(xué)性狀

質(zhì)?；蚩删幋a多種重要的生物學(xué)性狀：

■致育質(zhì)粒(fertilityplasmid、F質(zhì)粒)編碼性菌毛，介導(dǎo)細(xì)菌之間的接合傳遞；

■耐藥性質(zhì)粒(resistanceplasmid＞R質(zhì)粒)編碼細(xì)菌對(duì)抗菌藥物或重金屬鹽類的

耐藥性。分兩類，一是接合性耐藥質(zhì)粒(R質(zhì)粒)，另一是非接合耐藥性質(zhì)粒(r質(zhì)

粒)；

■毒力質(zhì)粒(Vi質(zhì)粒)編碼與該菌致病性有關(guān)的毒力因子；

■細(xì)菌素質(zhì)粒編碼細(xì)菌產(chǎn)生細(xì)菌素；

■代謝質(zhì)粒編碼產(chǎn)生相關(guān)的代謝酶。

三、轉(zhuǎn)位因子

/轉(zhuǎn)位因子(transposableelement)：是一類在細(xì)菌染色體、質(zhì)?；蚴删w之間可自行

移動(dòng)的一段特異的具有轉(zhuǎn)位特性的核甘酸序列片段，又稱移動(dòng)基因。

/轉(zhuǎn)座子有二類：

插入序列l(wèi)(insertionsequence,IS)：最小，不超過2kb，只攜帶與轉(zhuǎn)座功能有關(guān)的基

因。

轉(zhuǎn)座子(transposon,Tn)：長度一般超過2kb,除攜帶與轉(zhuǎn)位有關(guān)的基因外還攜帶其

他基因(如耐藥性、毒素基因等)。

四、整合子

定位：細(xì)菌染色體、質(zhì)粒或轉(zhuǎn)座子上.

基本結(jié)構(gòu)：兩端為保守末端(“〃/,59-be),中間為可變區(qū)(orf1),含一個(gè)或多個(gè)基因盒.

功能元件：重組位點(diǎn)(attl,59-be)；整合酶基因(i加/)；啟動(dòng)子(Pc).

功能：通過轉(zhuǎn)座子或接合性質(zhì)粒，使多種耐藥基因在細(xì)菌中進(jìn)行水平傳播.

第三節(jié)基因的轉(zhuǎn)移與重組

＞基因轉(zhuǎn)移(genetransfer)：外源性的遺傳物質(zhì)由供體菌進(jìn)入某受體菌細(xì)胞內(nèi)的過程。

＞基因重組(recombination)：轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起，使受體菌獲得供

體菌某些特性。

＞細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移和重組方式：轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、溶原性轉(zhuǎn)換、原生質(zhì)體融合。

1.轉(zhuǎn)化(transformation):受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段獲得新的遺傳性狀的過程稱

為轉(zhuǎn)化。

2.接合(conjugation)

接合：是細(xì)菌通過性菌毛相互連接溝通，將遺傳物質(zhì)(主要是質(zhì)粒DNA)從供體菌轉(zhuǎn)移給

受體菌。能通過結(jié)合方式轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒稱為接合性質(zhì)粒，不能通過性菌毛在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移的質(zhì)粒

為非接合性質(zhì)粒。

F質(zhì)粒的接合

■F+——即F質(zhì)粒，編碼性菌毛，稱雄性菌

■Hfr——F質(zhì)粒整合到細(xì)菌染色體上，使細(xì)菌能高效地轉(zhuǎn)移染色體上的基因，故稱高

頻重組菌

■F——Hfr菌中的F質(zhì)?？蓮娜旧w上脫離下來，并帶染色體匕IL個(gè)鄰近的基因，故

稱F

三者均有性菌毛，均可發(fā)生接合

R質(zhì)粒的接合

＞細(xì)菌的耐藥性與耐藥性的基因突變及R質(zhì)粒的接合轉(zhuǎn)移等有關(guān)。

＞R質(zhì)粒有耐藥傳遞因子(RTF)和耐藥決定子(r)兩部分組成。RTF的功能與F質(zhì)粒相似,

可編碼性菌毛的產(chǎn)生和通過接合轉(zhuǎn)移；R決定子能編碼對(duì)抗菌藥物的耐藥性。

3.轉(zhuǎn)導(dǎo)(transduction)

＞轉(zhuǎn)導(dǎo)：是以溫和噬菌體為載體，將供體菌的一段DNA轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi)，使受體菌

獲得新的性狀。

＞根據(jù)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因片段的范圍，可將轉(zhuǎn)導(dǎo)分為兩類：普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)(轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA可是供

菌染色體上的任何部分)、局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)(轉(zhuǎn)導(dǎo)的DNA只限供菌染色體上的特定基因)。

4.溶原性轉(zhuǎn)換(lysogenicconversion)

溶原性細(xì)菌因染色體上整合有前噬菌體而獲得新的遺傳性狀稱為溶原性轉(zhuǎn)換。

5.原生質(zhì)體融合(protoplastfusion)

G+菌形成原生質(zhì)體后，在聚乙二爵(PEG)作用下，可使兩種不同的細(xì)菌細(xì)胞發(fā)生融合的

過程。

融合后形成雙倍體細(xì)胞，可短期生存，染色體重組，獲得多種不同表型的重組融合體。

人為實(shí)驗(yàn)基因轉(zhuǎn)移與重組。

第四節(jié)基因突變

一基因突變規(guī)律：

■突變可以自然發(fā)生為：自發(fā)突變.具自發(fā)性，隨機(jī)性.

■人工誘導(dǎo)產(chǎn)生的突變?yōu)檎T發(fā)突變，可提高突變率.

彷徨試驗(yàn)(fluctuationtest,波動(dòng)試驗(yàn))：隨機(jī)的、非定向的突變是在接觸噬菌體之前就已發(fā)生,

噬菌體對(duì)突變僅起篩選而不是誘導(dǎo)作用。

影印試驗(yàn)(replicaplating):耐藥突變株在接觸藥物之前出現(xiàn)，藥物的作用是選擇耐藥株，淘汰

敏感株

■野生型(wildtype):未發(fā)生突變的菌株.

■突變型(mutanttype):相對(duì)于野生型，某一性狀發(fā)生改變的菌株.

■回復(fù)突變(reversemutation):有時(shí)突變株經(jīng)過又一次突變可恢復(fù)為野生型的性狀.

第五節(jié)細(xì)菌遺傳變異在醫(yī)學(xué)上的實(shí)際意義

1、影響細(xì)菌學(xué)診斷

2、預(yù)防耐藥菌株的擴(kuò)散

3、制備疫苗

4、檢測致癌物

5、基因工程方面的應(yīng)用

第六章細(xì)菌的耐藥性

第一節(jié)抗菌藥物的種類及其作用機(jī)制

抗生素(antibiotic)：微生物在其代謝過程中產(chǎn)生的能殺滅或抑制其它微生物的產(chǎn)物。有天

然和人工半合成兩類?

按生物來源分類：

1.細(xì)菌產(chǎn)生的抗生素：如多粘菌素。

2.真菌產(chǎn)生的抗生素：如青霉素及頭抱菌素，現(xiàn)在多用其半合成產(chǎn)物。

3.放線菌產(chǎn)生的抗生素：放線菌是生產(chǎn)抗生素的主要來源。常見的抗生素包括鏈霉素、

卡那霉素、四環(huán)素、紅霉素、兩性霉素B等。

抗菌藥物的作用機(jī)制

細(xì)胞壁細(xì)胞膜蛋白合成核酸合成

內(nèi)酰胺類多粘菌素類氯霉素磺胺藥

萬古霉素兩性霉素B四環(huán)素類甲氧芾胺喀咤

桿菌肽制霉菌素紅霉素利福平

環(huán)絲氨酸酮康用林可霉素類嗟諾酮類

氨基糖昔類

第二節(jié)細(xì)菌的耐藥機(jī)制

■耐藥性(drugresistance)是指細(xì)菌對(duì)藥物所具有的相對(duì)抵抗性。

■耐藥性的程度：以該藥對(duì)細(xì)菌的最小抑菌濃度(minimuminhibitoryconcentration,

MIC)表示。

一、細(xì)菌耐藥的遺傳機(jī)制

(~)固有耐藥性(intrinsicresistance):細(xì)菌對(duì)某些抗菌藥物的天然不敏感.如:細(xì)菌對(duì)兩

性霉素B耐藥

(二)獲得耐藥性(acquiredresistance):

染色體突變

質(zhì)粒介導(dǎo)的耐藥性

轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的耐藥性

整合子介導(dǎo)的耐藥性

二、細(xì)菌耐藥的生化機(jī)制

(―)鈍化酶(modifiedenzyme)的產(chǎn)生：beta-內(nèi)酰胺酶水解bela-內(nèi)酰胺環(huán).

(二)藥物作用靶位的改變：青霉素結(jié)合蛋白(轉(zhuǎn)肽酶)構(gòu)型變化,青霉素?zé)o法與其結(jié)合.如耐甲

氧西林金葡(methincillin-resistantstaphylococcusaureus,MRSA)。

(三)抗菌藥物的滲透障礙：細(xì)胞壁通透性的改變.如：生物膜保護(hù)細(xì)菌逃逸抗菌藥物的殺

傷作用.

(四)主動(dòng)外排機(jī)制：使得菌體內(nèi)藥物濃度不足。

第三節(jié)細(xì)菌耐藥性的防治

?合理使用抗菌藥物(參照藥敏結(jié)果)

?嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離制度

?加強(qiáng)藥政管理（嚴(yán)格農(nóng)牧業(yè)用藥）

?新抗菌藥物的研制

?破壞耐藥基因（質(zhì)粒）

第七章細(xì)菌的感染與免疫

第一節(jié)正常菌群與機(jī)會(huì)致病菌

一、正常菌群

自然界中，土壤、空氣、水及各種物體廣泛存在著大量的，多種多樣的微生物。

人及動(dòng)植物的體表及其外界相通的腔道中也存在不同種類和數(shù)量的微生物，當(dāng)人體免疫功能

正常時(shí)，這些微生物對(duì)宿主無害，有些對(duì)人還有利，是為正常微生物群，通稱正常菌群（normal

flora）（IO14）-

寄生部位：皮膚、口腔、鼻咽腔、外耳道、眼結(jié)膜、胃、腸道、尿道、陰道，但

是血液及組織器官正常情況下是無菌的

正常菌群的生理學(xué)意義：

生物拮抗：受體競爭；產(chǎn)生有害代謝產(chǎn)物；營養(yǎng)競爭

營養(yǎng)作用：促進(jìn)消化吸收；參與營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化；合成維生素供人體利用

?免疫作用

抗衰老作用：雙歧桿菌、乳桿菌及腸球菌等產(chǎn)生過氧化物歧化醒（SOD）,消除自由

基（02）毒性，抗氧化損傷，抗衰老

?抗腫瘤作用：降解致癌物質(zhì)；激活巨噬細(xì)胞——抑制腫瘤細(xì)胞

二、機(jī)會(huì)感染

正常菌群與宿主間的生態(tài)平衡在某些情況卜可被打破，原來在正常時(shí)不致病的正常菌群

就成了條件致病菌（機(jī)會(huì)性致病菌）而引起宿主發(fā)病。常見的情況有：寄居部位的改變；宿

主免疫功能低下；菌群失調(diào)，如：長期大量應(yīng)用抗生素。

三、微生態(tài)平衡與失調(diào)

生態(tài)學(xué)：生物v［環(huán)境

微生態(tài)學(xué)：微生物,一?宿主心環(huán)境）

醫(yī)學(xué)微生態(tài)學(xué)：人體髓麗及機(jī)會(huì)感染菌，

微生態(tài)平衡——指正常微生物群與宿主生態(tài)環(huán)境在長期進(jìn)化過程中形成的生理性組合的動(dòng)

態(tài)平衡。

影響因素：

?宿主因素（年齡、飲食、激素水平等）

?正常微生物群（定位、定性、定量）

?外界環(huán)境

微生態(tài)失調(diào)——指正常微生物群在宿主之間的平衡，在外界環(huán)境因素影響下被破壞，由生理

性組合轉(zhuǎn)變?yōu)椴±硇越M合。

誘發(fā)因素

-使用抗生素

?正常菌群寄生部位轉(zhuǎn)移（外科手術(shù)、腔鏡檢查等）

-機(jī)體免疫功能下降

第二節(jié)細(xì)菌的致病作用

感染（infection）微生物侵入宿主體內(nèi)，與宿主相互作用，并導(dǎo)致不同程度的病理變化的過程。

致病菌或病原菌（pathogen）：能感染或引起宿主疾病的細(xì)菌（具有致病性的細(xì)菌）。

致病性(pathogenicity)或病原性：細(xì)菌能引起感染的能力或性質(zhì)。

毒力(virulence)：致病菌的致病性強(qiáng)弱程度。是細(xì)菌致病性量的概念。

一、毒力

細(xì)菌的毒力因子包括：侵襲力和毒素。

我們首先來講侵襲力。

(-)侵襲力是指病原菌具有突破防御、侵入定居、繁殖擴(kuò)散的能力，包括莢膜、黏附

素和侵襲性物質(zhì)。

1.黏附素：黏附與定植是感染的第一步，與致病性密切相關(guān)。正常情況下，呼吸道的纖

毛運(yùn)動(dòng)、腸蠕動(dòng)等均不利于細(xì)菌的定植，所以粘附很必要。

黏附機(jī)制：主要為配體和受體的結(jié)合，細(xì)菌配體與宿主細(xì)胞受體結(jié)合，大多具有組織趨

向性。

2.莢膜：

3.侵襲性物質(zhì)：侵襲素和侵襲類酶類

4.生物被膜：細(xì)菌附著在有生命或無生命的材料表面后，由細(xì)菌及其分泌的胞外多聚物

共同組成的呈膜狀的細(xì)菌群體一一保護(hù)性存在形式。

(-)毒素

病原菌產(chǎn)生的毒性物質(zhì)，可直接引起宿主的組織損傷或生理功能紊亂。

1.外毒素主要由革蘭陽性菌和部分革蘭陰性菌產(chǎn)生并釋放到菌體外，主要是蛋白質(zhì)，革

蘭陰性菌能產(chǎn)生外毒素的主要有銅綠假單胞菌、痢疾桿菌、霍亂弧菌等。

特征：(1)毒性蛋白質(zhì)，大多A—B型毒素；

A亞單位(毒性部分)：決定毒素致病作用

B亞單位(結(jié)合部分)：具有靶細(xì)胞的親和性、具有抗原性

(2)毒性作用強(qiáng)，具有選擇性；如肉毒毒素，對(duì)人的致死量為l~2ug。

(3)對(duì)理化因素不穩(wěn)定；主要不耐熱，加熱可以喪失活性。

(4)抗原性強(qiáng)，可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素，甲醛脫毒形成類毒素；我們用人工

的方法脫毒，保留了抗原性，就是疫苗。

(5)種類多、機(jī)制復(fù)雜，包括神經(jīng)毒素、細(xì)胞毒素、腸毒素。神經(jīng)毒素主要

干擾神經(jīng)沖動(dòng)的傳遞；細(xì)胞毒素可抑制細(xì)胞蛋白合成等；腸毒素作用于內(nèi)皮細(xì)胞或

者嘔吐中樞。

2.內(nèi)毒素

G-菌細(xì)胞壁的脂多糖成分，菌細(xì)胞破解后才能釋放出來。

特征：產(chǎn)生于G一菌：

化學(xué)性質(zhì)為LPS,對(duì)理化因素穩(wěn)定；

毒性作用相對(duì)較弱，無選擇性；

抗原性較弱，不能人工處理為類毒素。

內(nèi)毒素的生物學(xué)作用：

致熱反應(yīng)；

白細(xì)胞反應(yīng)；

Shwartzman現(xiàn)象與DIC；

內(nèi)毒素血癥與休克；

免疫調(diào)節(jié)作用。

二者區(qū)別

區(qū)別要點(diǎn)外毒素內(nèi)毒素

革蘭陽性菌與部分革蘭陰性

來源革蘭陰性菌

菌

從活菌分泌出，少數(shù)菌崩解后

存在部分細(xì)胞壁組分，菌裂解后釋放

釋放

化學(xué)成分蛋白質(zhì)脂多糖

穩(wěn)定性60-80℃,30min被破壞160℃,2-4h才被破壞

較弱，各菌的毒性效應(yīng)大致相同，引

強(qiáng)，對(duì)組織器官有選擇性毒害

毒性作用起發(fā)熱、白細(xì)胞增多、微循環(huán)障礙、休克、

效應(yīng)，引起特殊臨床表現(xiàn)

DIC等

強(qiáng)，刺激機(jī)體產(chǎn)生抗毒素；甲弱，刺激機(jī)體產(chǎn)生的中和抗體作用弱;

抗原性

醛液處理脫毒形成類毒素甲醛處理不形成類毒素

超抗原（superantigen）:微生物產(chǎn)生的某些蛋白具有激活免疫反應(yīng)的高度生物學(xué)活性，以

產(chǎn)生大量T細(xì)胞和細(xì)胞因子為特征，主要表現(xiàn)為致病作用，這些毒素抗原稱為超抗原。如:

金葡的腸毒素，毒性休克綜合征毒素；鏈球菌的猩紅熱毒素.

二、細(xì)菌侵入的數(shù)量：毒力越強(qiáng)，需要的數(shù)量越少。

三、細(xì)菌侵入的途徑：呼吸道、消化道等.

第三節(jié)宿主的免疫防御機(jī)制

皮膚與粘膜

血腦屏障

廠屏障結(jié)構(gòu)

胎盤屏障

非特異性免疫（天然生/吞噬細(xì)胞

補(bǔ)體

廠疫）1（

（體液因素溶菌酶

V

防御素

特異性免疫（獲得性免<件體儂液比免反疫

疫））

71細(xì)胞免疫

一、非特異性免疫機(jī)制

（一）屏障結(jié)構(gòu)

皮膚與黏膜屏障：機(jī)械阻擋、纖毛運(yùn)動(dòng)；分泌殺菌物質(zhì)；菌群拮抗作用

血腦屏障：軟腦膜+脈絡(luò)膜+腦毛細(xì)血管+星狀膠質(zhì)細(xì)胞

胎盤屏障：母體子宮內(nèi)膜的基蛻膜+胎兒絨毛膜

（-）吞噬作用

大吞噬細(xì)胞：血液中單核細(xì)胞和組織中巨噬細(xì)胞

吞噬細(xì)胞：

小吞噬細(xì)胞：血液中中性粒細(xì)胞

1.吞噬殺傷過程：

趨化f接觸f吞入f殺滅與消化f殘?jiān)懦?/p>

2.殺傷機(jī)制

依氧殺菌機(jī)制

①呼吸爆發(fā)（需分子氧參加）

活性氧中介物（ROD：比。2、O2\OH\O2等

分子氧被還原為

多種

活性氮中介物（RND：NO、NO2\NO3一等

對(duì)細(xì)菌均有直接毒性作用

（破壞細(xì)菌的DNA、蛋白質(zhì)和膜脂類）

②髓過氧化物酶（MPO）：存在于溶酶體中，與H2O2及氯化物的共同參與，對(duì)細(xì)菌、

真菌等具有強(qiáng)大殺傷活性。

非依氧殺菌機(jī)制

>酸性作用：糖分解產(chǎn)酸而導(dǎo)致pH下降，抑制細(xì)菌生長而殺菌。

>溶能體酶及殺菌蛋白：溶酶體、乳鐵蛋白、蛋白水解酶、核酸酶、酯酶等,

對(duì)細(xì)菌有殺傷、消化、分解作用。

3.吞噬作用的后果

A完全吞噬：病原體在吞噬溶酶體內(nèi)被殺滅、消化、排除殘?jiān)倪^程。（5-10分

鐘死亡，30-60分鐘破壞）

A不完全吞噬：只被吞噬，卻不被殺死。

A組織損傷：吞噬過程中，溶酶體酶（水解酶）也能破壞鄰近的正常組織，造

成組織損傷和炎癥反應(yīng)。

（三）體液因素

?補(bǔ)體：調(diào)理，溶菌.

溶菌酶:存在于血清，唾液，淚液，乳汁.主要作用于G+菌.

防御素：多肽，破壞胞外菌細(xì)胞膜.

二、特異性免疫

（-）體液免疫——抗體的作用

1.抑制病原體黏附

2.調(diào)理吞噬作用

3.中和細(xì)菌外毒素

4.溶菌作用

5.抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（ADCC）

（二）細(xì)胞免疫

?細(xì)胞毒T細(xì)胞（CTL）直接殺傷靶細(xì)胞

效應(yīng)T細(xì)胞（Thl）產(chǎn)生細(xì)胞因子發(fā)揮作用

（三）黏膜免疫（mucosalimmunesystem,MIS）

三、抗細(xì)菌感染免疫的特點(diǎn)

（-）抗胞外菌感染的免疫

■胞外菌:指寄生在宿主細(xì)胞外的組織間隙和血液、淋巴液和組織液中的細(xì)

胞。如葡萄球菌.

■靠非特異免疫；但主要是體液免疫發(fā)揮作用

?吞噬作用（非特異）

?抗體